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补中益气汤含药血清对树突状细胞VDR甲基化及PI3K-AKT-mTOR通路的影响 被引量:2
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作者 文艺 高天舒 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2024年第1期87-95,共9页
目的补中益气汤对树突状细胞(dendritic cells,DCs)免疫耐受机制的体外研究。方法小鼠树突状细胞株于体外进行培养,分为空白对照组(A组)、中药组(B组)、维生素D组(C组)、中药+维生素D组(D组)、中药+LY组(E组)、维生素D+LY组(F组)、中药+... 目的补中益气汤对树突状细胞(dendritic cells,DCs)免疫耐受机制的体外研究。方法小鼠树突状细胞株于体外进行培养,分为空白对照组(A组)、中药组(B组)、维生素D组(C组)、中药+维生素D组(D组)、中药+LY组(E组)、维生素D+LY组(F组)、中药+VitD+LY组(G组)。以15%含药血清,10μmol·L-1维生素D、1.5μmol·L-1LY294002(PI3K阻滞剂)分别干预7组细胞,于培养箱中分别培养24、48 h后,BSP法检测树突状细胞维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)基因DNA甲基化情况;ELISA法检测细胞上清液中VDR、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)的含量;流式细胞术检测细胞共刺激分子CD40、CD80、CD86、主要组织相容性复合物-Ⅱ(major histocom-patibility complex,MHC-Ⅱ)的表达水平;Western Blot、qPCR检测各组细胞PI3K-AKT-mTOR通路mRNA及蛋白情况。结果(1)中药及维生素D干预后,DCs上VDR的表达增多(P<0.001或P<0.05),VDR基因DNA甲基化情况显著降低(P<0.05)。(2)中药及维生素D能够提高DCs上清液中IL-10含量(P<0.05或P<0.001),阻滞剂作用后,DCs分泌IL-10的功能均降低(P<0.05或P<0.001)。(3)中药及维生素D能够降低DCs表面因子CD40、CD80、CD86及MHCD-Ⅱ的表达(P<0.05或P<0.001),阻滞剂作用后,CD40、CD80、CD86及MHCD-Ⅱ表达均提高(P<0.001)。(4)Western Blot、qPCR结果显示,中药及维生素D能够升高DCs PI3K-AKT-mTOR通路mRNA和蛋白的表达(P<0.05或P<0.001),抑制剂作用后,PI3K-AKT-mTOR通路mRNA和蛋白水平均下降,其中磷酸化蛋白降低显著(P<0.001)。(5)24 h与48 h两个时间点并未见明显差异(P>0.05)。结论补中益气汤通过抑制DCs VDR基因DNA甲基化,激活PI3K-AKT-mTOR通路,使其维持免疫耐受状态。 展开更多
关键词 补中益气汤 AIT 树突状细胞 VDR PI3K-akt-mtor通路
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基于PI3K-AKT-mTOR信号通路探讨灵芝孢子对2型糖尿病大鼠睾丸的保护作用 被引量:1
2
作者 逄瑞丰 王肖烨 +4 位作者 宣金雨 毕九丁 孔维明 郝婉莹 马小茹 《黑龙江医药科学》 2024年第1期1-5,共5页
目的:观察2型糖尿病对大鼠睾丸的损伤作用及灵芝孢子通过PI3K-AKT-mTOR信号通路对其损伤的保护作用。方法:选取40只雄性SD大鼠随机分为正常组(NC)、高脂高糖饮食组(HF)、糖尿病模型组(DM)及灵芝孢子干预组(GLSP),每组10只。通过腹腔注... 目的:观察2型糖尿病对大鼠睾丸的损伤作用及灵芝孢子通过PI3K-AKT-mTOR信号通路对其损伤的保护作用。方法:选取40只雄性SD大鼠随机分为正常组(NC)、高脂高糖饮食组(HF)、糖尿病模型组(DM)及灵芝孢子干预组(GLSP),每组10只。通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ30mg/kg)联合高脂高糖饮食制备糖尿病大鼠模型,模型制备成功后治疗组使用灵芝孢子300mg/(kg·d)灌胃,其余3组使用同体积生理盐水灌胃,连续12周,期间观测各组大鼠一般情况及状态,每周测定1次大鼠血糖及体质量变化。末次称量体质量及检测空腹血糖后处死大鼠,称量睾丸质量,取附睾尾制涂片染色观察精子形态,试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)水平;Western blotting检测PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白水平。结果:DM组大鼠较NC组大鼠血糖升高,精神萎靡,SOD水平降低,MDA水平升高,体质量及睾丸质量减轻(P<0.01),精子形态差。灵芝孢子可改善DM大鼠的精神状态及精子形态,降低DM大鼠血糖、MDA水平,升高DM大鼠体质量及睾丸质量(P<0.01)。同时灵芝孢子可使p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR、SOD水平升高(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.05)。结论:灵芝孢子可减轻DM大鼠的睾丸损伤情况,其机制可能与抑制PI3K-AKT-mTOR信号通路有关。 展开更多
关键词 灵芝孢子 糖尿病 睾丸 PI3K-akt-mtor信号通路
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同型半胱氨酸经PI3K-AKT-mTOR信号通路对巨噬细胞自噬及脂质沉积的影响
3
作者 胡舒彤 刘秋君 +6 位作者 马非亚 杨安宁 郝银菊 熊建团 焦运 姜怡邓 李桂忠 《宁夏医科大学学报》 2024年第2期109-117,共9页
