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AKTA蛋白纯化系统的开放共享与维护管理 被引量：1
1
作者 姜丽艳 闫国栋 +1 位作者 杜映达 高贵 《分析测试技术与仪器》 CAS 2019年第1期57-60,共4页
AKTA蛋白纯化系统广泛应用于高校教学和科研实验室的蛋白质纯化以及药物开发研究,是蛋白质、多肽和核酸及天然产物最有效的纯化手段.结合多年的大型仪器管理经验,探讨了AKTA蛋白纯化系统的开放共享管理和维护保养经验及故障排除方法,旨... AKTA蛋白纯化系统广泛应用于高校教学和科研实验室的蛋白质纯化以及药物开发研究,是蛋白质、多肽和核酸及天然产物最有效的纯化手段.结合多年的大型仪器管理经验,探讨了AKTA蛋白纯化系统的开放共享管理和维护保养经验及故障排除方法,旨在提高AKTA蛋白纯化系统的使用效率,并延长其使用寿命,更好的服务于教学和科研工作. 展开更多
关键词 蛋白纯化系统 开放共享 维护保养 故障排除
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新型内分泌药物时代下的高危前列腺癌术前新辅助治疗研究进展 被引量：1
2
作者 闫石 朱亚生 +4 位作者 肖雨田 郭涛 王野 张晓敏 任善成 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2023年第12期1092-1096,共5页
既往基于传统内分泌药物的前列腺癌新辅助治疗始终未观察到生存获益,因此不被指南所推荐。近年来,新型内分泌药物(阿比特龙、恩扎卢胺、阿帕他胺和达罗他胺)应用于临床并依靠良好的生存获益不断改写指南,基于新型内分泌药物的新辅助治... 既往基于传统内分泌药物的前列腺癌新辅助治疗始终未观察到生存获益,因此不被指南所推荐。近年来,新型内分泌药物(阿比特龙、恩扎卢胺、阿帕他胺和达罗他胺)应用于临床并依靠良好的生存获益不断改写指南,基于新型内分泌药物的新辅助治疗重新进入人们的视野。本文归纳了近年来采用新型内分泌药物行新辅助治疗的4类模式,并对新辅助治疗后如何进行疗效评估及分子机制探索进行初步探讨。 展开更多
关键词 前列腺癌 高危 新型内分泌药物 新辅助治疗 病理评估 靶向雄激素受体途径药物 耐药
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制备色谱系统从岩黄连中分离岩黄连碱 被引量：8
3
作者 蒋伟哲 莫长林 +1 位作者 黄兴振 凌玲 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期1017-1019,共3页
目的采用制备色谱系统从岩黄连中分离纯化其活性单体岩黄连碱,建立其纯化工艺和技术。方法用醇-酸水-氯仿的方法从岩黄连中提取出总生物碱,然后采用制备色谱系统AKTA Exp lorer 100从中分离出岩黄连碱。结果产品经HPLC检测质量分数达99... 目的采用制备色谱系统从岩黄连中分离纯化其活性单体岩黄连碱,建立其纯化工艺和技术。方法用醇-酸水-氯仿的方法从岩黄连中提取出总生物碱,然后采用制备色谱系统AKTA Exp lorer 100从中分离出岩黄连碱。结果产品经HPLC检测质量分数达99%以上。结论该方法先进,重复性好,可用于分离纯化岩黄连碱。 展开更多
关键词 岩黄连 岩黄连碱 制备色谱 akta EXPLORER 100
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甲型副伤寒杆菌鞭毛蛋白的分离纯化及其抗血清的制备 被引量：4
4
作者 胡明冬 徐剑铖 +2 位作者 冯英凯 周长喜 龚传明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期607-609,共3页
