目的探讨柴胡皂苷D调控CaMKKβ/AMPK信号通路,在功能性消化不良中对胃肠道Cajal间质细胞(Interstitial cells of Cajal,ICCs)细胞自噬的作用及机制。方法分离大鼠原代ICCs细胞,谷氨酸刺激构建ICCs自噬模型,免疫荧光检测Ca2+水平。将原代...目的探讨柴胡皂苷D调控CaMKKβ/AMPK信号通路,在功能性消化不良中对胃肠道Cajal间质细胞(Interstitial cells of Cajal,ICCs)细胞自噬的作用及机制。方法分离大鼠原代ICCs细胞,谷氨酸刺激构建ICCs自噬模型,免疫荧光检测Ca2+水平。将原代ICCs细胞分为对照组、模型组、模型+柴胡皂苷D组、模型+CaMKKβ抑制剂组、模型+柴胡皂苷D+CaMKKβ抑制剂组。透射电镜观察自噬体超微结构,ELISA检测Ghrelin和SP的水平,免疫荧光检测Ca2+和LC-3Ⅱ的表达,Western blot检测LC-3Ⅱ/Ⅰ、CaMKKβ、p-AMPK、Drp1、MFN2、IP3R和RyR的蛋白表达水平。结果谷氨酸诱导的模型组ICCs中LC-3Ⅱ荧光表达增强。柴胡皂苷D干预可降低Ca2+浓度,降低CaMKKβ、AMPK和MFN2水平(P<0.01),增加LC-3Ⅱ/Ⅰ、IP3R、RyR、Drp1、Ghrelin和SP水平(P<0.01)。柴胡皂苷D联合CaMKKβ抑制剂STO-609干预后效果更显著。结论柴胡皂苷D可通过CaMKKβ/AMPK信号通路介导Ca2+外流,影响ICCs细胞过度自噬及胃肠动力相关因子的表达。展开更多
腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)是影响全身代谢和生理功能的多种代谢途径的主要调节者,其活化已被提出用于治疗多种代谢性疾病,如肥胖症、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、2型糖尿病(T2DM)。AMPK是一种高度保守的...腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)是影响全身代谢和生理功能的多种代谢途径的主要调节者,其活化已被提出用于治疗多种代谢性疾病,如肥胖症、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、2型糖尿病(T2DM)。AMPK是一种高度保守的代谢调节因子,参与糖脂相关的代谢过程,近年来被认为是代谢性疾病的一个关键研究靶点。多项研究显示,中药单体、中药复方可以通过激活AMPK信号通路改善胰岛素抵抗(IR)和炎症反应,激活自噬,调节糖脂代谢,从而延缓NAFLD合并T2DM的发生和发展。采用文献检索和综合分析的方法,总结中医药通过激活AMPK信号通路参与NAFLD合并T2DM治疗的作用机制,为今后中医药治疗NAFLD合并T2DM提供思路。展开更多
文摘目的探讨柴胡皂苷D调控CaMKKβ/AMPK信号通路,在功能性消化不良中对胃肠道Cajal间质细胞(Interstitial cells of Cajal,ICCs)细胞自噬的作用及机制。方法分离大鼠原代ICCs细胞,谷氨酸刺激构建ICCs自噬模型,免疫荧光检测Ca2+水平。将原代ICCs细胞分为对照组、模型组、模型+柴胡皂苷D组、模型+CaMKKβ抑制剂组、模型+柴胡皂苷D+CaMKKβ抑制剂组。透射电镜观察自噬体超微结构,ELISA检测Ghrelin和SP的水平,免疫荧光检测Ca2+和LC-3Ⅱ的表达,Western blot检测LC-3Ⅱ/Ⅰ、CaMKKβ、p-AMPK、Drp1、MFN2、IP3R和RyR的蛋白表达水平。结果谷氨酸诱导的模型组ICCs中LC-3Ⅱ荧光表达增强。柴胡皂苷D干预可降低Ca2+浓度,降低CaMKKβ、AMPK和MFN2水平(P<0.01),增加LC-3Ⅱ/Ⅰ、IP3R、RyR、Drp1、Ghrelin和SP水平(P<0.01)。柴胡皂苷D联合CaMKKβ抑制剂STO-609干预后效果更显著。结论柴胡皂苷D可通过CaMKKβ/AMPK信号通路介导Ca2+外流,影响ICCs细胞过度自噬及胃肠动力相关因子的表达。
文摘腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)是影响全身代谢和生理功能的多种代谢途径的主要调节者,其活化已被提出用于治疗多种代谢性疾病,如肥胖症、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、2型糖尿病(T2DM)。AMPK是一种高度保守的代谢调节因子,参与糖脂相关的代谢过程,近年来被认为是代谢性疾病的一个关键研究靶点。多项研究显示,中药单体、中药复方可以通过激活AMPK信号通路改善胰岛素抵抗(IR)和炎症反应,激活自噬,调节糖脂代谢,从而延缓NAFLD合并T2DM的发生和发展。采用文献检索和综合分析的方法,总结中医药通过激活AMPK信号通路参与NAFLD合并T2DM治疗的作用机制,为今后中医药治疗NAFLD合并T2DM提供思路。