目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对巨噬细胞自噬及脂质沉积的影响。方法将18只雄性ApoE-/-小鼠分为对照组、Hcy组、Hcy+Rap组,通过蛋白质免疫印迹检测自噬相关蛋白LC3BⅡ、p62、PI3K-AKT-mTOR信号通路中总蛋白及磷酸化蛋白水平;采用mRFP-GFP-... 目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对巨噬细胞自噬及脂质沉积的影响。方法将18只雄性ApoE-/-小鼠分为对照组、Hcy组、Hcy+Rap组,通过蛋白质免疫印迹检测自噬相关蛋白LC3BⅡ、p62、PI3K-AKT-mTOR信号通路中总蛋白及磷酸化蛋白水平;采用mRFP-GFP-LC3腺病毒感染细胞,观察自噬流的改变;Dil-ox-LDL染色及油红O染色检测Hcy对巨噬细胞内脂质沉积的影响;组织油红O染色观察小鼠主动脉根部斑块的脂质沉积情况;免疫组化检测小鼠主动脉根部斑块中巨噬细胞自噬改变。结果Western blot检测和自噬流实验结果显示,与对照组相比较,给予Hcy干预后,巨噬细胞自噬被抑制,PI3K、AKT、mTOR表达差异均无统计学意义(P均>0.05),但PI3K、AKT、mTOR磷酸化水平均升高(P均<0.05);与Hcy组相比较,Hcy+Rap组LC3BⅡ表达增高(P<0.05),p62表达降低(P<0.01);Dil-ox-LDL染色与油红O染色结果显示,与对照组相比较,Hcy组巨噬细胞内脂质沉积增加(P<0.01),而给予Rap干预后,细胞内脂质沉积减少(P<0.01);与对照组相比较,HMD组小鼠主动脉根部斑块中脂质沉积增多(P<0.01),注射Rap后,脂质沉积减少(P<0.01);免疫组化结果显示,与对照组相比较,HMD组自噬被抑制,注射Rap后,自噬得到恢复。结论Hcy能够抑制巨噬细胞自噬并促进脂质沉积,与PI3K-AKT-mTOR信息通路有关。 展开更多
关键词 巨噬细胞 同型半胱氨酸 PI3K-akt-mtor信号通路 自噬 动脉粥样硬化 雷帕霉素
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加减益经汤对卵巢功能减退大鼠PI3K-Akt-mTOR信号通路的影响
4
作者 万云慧 陈晓勇 +1 位作者 王慧民 叶倩 《中医药临床杂志》 2023年第12期2382-2387,共6页
目的:探讨加减益经汤对卵巢功能减退大鼠PI3K-Akt-mTOR信号通路的影响。方法:40只大鼠随机分为空白组、模型组、加减益经汤组、戊酸雌二醇片组及雷帕霉素组,各8只。计算大鼠动情周期紊乱率及性腺指数;HE染色观察大鼠卵巢组织病变;ELISA... 目的:探讨加减益经汤对卵巢功能减退大鼠PI3K-Akt-mTOR信号通路的影响。方法:40只大鼠随机分为空白组、模型组、加减益经汤组、戊酸雌二醇片组及雷帕霉素组,各8只。计算大鼠动情周期紊乱率及性腺指数;HE染色观察大鼠卵巢组织病变;ELISA法检测血清促性腺激素释放激素(Gn-RH)、促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E_(2))、抗苗勒管激素(AMH);qRT-PCR及WB检测PI3K、Akt、mTOR mRNA及蛋白表达。结果:与空白组相比,模型组大鼠动情周期紊乱率、血清Gn-RH、FSH、LH水平升高,卵巢指数和子宫指数、血清E_(2)、AMH水平、PI3K、Akt、mTOR mRNA、蛋白表达降低。与模型组相比,加减益经汤组及戊酸雌二醇片组大鼠动情周期紊乱率、血清Gn-RH、FSH、LH水平降低,卵巢指数和子宫指数、血清E_(2)、AMH水平、PI3K、Akt、mTOR mRNA、蛋白升高。空白组大鼠卵巢组织无病变;模型组与雷帕霉素组大鼠卵巢萎缩,皮质增厚,卵泡异常,闭锁卵泡增加,髓质萎缩;加减益经汤组及戊酸雌二醇片组大鼠卵巢组织病变减轻,卵泡略增多,闭锁卵泡及间质腺少见,髓质略萎缩。结论:加减益经汤可通过激活PI3K-Akt-mTOR信号通路减轻卵巢功能减退大鼠病理损伤,提高卵巢储备功能。 展开更多
关键词 加减益经汤 卵巢功能减退 PI3K-akt-mtor信号通路 雷帕霉素
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岩白菜素通过下调PI3K-AKT-mTOR通路抑制恶性胶质瘤的恶性生物学行为
5
作者 田仁富 宁志丰 陈治标 《转化医学杂志》 2023年第1期6-10,共5页
目的探究岩白菜素对恶性胶质瘤细胞的抑制作用及可能机制。方法常规培养U251和U87细胞,以一定浓度梯度(0、0.5、1、2、4、8μM)的岩白菜素与U251和U87细胞共孵育,MTT法检测细胞增殖能力,平板克隆形成实验检测集落形成能力,Transwell小... 目的探究岩白菜素对恶性胶质瘤细胞的抑制作用及可能机制。方法常规培养U251和U87细胞,以一定浓度梯度(0、0.5、1、2、4、8μM)的岩白菜素与U251和U87细胞共孵育,MTT法检测细胞增殖能力,平板克隆形成实验检测集落形成能力,Transwell小室迁移和侵袭实验检测纵向迁移能力,划痕愈合实验检测横向迁移能力,Hoechst细胞凋亡检测试剂盒检测凋亡,免疫印迹检测PI3K-AKT-mTOR通路的变化,MTT检测与PI3K抑制剂共孵育后岩白菜素对U251细胞抑制作用的变化。同时利用MTT评估岩白菜素对正常人脑胶质HEB细胞的细胞毒性。结果与一定浓度梯度的岩白菜素共孵育后,MTT法检测发现U251和U87细胞的增殖能力以时间依赖性和浓度依赖性下降,平板克隆形成实验检测发现U251和U87细胞的集落形成能力浓度依赖性下降,Transwell小室迁移和侵袭实验检测发现U251细胞的纵向迁移和侵袭能力浓度依赖性下降,划痕愈合实验发现U251细胞的横向迁移能力浓度依赖性下降,Hoechst细胞凋亡检测试剂盒检测发现与一定浓度的岩白菜素共孵育后凋亡细胞增多,免疫印迹检测发现,总PI3K、总AKT及总mTOR没有改变,但是磷酸化的PI3K、磷酸化的AKT及磷酸化的mTOR呈浓度依赖性下降,PI3K抑制剂并不能增强岩白菜素对U251细胞的抑制作用。岩白菜素对HEB无明显细胞毒性。结论岩白菜素可以特异性抑制恶性胶质瘤细胞的恶性生物学行为,作用机制与减少PI3K-AKT-mTOR通路的磷酸化有关。 展开更多
关键词 恶性胶质瘤 岩白菜素 PI3K-akt-mtor通路 PI3K抑制剂
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青藤碱通过PI3K/AKt-mTOR信号通路调节膝OA兔软骨自噬水平机制研究 被引量:15
6
作者 郑洁 袁普卫 +2 位作者 赵莉平 边敏佳 康武林 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2019年第8期30-33,共4页
