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原发性高血压患者ABCG4基因启动子的甲基化差异分析 被引量:9
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作者 郭军 蔡军 李自成 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期2067-2071,共5页
目的:分析原发性高血压患者DNA启动子甲基化的差异,期待从表观遗传学的角度初步揭示人类原发性高血压的发病机制。方法:实验对象分为正常对照组和原发性高血压组,提取外周血单个核细胞全基因组DNA。通过DNA甲基化芯片高通量筛选,共得到... 目的:分析原发性高血压患者DNA启动子甲基化的差异,期待从表观遗传学的角度初步揭示人类原发性高血压的发病机制。方法:实验对象分为正常对照组和原发性高血压组,提取外周血单个核细胞全基因组DNA。通过DNA甲基化芯片高通量筛选,共得到差异甲基化基因627个。筛选FZD7、LRP、TTBK1、USFP1、SYCE1、NDUSF8、ZNF540和ABCG4共8个可能与高血压相关基因,并进行后续亚硫酸氢盐测序PCR分析。结果:8个候选基因中,ABCG4差异甲基化程度最为显著。原发性高血压组ABCG4基因启动子区甲基化率为18.3%,正常组为32.4%,两者差异显著(P<0.01)。结论:本研究证实原发性高血压患者ABCG4基因启动子低甲基化,可能在原发性高血压的发病机制中起到一定的作用。 展开更多
关键词 甲基化 高血压 启动子 基因 abcg4
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ABCG4和V-ATPase在非小细胞肺癌中的表达及相关性临床意义 被引量:1
2
作者 张志培 李小飞 +6 位作者 王小平 周勇安 徐鉷 汪健 黄立军 田玉兔 程庆书 《中国肺癌杂志》 CAS 2008年第5期691-695,共5页
背景与目的多药耐药是肺癌化疗治疗失败的重要原因,ABC介导药物外排是耐药的主要因素,寻找该家族中新的耐药蛋白并阐明其耐药机制十分重要。ABCG4有望成为耐药候选基因;耐药性与细胞内外pH值可能有关,而V-ATPase在调节pH值起主要作用。... 背景与目的多药耐药是肺癌化疗治疗失败的重要原因,ABC介导药物外排是耐药的主要因素,寻找该家族中新的耐药蛋白并阐明其耐药机制十分重要。ABCG4有望成为耐药候选基因;耐药性与细胞内外pH值可能有关,而V-ATPase在调节pH值起主要作用。本研究通过检测ABCG4和V-ATPase在非小细胞肺癌中的表达,分析其与病理分级和TNM分期间的关系以及两蛋白表达的相关性,为研究ABCG4、V-ATPase在肿瘤表达及耐药相关性提供基础。方法采用免疫组化EnVinsion法、免疫荧光法检测在肺鳞癌、腺癌中的表达,激光共聚焦显微镜观察其定位和共定位,用统计学分析表达差异性和相关性。结果ABCG4在肺鳞癌、腺癌中高表达,两者差异性显著(P=0.001);鳞癌Ⅱ和Ⅱ-Ⅲ组间、腺癌不同分化组间差异性显著;鳞癌和腺癌TNM分期秩和检验差异性显著。V-ATPase在鳞癌、腺癌中也为高表达,两者差异性非常显著;鳞癌Ⅱ和Ⅱ-Ⅲ组间、腺癌不同分化组间差异性显著;在鳞癌和腺癌TNM分期秩和检验差异性均不显著。ABCG4和V-ATPase蛋白在鳞癌、腺癌、鳞癌Ⅱ和Ⅱ-Ⅲ、中分化腺癌各组中的表达相关性检验P<0.01,相关系数rs分别为0.771、0.765、0.714、0.777、0.865;而低分化腺癌组中的相关性检验P值为0.048,相关系数rs为0.350。ABCG4主要定位在胞膜上和胞质中,两蛋白有共定位现象。结论ABCG4和V-ATPase在非小细胞肺癌中高表达,表达的高低与病理分级、TNM分期有关;两蛋白在鳞癌、腺癌及其分级间表达都存在相关性,可能存在相互作用的现象。这为研究ABCG4和V-ATPase在肿瘤中的表达及可能耐药作用提供了实验依据。 展开更多
关键词 肺肿瘤 abcg4 V-ATPASE 耐药蛋白
