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lncRNA NEAT1通过抑制miR-let-7a激活BZW2促进喉乳头状瘤细胞的增殖和凋亡逃逸
1
作者 张波 王松 阿依恒·曲库尔汗 《局解手术学杂志》 2023年第5期382-388,共7页
目的探讨长链非编码RNA核富集转录本1(lncRNA NEAT1)对喉乳头状瘤(LP)细胞的增殖和凋亡逃逸的调控作用和机制。方法培养人喉乳头状瘤细胞Hs840.T,将正常人口腔上皮细胞(HOECs)作为对照。将Hs840.T分为lncRNA NEAT1过表达载体(pcDNA-NEA... 目的探讨长链非编码RNA核富集转录本1(lncRNA NEAT1)对喉乳头状瘤(LP)细胞的增殖和凋亡逃逸的调控作用和机制。方法培养人喉乳头状瘤细胞Hs840.T,将正常人口腔上皮细胞(HOECs)作为对照。将Hs840.T分为lncRNA NEAT1过表达载体(pcDNA-NEAT1)组、pcDNA-NEAT1阴性对照(pcDNA-NC)组、沉默lncRNA NEAT1的小干扰RNA载体(siNEAT1)组、siNEAT1的阴性对照(siNC)组、miR-let-7a的模拟物(mimic)组、mimic阴性对照(mimic-NC)组、miR-let-7a抑制剂(inhibitor)组、inhibitor阴性对照(inhibitor-NC)组、沉默碱性亮氨酸拉链和W2结构域2(BZW2)的小干扰RNA载体(siBZW2)组、siBZW2的阴性对照(siBZW2-NC)组、pcDNA-NEAT1联合siBZW2给药(pcDNA-NEAT1+siBZW2)组、pcDNA-NEAT1联合siBZW2-NC给药(pcDNA-NEAT1+siBZW2-NC)组。qRT-PCR检测各组中lncRNA NEAT1及其预测靶分子miR-let-7a的表达。Western blot和qRT-PCR检测BZW2的表达。双荧光素酶报告基因实验检测Hs840.T中lncRNA NEAT1和miR-let-7a以及miR-let-7a和BZW2的靶向关系。MTT实验测定Hs840.T的增殖能力。Annexin V-FITC/PI双染法检测Hs840.T的凋亡逃逸能力。结果Hs840.T中的lncRNA NEAT1和BZW2表达高于HOECs(P<0.05),而miR-let-7a表达低于HOECs(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果表明,Hs840.T中lncRNA NEAT1吸附抑制miR-let-7a并上调BZW2的表达(P<0.05),且BZW2是miR-let-7a的靶基因。与pcDNA-NC组相比,pcDNA-NEAT1组Hs840.T的增殖率增加(P<0.05),早期、晚期凋亡率均降低(P<0.05);与siNC组相比,siNEAT1组Hs840.T的增殖率降低(P<0.05),早期、晚期凋亡率均增加(P<0.05)。另外,与pcDNA-NEAT1+siBZW2-NC组相比,pcDNA-NEAT1+siBZW2组Hs840.T的增殖率降低(P<0.05),早期、晚期凋亡率均增高(P<0.05)。结论lncRNA NEAT1通过抑制miR-let-7a激活BZW2促进LP细胞的增殖和凋亡逃逸。 展开更多
关键词 喉乳头状瘤 长链非编码RNA核富集转录本1 miR-let-7a 碱性亮氨酸拉链和w2结构域2 细胞凋亡 细胞增殖
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碱性亮氨酸拉链和W2结构域2对子宫内膜癌细胞生物学行为的作用及机制 被引量：1
2
作者 唐彬 蔡文 +3 位作者 徐姗姗 江征慧 未亚兰 江飞云 《实用临床医药杂志》 2023年第18期18-25,共8页
目的 探讨碱性亮氨酸拉链和W2结构域2(BZW2)对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭、迁移及细胞周期的调控作用及其潜在作用机制。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测BZW2在人子宫内膜基质细胞系ESC和... 目的 探讨碱性亮氨酸拉链和W2结构域2(BZW2)对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭、迁移及细胞周期的调控作用及其潜在作用机制。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测BZW2在人子宫内膜基质细胞系ESC和人子宫内膜癌细胞(Ishikawa、KLE、RL95-2、HEC-1-A)中的表达。将BZW2干扰质粒转染至HEC-1-A细胞,并加入Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路激动剂SKL2001进行处理。采用CCK-8、克隆形成实验、划痕实验及Transwell实验分别检测细胞活性、克隆形成、迁移及侵袭能力;采用流式细胞术检测细胞周期;采用GSEA分析BZW2在Wnt信号通路中的富集度;采用Western blot分析增殖、转移、周期及Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达水平。结果 BZW2在子宫内膜癌细胞中表达上调,干扰BZW2可抑制子宫内膜癌细胞增殖、迁移、侵袭,并诱导G0/G1期细胞阻滞(P<0.001)。敲低BZW2可使Wnt/β-catenin通路失活(P<0.001), SKL2001可部分逆转BZW2缺失对HEC-1-A细胞增殖、迁移、侵袭及细胞周期的调控作用(P<0.001)。结论 BZW2下调可抑制子宫内膜癌细胞增殖、侵袭、迁移,并促进G_(0)/G_(1)期细胞阻滞,其机制可能与Wnt/β-catenin信号通路失活有关,BZW2可作为治疗子宫内膜癌的新靶点。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 碱性亮氨酸拉链和w2结构域2 细胞周期 迁移 侵袭 WNT/Β-CATENIN信号通路