目的:观察不同剂量青藤碱(SIN)对膝OA兔关节软骨自噬水平以及自噬抑制信号通路PI3K/AKtmTOR关键分子表达的影响。方法:50只新西兰大白兔随机分为空白组、模型组、SIN低剂量组、SIN中剂量组和SIN高剂量组。空白组不予任何处理,模型组、SI... 目的:观察不同剂量青藤碱(SIN)对膝OA兔关节软骨自噬水平以及自噬抑制信号通路PI3K/AKtmTOR关键分子表达的影响。方法:50只新西兰大白兔随机分为空白组、模型组、SIN低剂量组、SIN中剂量组和SIN高剂量组。空白组不予任何处理,模型组、SIN低剂量组、SIN中剂量组和SIN高剂量组通过Hulth法建立膝骨关节炎模型后,分别用生理盐水、SIN进行膝关节腔注射,共干预10次,SIN用量由低到高分别为0.2mL(5mg)、0.35mL(8.75mg)和0.5mL(12.5mg)。实时荧光定量PCR法检测关节软骨Atg-5和Atg-12的mRNA表达,Westernblot法检测关节软骨Beclin-1、LC3-Ⅱ、PI3K、AKt和mTOR的蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组和SIN低剂量组Atg-5、Atg-12的mRNA表达以及Beclin-1、LC3-Ⅱ的蛋白表达显著下调(P<0.05),SIN中、高剂量组显著高于模型组,SIN中、高剂量两组之间比较无统计学差异(P>0.05);与空白组比较,模型组和SIN低剂量组PI3K、AKt和mTOR的蛋白表达明显上调(P<0.05),SIN中、高剂量组明显低于模型组(P<0.05),SIN中剂量组与高剂量组比较无统计学差异(P>0.05)。结论:中、高剂量的青藤碱可通过抑制PI3K/AKt-mTOR信号通路活性上调膝OA兔关节软骨自噬水平。 展开更多
关键词 青藤碱 骨性关节炎 自噬 PI3K/akt-mtor通路
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PI3K-AKT-mTOR信号通路基因多态性与胃癌遗传易感相关性 被引量:16
7
作者 林贤东 胡丹 +5 位作者 陈刚 师怡 张和军 金善丰 李鑫静 郑雄伟 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期361-365,369,共6页
目的 探讨中国福建地区汉族人群PI3K/AKT/mT0R信号通路基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与胃癌遗传易感性的关系。方法 选取组织学确诊的胃癌323例及年龄和性别等频数匹配的对照健康体检人493例,采用PCR-连接... 目的 探讨中国福建地区汉族人群PI3K/AKT/mT0R信号通路基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与胃癌遗传易感性的关系。方法 选取组织学确诊的胃癌323例及年龄和性别等频数匹配的对照健康体检人493例,采用PCR-连接酶检测反应(ligase detection reaction,PCR-LDR)法进行PI3Krs7651265A〉G、mTORrs7212142G〉A及AKT rs1130214G〉T多态性检测,应用非条件Logistic回归分析评估不同基因型与胃癌发病风险及病理特征的关系。采用似然比检验分析PI3K和mTOR基因多态性之间的交互作用。结果 PI3K基因rs7651265携带G等位基因(GG+GA)患者发生胃癌的风险是携带AA基因型的4.93倍(P〈0.05)。而该位点携带AA基因型的患者发生肿瘤浸润的风险是携带GG+AG基因型患者的3.5倍(P〈0.05)。mTORrs7212142携带GG基因型的患者发生淋巴结转移的风险是携带AA+AG基因型的1.67倍(P〈0.05)。采用似然比检验分析表明,PI3Krs7651265A〉G和mTORrs7212142G〉A基因多态性间存在明显交互作用。与携带野生型纯合子PI3KAA和mTORGG基因型的个体相比,位点发生变异的PI3K(AG+GG)mTOR(GG)、PI3K(AG+GG)mTOR(AG+AA)增加个体患胃癌的风险,OR值分别为5.71(95%CI:3.50-9.34,P〈0.05)和6.41(95%CI:4.13-9.90,P〈0.05)。结论 PI3K-AKT-mTOR信号通路基因多态性与胃癌的发生及侵袭转移密切相关,有可能成为胃癌预后的新分子指标。 展开更多
关键词 胃肿瘤 PI3K-akt-mtor信号通路 单核苷酸多态性 疾病遗传易感性
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利拉鲁肽调控PI3K-Akt-mTOR通路改善糖尿病肾病患者病情 被引量:11
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作者 沈艳萍 乔青 +1 位作者 李明 卢国元 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期466-470,共5页
目的针对糖尿病肾病患者应用利拉鲁肽进行干预,从而探讨药物的治疗效果和作用机制。方法选取糖尿病肾病患者,实验组给予利拉鲁肽干预,对照组给予常规治疗,采集各组患者血液及尿液进行血糖、血脂、肾功能、炎性因子、全段成纤维细胞生长... 目的针对糖尿病肾病患者应用利拉鲁肽进行干预,从而探讨药物的治疗效果和作用机制。方法选取糖尿病肾病患者,实验组给予利拉鲁肽干预,对照组给予常规治疗,采集各组患者血液及尿液进行血糖、血脂、肾功能、炎性因子、全段成纤维细胞生长因子-23(iFGF-23)以及α-Klotho蛋白含量的检测,提取外周血单个核细胞进行信号通路的检测。结果在血糖方面,与治疗前比较,实验组空腹血糖(FBG)及糖化血红蛋白(HbAlc)含量显著降低(均P<0.05)。在血脂方面,治疗后,相对于对照组,实验组患者总胆固醇(TC),三酰甘油(TG)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量显著降低,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量显著升高(均P<0.05)。在肾功能方面,相对于对照组,实验组患者血肌酐(Scr),尿微量白蛋白(Umalb)、尿白蛋白/尿肌酐比值(ACR)含量显著降低,肾小球滤过率(GFR)显著升高(均P<0.05)。在炎性因子方面,相对于对照组,实验组TNF-α、IL-1及IL-6含量显著降低(均P<0.05)。在iFGF-23及α-Klotho蛋白含量方面,相对于对照组,实验组患者iFGF-23含量显著降低,α-Klotho含量显著升高(均P<0.05)。信号通路方面,与对照组比较,治疗后实验组患者磷脂酰肌醇(-3)激酶(PI3K),蛋白激酶B(Akt),雷帕霉素靶蛋白(mTOR)含量显著降低(均P<0.05)。结论利拉鲁肽可通过调控PI3K-Akt-mTOR通路改善糖尿病肾病患者病情,为临床用药提供了理论基础。 展开更多