目的　提纯甲型副伤寒杆菌鞭毛蛋白并制备其抗血清。方法　酸裂解法分离副伤寒杆菌鞭毛蛋白,通过半饱和硫酸铵提取、AKTAExplorer蛋白纯化系统除盐及弱阴离子交换层析纯化,所获得鞭毛蛋白的产量通过考马斯亮蓝法测定。纯化后的鞭毛蛋白... 目的　提纯甲型副伤寒杆菌鞭毛蛋白并制备其抗血清。方法　酸裂解法分离副伤寒杆菌鞭毛蛋白,通过半饱和硫酸铵提取、AKTAExplorer蛋白纯化系统除盐及弱阴离子交换层析纯化,所获得鞭毛蛋白的产量通过考马斯亮蓝法测定。纯化后的鞭毛蛋白免疫新西兰大白兔,通过免疫印迹试验和双向免疫扩散试验,确定血清中是否有抗鞭毛蛋白抗体产生及其效价。结果　SDS PAGE提示,纯化的鞭毛蛋白为1条相对分子量为5 2×10 3 蛋白带;免疫印迹实验亦提示条带在5 2×10 3 处;蛋白定量测得每1克湿重的细菌可提取(4 8±0 5 )mg鞭毛蛋白;抗鞭毛蛋白抗血清效价为1∶64。结论　经酸裂解法可获得高产量的鞭毛蛋白,其抗血清易于制备,滴度高,该抗血清可能在拮抗脓毒血症炎症损伤作用方面有积极意义。 展开更多
关键词 甲型副伤寒杆菌 鞭毛蛋白 akta Explorer蛋白纯化系统
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牛、羊发酵乳中多肽的筛分比较及抗炎作用初探 被引量：1
5
作者 张悦 葛武鹏 +3 位作者 贾玉良 陈瑛 王迁 秦立虎 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期66-73,共8页
对不同菌种发酵的牛、羊发酵乳经过模拟人体消化后利用AKTA purifier 10蛋白质层析仪进行功能性多肽分离纯化及比较,同时应用小鼠肿瘤坏死因子TNF-αELISA及Western blot对所分离出的多肽进行抗炎作用分析与比较,为抗炎功能性食品的开... 对不同菌种发酵的牛、羊发酵乳经过模拟人体消化后利用AKTA purifier 10蛋白质层析仪进行功能性多肽分离纯化及比较,同时应用小鼠肿瘤坏死因子TNF-αELISA及Western blot对所分离出的多肽进行抗炎作用分析与比较,为抗炎功能性食品的开发提供参考。结果表明:①用普通菌种发酵的牛、羊酸乳中的多肽种类少于添加了益生菌发酵的牛、羊发酵乳,普通羊酸乳中分离出多肽3种,普通牛酸乳中1种,嗜酸乳杆菌牛发酵乳中2种、羊发酵乳中4种,双歧杆菌牛发酵乳中2种、羊发酵乳中3种;②同时添加了嗜酸乳杆菌和双歧杆菌的复合菌种发酵乳中分离出了最多种类的多肽,且羊发酵乳中多于牛发酵乳;③在被测样品中小鼠肿瘤坏死因子TNF-α的浓度范围是(2.18±0.069)^(14.03±0.081)ng/L,与阳性对照(16.52±0.027)ng/L相比,所有分离出的多肽均具有一定抗炎作用;④通过比较,同时添加了嗜酸乳杆菌和双歧杆菌复合菌种的羊发酵乳中含有的一种多肽C①-2显示出最好的抗炎性能。 展开更多
关键词 牛、羊发酵乳 多肽 抗炎性 akta
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牛、羊初乳中多肽的筛分比较及抗炎作用研究
6
作者 张悦 葛武鹏 +3 位作者 贾玉良 陈瑛 王迁 秦立虎 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2014年第4期11-14,共4页
应用AKTA purifier 10蛋白质层析仪,对经过模拟人体消化后的牛、羊初乳中的多肽进行分离纯化,并比较其差异性,同时应用小鼠肿瘤坏死因子TNF-αELISA试剂盒对所分离出的多肽进行抗炎作用检测并比较,为抗炎功能性食品的开发提供参考。结果... 应用AKTA purifier 10蛋白质层析仪,对经过模拟人体消化后的牛、羊初乳中的多肽进行分离纯化,并比较其差异性,同时应用小鼠肿瘤坏死因子TNF-αELISA试剂盒对所分离出的多肽进行抗炎作用检测并比较,为抗炎功能性食品的开发提供参考。结果:①从牛初乳中分离出了23种多肽,从羊初乳中分离出了36种多肽;②羊初乳中分离出的多肽种类多于牛初乳;③通过检测,所有乳样品中小鼠肿瘤坏死因子TNF-α的浓度范围是(2.42±0.006)^(18.03±0.102)ng/L,与阳性对照(18.52±0.027)ng/L相比,所有分离出的多肽均具有抗炎作用;④通过比较,羊初乳第三天中含有的一种多肽显示出最好的抗炎性能。 展开更多
