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高邮鸭Akt1基因克隆及生物信息学分析
1
作者 李小芬 朱睿 +2 位作者 宋易霖 田维婷 张蕾 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第10期1-7,共7页
Akt1是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族基因,通过响应生长因子刺激磷酸化一系列下游底物来调节许多过程,包括代谢、增殖、细胞存活、生长和血管生成等。实验室前期对全转录组差异分析获得了与高邮鸭双黄蛋率显著相关的候选关键基因Akt1,并且A... Akt1是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族基因,通过响应生长因子刺激磷酸化一系列下游底物来调节许多过程,包括代谢、增殖、细胞存活、生长和血管生成等。实验室前期对全转录组差异分析获得了与高邮鸭双黄蛋率显著相关的候选关键基因Akt1,并且Akt1显著富集于差异表达信号通路——PI3K-AKT信号通路。为了对高邮鸭双黄蛋候选基因Akt1进行系统的功能研究,本研究通过PCR技术克隆高邮鸭卵巢组织Akt1全长,构建了Akt1-EGFP融合表达载体,结合生物信息学技术对AKT1蛋白的理化性质进行系统分析。结果:AKT1为种间保守型非分泌蛋白,表达于质膜,具有丰富的丝氨酸和苏氨酸磷酸化位点,可与10种蛋白(TSC1、MAPK1、PIK3R1、PIK3CA、TSC2、CDKN1A、IKBKB、PIK3CD、PDPK1和ILK)发生互相作用。研究结果为揭示Akt1基因编码的蛋白在调控高邮鸭双黄蛋形成过程中的功能和分子机制提供理论基础。 展开更多
关键词 高邮鸭 双黄蛋 akt1基因 克隆 生物信息学分析
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SHMT2通过上调Akt1促进人皮肤黑色素瘤细胞的迁移和侵袭
2
作者 夏艳 曹远均 +1 位作者 夏苗 张妮 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第13期2328-2334,共7页
目的:研究丝氨酸羟甲基转移酶2(SHMT2)通过上调Akt1促进人皮肤黑色素瘤细胞迁移和侵袭的分子机制。方法:通过嘌呤霉素压力筛选获取稳定表达SHMT2蛋白的A-375和WM35细胞系;通过Western Blotting和细胞免疫化学检测SHMT2蛋白在A-375和WM3... 目的:研究丝氨酸羟甲基转移酶2(SHMT2)通过上调Akt1促进人皮肤黑色素瘤细胞迁移和侵袭的分子机制。方法:通过嘌呤霉素压力筛选获取稳定表达SHMT2蛋白的A-375和WM35细胞系;通过Western Blotting和细胞免疫化学检测SHMT2蛋白在A-375和WM35细胞系中的稳定表达;通过细胞划痕、Transwell小室实验检测SHMT2对A-375和WM35细胞体外划痕愈合、迁移和侵袭能力的影响;通过GEPIA在线数据库分析SHMT2与Akt1及上皮-间充质转换(EMT)相关因子Snai1、Snai2、ZEB2和vimentin在人皮肤黑色素瘤中表达的相关性;通过RT-PCR、Western Blotting检测Akt1、p-Akt1、Snai1、Snai2、ZEB2和vimentin在SHMT2稳定表达细胞系中的表达情况。结果:成功构建SHMT2稳定表达的A-375和WM35细胞系;过表达SHMT2可以促进A-375和WM35细胞的体外划痕愈合、迁移和侵袭;GEPIA在线数据库结果显示在人皮肤黑色素瘤中SHMT2表达与Akt1、Snai1、Snai2、ZEB2和vimentin表达呈正相关;过表达SHMT2可以上调Akt1和p-Akt1蛋白在人皮肤黑色素瘤细胞中的表达。结论:SHMT2通过上调Akt1表达促进A-375和WM35细胞的体外迁移和侵袭。 展开更多
关键词 SHMT2 akt1 人皮肤黑色素瘤 迁移 侵袭
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血清circRNA-AKT1水平与宫颈癌病人临床病理特征的关系及预后价值分析
3
作者 李红霞 曾欢 卢余莉 《蚌埠医学院学报》 CAS 2024年第10期1335-1339,共5页
目的:分析宫颈癌病人血清circRNA-AKT1表达水平与病人临床病理特征的关系以及对宫颈癌预后的判别价值。方法:收集宫颈癌病人64例(宫颈癌组)、宫颈上皮内瘤变(CIN)病人43例(CIN组)、子宫肌瘤病人22例(子宫肌瘤组)及健康体检者81名(对照组... 目的:分析宫颈癌病人血清circRNA-AKT1表达水平与病人临床病理特征的关系以及对宫颈癌预后的判别价值。方法:收集宫颈癌病人64例(宫颈癌组)、宫颈上皮内瘤变(CIN)病人43例(CIN组)、子宫肌瘤病人22例(子宫肌瘤组)及健康体检者81名(对照组)的一般资料与血清标本,qRT-PCR法测定受试者血清circRNA-AKT1水平并对各组间水平进行比较,ROC曲线评价circRNA-AKT1对宫颈癌发生的诊断效能;分析血清circRNA-AKT1水平与宫颈癌病人临床病理特征的相关性;KM生存曲线分析血清circRNA-AKT1与宫颈癌病人预后的关系;Cox回归分析影响宫颈癌病人预后不良的危险因素。