关键词 利拉鲁肽 糖尿病肾病 炎性因子 iFGF-23 α-Klotho PI3K-akt-mtor通路
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PI3K-Akt-mTOR通路及其小分子抑制剂的研究进展 被引量:15
9
作者 何俏军 董晓武 +2 位作者 朱虹 胡永洲 杨波 《中国生化药物杂志》 CAS 2016年第8期6-15,共10页
磷脂肌醇(PI3K)-蛋白激酶B(PKB,Akt)-雷帕霉素靶体蛋白(mTOR)通路在细胞的存活、增殖和分化等过程中发挥关键作用。PI3K-Akt-mTOR信号通路的异常激活和人类肿瘤的发生密切相关,许多靶向该通路的小分子抑制剂已经进入临床试验中。本文将... 磷脂肌醇(PI3K)-蛋白激酶B(PKB,Akt)-雷帕霉素靶体蛋白(mTOR)通路在细胞的存活、增殖和分化等过程中发挥关键作用。PI3K-Akt-mTOR信号通路的异常激活和人类肿瘤的发生密切相关,许多靶向该通路的小分子抑制剂已经进入临床试验中。本文将对近年来PI3K-Akt-mTOR信号通路与肿瘤的关系及PI3K-Akt-mTOR抑制剂抗肿瘤作用研究进展,并结合本课题组的相关研究成果进行综述。 展开更多
关键词 PI3K-akt-mtor通路 小分子抑制剂 恶性肿瘤
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龙葵碱对Panc-1细胞增殖和血管形成能力的影响及对AKT-mTOR通路的调节作用 被引量:4
10
作者 杨嘹嘹 刘乐伟 +2 位作者 谢建亮 陈旭鹏 黄智铭 《肝胆胰外科杂志》 CAS 2016年第1期59-62,共4页
目的探讨龙葵碱对胰腺癌细胞Panc-1的增殖和血管形成能力的影响及其相关机制。方法实验分为对照组和药物组,药物组分别采用浓度为3.5、7.0和10.5μmol/L的龙葵碱对细胞进行干预,软琼脂克隆试验观察龙葵碱对胰腺癌细胞Panc-1非贴壁依赖... 目的探讨龙葵碱对胰腺癌细胞Panc-1的增殖和血管形成能力的影响及其相关机制。方法实验分为对照组和药物组,药物组分别采用浓度为3.5、7.0和10.5μmol/L的龙葵碱对细胞进行干预,软琼脂克隆试验观察龙葵碱对胰腺癌细胞Panc-1非贴壁依赖性增殖能力的影响;脉管形成实验观察龙葵碱对胰腺癌细胞Panc-1血管形成能力的影响;蛋白质免疫印迹(Western blotting)法检测Panc-1细胞总蛋白中蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、雷帕霉素靶蛋白(target of rapamycin,mTOR)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达变化。结果龙葵碱可明显抑制Panc-1细胞非贴壁依赖性增殖能力,且呈剂量依赖性[100%vs(42.1±9.6)%,(24.3±8.5)%,(14.4±1.7)%;P<0.05];龙葵碱亦可抑制VEGF蛋白表达[100%vs(74.9±5.5)%,(31.9±6.8)%,(16.517.5)%,P<0.05],并且抑制脉管形成[100%vs(82.3±9.5)%,(76.9±8.9)%,(56.0±12.1)%,P<0.05];龙葵碱可下调Panc-1细胞AKT、mTOR磷酸化蛋白表达[100%vs(72.410.8)%,(59.411.3)%,(40.712.9)%;100%vs(96.7±0.4)%,(77.5±3.4)%,(34.1±7.6)%,P<0.05]。结论龙葵碱可能通过抑制AKT-mTOR细胞信号通路而抑制Panc-1细胞的增殖及血管形成能力。 展开更多
关键词 龙葵碱 胰腺癌 增殖 血管形成 akt-mtor通路
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基于网络药理学技术探讨化痰散结方对阿霉素耐药乳腺癌PI3K-Akt-mTOR信号通路相关蛋白的影响 被引量:6
11
作者 王璐 唐世锋 +5 位作者 庄静 刘存 周超 孙月 朱帅 孙长岗 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2018年第5期1161-1165,I0017,共6页
目的:基于网络药理学建立多柔比星/阿霉素耐药相关的蛋白质相互作用网络并通体外实验研究探究化痰散结方逆转耐药的相关分子学机制。方法:筛选pubmed中人类OMMIM遗传数据库的乳腺癌多柔比星/阿霉素耐药相关基因,应用STRING软件进行文... 目的:基于网络药理学建立多柔比星/阿霉素耐药相关的蛋白质相互作用网络并通体外实验研究探究化痰散结方逆转耐药的相关分子学机制。方法:筛选pubmed中人类OMMIM遗传数据库的乳腺癌多柔比星/阿霉素耐药相关基因,应用STRING软件进行文本挖掘并建立蛋白质相互作用网络;将互作数据读入Cytoscape3.4.0,分别应用插件JEPETTO 1.3.1和MCODE1.4.2实现拓扑分析和聚类分析;使用Cytoscape中的插件Clusterviz进一步挖掘网络中可能包含的分子复合物;将所得复合物导入DAVID,富集其中的分子复合物通路。针采用MTT法、Western Blot法对细胞及关键通路进行体外实验研究,进而观察化痰散结方对MCF-7/ADR细胞增殖及相关信号通路表达的影响。结果:乳腺癌多柔比星/阿霉素耐药蛋白质网络是一个多基因构成的网络并且由多信号通路协同发挥调节作用,并非简单由单基因或信号通路调控;在所得相互作用网络中,PI3K-Akt-mTOR很可能作为"关键节点"发挥调控作用;化痰散结方含药血清能够抑制MCF-7/ADR细胞的增值,其内在分子学机制可能与抑制PI3K-Akt-mTOR通路的表达有关。结论:化痰散结方能够逆转人乳腺癌多柔比星/阿霉素耐药,其耐药相关蛋白质相互作用网络复杂,其中PI3K-Akt-mTOR很可能是其中的关键调控点,而化痰散结方抑制MCF-7/ADR细胞增殖的作用机制之一是抑制PI3K-Akt-mTOR通路的表达。 展开更多
关键词 化痰散结方 乳腺癌多柔比星/阿霉素耐药 蛋白质网络 PI3K-akt-mtor通路
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PTEN基因通过Akt-mTOR对乳腺癌细胞增殖与凋亡的影响 被引量:5
