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猪传染性胃肠炎病毒spike蛋白C抗原位点的原核表达研究 被引量：2
1
作者 于天飞 朱可佳 +5 位作者 张双 杨怀娇 李赫 闫健哲 张晓琳 陈刚 《黑龙江畜牧兽医（下半月）》 CAS 北大核心 2015年第3期72-74,共3页
为猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的血清学检测方法的建立提供必要的诊断抗原,通过基因重组的方法,在大肠杆菌表达系统中表达了猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)spike蛋白C抗原位点。Western blot试验表明:表达的重组蛋白具有良好的抗原性。研究为T... 为猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的血清学检测方法的建立提供必要的诊断抗原,通过基因重组的方法,在大肠杆菌表达系统中表达了猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)spike蛋白C抗原位点。Western blot试验表明:表达的重组蛋白具有良好的抗原性。研究为TGEV血清学检测方法的建立提供了必要的物质基础。 展开更多
关键词 TGEV PRcV spike蛋白(纤突蛋白) c抗原位点 Western BLOT法
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猪传染性胃肠炎病毒S基因抗原位点B与C之间片段的克隆与原核表达 被引量：2
2
作者 张春叶 孙英健 +3 位作者 沈红 李焕荣 吴国娟 于同泉 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期510-513,共4页
将RT-PCR扩增的猪传染性胃肠炎病毒S基因抗原位点B与C之间的目的片段经克隆、双酶切后连接于表达载体,经酶切、PCR和测序鉴定的阳性重组质粒转化BL21(DE3),用IPTG诱导重组菌株表达其融合蛋白。结果显示,目的片段的大小为357bp,序列分析... 将RT-PCR扩增的猪传染性胃肠炎病毒S基因抗原位点B与C之间的目的片段经克隆、双酶切后连接于表达载体,经酶切、PCR和测序鉴定的阳性重组质粒转化BL21(DE3),用IPTG诱导重组菌株表达其融合蛋白。结果显示,目的片段的大小为357bp,序列分析表明,S基因与其他猪传染性胃肠炎病毒相应基因具有很高的同源性;Western-blotting检测表明,分子质量约34ku的融合蛋白具有良好的反应原性。 展开更多
关键词 猪 传染性胃肠炎病毒 S基因 抗原位点B 抗原位点c 克隆 原核表达
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猪传染性胃肠炎病毒S基因B、C位点的克隆及原核表达载体的构建 被引量：1
3
作者 张春叶 沈红 +1 位作者 李焕荣 路苹 《动物医学进展》 CSCD 2008年第9期1-5,共5页
参考GenBank上公布的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因B、C抗原位点序列,应用Prim-er6.0设计一对含酶切位点的引物,用于RT-PCR扩增B、C抗原位点目的片段,将扩增产物连接于peasy-T克隆载体上,构建克隆载体,用EcoRⅠ和XhoⅠ对表达载体PET-32... 参考GenBank上公布的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因B、C抗原位点序列,应用Prim-er6.0设计一对含酶切位点的引物,用于RT-PCR扩增B、C抗原位点目的片段,将扩增产物连接于peasy-T克隆载体上,构建克隆载体,用EcoRⅠ和XhoⅠ对表达载体PET-32a(+)和重组质粒进行酶切,将酶切产物亚克隆至PET-32a(+)多克隆位点上,连接、转化至BL21(DE3),构建B、C位点的原核表达载体,并对阳性重组质粒进行酶切、PCR和测序鉴定。所扩增的目的片段的大小为357 bp,与原核表达载体连接后,经核苷酸及推导的氨基酸序列分析表明,该基因与其他猪传染性胃肠炎病毒相应基因具有很高的同源性,说明成功地构建了TGEV S基因B、C抗原位点的原核表达载体。TGEV S基因B、C抗原位点原核表达载体的成功构建,为TGEV诊断方法的建立提供良好的技术基础。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎病毒 S基因B c抗原位点 克隆 原核表达载体
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