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利用CRISPR/Cpf1系统构建人ABCG1和ABCG4基因敲除的293T细胞株 被引量:1
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作者 覃鸿妮 谢钰珍 +1 位作者 马傲 蔡一林 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第4期741-750,共10页
【目的】基于CRISPR/Cpf1(AsCpf1/LbCpf1)技术构建人ABCG1和ABCG4基因敲除的人胚肾细胞(HEK293T)稳定细胞株,旨在研究ABCG1和ABCG4基因的生物学功能。【方法】针对ABCG1和ABCG4基因作用的功能域,设计2对靶向ABCG1和ABCG4基因前7个外显子... 【目的】基于CRISPR/Cpf1(AsCpf1/LbCpf1)技术构建人ABCG1和ABCG4基因敲除的人胚肾细胞(HEK293T)稳定细胞株,旨在研究ABCG1和ABCG4基因的生物学功能。【方法】针对ABCG1和ABCG4基因作用的功能域,设计2对靶向ABCG1和ABCG4基因前7个外显子的sgRNA序列,分别克隆到AsCpf1和LbCpf1的载体上。将测序验证正确的重组质粒转染到HEK293T细胞中,T7E1酶切和测序验证敲除效率,对敲除成功的293T细胞利用有限稀释法筛选获得基因双突变的敲除细胞株,对其基因组进行PCR扩增并双向测序验证编辑结果,选择有正确编辑结果的PCR产物进行TA克隆,进而测序验证单克隆细胞株编辑效率。【结果】结果获得敲除ABCG1和ABCG4基因的稳定细胞株各1株(AsCpf1-ABCG1-sgRNA 1-1和LbCpf1-ABCG4-sgRNA 2-1)。【结论】通过利用新型基因编辑技术CRISPR/Cpf1系统,获得了永久性敲除目的细胞靶基因的细胞株,可为进一步探索和证实ABCG1和ABCG4在细胞中胆固醇代谢和调节作用提供帮助。 展开更多
关键词 CRISPR/Cpf1 ABCG1 abcg4 基因敲除 稳定细胞株
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食管鳞癌ABCG4的表达及临床意义
4
作者 徐鉷 李小飞 +5 位作者 王小平 韩勇 田玉兔 黄立军 邓迎春 张志培 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期540-542,共3页
目的:检测ABC膜转运蛋白ABCG4在食管鳞癌中的表达,探讨其在病理分级、TNM分期及转移与否中的差异性,为研究ABCG4在肿瘤中表达及其与耐药相关性提供依据。方法:采用免疫组化EnVinsion法、免疫荧光法检测ABCG4在66例食管鳞癌中的表达,激... 目的:检测ABC膜转运蛋白ABCG4在食管鳞癌中的表达,探讨其在病理分级、TNM分期及转移与否中的差异性,为研究ABCG4在肿瘤中表达及其与耐药相关性提供依据。方法:采用免疫组化EnVinsion法、免疫荧光法检测ABCG4在66例食管鳞癌中的表达,激光共聚焦显微镜观察其表达定位,统计学分析差异性。结果:ABCG4阳性表达主要定位于胞膜上和胞质中,鳞癌总阳性率65.15%,Ⅰ-Ⅱ、Ⅱ、Ⅱ-Ⅲ阳性率分别为15.38%、75.0%、85.16%,3组间检验差异性非常明显(P<0.01),各2组间的Mann-Whitney检验差异性有统计学意义(P<0.05);TNM分期Ⅱa、Ⅱb、Ⅲ阳性率分别为34.5%、90.5%、87.5%,3组间检验差异性显著(P<0.01),Ⅱa与各组的Mann-Whitney检验差异性非常显著(P<0.01),Ⅱb与Ⅲ组间检验差异性无统计学意义(P>0.05)。淋巴结转移组与非转移组差异性非常显著(P<0.01)。结论:ABCG4在食管鳞癌中高表达,表达的高低与病理分级、TNM分期高低及其淋巴结转移与否有关,很可能与食管鳞癌化疗药物耐药、转移有关联。 展开更多
关键词 食管癌:鳞癌 abcg4 药物耐药 转移
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非小细胞肺癌组织中ABCG4表达与耐药的相关性研究