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作者 刘芳 戴经纬 +1 位作者 刘丽娜 赵毅 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第12期2048-2051,共4页
目的:探讨PTEN基因通过Akt-mTOR对乳腺癌细胞增殖与凋亡的影响。方法:人乳腺癌MDA-MB-231细胞随机分为两组:pcDNA3.0组与pcDNA3.0-PTEN组,分别转染pcDNA3.0质粒、pcDNA3.0-PTEN质粒2μg,转染48 h收集细胞。采用CCK-8法检测细胞存活率,... 目的:探讨PTEN基因通过Akt-mTOR对乳腺癌细胞增殖与凋亡的影响。方法:人乳腺癌MDA-MB-231细胞随机分为两组:pcDNA3.0组与pcDNA3.0-PTEN组,分别转染pcDNA3.0质粒、pcDNA3.0-PTEN质粒2μg,转染48 h收集细胞。采用CCK-8法检测细胞存活率,双染法检测细胞凋亡,Western-blot检测细胞蛋白表达。结果:pcDNA3.0-PTEN组的细胞存活率低于pcDNA3.0组,对比差异有统计学意义(P<0.05)。与pcDNA3.0组对比,pcDNA3.0-PTEN组的细胞凋亡率显著上升,对比差异有统计学意义(P<0.05)。pcDNA3.0-PTEN组的PTEN蛋白表达量高于pcDNA3.0组,Akt、mTOR蛋白表达量低于pcDNA3.0组,对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PTEN基因过表达可通过抑制Akt-mTOR信号通路,提高乳腺癌细胞凋亡指数,降低细胞增殖活性,从而发挥抑癌作用。 展开更多
关键词 PTEN基因 乳腺癌 细胞增殖 akt-mtor信号通路
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姜黄素通过Akt-mTOR信号通路调控细胞自噬对骨关节炎大鼠的保护作用研究 被引量:4
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作者 曹舒兴 周楠 +4 位作者 王进 赵立辉 曹光 马维 李明 《河北医药》 CAS 2021年第24期3685-3689,共5页
目的研究姜黄素对大鼠骨关节炎软骨细胞的保护作用及其与细胞自噬Akt-mTOR信号通路的关系。方法将30只6周龄健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、手术组及治疗组。手术组采用Hulth法诱导大鼠骨关节炎模型,治疗组术后即给予口服姜黄素50 mg&... 目的研究姜黄素对大鼠骨关节炎软骨细胞的保护作用及其与细胞自噬Akt-mTOR信号通路的关系。方法将30只6周龄健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、手术组及治疗组。手术组采用Hulth法诱导大鼠骨关节炎模型,治疗组术后即给予口服姜黄素50 mg·kg^(-1)·d^(-1),连续给药8周。通过番红-O染色和Mankin’s评分评估关节软骨结构特征;TUNEL染色分析软骨细胞凋亡情况;Western blot检测凋亡相关标志物caspase-3以及Bax/Bcl2,自噬相关标志物LC-Ⅰ/Ⅱ和Beclin1以及Akt/mTOR信号通路mTOR、Akt、p-P70s6k等。此外,提取进行改良Hulth法手术后的大鼠膝关节软骨组织细胞原代培养,分别添加姜黄素(40μmol/L)、Akt-mTOR信号通路激活剂尼古丁(2.5μmol/L)、姜黄素+尼古丁组(姜黄素处理前2 h给予尼古丁处理),验证姜黄素是否通过Akt-mTOR信号通路调控细胞自噬对骨关节炎大鼠发挥保护作用。结果与手术组相比,姜黄素治疗组Mankin’s评分显著降低(P<0.05);软骨细胞凋亡受到抑制;凋亡相关标志物caspase-3以及Bax/Bcl2比值显著下降(P<0.05);自噬相关标志物LC-Ⅰ/Ⅱ和Beclin1表达显著升高(P<0.05);mTOR、Akt、p-P70s6k的表达水平显著降低(P<0.05)。在细胞实验中,当给予姜黄素+尼古丁处理后,相比于单纯给予姜黄素,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平明显下降(P<0.01)。结论姜黄素通过Akt/mTOR信号通路诱导自噬,在骨关节炎大鼠中发挥了治疗作用。 展开更多
关键词 姜黄素 骨关节炎 自噬作用 akt-mtor信号通路
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益肾通络方对少弱精子症大鼠睾丸组织PI3K-AKT-mTOR通路、CatSper-1、HSPA2蛋白及mRNA表达的影响 被引量:13
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作者 孙自学 邱荃 +2 位作者 何鑫 张芳 赵沛沛 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期437-444,共8页
目的:基于PI3K-AKT-mTOR通路研究益肾通络方对少弱精子症模型大鼠睾丸组织的影响及作用机制。方法:将SPF级雄性SD大鼠48只,随机分为正常对照组、模型组、左卡尼汀组、益肾通络方(YTP)组(高、低剂量组)、Omipalisib抑制剂(OI)组、Omipali... 目的:基于PI3K-AKT-mTOR通路研究益肾通络方对少弱精子症模型大鼠睾丸组织的影响及作用机制。方法:将SPF级雄性SD大鼠48只,随机分为正常对照组、模型组、左卡尼汀组、益肾通络方(YTP)组(高、低剂量组)、Omipalisib抑制剂(OI)组、Omipalisib抑制剂+益肾通络方高剂量组(OI+YTP高剂量组)、Omripalisib抑制剂+益肾通络方低剂量组(OI+YTP低剂量组),每组各6只。除正常对照组外其余大鼠均在雷公藤多苷灌胃建立少弱精子症模型大鼠基础上给予相对应药物,镜下观察各组大鼠精子参数,HE染色观察各组睾丸组织病理变化,Western印迹和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测PI3K-AKT-mTOR信号通路相关蛋白及mRNA表达情况。结果:与模型组相比,左卡尼汀组、YTP高剂量组、YTP低剂量组在精子浓度和精子活力(PR、PR+NP)方面均显著提高(P<0.001);HE染色结果显示模型组生精细胞排列不整齐,生精小管管腔缩小,间隙变宽等,左卡尼汀组、YTP高剂量组、YTP低剂量组也观察到了与模型组相似的病理改变,但同时也观察到了较为完好的精子细胞且在数量相对模型组较多,OI组、OI+YTP高剂量组、OI+YTP低剂量组的病理改变与模型组相近。