目的:研究微小RNA-218(microRNA-218,miR-218)靶向B细胞特性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1(B-cell specific moloney leukemia virus insertion site 1,Bmi-1)抑制肺腺癌细胞增殖的作用及机制。方法:培养肺腺癌细胞株A549,分别转染miR-...目的:研究微小RNA-218(microRNA-218,miR-218)靶向B细胞特性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1(B-cell specific moloney leukemia virus insertion site 1,Bmi-1)抑制肺腺癌细胞增殖的作用及机制。方法:培养肺腺癌细胞株A549,分别转染miR-阴性对照(NC)核苷酸序列、miR-218核苷酸序列、NC质粒、Bmi-1质粒,采用平板克隆形成实验、CCK8实验检测细胞增殖水平,采用荧光定量PCR实验检测miR-218的表达,采用Western blot实验检测Bmi-1的表达,采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-218与Bmi-1的靶向关系。建立移植瘤裸鼠,慢病毒转染miR-NC或miR-218核苷酸序列,检测移植瘤体积、质量及Bmi-1的表达。结果:与转染miR-NC核苷酸序列的miR-NC组比较,转染miR-218核苷酸序列的miR-218组A549细胞miR-218表达水平、增殖抑制率增加,克隆形成率、Bmi-1表达水平及野生型Bmi-1质粒的荧光素酶活性降低(P<0.05);与共转染miR-218核苷酸序列及NC质粒的miR-218+NC质粒组比较,共转染miR-218核苷酸序列及Bmi-1质粒的miR-218+Bmi-1质粒组A549细胞增殖抑制率降低,克隆形成率、Bmi-1表达水平增加(P<0.05);与慢病毒转染miR-NC核苷酸序列的miR-NC组比较,慢病毒转染miR-218核苷酸序列的miR-218组裸鼠移植瘤体积、质量及Bmi-1表达水平均降低(P<0.05)。结论:miR-218靶向下调Bmi-1表达并抑制肺腺癌细胞增殖。展开更多
文摘目的:研究微小RNA-218(microRNA-218,miR-218)靶向B细胞特性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1(B-cell specific moloney leukemia virus insertion site 1,Bmi-1)抑制肺腺癌细胞增殖的作用及机制。方法:培养肺腺癌细胞株A549,分别转染miR-阴性对照(NC)核苷酸序列、miR-218核苷酸序列、NC质粒、Bmi-1质粒,采用平板克隆形成实验、CCK8实验检测细胞增殖水平,采用荧光定量PCR实验检测miR-218的表达,采用Western blot实验检测Bmi-1的表达,采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-218与Bmi-1的靶向关系。建立移植瘤裸鼠,慢病毒转染miR-NC或miR-218核苷酸序列,检测移植瘤体积、质量及Bmi-1的表达。结果:与转染miR-NC核苷酸序列的miR-NC组比较,转染miR-218核苷酸序列的miR-218组A549细胞miR-218表达水平、增殖抑制率增加,克隆形成率、Bmi-1表达水平及野生型Bmi-1质粒的荧光素酶活性降低(P<0.05);与共转染miR-218核苷酸序列及NC质粒的miR-218+NC质粒组比较,共转染miR-218核苷酸序列及Bmi-1质粒的miR-218+Bmi-1质粒组A549细胞增殖抑制率降低,克隆形成率、Bmi-1表达水平增加(P<0.05);与慢病毒转染miR-NC核苷酸序列的miR-NC组比较,慢病毒转染miR-218核苷酸序列的miR-218组裸鼠移植瘤体积、质量及Bmi-1表达水平均降低(P<0.05)。结论:miR-218靶向下调Bmi-1表达并抑制肺腺癌细胞增殖。
