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转基因玉米pUC57-BT11质粒标准分子的构建与适用性研究 被引量:5
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作者 董莲华 李亮 +2 位作者 王晶 赵正宜 臧超 《计量学报》 CSCD 北大核心 2011年第6期570-574,共5页
构建了含有转化体特异性片段(BT11-93bp)和玉米的内标准基因片段(zSSIIb-151bp)的质粒分子pUC57-BT11,经酶切和测序验证后,对其特异性进行检查。采用测序和荧光定量PCR法对该质粒分子进行定值,结果为1.01±0.叭(k=2)。... 构建了含有转化体特异性片段(BT11-93bp)和玉米的内标准基因片段(zSSIIb-151bp)的质粒分子pUC57-BT11,经酶切和测序验证后,对其特异性进行检查。采用测序和荧光定量PCR法对该质粒分子进行定值,结果为1.01±0.叭(k=2)。通过质粒分子和基因组DNA产生的内源和外源基因比较,发现两者标准曲线斜率无显著差异,线性相关系数均〉10.99。利用pUC57-BT11质粒分子对已知含量的转基因基体标准物质进行转基因含量测定,结果发现采用pUC57.BT11质粒分子对标准物质的测定结果与其标准值-致,表明pUC57-BT11质粒分子可作为转基因玉米BT11转化体特异性的定性和定量检测用标准物质。 展开更多
关键词 计量学 转基因玉米 bt11 质粒标准分子 标准物质
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重组酶聚合酶扩增技术快速检测转基因玉米Bt11 被引量:5
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作者 刘静 武国干 +5 位作者 吴潇 刘华 王金斌 吕贝贝 蒋玮 唐雪明 《上海农业学报》 CSCD 2018年第1期20-24,共5页
根据外源基因草丁膦乙酰转移酶基因(PAT)与载体骨架连接区序列设计引物,建立了基于重组酶聚合酶扩增技术(RPA)的转基因玉米Bt11特异性快速检测方法。结果表明:该方法可在37℃条件下20 min内完成转基因玉米Bt11的检测,绝对检测限为100拷... 根据外源基因草丁膦乙酰转移酶基因(PAT)与载体骨架连接区序列设计引物,建立了基于重组酶聚合酶扩增技术(RPA)的转基因玉米Bt11特异性快速检测方法。结果表明:该方法可在37℃条件下20 min内完成转基因玉米Bt11的检测,绝对检测限为100拷贝/μL,相对检测限为0.1%。 展开更多
关键词 重组酶聚合酶扩增技术 bt11 特异性检测 绝对检测限 相对检测限
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加工产品中转基因玉米Bt11成分实时荧光PCR定量(性)检测 被引量:16
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作者 覃文 曹际娟 朱水芳 《生物技术通报》 CAS CSCD 2003年第6期46-50,共5页
实验在玉米自身基因和外源基因的边界序列之间设计了具有品种和品系特异性的引物和探针 ,并以实时荧光PCR技术 ,建立了加工产品中转基因玉米Bt1 1成分品系鉴定检测和定量检测的方法。实验对加热条件和时间对检测转基因成分的影响作了探... 实验在玉米自身基因和外源基因的边界序列之间设计了具有品种和品系特异性的引物和探针 ,并以实时荧光PCR技术 ,建立了加工产品中转基因玉米Bt1 1成分品系鉴定检测和定量检测的方法。实验对加热条件和时间对检测转基因成分的影响作了探讨 ,并检测了部分市售食品和饲料。检测结果发现 ,加热时间温度越高、时间越长 ,对转基因成分定量检测的影响越大 ;在所检测的样品中可以检测出转基因玉米Bt1 1成分 ,有些样品还同时检出其他转基因成分。本研究实验建立的方法 ,可以用于加工产品中转基因成分的定量检测 ,也可以用于定性检测 ,或作为常规PCR定性检测后的确证实验方法。 展开更多
关键词 转基因玉米 实时荧光定量PCR 检测 外源基因 引物
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转基因玉米Bt11品系特异性荧光RPA检测 被引量:6
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作者 李凯 金芜军 +3 位作者 李亮 苗朝华 刘卫晓 宛煜嵩 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期4741-4745,共5页
重组酶聚合酶介导的等温扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)作为一种新型等温扩增技术,具有反应时间短、灵敏度高、特异性强等特点,在转基因检测领域得到了广泛关注。本研究针对转基因玉米Bt11外源插入链接区域设计筛选了... 重组酶聚合酶介导的等温扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)作为一种新型等温扩增技术,具有反应时间短、灵敏度高、特异性强等特点,在转基因检测领域得到了广泛关注。本研究针对转基因玉米Bt11外源插入链接区域设计筛选了特异性引物和探针,建立了快速准确的荧光RPA检测方法,在39℃条件下,20 min内完成扩增并且能够实时监测,可以准确有效地检测到50个拷贝的靶标片段。而且,对于背景复杂的植物基因组DNA能够得到准确的扩增曲线。本研究不仅可以满足常规实验室检测,通过RPA便携式仪器,还可以满足转基因植物现场检测,具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 等温扩增 实时荧光RPA 转基因检测 bt11