Western印迹结果显示:与模型组相比,左卡尼汀组可上调p-AKT、CatSper-1、HSPA2蛋白表达量(P<0.05),YTP低剂量组可上调p-AKT、mTOR、CatSper-1、HSPA2蛋白表达量(P<0.05),YTP高剂量组除可上调上述蛋白表达外,还可上调PI3K蛋白表达量(P<0.05);OI组PI3K、mTOR、CatSper-1的蛋白表达量与模型组对比无差异(P>0.05);OI+YTP高剂量组及OI+YTP低剂量组PI3K、p-AKT、mTOR、CatSper-1、HSPA2的蛋白表达与模型组、OI组对比无差异(P>0.05)。qRT-PCR结果显示:与模型组相比,左卡尼汀组、YTP高、低剂量组均可上调PI3K mRNA、mTOR mRNA、CatSper-1 mRNA、HSPA2 mRNA表达(P<0.05);YTP高剂量组可显著上调CatSper-1 mRNA表达(P<0.001),且与YTP低剂量组对比时,YTP高剂量组可以更有效上调PI3K的mRNA表达(P<0.05)。OI组PI3K、mTOR、CatSper-1、HSPA2的mRNA表达与模型组对比无差异(P>0.05);OI+YTP高剂量组及OI+YTP低剂量组PI3K、mTOR、CatSper-1、HSPA2的mRNA表达与模型组、OI组对比无差异(P>0.05)。结论:益肾通络方可改善雷公藤多苷诱导的少弱精子症SD模型大鼠精子质量及睾丸组织病理形态变化,其机制可能与该方上调了睾丸组织PI3K-AKT-mTOR通路的相关蛋白及mRNA表达有关。 展开更多
关键词 益肾通络方 男性不育 少弱精子症 实验研究 PI3K-akt-mtor CatSper-1 HSPA2
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PI3K-Akt-mTOR信号通路对Foxp3基因表达的影响 被引量:5
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作者 葛圣林 彭磊磊 张成鑫 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期855-859,共5页
目的研究PI3K-Akt-mTOR信号通路对Foxp3基因表达的影响。方法将SPF级昆明系小鼠60只随机分为对照组(A)和实验组(B、C、D),B、C、D三组分别灌胃雷帕霉素0.2、0.4、0.6 mg.d-1,A组每天予以无菌水灌胃,共3周。3周后,无菌条件下心脏采血,EDT... 目的研究PI3K-Akt-mTOR信号通路对Foxp3基因表达的影响。方法将SPF级昆明系小鼠60只随机分为对照组(A)和实验组(B、C、D),B、C、D三组分别灌胃雷帕霉素0.2、0.4、0.6 mg.d-1,A组每天予以无菌水灌胃,共3周。3周后,无菌条件下心脏采血,EDTA抗凝,分离脾脏,制备单细胞悬液,采用流式细胞仪检测小鼠外周血和脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞水平(CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞的百分比),RT-PCR检测小鼠脾细胞Foxp3mRNA的表达,免疫组织化学SP法染色观察小鼠脾脏中p-mTOR蛋白表达的变化,并利用计算机图像分析技术测量各实验组及对照组中p-mTOR蛋白表达的平均光密度。结果 Foxp3 mRNA在实验组(B、C、D)小鼠脾脏中表达的程度分别为(0.4853±0.0574、0.7886±0.1085、0.9639±0.2015),明显高于对照组A(0.1345±0.0271)(P<0.05);实验组(B、C、D)小鼠脾脏中p-mTOR蛋白表达的平均光密度分别为(0.2326±0.0431、0.1156±0.0223、0.0556±0.0041),明显低于对照组A(0.4223±0.0534)(P<0.05);两指标经pearson相关分析,小鼠脾脏中Foxp3mRNA的表达与p-mTOR蛋白表达呈负相关。结论抑制PI3K-Akt-mTOR信号通路会促使Foxp3的表达增强;PI3K-Akt-mTOR信号通路的激活程度与Foxp3的表达程度呈负相关。 展开更多
关键词 雷帕霉素 PI3K-akt-mtor 信号通路 FOXP3 CD4+CD25+TREG细胞 P-MTOR
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基于PI3K-Akt-mTOR信号通路探讨葛根素对大鼠神经病理性疼痛的影响 被引量:7
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作者 吕婧 黎镇赐 +2 位作者 马化鑫 刘维 郭静文 《现代中西医结合杂志》 CAS 2021年第4期343-347,共5页
目的基于PI3K-Akt-mTOR信号通路探讨葛根素对大鼠神经病理性疼痛的作用。方法取8只SD大鼠作为假手术组,将24只采用压迫损伤坐骨神经方法构建的神经病理性疼痛模型大鼠随机分为模型组、葛根素组、PI3K抑制剂组各8只。葛根素组给予葛根素... 目的基于PI3K-Akt-mTOR信号通路探讨葛根素对大鼠神经病理性疼痛的作用。方法取8只SD大鼠作为假手术组,将24只采用压迫损伤坐骨神经方法构建的神经病理性疼痛模型大鼠随机分为模型组、葛根素组、PI3K抑制剂组各8只。葛根素组给予葛根素注射液100 mg/kg腹腔注射,PI3K抑制剂组给予wortmannin 5 mg/kg腹腔注射,假手术组和模型组给予等量的生理盐水腹腔注射,均每天1次,连续1周。检测各组大鼠坐骨神经机械刺激缩足反射阈值、热缩足反射潜伏期以及冷缩足反射阈值,对L4~6段脊髓进行HE染色以及原位末端标记(TUNEL)检测,采用Western blot法检测各组大鼠脊髓组织中PI3K、Akt、mTOR蛋白表达水平。结果模型组大鼠的机械刺激缩足反射阈值和热缩足反射潜伏期均显著低于假手术组(P均<0.05),冷缩足反射阈值显著高于假手术组(P<0.05);葛根素组和PI3K抑制剂组大鼠的机械刺激缩足反射阈值和热缩足反射潜伏期均显著高于模型组(P均<0.05),冷缩足反射阈值均显著低于模型组(P均<0.05)。模型组大鼠脊髓组织细胞凋亡率和脊髓组织中PI3K、Akt、mTOR蛋白表达水平均显著高于假手术组(P均<0.05),葛根素组和PI3K抑制剂组脊髓组织细胞凋亡率和脊髓组织中PI3K、Akt、mTOR蛋白表达水平均显著低于模型组(P均<0.05)。葛根素组和PI3K抑制剂组各指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论葛根素具有改善大鼠神经病理性疼痛的作用,作用机制可能与PI3K-Akt-mTOR信号通路密切相关。 展开更多