关键词 牛羊初乳 多肽 抗炎性 akta
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富蕴县阿克塔斯铜金矿床火山岩地球化学 被引量：4
7
作者 纪珊珊 丁汝福 +1 位作者 赵智贤 刘猛 《广州化学》 CAS 2012年第3期38-49,共12页
阿克塔斯铜金矿区位于新疆富蕴县内,矿区主体位于东准噶尔北部,靠近阿尔泰与北准噶尔两个具有不同构造特征和演化历史的构造单元。阿克塔斯金铜矿体主要赋存于石英脉、斜长花岗岩、蚀变安山岩及接触带内的千枚岩破碎带中。根据安山岩的... 阿克塔斯铜金矿区位于新疆富蕴县内,矿区主体位于东准噶尔北部,靠近阿尔泰与北准噶尔两个具有不同构造特征和演化历史的构造单元。阿克塔斯金铜矿体主要赋存于石英脉、斜长花岗岩、蚀变安山岩及接触带内的千枚岩破碎带中。根据安山岩的微量元素分配模式的研究发现,岩浆在演化的过程中有大陆地壳的物质加入其中并进行混染。通过对含矿石英脉中黄铁矿和黄铜矿中的硫进行同位素分析,表明黄铁矿、黄铜矿中硫可能都来源于地幔。矿区区域地球化探异常发育,金、铜、砷元素含量高、相关性好,并与火山―岩浆岩有密切空间关系,是寻找评价与火山岩以及浅成岩有关铜金矿的有利地段。 展开更多
关键词 阿克塔斯 成矿类型 地幔 硫同位素
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甲型副伤寒沙门菌鞭毛蛋白的分离、纯化和鉴定 被引量：6
8
作者 胡明冬 徐剑铖 +3 位作者 周长喜 冯英凯 龚传明 毛宝龄 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期599-603,共5页
目的提纯甲型副伤寒沙门菌鞭毛蛋白并鉴定。方法选用甲型副伤寒沙门菌,经自制的液体培养基扩大培养后,酸裂解法初步分离出鞭毛蛋白,用AKTAExplorer蛋白纯化系统除盐,弱阴离子交换层析纯化。纯化的蛋白用SDS-PAGE、Westernblot和磷钨酸... 目的提纯甲型副伤寒沙门菌鞭毛蛋白并鉴定。方法选用甲型副伤寒沙门菌,经自制的液体培养基扩大培养后,酸裂解法初步分离出鞭毛蛋白,用AKTAExplorer蛋白纯化系统除盐,弱阴离子交换层析纯化。纯化的蛋白用SDS-PAGE、Westernblot和磷钨酸负染扫描电子显微镜(scanningelectronmicrocopy,SEM)观察并摄片鉴定。考马斯亮蓝法测定所获得鞭毛蛋白的产量。结果SDS-PAGE提示纯化的鞭毛蛋白为一条相对分子质量(Mr)为52×103蛋白带;免疫印迹试验亦提示条带在Mr52×103处;SEM观察发现该鞭毛蛋白呈丝状;三者均证实该蛋白为同一均质蛋白。蛋白定量测得每克湿重的细菌可提取(4.8±0.5)mg鞭毛蛋白。结论经酸裂解法可获得高产量的鞭毛蛋白,且易于纯化和鉴定。 展开更多
关键词 甲型副伤寒沙门菌 鞭毛蛋白 鉴定 akta Explorer蛋白纯化系统 沙门菌鞭毛蛋白 蛋白纯化 SDS-PAGE Western 扫描电子显微镜
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蒙古黄芪中核糖核酸酶活性蛋白AmPR-10的纯化和性质研究 被引量：9
9
作者 任晋宏 王永辉 +5 位作者 薛慧清 刘晔 Divid Adelson 陈薛静 李敏 高丽 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第19期3945-3953,共9页