5
作者 杨锋 王雪娇 +3 位作者 杨三虎 张亮 杨光 张志培 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2017年第3期209-213,共5页
目的检测ABCG4 mRNA和蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,分析其表达与病理类型及NSCLC细胞耐药的相关性,为研究其耐药机制提供理论基础。方法采用免疫组化染色、RT-PCR及Western blotting检测ABCG4在NSCLC组织中的表达;MTT法检测N... 目的检测ABCG4 mRNA和蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,分析其表达与病理类型及NSCLC细胞耐药的相关性,为研究其耐药机制提供理论基础。方法采用免疫组化染色、RT-PCR及Western blotting检测ABCG4在NSCLC组织中的表达;MTT法检测NSCLC对化疗药物的敏感性,分析药物敏感性与ABCG4 mRNA和蛋白表达的相关性。结果 ABCG4蛋白阳性主要定位于细胞膜和胞质,其在NSCLC组织中的阳性表达率为73.9%(68/92),而在30例癌旁正常肺组织中几乎不表达。ABCG4蛋白在肺鳞癌和肺腺癌中的阳性表达率分别为67.3%和81.4%,差异无统计学意义(P>0.05)。环磷酰胺、吉西他滨、多柔比星、紫杉醇和顺铂在NSCLC组织中的药物敏感程度与其相应组织中ABCG4蛋白阳性表达有关(rs均>0.3,P均<0.05);除紫杉醇外,环磷酰胺、吉西他滨、多柔比星和顺铂在NSCLC组织中的药物敏感程度与其相应组织中ABCG4 mRNA表达量有关(P均<0.05)。结论 ABCG4在肺鳞癌、肺腺癌中高表达,其表达程度与NSCLC部分化疗药物耐药有关,为进一步研究ABCG4在NSCLC中的表达及可能耐药机制提供实验依据。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 abcg4 耐药性
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ABCG4在肺鳞癌、腺癌中的表达及临床意义
6
作者 张志培 李小飞 +6 位作者 王小平 周勇安 徐鉷 陈德凤 田玉兔 赵亚超 程庆书 《现代肿瘤医学》 CAS 2008年第11期1901-1903,共3页
目的:检测耐药蛋白ABCG4在肺鳞癌、腺癌中的表达,分析其表达率与病理分级和临床分期间的关系,为研究ABCG4在肿瘤表达及耐药相关性提供基础。方法:采用免疫组织化学EnVinsion法、免疫荧光法检测ABCG4在肺鳞癌、腺癌中的表达和激光共聚焦... 目的:检测耐药蛋白ABCG4在肺鳞癌、腺癌中的表达,分析其表达率与病理分级和临床分期间的关系,为研究ABCG4在肿瘤表达及耐药相关性提供基础。方法:采用免疫组织化学EnVinsion法、免疫荧光法检测ABCG4在肺鳞癌、腺癌中的表达和激光共聚焦显微镜观察其荧光定位。结果:ABCG4在肺鳞癌、腺癌中高表达,鳞癌总阳性率67.3%、腺癌总阳性率为81.4%,两者差异性显著(P=0.001);中分化、低分化鳞癌阳性率分别为41.7%、92.0%,差异性非常显著(P=0.000);腺癌中分化阳性率76.7%、低分化腺癌92.3%,差异性显著(P=0.033);鳞癌和腺癌的各临床分期的Kruskal-Wallis秩和检验差异性显著,P值分别为0.039、0.048。ABCG4主要定位在胞膜上和胞质中。结论:ABCG4在肺鳞癌、腺癌中高表达,表达的高低与病理分级、临床分期有关,为进一步研究ABCG4在肿瘤中的表达及可能耐药作用提供实验依据。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 abcg4 耐药蛋白
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Abcg4基因在小鼠组织中的表达及其RNA干涉的研究
7
作者 王雪芳 李锡海 吴金美 《江苏科技大学学报(自然科学版)》 CAS 2013年第1期89-92,共4页