关键词 葛根素 PI3K-akt-mtor信号通路 大鼠 神经性病理疼痛
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白毛藤乙醇提取物通过Akt-mTOR途径调节卵巢癌的增殖和糖酵解 被引量:4
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作者 张晨 王洁 梁若笳 《中药材》 CAS 北大核心 2021年第9期2194-2199,共6页
目的:研究白毛藤乙醇提取物通过Akt-mTOR途径调节卵巢癌的增殖和糖酵解的机制。方法:体外培养卵巢癌SKOV3细胞,分为0、0.1、0.25、0.5、1.0、2.5、5、10μg/mL白毛藤乙醇提取物组和紫杉醇(1μmol/L)阳性对照组共9组。MTT法检测细胞活力,... 目的:研究白毛藤乙醇提取物通过Akt-mTOR途径调节卵巢癌的增殖和糖酵解的机制。方法:体外培养卵巢癌SKOV3细胞,分为0、0.1、0.25、0.5、1.0、2.5、5、10μg/mL白毛藤乙醇提取物组和紫杉醇(1μmol/L)阳性对照组共9组。MTT法检测细胞活力,LDH细胞毒性检测试剂盒检测LDH泄漏量,流式细胞仪检测细胞周期,Hoechst 33258实验检测细胞凋亡情况,相应试剂盒测定葡萄糖摄取量、乳酸生成量。Western blot检测细胞cleaved Caspase-3、cleaved PARP、PKM2、GLUT-1、LDHA、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、Beclin1、p62、p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR蛋白表达。结果:作用24、48 h,与空白对照组比较,0.1、0.25、0.5、1.0、2.5、5、10μg/mL白毛藤乙醇提取物对SKOV3细胞活性均有抑制作用,超过1.0μg/mL的白毛藤乙醇提取物显著增加SKOV3细胞的LDH泄漏量;0.25、0.5μg/mL白毛藤乙醇提取物组卵巢癌细胞周期阻滞在G_(0)/G_(1)期,(P<0.05或P<0.01);0.1、0.25、0.5μg/mL白毛藤乙醇提取物组卵巢癌细胞葡萄糖摄取量、乳酸生成量均显著降低。Western blot检测结果显示,与空白对照组比较,0.1μg/mL白毛藤乙醇提取物组卵巢癌SKOV3细胞中PKM2、p62、p-mTOR/mTOR蛋白表达显著降低,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01);0.25、0.5μg/mL白毛藤乙醇提取物组PKM2、GLUT-1、LDHA、p62、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白表达显著降低,cleaved Caspase-3、cleaved PARP、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。Hoechst 33258实验结果显示卵巢癌细胞凋亡率随着白毛藤乙醇提取物浓度的增加递增。结论:白毛藤乙醇提取物可通过抑制Akt-mTOR途径,上调cleaved Caspase-3、cleaved PARP、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1的蛋白表达,下调PKM2、GLUT-1、LDHA蛋白表达,诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡和自噬,抑制糖酵解代谢,从而发挥抗卵巢癌的作用。 展开更多
关键词 卵巢癌 白毛藤乙醇提取物 akt-mtor通路 细胞增殖 糖酵解
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去甲氧基姜黄素通过PI3K-Akt-mTOR信号通路调控细胞自噬对心肌缺血再灌注损伤大鼠的保护作用研究 被引量:13
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作者 崔健昆 耿乃志 +3 位作者 孟凡吉 施丽春 田耕 杨桂青 《中医药学报》 CAS 2020年第8期19-24,共6页
目的:探讨去甲氧基姜黄素(DMC)通过调控自噬减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用及可能机制。方法:清洁级雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、不同剂量DMC预处理组(10、15和30 mg/kg)组。给药7 d后,采用结扎左冠状动脉前降支30 m... 目的:探讨去甲氧基姜黄素(DMC)通过调控自噬减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用及可能机制。方法:清洁级雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、不同剂量DMC预处理组(10、15和30 mg/kg)组。给药7 d后,采用结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min的方法制备MI/RI模型。检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、白介素6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;TTC法检测心肌梗死面积;HE染色法观察心肌组织病理变化;Western blot法检测LC3II、Beclin1、p62、PI3K、Akt和mTOR的蛋白表达及磷酸化水平。结果:与假手术组相比,模型组血清中CK-MB、LDH、MDA、IL-6、IL-1β和TNF-α水平明显升高(P<0.01),SOD活性显著降低(P<0.01);心肌梗死面积显著增加(P<0.01),心肌纤维结构紊乱、溶解和炎性浸润;心肌组织中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1蛋白表达显著升高(P<0.01),p62、p-PI3K蛋白水平明显降低(P<0.01)。与模型组相比较,DMC预处理各剂量组血清中CK-MB、LDH、MDA、IL-6、IL-1β和TNF-α水平均明显降低(P<0.05或P<0.01);心肌梗死面积均有不同程度的减少(P<0.01),心肌组织病理变化有不同程度的改善;心肌组织中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1蛋白表达降低(P<0.01),p62、p-PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白水平明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论:DMC能通过激活PI3K-Akt-mTOR信号通路,抑制心肌细胞过度自噬,对心肌缺血再灌注损伤起到明显的保护作用。 展开更多