结果:与对照组相比,CIN组、宫颈癌组病人血清circRNA-AKT1水平升高(P<0.05);与子宫肌瘤组相比,CIN组、宫颈癌组病人血清circRNA-AKT1水平升高(P<0.05);与CIN组相比,宫颈癌组病人血清circRNA-AKT1水平升高(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示血清中circRNA-AKT1水平诊断宫颈癌发生的AUC为0.931;宫颈癌病人血清circRNA-AKT1水平与年龄、是否绝经、肿瘤大小、病理类型无关(P>0.05);与FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期相比,Ⅲ~Ⅳ期病人血清circRNA-AKT1高表达比例升高(P<0.05);与无淋巴结转移者相比,淋巴结转移病人血清circRNA-AKT1高表达比例升高(P<0.05)。KM曲线显示circRNA-AKT1高表达组3年内累积生存率(56.4%)低于低表达组(76.0%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.01,P<0.05);多因素Cox回归分析显示,淋巴结转移、FIGO分期、circRNA-AKT1表达水平是宫颈癌病人预后不良的危险因素(P<0.05)。结论:circRNA-AKT1在宫颈癌病人血清中高表达,与宫颈癌病人淋巴结转移、临床分期以及预后情况相关,血清circRNA-AKT1可作为预测宫颈癌病人预后情况的重要辅助指标。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 血清circRNA-akt1 宫颈上皮内瘤变
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黄蜀葵花总黄酮介导AKT1信号通路拮抗HepG-2细胞脂质沉积研究
4
作者 杨渊 鲍家成 戴宗英 《中医药导报》 2024年第6期29-33,共5页
目的:探讨黄蜀葵花总黄酮(TFA)对棕榈酸(PA)诱导HepG-2细胞脂质沉积模型的干预效应及机制。方法:体外培养人肝源HepG-2细胞,应用PA处理以构建细胞脂质沉积模型,然后从黄蜀葵花中提取TFA,以TFA或蛋白激酶B(AKT)抑制剂作为干预剂,对PA诱... 目的:探讨黄蜀葵花总黄酮(TFA)对棕榈酸(PA)诱导HepG-2细胞脂质沉积模型的干预效应及机制。方法:体外培养人肝源HepG-2细胞,应用PA处理以构建细胞脂质沉积模型,然后从黄蜀葵花中提取TFA,以TFA或蛋白激酶B(AKT)抑制剂作为干预剂,对PA诱导的细胞脂质沉积模型进行预处理,应用油红O染色、酶联免疫吸附实验和免疫印迹实验(Western blotting)检测细胞脂质代谢、AKT1和脂联素(APN)信号通路蛋白表达水平。结果:与PA模型组比较,TFA或AKT抑制剂干预后,细胞脂质沉积程度(%)、游离脂肪酸(FFAs)和甘油三酯(TG)水平降低,而APN水平升高(P<0.05)。Western blotting实验显示PA模型组AKT1和固醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1)表达水平上调而APN和糖原合成酶激酶3β(GSK3β)水平下调(P<0.05)。与PA模型组比较,TFA或AKT抑制剂干预显示AKT1下调而APN水平上调,其下游信号GSK3β表达上调而SREBP-1表达下调(P<0.05)。结论:TFA拮抗PA诱导的HepG-2细胞脂质沉积可能与其介导AKT1抑制及APN信号通路激活有关。 展开更多
关键词 黄蜀葵花总黄酮 akt1 APN 脂质沉积 拮抗效应 HEPG-2细胞
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基于网络药理学探讨平消胶囊通过AKT1/β-catenin信号促进乳腺癌凋亡的作用机制 被引量：1
5
作者 陈洪晓 刘苏 +3 位作者 金乐 张慧慧 张蕾 陈昭琳 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2023年第12期1321-1330,共10页
目的:探究平消胶囊治疗乳腺癌的潜在作用机制。方法:利用TCMSP、TCM-ID、GeneCards等数据库筛选平消胶囊与乳腺癌的相关靶点;Cytoscape软件构建“药物-靶点-疾病”网络;运用R软件进行GO和KEGG分析;使用Autodock Vina和Pymol软件进行平... 目的:探究平消胶囊治疗乳腺癌的潜在作用机制。方法:利用TCMSP、TCM-ID、GeneCards等数据库筛选平消胶囊与乳腺癌的相关靶点;Cytoscape软件构建“药物-靶点-疾病”网络;运用R软件进行GO和KEGG分析;使用Autodock Vina和Pymol软件进行平消胶囊活性成分与核心靶点的分子对接及可视化;通过R软件survival包对核心靶点进行分析,筛选出与总体生存时间密切相关的基因;通过CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测p-AKT1、β-catenin和cyclinD1的蛋白表达水平。结果:筛选出药物靶点194个,疾病靶点1612个,韦恩图求交集靶点共127个,核心靶点主要包括TB53、AKT1、TNF、CASP3等20个;GO分析主要与氧化应激反应、细胞对化学反应的调控等生物活性有关;KEGG分析主要通过PI3K-AKT信号通路、TNF信号通路、IL-17信号通路等通路有关;分子对接结果显示活性成分与核心靶点AKT1、MAPK1、RELA均有较好的结合;细胞实验表明槲皮素(40、80、120μmol/L)促进乳腺癌细胞凋亡;Western blot检测显示随着不同浓度的槲皮素处理乳腺癌细胞48 h后,p-AKT1、β-catenin和cyclinD1的蛋白表达量均不同程度地降低。结论:网络药理学与细胞实验证实平消胶囊可能通过调节AKT1/β-catenin信号通路,发挥其抗乳腺癌作用。 展开更多