利用半定量RT-PCR的方法研究基因Abcg4在小鼠组织的表达情况,发现Abcg4基因在小鼠脑、眼睛和脾中表达,其中脑和眼睛中表达较高.为进一步研究Abcg4基因的功能,采用RNA干涉(RNAi)技术抑制脑中Abcg4基因的表达,通过体内实验了解其对Abcg4... 利用半定量RT-PCR的方法研究基因Abcg4在小鼠组织的表达情况,发现Abcg4基因在小鼠脑、眼睛和脾中表达,其中脑和眼睛中表达较高.为进一步研究Abcg4基因的功能,采用RNA干涉(RNAi)技术抑制脑中Abcg4基因的表达,通过体内实验了解其对Abcg4基因的沉默效率.设计合成针对Abcg4基因的小干扰RNA(siRNA),不同剂量siRNA注射小鼠侧脑室内,于小鼠注射后不同时相点,采用半定量RT-PCR法检测脑内Abcg4基因的表达量.结果表明,特定靶序列的siRNA注射剂量6μg,注射48 h时,对Abcg4基因的抑制效率可达85%.研究表明,脑注射siRNA可以显著抑制小鼠脑中Abcg4基因的表达. 展开更多
关键词 abcg4基因 组织表达 RNAI RT-PCR 侧脑室注射
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ABCG4在食管鳞癌中的表达及与化疗药耐药相关性的研究
8
作者 周勇安 徐鉷 +3 位作者 田玉兔 黄立军 张志培 邓迎春 《中国肿瘤》 CAS 2009年第3期234-237,共4页
[目的]探讨ABC膜转运蛋白ABCG4在食管鳞癌中的表达及与化疗药物耐药性的相关性。[方法]采用免疫组化检测ABCG4在66例食管鳞癌中的表达。用MTT法检测相应癌组织对化疗药物的敏感性。[结果]ABCG4表达总阳性率65.15%。在TNM分期Ⅱa、Ⅱb、... [目的]探讨ABC膜转运蛋白ABCG4在食管鳞癌中的表达及与化疗药物耐药性的相关性。[方法]采用免疫组化检测ABCG4在66例食管鳞癌中的表达。用MTT法检测相应癌组织对化疗药物的敏感性。[结果]ABCG4表达总阳性率65.15%。在TNM分期Ⅱa、Ⅱb、Ⅲ期中阳性率分别为34.5%、90.5%、87.5%,3组间有显著性差异(P=0.000)。除紫杉醇外,9种化疗药物药物敏感性与ABCG4表达均呈负相关(rs<-0.3,P<0.05)。[结论]ABCG4在食管鳞癌的表达与TNM分期有相关性,并很可能与食管鳞癌化疗药耐药有关。 展开更多
关键词 食管肿瘤 鳞状细胞癌 abcg4 药物耐药 药物敏感性
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食管鳞癌中ABCG4和V-ATPase表达及其临床意义
9
作者 张志培 郑岩 +7 位作者 王舰 李小飞 徐鉷 黄立军 田玉兔 邓迎春 赵晋波 周勇安 《肿瘤学杂志》 CAS 2010年第2期123-126,共4页
[目的]探讨ABCG4、V-ATPase蛋白在食管鳞癌中的表达及其临床意义。[方法]采用免疫组化、免疫荧光法检测ABCG4和V-ATPase在66例食管鳞癌中的表达,分析两者表达相关性。[结果]ABCG4、V-ATPase阳性率分别为65.15%、68.18%。ABCG4、V-ATPas... [目的]探讨ABCG4、V-ATPase蛋白在食管鳞癌中的表达及其临床意义。[方法]采用免疫组化、免疫荧光法检测ABCG4和V-ATPase在66例食管鳞癌中的表达,分析两者表达相关性。[结果]ABCG4、V-ATPase阳性率分别为65.15%、68.18%。ABCG4、V-ATPase的表达与性别、病理分级、TNM分期及淋巴结转移情况有关(P<0.05),均与年龄无关。在食管癌及各病理分级、各TNM分期中,ABCG4和V-ATPase的表达均有相关性(P均<0.001,相关系数rs均>0.7)。[结论]ABCG4、V-ATPase在食管鳞癌中高表达,可能与耐药、转移有关;两种蛋白表达存在相关性,可能有相互作用的功能。 展开更多
关键词 食管肿瘤 鳞状细胞 abcg4 V-ATPASE
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