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高温纤维素降解细菌的筛选与鉴定 被引量：3
1
作者 常慧萍 张红 +3 位作者 杨雪 韩鸿鹏 郝青梅 毛文玲 《河南教育学院学报（自然科学版）》 2012年第3期5-7,10,共4页
以堆腐的发酵牛粪为原料筛选高温纤维素降解细菌.通过纤维素刚果红培养基初筛、测定发酵液的CM-Case和FPAase活力的复筛,筛选出四株酶活较高的菌株,分别是1101、1105、1106和1108.从菌落特征、菌体形态、培养特性及一系列生理生化特性... 以堆腐的发酵牛粪为原料筛选高温纤维素降解细菌.通过纤维素刚果红培养基初筛、测定发酵液的CM-Case和FPAase活力的复筛,筛选出四株酶活较高的菌株,分别是1101、1105、1106和1108.从菌落特征、菌体形态、培养特性及一系列生理生化特性对四株菌株进行初步鉴定,结果表明1101、1106、1108属于芽孢杆菌属,1105属于短芽孢杆菌属. 展开更多
关键词 耐高温的 纤维素降解细菌 筛选 cmcase活力 FPAase活力 鉴定
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菊欧氏杆菌β-1,4-内切葡聚糖酶celY基因在大肠杆菌中的克隆、表达及活性分析 被引量：2
2
作者 黄潇 王泽宇 +3 位作者 邢芸 侯景 李泰明 刘景晶 《药物生物技术》 CAS CSCD 2012年第2期95-99,共5页
以菊欧氏杆菌(Erwinia chrysanthemi)基因组DNA为模板,通过PCR方法扩增了该菌的β-1,4-内切葡聚糖酶celY基因及其调控元件并克隆至pUC19载体。测序结果经分析,该基因编码的蛋白序列与菊欧氏杆菌Ech586的β-1,4-内切葡聚糖酶同源性达到98... 以菊欧氏杆菌(Erwinia chrysanthemi)基因组DNA为模板,通过PCR方法扩增了该菌的β-1,4-内切葡聚糖酶celY基因及其调控元件并克隆至pUC19载体。测序结果经分析,该基因编码的蛋白序列与菊欧氏杆菌Ech586的β-1,4-内切葡聚糖酶同源性达到98%。将celY的开放阅读框基因插入到表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),采用LB-CMC平板刚果红染色筛选含celY基因的转化子。12%SDS-PAGE显示,重组菌经IPTG诱导后表达了目的蛋白,其相对分子质量与预期结果相符。CMCase活力测定显示重组pET-28a-celY阳性菌分泌到培养基中的CelY酶活力为84.4 U/L,周质中的酶活力为12.7 U/L。β-1,4-内切葡聚糖酶CelY工程菌的获得,为研究菊欧氏杆菌纤维素酶基因在菊欧氏杆菌同源转化中的表达及工程菌的酶学特性提供了重要的资料。 展开更多
关键词 菊欧氏杆菌 Β-1 4-内切葡聚糖酶 β-1 4-内切葡聚糖酶celY基因 cmcase活力
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