关键词 平消胶囊 乳腺癌 网络药理学 分子对接 akt1/β-catenin
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基于PI3K/AKT1/FoxO3a信号通路探讨蛭龙活血通瘀胶囊对糖尿病心肌病大鼠的影响 被引量：7
6
作者 曾奇虎 刘孟楠 +3 位作者 李小林 白雪 杨思进 罗钢 《中药材》 CAS 北大核心 2023年第1期197-201,共5页
目的:探讨蛭龙活血通瘀胶囊对糖尿病心肌病大鼠的影响及其可能的作用机制。方法:将40只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、蛭龙活血通瘀胶囊组、二甲双胍组,使用高脂饲料及腹腔注射链脲佐菌素的方法建立糖尿病心肌病模型。给药8 w后取... 目的:探讨蛭龙活血通瘀胶囊对糖尿病心肌病大鼠的影响及其可能的作用机制。方法:将40只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、蛭龙活血通瘀胶囊组、二甲双胍组,使用高脂饲料及腹腔注射链脲佐菌素的方法建立糖尿病心肌病模型。给药8 w后取材,检测血清GHb、TC、TG、LDL-C、HDL-C的水平;采用HE染色、Masson染色和TUNEL染色分别观察大鼠心肌组织病理学改变、胶原沉积及细胞凋亡情况;采用RT-PCR检测各组大鼠心肌组织PI3K、AKT1、FoxO3a mRNA表达;采用Westerm Blot检测各组大鼠心肌组织p-PI3K、p-AKT1、p-FoxO3a蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠血清GHb、TC、TG、LDL-C水平及心肌细胞凋亡率显著升高,心肌组织PI3K、AKT1、FoxO3a mRNA及p-PI3K、p-AKT1、p-FoxO3a蛋白表达显著降低(P<0.01),HDL-C差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,蛭龙活血通瘀胶囊组血清GHb、TC、TG、LDL-C水平及心肌细胞凋亡率显著降低,血清HDL-C水平和心肌组织PI3K、AKT1、FoxO3a mRNA及p-PI3K、p-AKT1、p-FoxO3a蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01);病理染色结果显示模型组心肌纤维肥大,排列紊乱,可见少量炎性细胞浸润,部分区域可见弥漫性的纤维蓝染及坏死细胞,经治疗后细胞肥大、纤维蓝染及坏死情况明显改善。结论:蛭龙活血通瘀胶囊可通过上调心肌组织PI3K、AKT1、FoxO3a mRNA表达及其蛋白的磷酸化有效降低糖尿病心肌病大鼠GHb及血脂,抑制心肌纤维化和心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 蛭龙活血通瘀胶囊 糖尿病心肌病 PI3K akt1 FOXO3A
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基于PI3K/AKT1通路探讨山西老陈醋对高脂饮食诱导大鼠抗氧化作用机制
7
作者 申彤 刘佳佳 +1 位作者 陈嘉 庞全海 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第20期398-406,共9页
目的:基于PI3K/AKT1通路探究山西老陈醋对高脂饮食诱导大鼠抗氧化作用机制。方法:30只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为5组:正常组(C,常规饲料)、高脂模型组(M,高脂乳剂)、低(LV)、中(MV)、高(HV)剂量山西老陈醋干预组(1.35、2.7、5.4 g/(kg... 目的:基于PI3K/AKT1通路探究山西老陈醋对高脂饮食诱导大鼠抗氧化作用机制。方法:30只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为5组:正常组(C,常规饲料)、高脂模型组(M,高脂乳剂)、低(LV)、中(MV)、高(HV)剂量山西老陈醋干预组(1.35、2.7、5.4 g/(kg·bw))。造模(5周)同时给予陈醋干预后,山西老陈醋继续干预5周。检测血清血脂含量、肝损伤指标及抗氧化酶活性;HE染色观察肝组织病理学状态;qRT-PCR和Western blotting检测大鼠肝脏中PIK3CA、AKT1 mRNA及蛋白水平表达,免疫组织化学技术进行定位分析。结果:与C组相比,M组肝脂肪变性严重,血清中脂质含量和肝损伤程度极显著升高(P<0.01),抗氧化酶活性极显著下降(P<0.01),肝组织中PIK3CA和AKT1 mRNA及蛋白水平表达极显著升高(P<0.01),高脂血症大鼠造模成功,同时PI3K/AKT1通路被激活。血清学检测结果显示,山西老陈醋可显著下调血清中脂质含量、改善肝损伤、增加抗氧化酶活性(P<0.05),使其肝组织病理损伤减轻,且HV和MV组改善效果优于LV组。qRT-PCR、Western blotting及免疫组织化学技术检测结果显示,PIK3CA、AKT1主要定位于肝细胞质及细胞核中,山西老陈醋可极显著下调PI3K/AKT1通路中PIK3CA、AKT1 mRNA及蛋白水平表达(P<0.01),HV和MV组干预效果优于LV组。结论:不同剂量山西老陈醋可不同程度改善高脂饮食大鼠脂质、抗氧化及肝功能指标,最佳剂量可能在2.7~5.4 g/(kg·bw)之间,山西老陈醋可能通过调控PI3K/AKT1通路发挥抗氧化应激损伤作用,进而改善高脂饮食诱发的大鼠高脂血症。 展开更多