关键词 去甲氧基姜黄素 心肌缺血再灌注损伤 自噬 PI3K-akt-mtor信号通路
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七氟醚预处理对PTSD大鼠行为学及海马Akt-mTOR信号通路的影响 被引量:1
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作者 孙茜 张瑶 +3 位作者 许倩 李永乐 朱运河 李伟彦 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期502-505,共4页
目的探讨七氟醚预处理对创伤后应激障碍(PTSD)大鼠行为学及海马Akt-mTOR信号通路的影响。方法将雄性SD大鼠108只,随机分为:正常对照组(C组,n=10),侧脑室置管组(T组,n=10),PTSD模型组(P组,n=22),七氟醚组(S组,n=22),胰岛素生长因子-1组(I... 目的探讨七氟醚预处理对创伤后应激障碍(PTSD)大鼠行为学及海马Akt-mTOR信号通路的影响。方法将雄性SD大鼠108只,随机分为:正常对照组(C组,n=10),侧脑室置管组(T组,n=10),PTSD模型组(P组,n=22),七氟醚组(S组,n=22),胰岛素生长因子-1组(I组,n=22)和胰岛素生长因子-1联合七氟醚组(IS组,n=22)。采用单一连续应激(SPS)方案建立PTSD大鼠模型。T组侧脑室注射生理盐水5μl;P组侧脑室注射生理盐水5μl后,SPS造模;S组侧脑室注射生理盐水5μl后,吸入七氟醚2h,然后SPS造模;I组侧脑室注射胰岛素生长因子-15μl(0.4μg/μl)后,SPS造模;IS组侧脑室注射胰岛素生长因子-15μl(0.4μg/μl)后,吸入2%七氟醚2h,然后SPS造模。在造模成功后30min、1、2和4h,每组取4只大鼠处死提取海马组织,WesternBlot检测海马Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR表达量;造模后第7天,每组6只,分别行旷场实验和木僵率测试。结果与C组和T组比较,P组、S组、I组和IS组中央格停留时间明显缩短、直立次数明显减少、木僵率、造模后1hp-Akt/Akt和p-mTOR/mTOR表达量明显升高(P<0.05)。与P组和I组比较,S组和IS组中央格停留时间明显延长、直立次数明显增加、木僵率明显降低(P<0.05)。与P组比较,S组造模后1hp-Akt/Akt和p-mTOR/mTOR表达量明显降低(P<0.05);而I组和IS组p-Akt/Akt和p-mTOR/mTOR表达量明显升高(P<0.05)。与I组比较,IS组木僵率、造模后1hS组、IS组p-Akt/Akt和p-mTOR/mTOR表达量明显降低(P<0.05)。与造模后30min比较,造模后1hP组的p-Akt/Akt和p-mTOR/mTOR表达量明显升高(P<0.05)。结论七氟醚可以改善PTSD模型大鼠术后7d的焦虑水平和木僵行为,其效应可能与其抑制PTSD大鼠海马Akt和mTOR的磷酸化有关。 展开更多
关键词 七氟醚 创伤后应激障碍 单一连续应激 akt-mtor
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抗纤灵对5/6肾切除诱导的慢性肾纤维化小鼠Akt-mTOR信号通路的影响 被引量:3
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作者 麻志恒 钟利平 +1 位作者 余柯娜 何立群 《上海中医药杂志》 2015年第11期67-70,90,共5页
目的观察抗纤灵对5/6肾切除诱导的慢性肾脏纤维化小鼠磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-m TOR)及Akt,m TOR mRNA表达的影响,从Akt-m TOR信号通路角度探讨抗纤灵的作用机制。方法 C57BL/6J雄性小鼠采用5/6肾切除... 目的观察抗纤灵对5/6肾切除诱导的慢性肾脏纤维化小鼠磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-m TOR)及Akt,m TOR mRNA表达的影响,从Akt-m TOR信号通路角度探讨抗纤灵的作用机制。方法 C57BL/6J雄性小鼠采用5/6肾切除制备慢性肾脏纤维化模型。2周后根据肌酐水平将手术组小鼠分为模型组、雷帕霉素组和抗纤灵组,同时设立假手术组,每组10只。雷帕霉素组、抗纤灵组分别给予雷帕霉素(0.8μg/g)、抗纤灵(20 g/kg)每天0.5 ml灌胃治疗,模型组和假手术组灌胃等量蒸馏水。连续用药8周后处死小鼠,检测各组小鼠肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24小时尿蛋白(24 h UP)含量;采用蛋白质印迹法(Western blotting)、RT-PCR检测肾脏组织中p-Akt、p-m TOR蛋白及Akt、m TOR mRNA的表达。结果与假手术组比较,模型组Scr、BUN、24 h UP、p-Akt、p-m TOR蛋白及Akt、m TOR mRNA显著升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,雷帕霉素组、抗纤灵组Scr、UN、24 h UP、p-Akt、p-m TOR蛋白及Akt,m TOR mRNA均有所降低(P<0.05,P<0.01)。雷帕霉素组与抗纤灵组比较,在降低Scr、24 h UP方面,抗纤灵组明显优于雷帕霉素组(P<0.05);在降低p-m TOR蛋白及m TOR mRNA方面,雷帕霉素优于抗纤灵组(P<0.05)。结论抗纤灵可能通过调节Akt-m TOR信号通路,对肾纤维化有一定的改善作用。 展开更多
关键词 抗纤灵 慢性肾纤维化 akt-mtor信号通路
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