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转基因玉米质粒分子国家标准样品的构建 被引量:2
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作者 郑秋月 曹际娟 +1 位作者 徐君怡 赵昕 《标准科学》 2012年第12期48-51,共4页
本文研制转基因玉米常见的4个品系:BT11、MON810、NK603和T25质粒分子国家标准样品。研究重点包括目标序列和内标准基因序列的选择和扩增、标准样品定值和分析等。均匀性和稳定性结果表明,所研制的转基因玉米4个品系标准样品均匀稳定。... 本文研制转基因玉米常见的4个品系:BT11、MON810、NK603和T25质粒分子国家标准样品。研究重点包括目标序列和内标准基因序列的选择和扩增、标准样品定值和分析等。均匀性和稳定性结果表明,所研制的转基因玉米4个品系标准样品均匀稳定。采用PicoGreen DNA分子荧光定量方法定值标准样品。多家单位合作定值,确定标准样品的标准值及其不确定度。所研制的转基因玉米质粒分子标准样品获得了国家标准样品证书,适用于转基因产品的定量和定性测定。 展开更多
关键词 转基因玉米bt11品系 转基因玉米MON810品系 转基因玉米NK603品系 转基因玉米T25品系 质粒分子国家标准样品
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基于MPCR法检测抗虫与耐除草剂转基因玉米Bt1 被引量:1
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作者 李忆 尹全 《贵州农业科学》 CAS 2016年第6期48-52,共5页
为构建抗虫和耐除草剂转基因玉米Bt11的多重PCR检测方法,根据抗虫和耐除草剂玉米Bt11分子特征,同时选择玉米内源参照基因zSSIIb、外源基因Cry1Ab、P-CaMV 35S、T-NOS和PAT 5个基因作为MPCR检测基因,参照国家相关标准中特异性引物序列,... 为构建抗虫和耐除草剂转基因玉米Bt11的多重PCR检测方法,根据抗虫和耐除草剂玉米Bt11分子特征,同时选择玉米内源参照基因zSSIIb、外源基因Cry1Ab、P-CaMV 35S、T-NOS和PAT 5个基因作为MPCR检测基因,参照国家相关标准中特异性引物序列,通过对反应条件的优化以及方法特异性和灵敏度测试,建立MPCR检测体系。结果表明:利用已知样品对体系(退火温度为56℃,模板浓度≥200bp,引物配比为zSSIIb∶Cry1Ab∶P-CaMV 35S∶T-NOS∶PAT=0.1∶0.2∶0.2∶0.2∶0.2)验证,抗虫和耐除草剂玉米Bt11能同时被检出zSSIIb、Cry1Ab、P-CaMV 35S、T-NOS和PAT等5个基因,而其他样品均不能被同时检出这5个基因,建立体系可用于抗虫和耐除草剂转基因玉米Bt11检测。 展开更多
关键词 玉米 bt11 检测 MPCR
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基于CC-Link总线的平面仓库控制系统设计
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作者 蒋玲 陈慧蓉 《西安文理学院学报(自然科学版)》 2017年第5期32-36,共5页
针对平面仓库错综复杂的货区和货物的码放,传统的手工管理和普通的信息管理系统存在无法快速、直观地提取有效信息的现状,设计了一种基于CC-Link总线的平面仓库控制系统.该控制系统中,PLC通过CC-Link总线将来自平面仓库控制信息和数据... 针对平面仓库错综复杂的货区和货物的码放,传统的手工管理和普通的信息管理系统存在无法快速、直观地提取有效信息的现状,设计了一种基于CC-Link总线的平面仓库控制系统.该控制系统中,PLC通过CC-Link总线将来自平面仓库控制信息和数据送至现场三相交流异步电机、伺服电机、步进电机和变频器等,进而实现对平面仓库货物码放和出入库操作,通过TPC触摸屏中简单的图形和颜色直观实时监控平面仓库库存状态和信息.实践表明,该系统大大提高了平面仓库的存储和作业效率,使之达到现代化高效物流系统的要求,具有推广应用的价值. 展开更多
关键词 CC-LINK 平面仓库 QJ61bt11N FX2N-32CCL 三菱PLC
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CC-Link现场总线在汽车总装配厂的应用 被引量:2
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作者 师锦航 陈春辉 +1 位作者 王军建 高晓斌 《汽车实用技术》 2019年第15期181-182,187,共3页