关键词 山西老陈醋 PI3K/akt1 高脂饮食 大鼠 抗氧化作用
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阿托伐他汀对老年急性脑梗死患者认知功能及Akt1/caspase-3通路的影响
8
作者 罗力亚 耿丽洁 +3 位作者 刘姗姗 张伟 张帅 刘翠青 《分子诊断与治疗杂志》 2023年第11期1903-1906,1912,共5页
目的 研究不同剂量阿托伐他汀改善老年急性脑梗死(ACI)患者认知功能及调控Akt1/caspase-3通路的差异。方法 选择2018年1月至2020年12月期间河北省第八人民医院收治的83例老年ACI患者作为研究对象,根据阿托伐他汀降脂剂量不同分为每日40... 目的 研究不同剂量阿托伐他汀改善老年急性脑梗死(ACI)患者认知功能及调控Akt1/caspase-3通路的差异。方法 选择2018年1月至2020年12月期间河北省第八人民医院收治的83例老年ACI患者作为研究对象,根据阿托伐他汀降脂剂量不同分为每日40 mg强化降脂的观察组、每日20 mg常规降脂对照组,治疗前及治疗后21 d时检测血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、高密度总蛋白胆固醇(HDLC)、caspase-3含量,外周血Akt1表达水平,采用美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)评价神经功能,采用改良Rankin量表(mRS)评价预后,采用简易精神状态量表(MMSE)、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评价认知功能,观察不良反应发生率。结果 治疗后,两组的HDLC比较差异无统计学意义(t=0.453,P>0.05)。观察组的TC、LDLC、NIHSS评分、预后不良发生率、血清caspase-1含量低于对照组,MMSE评分、MoCA评分及外周血Akt1表达水平高于对照组,差异有统计学意义(t/χ^(2)=3.773、3.193、9.598、6.592、4.572、3.823、8.384、7.521,P<0.05);两组不良反应发生率的比较,差异无统计学意义(χ^(2)=0.051,P>0.05)。结论 每日40 mg阿托伐他汀强化降脂改善老年ACI患者的认知功能并调控Akt1/caspase-3通路。 展开更多
关键词 急性脑梗死 强化降脂 阿托伐他汀 认知功能 akt1/caspase-3通路
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AKT1基因多态性与利培酮治疗精神分裂症8周疗效的关联研究 被引量：10
9
作者 李小钧 卢天兰 +1 位作者 岳伟华 张岱 《中国心理卫生杂志》 CSSCI CSCD 北大核心 2018年第2期125-129,共5页
目的:探讨AKT1基因多态性与利培酮治疗首发、未用药精神分裂症8周后疗效的关联。方法:共入组150例符合美国精神障碍诊断与统计手册第4版(DSM-IV)诊断标准的汉族精神分裂症门诊或住院患者,其中完成利培酮(治疗剂量4~6 mg/d)治疗8周者为12... 目的:探讨AKT1基因多态性与利培酮治疗首发、未用药精神分裂症8周后疗效的关联。方法:共入组150例符合美国精神障碍诊断与统计手册第4版(DSM-IV)诊断标准的汉族精神分裂症门诊或住院患者,其中完成利培酮(治疗剂量4~6 mg/d)治疗8周者为128例。采用治疗8周后阳性与阴性症状量表(PANSS)减分率评估药物疗效;采用DNA测序方法,在128例汉族精神分裂症患者中,检测AKT1基因4个单核苷酸多态性(SNP)位点(rs1130214、rs10149779、rs1130233、rs2494732)的基因型,并采用数量性状位点分析方法(QTL)探索AKT1基因多态性与利培酮治疗精神分裂症疗效的关联。结果:AKT1基因rs1130233(G>A)及rs2494732多态性(C>T)与利培酮治疗精神分裂症8周后PANSS减分率关联显著(P<0.05),经多重检验Bonferroni校正后仍有统计学意义。而rs1130214与rs10149779在本样本中与利培酮疗效的关联无统计学意义(P>0.05)。结论:本研究提示在中国汉族人群中,AKT1基因多态性可能与利培酮治疗精神分裂症急性期疗效关联,有望对个体化药物疗效预测提供依据。 展开更多
关键词 精神分裂症 akt1基因 多态性 利培酮 疗效
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RNAi调下AKT1、PI3K P85表达抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖 被引量：5
10
作者 梅玫 任玉 +6 位作者 周旋 赵津辉 王凡 高伟 祁艳斌 姚智 蒋伶活 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期51-56,共6页
