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在载脂蛋白E基因敲除小鼠和人脐静脉平滑肌细胞中同型半胱氨酸对B1和Alu重复序列甲基化的影响 被引量：9
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作者 吴凯 马胜超 +5 位作者 孙炜炜 王菊 曹成建 马长剑 杨安宁 姜怡邓 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期785-790,共6页
目的观察同型半胱氨酸对载脂蛋白E基因敲除小鼠不同组织和人脐静脉平滑肌细胞中B1和Alu序列甲基化水平的影响,为进一步阐明同型半胱氨酸致动脉粥样硬化形成的分子机制提供理论和实验依据。方法复制高同型半胱氨酸血症载脂蛋白E基因敲除... 目的观察同型半胱氨酸对载脂蛋白E基因敲除小鼠不同组织和人脐静脉平滑肌细胞中B1和Alu序列甲基化水平的影响,为进一步阐明同型半胱氨酸致动脉粥样硬化形成的分子机制提供理论和实验依据。方法复制高同型半胱氨酸血症载脂蛋白E基因敲除小鼠模型,给予不同饮食14周后,分别取小鼠心脏组织、血管及白细胞;原代培养人脐静脉平滑肌细胞,用50、100、200及500μmol/L同型半胱氨酸干预培养72 h后,抽提组织、白细胞及平滑肌细胞的基因组DNA,采用巢式降落式甲基化特异性PCR法分别检测不同组织和细胞中B1和Alu序列甲基化水平的变化。结果饲以高蛋氨酸饮食的载脂蛋白E基因敲除小鼠心脏组织、血管和白细胞中B1重复序列甲基化水平下降明显,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.05和P<0.01);在同型半胱氨酸干预的平滑肌细胞中Alu序列甲基化水平下降显著(P<0.05和P<0.01)。结论同型半胱氨酸引起B1和Alu序列低甲基化改变可能是其导致动脉粥样硬化发生发展的重要机制之一。 展开更多
关键词 b1和Alu重复序列 甲基化 同型半胱氨酸 载脂蛋白E基因敲除小鼠 血管平滑肌细胞
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具有锚蛋白重复序列的B细胞支架蛋白1在胶原诱导性关节炎的作用研究
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作者 孔宁 任洁 +2 位作者 邹和建 万伟国 杨洁 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期29-33,I0002,共6页
目的探讨具有锚蛋白重复序列的B细胞支架蛋白（BANK）1在胶原诱导性关节炎（CIA）疾病过程中的变化特点，及其与关节炎严重程度的相关性。方法建立CIA小鼠模型并评估；ELISA法检测不同疾病阶段血清抗Ⅱ型胶原自身抗体和BANK1的水平、定... 目的探讨具有锚蛋白重复序列的B细胞支架蛋白（BANK）1在胶原诱导性关节炎（CIA）疾病过程中的变化特点，及其与关节炎严重程度的相关性。方法建立CIA小鼠模型并评估；ELISA法检测不同疾病阶段血清抗Ⅱ型胶原自身抗体和BANK1的水平、定量PCR法检测BANK1 mRNA外周血细胞中的表达量及与关节炎严重程度的相关性；流式细胞仪检测不同疾病阶段脾脏和引流淋巴结B细胞BANK1的表达，蛋白质印迹法检测脾脏细胞BANK1蛋白的水平。采用SPSS 21.0进行数据分析，应用GraphPad Prism 6进行绘图；数据采用重复测量方差分析进行比较；进行Spearman相关性分析，有相关性的做线性回归分析。结果CIA的发病率可达90%以上，关节炎评分与血清抗Ⅱ型胶原总IgG抗体（r=0.717 5，P〈0.01）、抗Ⅱ型胶原IgG2a抗体（r=0.675 3，P〈0.01）及抗Ⅱ型胶原IgG2b抗体水平（r=0.889 4，P〈0.01）均呈正相关；与正常小鼠比较，CIA小鼠血清BANK1水平和BANK1 mRNA表达量在疾病不同阶段均下降，后者与关节炎评分（r=-0.485 4，P〈0.01）呈负相关；脾脏和引流淋巴结中BANK1＋CD19＋细胞比例和脾脏细胞BANK1蛋白的表达均出现下降。结论随着CIA疾病的进展，BANK1表达下降，对B细胞的负性调节作用减弱，与关节炎的加重密切相关。 展开更多
关键词 关节炎 类风湿 关节炎 实验陆 b细胞 具有锚蛋白重复序列的b细胞支架蛋白1
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血清SAM/SAH在Hcy引起动脉粥样硬化基因组DNA甲基化中的作用 被引量：8
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作者 张辉 郭伟 +7 位作者 高婷婷 马燕琼 惠淑宁 马胜超 杨晓玲 蒋袁絮 田珏 姜怡邓 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2017年第2期129-133,共5页
目的探讨血清S-腺苷甲硫氨酸(SAM)/S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)比值在同型半胱氨酸(Hcy)致载脂蛋白E基因敲除(Apo E―/―)小鼠血管动脉粥样硬化(As)B1重复序列DNA甲基化改变中的作用。方法 36只饲养4周龄Apo E―/―小鼠,随机分为三组:模型... 目的探讨血清S-腺苷甲硫氨酸(SAM)/S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)比值在同型半胱氨酸(Hcy)致载脂蛋白E基因敲除(Apo E―/―)小鼠血管动脉粥样硬化(As)B1重复序列DNA甲基化改变中的作用。方法 36只饲养4周龄Apo E―/―小鼠,随机分为三组:模型对照组、高蛋氨酸组、叶酸+Vit B12干预组,每组12只,分别给予不同饮食;另取健康4周龄雄鼠(SPF级C57BL/6J)12只作为正常对照组,饲以普通饮食。饲养15周后,HE染色观察血管内动脉斑块的形成,高效液相色谱检测血清中Hcy、SAM、SAH的水平改变,n MS-PCR检测各组小鼠动脉粥样硬化斑块中Bl重复序列DNA甲基化改变。结果高蛋氨酸组血清Hcy与正常对照组相比升高约2.39倍(P<0.01),HE染色可见高蛋氨酸组中有动脉斑块形成;与正常对照组相比,模型对照组、高蛋氨酸组SAM/SAH增加了1.68倍和2.75倍(P<0.01);高蛋氨酸组B1重复序列DNA甲基化水平降低11.8%(P<0.05),且与SAM/SAH比值呈明显负相关(r=-0.3638,P=0.0210)。结论 ApoE―/―小鼠中B1重复序列发生DNA低甲基化改变,且与SAM/SAH呈负相关,提示血清SAM/SAH可作为一个判断血管As的生物学指标。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 b1重复序列 DNA甲基化 S-腺苷甲硫氨酸/S-腺苷同型半胱氨酸
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