随着自动化技术的深入发展,工业现场总线在汽车行业的应用也越来越广泛。文章详细介绍了三菱PLC与远程IO模块之间现场总线网络的建立,包括硬件配置、软件设置以及通信程序的编写。
关键词 CC-LINK FIELDBUS QJ61bt11N
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CC-LINK网络与三菱变频器在立体停车场中的应用 被引量:1
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作者 郭小青 《变频器世界》 2015年第4期87-90,82,共5页
本文介绍立体车库的控制方案和变频器与CC-LINK网络的设置调试。
关键词 FR-A701 CC-LINK QJ61bt11N 立体车库
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IP67模块在压力机运动部件上的应用
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作者 赵文科 侯彦 《今日制造与升级》 2022年第5期70-72,135,共4页
介绍BALLUF的IP67模块通过CC-Link总线与三菱Q系列PLC主站模块进行通信,以及控制压力机上模夹紧器的最佳方案,为运动部件远程分站的布置与编程提供参考。
关键词 压力机 三菱QJ61bt11N模块 巴鲁夫BNI-002模块 CC-LINK总线
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三菱J3-B伺服在全钢一次法成型机中的应用 被引量:1
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作者 王道鹏 《自动化应用》 2015年第7期27-29,54,共4页
介绍福建龙翔三鼓成型机的特点,以及如何运用三菱Q173DCPU的实模式实现伺服电机速度控制、位置控制。
关键词 全钢一次法成型机 Q13UDEHCPU Q173DCPU QJ61bt11N Q64AD Q64DAN NR-J3-B伺服放大器 伺服编程软件和伺服设置软件
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开放式CC-LINK总线在多工位真空成型机上的应用
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作者 付文忠 《中国高新技术企业》 2010年第15期105-106,共2页
针对目前多工位成型机电气控制系统PLC的输入输出点比较多,布线比较麻烦,制造复杂程度高等特点,采用三菱CC-LINK开放式现场总线设备网对其进行设备网络控制,实现高性能、省配线,柔性化,自动化适应性强的网络系统。
关键词 CC-LINK总线 主站QJ61bt11N 串行通讯模块QJ71C24N 远程I/O单元 高性能
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Cc-link总线技术在BP-440SS型自动冷镦机应用
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作者 王存明 张伟 《机械工程师》 2015年第3期131-132,共2页
BP-440SS型自动冷镦机采用三菱PLC,CPU单元选用A2U SHCPU-S1模块,安装于电气控制柜中总线主站模块,与安装在机床主按钮站上的总线从站模块通过Cc-link总线通讯,执行机床动作控制。
关键词 CC-LINK总线 总线主站模块A1SJ61bt11 总线从站模块AJ65BTC1-32T AJ65BTC1-32D
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MDA技术在转基因检测中的研究与应用
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作者 马晓娇 李亮 +1 位作者 宛煜嵩 金芜军 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期2207-2214,共8页
PCR技术是转基因植物及其产品检测的主要方法,但是因为其对模板纯度和质量有较高要求,对于低质量模板难以获得稳定的检测结果。本研究利用MDA技术可将低至10 copies的微量DNA样品扩增至可用PCR方法稳定检出;进一步利用MDA技术对转基因... PCR技术是转基因植物及其产品检测的主要方法,但是因为其对模板纯度和质量有较高要求,对于低质量模板难以获得稳定的检测结果。本研究利用MDA技术可将低至10 copies的微量DNA样品扩增至可用PCR方法稳定检出;进一步利用MDA技术对转基因玉米有证标准物质Bt11粉末的单颗粒痕量样品释出DNA进行扩增,结合PCR扩增检测,玉米粉末颗粒中内源参照基因的检出率达到70%以上,转基因特异性序列检出与内源参照基因检出的比值,与标准物质标称值基本相符,为建立基于MDA技术转基因植物及其产品粉末颗粒等痕量样品检测方法奠定了基础,同时也为加工产品中复合性状转基因作物的检测提供了潜在的解决方案。 展开更多
关键词 MDA 非转基因玉米 bt11 转基因玉米 检测
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