目的:探讨RNAi(RNA interference)技术抑制乳腺癌MCF-7细胞中AKT1和PI3KP85亚基的表达对MCF-7细胞增殖和侵袭等的影响。方法:将包含AKT1、PI3KP85两种siRNA开放阅读框的短发夹RNA(shRNA)重组腺病毒质粒表达载体rAd5-siAKT1-siPI3K转染... 目的:探讨RNAi(RNA interference)技术抑制乳腺癌MCF-7细胞中AKT1和PI3KP85亚基的表达对MCF-7细胞增殖和侵袭等的影响。方法:将包含AKT1、PI3KP85两种siRNA开放阅读框的短发夹RNA(shRNA)重组腺病毒质粒表达载体rAd5-siAKT1-siPI3K转染至乳腺癌MCF-7细胞。应用real-timePCR和Western blotting检测转染后目的基因mRNA和蛋白的表达水平,并用Western blotting检测目的基因被沉默后PCNA、cyclinD1和P53的表达情况。应用MTT法、流式细胞术、2-D和3-DMatrigel实验检测MCF-7细胞转染前后的细胞增殖周期和侵袭能力。结果:重组腺病毒质粒表达载体rAd5-siAKT1-siPI3K介导的靶向AKT1,PI3KP85shRNA可以有效抑制目的基因AKT1和PI3Kp85的mRNA和蛋白表达;下游相关因子PCNA、cyclinD1的表达亦下调,P53表达则上调。MTT法结果显示rAd5-siAKT1-siPI3K组细胞生长抑制率>50%,与未转染组和rAd5-siCtrl转染组比较,出现明显的G1/G0细胞周期阻滞;2-D和3-DMatrigel实验显示,未转染组和rAd5-siCtrl转染组细胞呈正常形态,而rAd5-siAKT1-siPI3K转染组细胞贴壁生长能力明显减低,细胞团块明显缩小。结论:靶向AKT1、PI3KP85亚基的shRNA技术可以抑制MCF-7细胞中AKT1、PI3KP85亚基的表达,抑制MCF-7细胞的体外增殖。 展开更多
关键词 RNA干扰 乳腺肿瘤 akt1 PI3KP85 增殖
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银屑病皮损及正常人皮肤中Akt1,Akt2和Akt3的表达 被引量：7
11
作者 蔓小红 张晓艳 +4 位作者 李红艳 徐波 唐娟 陈扬鑫 潘琳 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2011年第5期338-340,共3页
目的探讨Akt三种亚型Akt1,Akt2和Akt3的表达在寻常性银屑病发病中的意义。方法采用免疫组化法检测30例寻常性银屑病皮损及15例正常皮肤中Akt1,Akt2和Akt3的表达,并利用计算机图像采集与分析系统对免疫组化结果进行平均光密度测定。结果... 目的探讨Akt三种亚型Akt1,Akt2和Akt3的表达在寻常性银屑病发病中的意义。方法采用免疫组化法检测30例寻常性银屑病皮损及15例正常皮肤中Akt1,Akt2和Akt3的表达,并利用计算机图像采集与分析系统对免疫组化结果进行平均光密度测定。结果免疫组化结果显示,与正常人表皮相比,寻常性银屑病皮损中Akt1(0.2170±0.0144)和Akt2(0.2157±0.0150)的表达差异无统计学意义(P>0.05),而Akt3(0.2990±0.0165)的表达却明显高于正常皮肤,差异有统计学意义(P<0.01)。结论寻常性银屑病皮损内Akt活性的升高可能与Akt3的表达增强有关。 展开更多
关键词 akt1 AKT2 Akt3 银屑病
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Akt1信号通路在胃癌组织中的表达及意义 被引量：16
12
作者 程玉 李春辉 +1 位作者 刘海旺 李建玲 《广东医学》 CAS 北大核心 2015年第4期560-562,共3页
目的探讨Akt1信号通路在胃癌组织中的表达及意义。方法采用RT-PCR和Western blot技术分别检测60例胃癌组织及25例正常胃组织中Akt1 mRNA及蛋白的表达情况。结果 Akt1 mRNA和蛋白在胃癌组织中的相对表达量均显著高于正常胃组织(P<0.01... 目的探讨Akt1信号通路在胃癌组织中的表达及意义。方法采用RT-PCR和Western blot技术分别检测60例胃癌组织及25例正常胃组织中Akt1 mRNA及蛋白的表达情况。结果 Akt1 mRNA和蛋白在胃癌组织中的相对表达量均显著高于正常胃组织(P<0.01)。Akt1 mRNA和蛋白在胃癌组织中的表达与患者的性别、年龄无关(P>0.05),而与胃癌的分化程度、TNM分期、浸润深度、淋巴结转移情况相关(P<0.05)。Akt1 mRNA与蛋白在胃癌组织中的表达呈正相关(r=0.634,P=0.000)。结论 Akt1信号通路参与胃癌的发生、发展、浸润转移,在胃癌的癌变过程中起着重要作用。 展开更多
关键词 胃癌 akt1 信号通路
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慢病毒介导Akt1 shRNA载体转染对人肝母细胞瘤细胞株HepG2凋亡和增殖的影响 被引量：9
13
作者 马体栋 赵凡 李碧香 《肿瘤药学》 CAS 2019年第4期572-577,共6页
目的探究慢病毒介导Akt1 shRNA载体转染对人肝母细胞瘤细胞株HepG2凋亡和增殖水平的影响。方法以人肝母细胞瘤细胞株HepG2为研究对象,将其分为空白对照组(A组)、空白载体病毒组(B组)和ShRNA-Akt1慢病毒组(C组)。A组细胞未作任何处理,B... 目的探究慢病毒介导Akt1 shRNA载体转染对人肝母细胞瘤细胞株HepG2凋亡和增殖水平的影响。方法以人肝母细胞瘤细胞株HepG2为研究对象,将其分为空白对照组(A组)、空白载体病毒组(B组)和ShRNA-Akt1慢病毒组(C组)。A组细胞未作任何处理,B组细胞转染空白载体慢病毒,C组细胞转染shRNA-Akt1载体构建的慢病毒。利用短发夹RNA(shRNA)干扰技术构建Akt1的基因下调载体,通过慢病毒转染HepG2细胞,qPCR和Western blotting检测凋亡相关因子Caspase-3和Caspase-9的表达;CCK-8法检测细胞增殖能力;Transwell法检测细胞侵袭能力;Annexin-V/PI法检测细胞凋亡水平。