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BZW2和IVD在肝癌组织中的表达及其对肝癌肝移植受者预后的影响 被引量：3
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作者 杜俊杰 刘仕成 +3 位作者 江哲龙 潘凡 江艺 吕立志 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期213-218,共6页
目的探讨碱性亮氨酸拉链和W2结构域2(BZW2)及异戊酰辅酶A脱氢酶(IVD)在肝细胞癌(肝癌)中的表达及其对肝移植受者预后的影响。方法回顾性分析87例肝癌肝移植受者的病理标本及临床资料,分析肝癌肝移植受者术后肿瘤复发转移情况。采用免疫... 目的探讨碱性亮氨酸拉链和W2结构域2(BZW2)及异戊酰辅酶A脱氢酶(IVD)在肝细胞癌(肝癌)中的表达及其对肝移植受者预后的影响。方法回顾性分析87例肝癌肝移植受者的病理标本及临床资料,分析肝癌肝移植受者术后肿瘤复发转移情况。采用免疫组织化学染色检测BZW2和IVD的表达情况,分析BZW2和IVD与肝癌临床病理参数的关系及其对肝移植术后肿瘤复发和受者预后的影响。结果87例受者中,共有31例肿瘤复发,复发率为36%,复发时间为术后2~49个月,复发时间中位数为7个月。免疫组织化学染色结果显示,肝癌组织的BZW2阳性表达率高于正常肝组织(76%比30%),IVD阳性表达率低于正常肝组织(51%比69%),差异均有统计学意义(均为P<0.01)。BZW2表达与肿瘤直径、有否肿瘤包膜有关(均为P<0.05),IVD表达与肿瘤直径,甲胎蛋白(AFP)水平,肿瘤、淋巴结、转移(TNM)分期,有否血管侵犯有关(均为P<0.05)。BZW2高表达组受者肿瘤累积复发率高于BZW2低表达组,累积生存率低于BZW2低表达组;IVD低表达组患者肿瘤累积复发率高于IVD高表达组,累积生存率低于IVD高表达组(均为P<0.05)。结论在肝癌组织中,BZW2蛋白表达水平上调,IVD蛋白表达水平下调。且BZW2高表达和IVD低表达的肝移植受者的累积复发率较高,累积生存率较低。 展开更多
关键词 肝细胞癌 肝移植 碱性亮氨酸拉链和w2结构域2(bzw2) 异戊酰辅酶A脱氢酶(IVD) 甲胎蛋白 血管侵犯 肿瘤包膜 肿瘤分期 肿瘤复发
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miR-4458靶向结合BZW2对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
4
作者 魏志鸿 郭娟 +2 位作者 江哲龙 江艺 吕立志 《中华肝脏外科手术学电子杂志》 CAS 2023年第1期108-113,共6页
目的探讨miR-4458及其靶向蛋白BZW2在肝细胞癌(肝癌)中的表达及其对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法本研究标本来源于2019年1月至2020年12月中国人民解放军联勤保障部队第九〇〇医院收治的247例肝癌患者空腹血清、肝癌组织标本(... 目的探讨miR-4458及其靶向蛋白BZW2在肝细胞癌(肝癌)中的表达及其对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法本研究标本来源于2019年1月至2020年12月中国人民解放军联勤保障部队第九〇〇医院收治的247例肝癌患者空腹血清、肝癌组织标本(肝癌组),并收集同期200例健康志愿者空腹血清标本作为对照组。其中肝癌组男153例,女94例;年龄35~71岁,中位年龄49岁。对照组男120例,女80例;年龄30~70岁,中位年龄41岁。所有入组人员均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。采用实时荧光定量PCR检测两组患者miR-4458和BZW2 mRNA表达量;Western blot检测肝癌组织和癌旁组织中BZW2蛋白表达情况,分析肝癌组织中BZW2 mRNA表达量与患者临床病理特征的关系;生物信息学预测miR-4458和BZW2的作用关系,并采用双荧光素酶检测验证。培养和转染人肝癌细胞株HepG2,采用CCK-8法、Transwell实验检测调控miR-4458表达对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果肝癌组患者血清miR-4458平均相对表达量为0.85±0.23,明显低于健康对照组的1.06±0.30(t=-7.886,P<0.05)。肝癌组织miR-4458相对表达量为0.77±0.27,明显低于癌旁组织的1.23±0.35(t=-12.646,P<0.05)。肝癌组血清BZW2 mRNA相对表达量为1.67±0.44,明显高于健康对照组的1.13±0.29(t=13.674,P<0.05)。肝癌组织BZW2 mRNA相对表达量为1.98±0.31,明显高于癌旁组织的1.27±0.30(t=16.537,P<0.05)。肝癌组织BZW2蛋白相对表达量为1.57±0.44,明显高于癌旁组织的0.83±0.38(t=16.483,P<0.05)。肝癌组织BZW2 mRNA相对表达量与肝癌患者肿瘤直径、肿瘤包膜、微血管侵犯和肿瘤分化相关(t=-8.208,-13.248,-7.981,7.145;P<0.05)。生物信息平台预测并荧光素酶验证miR-4458和BZW2互为靶向关系。HepG2细胞转染miR-4458抑制剂后BZW2蛋白相对表达量为1.95±0.24,明显高于转染miR-4458模拟物的0.43±0.11(LSD-t=3.384,P<0.05)。HepG2细胞转染miR-4458抑制剂后24、48、72 h增殖、迁移和侵袭能力上调。结论肝癌患者中miR-4458低表达,BZW2高表达。miR-4458靶向结合BZW2后下调miR-4458表达可促进肝癌细胞增殖、迁移和侵袭,可能与肝癌患者不良预后相关。 展开更多
关键词 癌 肝细胞 微RNAS miR-4458 碱性亮氨酸拉链和w2结构域2 细胞增殖 细胞迁移 肿瘤侵润
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