目的采用全自动智能蛋白纯化系统AKTA Avant25建立蒙古黄芪病程相关蛋白(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein-10,AmPR-10)的稳定快速分离纯化方法,并分析其理化性质和生物学活性。方法蒙古黄芪经Tris-HCl缓冲液浸提... 目的采用全自动智能蛋白纯化系统AKTA Avant25建立蒙古黄芪病程相关蛋白(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein-10,AmPR-10)的稳定快速分离纯化方法,并分析其理化性质和生物学活性。方法蒙古黄芪经Tris-HCl缓冲液浸提后阴离子交换色谱捕获目标蛋白,疏水色谱精细分离,凝胶滤过色谱进一步精细分离得到AmPR-10。采用MALDI-TOF/TOF质谱法测定相对分子质量,质谱检测后MS/MS Ion Search检索鉴定蛋白,高碘酸-Schiff法判断是否为糖蛋白,琼脂糖凝胶电泳分析核糖核酸酶活性及不同影响因素对核糖核酸酶活性的影响。结果蒙古黄芪粗提液经Q Sepharose Fast Flow、Butyl Sepharose High Performance和SuperdexTM 75 10/300 GL 3步纯化后可得到电泳纯AmPR-10;质谱测定其相对分子质量为16 801;蛋白鉴定其属于PR-10蛋白家族;糖蛋白染色显示其不含糖链。AmPR-10具有显著的核糖核酸酶活性,且其活性对Na Cl浓度、pH值和金属离子的敏感度低,仅0.5 mol/L NaCl、pH 9.0、Mg^(2+)和Co^(2+)对其有微弱的抑制作用,EDTA对AmPR-10核糖核酸酶活性无影响。结论离子交换色谱-疏水色谱-凝胶过滤色谱3步法纯化AmPR-10快速稳定,可应用于其他中药蛋白质的分离纯化。AmPR-10可能在蒙古黄芪抵御RNA病毒侵染中发挥重要作用。 展开更多
关键词 蒙古黄芪 AmPR-10 akta Avant25 纯化 核糖核酸酶 活性蛋白 生物学活性 MALDI-TOF/TOF质谱法 高碘酸-Schiff法
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GII.P16-GII.2型诺如病毒VLPs的纯化研究
10
作者 程成 李秋璇 +8 位作者 白冰 张金鑫 李善智 李玥 李卓昕 王鹏 金宁一 鲁会军 韩继成 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2022年第12期1365-1368,共4页
目的诺如病毒(Norovirus)是一种重要的人畜共患病病毒,可感染人、猪、牛、犬等多种动物,引起诺如病毒病,每年给全球造成巨大的经济损伤。本研究基于AKTA纯化系统探索诺如病毒VLPs的纯化工艺。方法将诺如病毒重组杆状病毒接种到SF9细胞... 目的诺如病毒(Norovirus)是一种重要的人畜共患病病毒,可感染人、猪、牛、犬等多种动物,引起诺如病毒病,每年给全球造成巨大的经济损伤。本研究基于AKTA纯化系统探索诺如病毒VLPs的纯化工艺。方法将诺如病毒重组杆状病毒接种到SF9细胞中培养,通过Western blot、间接免疫荧光试验以及SDS-PAGE进行鉴定,对鉴定正确的细胞培养产物采用阴、阳离子柱进行病毒的层析纯化,并对层析柱的选择、层析缓冲液的pH值、洗脱液NaCI浓度等进行优化。基于优化后的参数或条件通过AKTA纯化系统纯化诺如病毒VLPs,分析纯化效果。结果经Western blot、间接免疫荧光、以及SDS-PAGE等鉴定,诺如病毒重组杆状病毒转染SF9细胞后表达诺如病毒VLPs。采用阴、阳离子柱进行病毒的层析纯化,优化的纯化参数或条件为:阴离子纯化柱,层析缓冲液pH值为6.0,洗脱液NaCI浓度为0.2 mol/L。结论诺如病毒重组杆状病毒转染SF9细胞后表达诺如病毒VLPs。优化的AKTA纯化系统可用于诺如病毒VLPs的纯化。 展开更多
关键词 诺如病毒 病毒样颗粒 akta纯化系统 蛋白纯化
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