结果shRNA-Akt1载体慢病毒转染滴度为8×10^7 TU·mL^-1。三组细胞的Akt1 mRNA相对表达量比较,差异均具有统计学意义(F=9.904,P=0.025),且C组显著低于A组和B组(q=3.092,2.009;P=0.019);三组细胞的Caspase-3和Caspase-9 mRNA相对表达量比较,差异均具有统计学意义(P<0.05),且C组显著高于A组和B组(P<0.05)。Western blotting检测结果显示,三组细胞的Akt1蛋白水平比较,差异均具有统计学意义(F=11.002,P=0.011),且C组显著低于A组和B组(q=2.887,2.457;P=0.014);三组细胞的Caspase-3和Caspase-9蛋白水平比较,差异均具有统计学意义(P<0.05),且C组显著高于A组和B组(P<0.05)。CCK-8结果显示,C组细胞增殖率显著低于B组和A组(q=2.009,3.901;P<0.05)。Transwell结果显示,C组细胞的侵袭能力显著低于B组和A组(q=2.127,2.157;P<0.05)。Annexin-V/PI结果显示,C组细胞凋亡率显著高于B组和A组(q=2.445,2.659;P<0.05)。结论慢病毒介导Akt1 shRNA载体可抑制HepG2细胞增殖和侵袭,并促进其凋亡,可作为肝癌的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 akt1 HEPG2细胞 侵袭 增殖 凋亡
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盐生植物小花碱茅K^+通道PtAKT1基因片段的克隆及序列分析 被引量：4
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作者 郭强 周向睿 +4 位作者 王沛 张金林 包爱科 伍国强 王锁民 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期683-688,共6页
为研究小花碱茅(Puainellia tenuiflora)K+/Na+选择吸收分子机制,根据已报道的其他植物AKT1基因的保守序列设计一对简并性引物,以小花碱茅根部总RNA为模板,采用RT-PCR方法克隆出AKT1基因,以期为小花碱茅AKT1全长基因的克隆、表达调控及... 为研究小花碱茅(Puainellia tenuiflora)K+/Na+选择吸收分子机制,根据已报道的其他植物AKT1基因的保守序列设计一对简并性引物,以小花碱茅根部总RNA为模板,采用RT-PCR方法克隆出AKT1基因,以期为小花碱茅AKT1全长基因的克隆、表达调控及其作物改良的研究奠定基础。序列分析结果表明:该基因长度大约为1019 bp,编码339个氨基酸;所得序列与GenBank中注册的高等植物AKT1基因序列的同源性均在85%以上,与其他AKT1的氨基酸序列同源性达73%以上。 展开更多
关键词 小花碱茅 akt1基因 克隆 序列分析
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转染Akt1基因对缺血再灌注大鼠心肌线粒体通透性转换的影响 被引量：11
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作者 王静 李东野 +6 位作者 夏勇 罗园媛 陈丹 潘德锋 朱红 张卓琦 徐通达 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期80-85,共6页
目的:研究Akt1基因对缺血再灌注(I/R)损伤心肌细胞的保护作用,并探讨Akt1基因对心肌I/R损伤时线粒体通透性转换(MPT)功能的影响。方法:使用结扎/松解左冠状动脉前降支法,结扎冠状动脉前降支30min,再灌注120min,建立大鼠在体心肌I/R损伤... 目的:研究Akt1基因对缺血再灌注(I/R)损伤心肌细胞的保护作用,并探讨Akt1基因对心肌I/R损伤时线粒体通透性转换(MPT)功能的影响。方法:使用结扎/松解左冠状动脉前降支法,结扎冠状动脉前降支30min,再灌注120min,建立大鼠在体心肌I/R损伤模型。40只雄性SD大鼠随机分为5组,每组8只:假手术对照组(control组)、心肌缺血/再灌注组(I/R组)、转Akt1基因+I/R组(Ad-gene组)、空载体+I/R组(Ad-blank组)、转Akt1基因+I/R+Akt抑制剂组(Ad-inhibitor组)。Ad-gene组术前48h开胸心肌内直接分点注射脂质体Akt1质粒复合物,control组和I/R组分别注射同等体积磷酸盐缓冲液(PBS),Ad-blank组注射等体积脂质体,Ad-inhibitor组注射等体积脂质体Akt1质粒LY294002混合物。观察转染Akt1基因对大鼠I/R心脏乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)释放、心肌细胞凋亡、Akt1表达、线粒体和胞浆内细胞色素C(Cyc-C)表达以及MPT的影响。结果:Control组可见Akt1表达,但明显低于其余各组;与control组相比较,其余各组心肌细胞凋亡指数(AI)、LDH和CK均增高;与control组相比较,其余各组Cyc-C较胞浆表达增加而线粒体内表达减少。Ad-gene组Akt1蛋白表达较control组、I/R组、Ad-blank组及Ad-inhibitor组均增加;Ad-gene组AI、LDH和CK较I/R组、Ad-blank组及Ad-inhibitor组均显著减少,但仍高于control组;Ad-gene组Cyc-C较I/R组、Ad-blank组以及Ad-inhibitor组胞浆内表达减少而线粒体内表达增加;Ad-gene组较IR组、Ad-blank组和Ad-inhibitor组在540nm处吸光度值增高,但明显低于control组。I/R组、Ad-blank组以及Ad-inhibitor组Akt1、Cyc-C、AI、LDH和CK以及在540nm处吸光度值比较均无显著差异。结论:转染Akt1基因对I/R损伤心肌细胞具有保护作用,该作用可能与Akt1抑制I/R诱导的心肌线粒体膜通透性转换,从而保护线粒体的功能有关。 展开更多
关键词 基因 akt1 再灌注损伤 线粒体通透性转换
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植物内整流K^＋通道AKT1的研究进展 被引量：8
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作者 胡静 胡小柯 +2 位作者 尉秋实 袁惠君 Yousaf Jamal 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期813-822,共10页
K^+是植物生长发育所必需的大量营养元素。内整流K^+通道(Arabidopsis K^+transporter 1,AKT1)属于Shaker家族,是介导K^+吸收的重要通道,为质膜的K^+感应器,参与调节细胞的生长发育、调控气孔运动及植物蒸腾作用,能够提高植株的抗旱耐盐... K^+是植物生长发育所必需的大量营养元素。内整流K^+通道(Arabidopsis K^+transporter 1,AKT1)属于Shaker家族,是介导K^+吸收的重要通道,为质膜的K^+感应器,参与调节细胞的生长发育、调控气孔运动及植物蒸腾作用,能够提高植株的抗旱耐盐性,因而在植物生长过程中具有重要作用。该文概述了AKT1的结构、组织表达定位和表达调控及功能等方面的研究进展,并提出采用蛋白组学、基因工程技术及RNAi手段深入研究K^+、Na^+吸收及转运的协同调控机制,提高作物对土壤中K^+的利用效率及AKT1在植物生理代谢、抗逆性中的作用。 展开更多
关键词 内整流K^+通道(akt1) K+吸收 Shaker家族
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老年大鼠阴茎海绵体中P-Erk1/2和P-Akt1激酶的表达 被引量：6
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作者 毛俊彪 许陈祥 姜睿 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期693-697,共5页
目的:一氧化氮(NO)是阴茎勃起的关键因子,其生成主要由一氧化氮合酶(NOS)调节,而磷酸化Erk1/2(P-Erk1/2)和磷酸化Akt1(P-Akt1)均能调节一氧化氮合酶(NOS)的表达及活性从而影响阴茎勃起。本实验研究P-Erk1/2和P-Akt1激酶在老年大鼠阴茎... 目的:一氧化氮(NO)是阴茎勃起的关键因子,其生成主要由一氧化氮合酶(NOS)调节,而磷酸化Erk1/2(P-Erk1/2)和磷酸化Akt1(P-Akt1)均能调节一氧化氮合酶(NOS)的表达及活性从而影响阴茎勃起。本实验研究P-Erk1/2和P-Akt1激酶在老年大鼠阴茎海绵体中的表达,探讨其在老年大鼠勃起功能障碍(ED)发生中的可能作用。方法:A组(2月龄)和B组(18月龄)雄性SD大鼠各10只,测其血清睾酮(T),免疫组化和RT-PCR方法检测大鼠阴茎海绵体中P-Erk1/2和P-Akt1的表达水平。结果:血清T值在B组[(4.73±0.94)nmol/L]较A组[(9.57±1.57)nmol/L]显著下降(P<0.05)。P-Erk1、P-Erk2的mRNA和P-Erk1/2蛋白的相对表达量(积分光密度值IA)在B组(0.95±0.06、0.92±0.05、32.09±8.45)较A组(0.47±0.09、0.61±0.11、7.50±1.81)显著升高(P<0.05);P-Akt1的mRNA和P-Akt1蛋白的相对表达量在B组(0.94±0.05、10.93±3.06)与A组(0.97±0.04、11.67±5.61)无显著差异(P>0.05)。结论:P-Erk1/2的过表达可能是老年性ED发生的机制之一。 展开更多
关键词 ERK1/2 akt1 阴茎海绵体 勃起功能障碍
原文传递
敲低AKT1基因增强裸鼠胃癌移植瘤对阿霉素的敏感性 被引量：4
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作者 周巍 付雪琼 于红刚 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1354-1359,共6页
目的研究敲低AKT1基因对裸鼠胃癌移植瘤阿霉素敏感性的影响。方法构建AKT1基因RNA干扰(RNAi)的慢病毒载体p GCSIL-sh AKT1-GFP,转染HEK293T细胞,以p GCSIL-sh CON-GFP为空载体组。获得慢病毒颗粒后,感染胃癌BGC-823细胞,采用Western blo... 目的研究敲低AKT1基因对裸鼠胃癌移植瘤阿霉素敏感性的影响。方法构建AKT1基因RNA干扰(RNAi)的慢病毒载体p GCSIL-sh AKT1-GFP,转染HEK293T细胞,以p GCSIL-sh CON-GFP为空载体组。获得慢病毒颗粒后,感染胃癌BGC-823细胞,采用Western blot法检测感染后BGC-823细胞中AKT1蛋白水平。皮下注射慢病毒感染的BGC-823细胞构建裸鼠胃癌移植瘤模型,使用阿霉素(DOX)进行处理,观察处理后移植瘤体积大小并绘制肿瘤生长曲线,采用HE染色观察移植瘤组织病变情况,采用组织原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测移植瘤组织中细胞凋亡情况。结果成功构建AKT1基因RNAi的慢病毒载体并成功感染胃癌BGC-823细胞,感染后胃癌BGC-823细胞中AKT1蛋白水平明显降低。敲低AKT1的BGC-823细胞裸鼠移植后,移植瘤生长减慢、移植瘤细胞凋亡增加,并可增强DOX对移植瘤生长的抑制作用。结论敲低AKT1基因可增强BGC-823细胞裸鼠移植瘤对DOX的敏感性。 展开更多
关键词 akt1 慢病毒载体 胃癌 移植瘤 阿霉素
原文传递
慢病毒靶向携带Akt1 shRNA对胃癌细胞SGC-7901凋亡和增殖的影响 被引量：5
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作者 谭韡 于红刚 +1 位作者 罗和生 周巍 《中国医药导报》 CAS 2017年第17期23-27,共5页
目的探讨慢病毒载体靶向携带Akt1基因短发夹RNA(Akt1-shRNA)对胃癌细胞SGC-7901凋亡和增殖的影响。方法构建表达Akt1-shRNA的慢病毒载体,转染293T细胞后获得Akt1-shRNA的慢病毒颗粒,病毒感染胃癌SGC-7901细胞(SGC-LV-shAkt1)为实验组细... 目的探讨慢病毒载体靶向携带Akt1基因短发夹RNA(Akt1-shRNA)对胃癌细胞SGC-7901凋亡和增殖的影响。方法构建表达Akt1-shRNA的慢病毒载体,转染293T细胞后获得Akt1-shRNA的慢病毒颗粒,病毒感染胃癌SGC-7901细胞(SGC-LV-shAkt1)为实验组细胞,SGC7901细胞和转染慢病毒空载体SGC7901细胞(SGCLV-sh CON)为对照组细胞。Real-Time PCR检测Akt1 m RNA表达水平,Western blot检测胃癌细胞Akt1、phosphoAkt(ser473)和bcl-2蛋白表达水平,然后流式双染法、生长速率等方法检测Akt1 shRNA对SGC-7901细胞凋亡及增殖能力的影响。结果成功构建Akt1基因RNAi的慢病毒载体LV-shAkt1,病毒滴度为5×108 TU/mL。SGC-7901细胞转染后,实验组(SGC-LV-shAkt1)Akt1 m RNA和Akt1、p-Akt、bcl-2蛋白表达水平较对照组(SGC-7901、SGC-LV-sh CON)降低(P<0.01);(38.7±3.5)%的实验组细胞凋亡(P<0.05)。SGC-LV-shAkt1细胞生长曲线平缓,生长速度较另两种细胞(SGC-7901、SGC-LV-sh CON)明显降低。结论靶向Akt1的RNAi能有效抑制胃癌细胞SGC-7901的生长,诱导胃癌细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路,下调抗凋亡蛋白bcl-2有关。 展开更多
关键词 akt1 慢病毒载体 胃癌 凋亡
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Survivin、caspase-3及AKT1在大肠癌中的表达及意义 被引量：12
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作者 樊勇军 冯一中 +1 位作者 李海 郑晓娟 《实用癌症杂志》 2010年第1期26-30,共5页
目的探讨survivin、caspase-3和AKT1在大肠腺癌中的表达及其临床病理学意义以及三者在大肠腺癌癌变过程中的作用。方法运用免疫组织化学SP法检测58例大肠腺癌、12例大肠腺瘤和10例正常大肠黏膜中survivin、caspase-3和AKT1的表达情况,... 目的探讨survivin、caspase-3和AKT1在大肠腺癌中的表达及其临床病理学意义以及三者在大肠腺癌癌变过程中的作用。方法运用免疫组织化学SP法检测58例大肠腺癌、12例大肠腺瘤和10例正常大肠黏膜中survivin、caspase-3和AKT1的表达情况,并分析其与大肠腺癌临床病理特征之间的关系以及三者之间的关系。结果在大肠腺癌中survivin、caspase-3以及AKT1的阳性表达率分别为77.6%(45/58)、32.8%(19/58)及70.7%(41/58)。Survivin在大肠腺癌中的表达高于大肠腺瘤以及正常大肠黏膜(P<0.05,P<0.05),cspase-3在大肠腺癌中的表达低于正常大肠黏膜(P<0.05),AKT1在大肠腺癌中的表达高于正常大肠黏膜(P<0.05)。Survivin的表达与肿瘤分化程度关系密切(P<0.05),caspase-3的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移关系密切(P<0.05,P<0.05),AKT1的表达与TNM分期关系密切(P<0.05)。Survivin的表达与caspase-3的表达呈显著负相关(P<0.05),与AKT1的表达呈显著正相关(P<0.05)。结论Survivin与AKT1在大肠腺癌中高表达,caspase-3在大肠腺癌中低表达,且survivin与caspase-3的表达显著负相关,survivin与AKT1的表达显著正相关,提示survivin可能下调caspase-3的表达而上调AKT1的表达,共同促进大肠腺癌的发生发展。 展开更多
关键词 大肠腺癌 SURVIVIN基因 CASPASE-3基因 akt1基因 免疫组织化学
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