期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到2篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
真核表达载体pcDNA3-CTLA4lg的构建及体内表达
1
作者 赵国华 许国岩 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第15期2927-2930,共4页
背景:CTLA-4lg的制备过程比较复杂,单克隆抗体的价格比较昂贵,而且应用CTLA-4lg单克隆抗体注射本身存在着血浆药物浓度不稳定的问题。目的:探讨Ctla4lg表达质粒构建的可行性。设计、时间及地点:基因水平观察实验,于2005/2006在中国医科... 背景:CTLA-4lg的制备过程比较复杂,单克隆抗体的价格比较昂贵,而且应用CTLA-4lg单克隆抗体注射本身存在着血浆药物浓度不稳定的问题。目的:探讨Ctla4lg表达质粒构建的可行性。设计、时间及地点:基因水平观察实验,于2005/2006在中国医科大学中心实验室完成。材料:雄性Wistar大鼠10只,近交系昆明小鼠10只。方法:提取Wistar大鼠总RNA,反转录成cDNA第1链,PCR扩增CTLA4基因,将其和真核表达载体pcDNA3酶切、连接。转化感受态菌DH5α,培养后挑取阳性克隆、提取质粒,酶切鉴定重组子、测序,最后转染近交系昆明小鼠,应用Westen Blot法检测血清CTLA4lg水平。主要观察指标:构建的Ctla4lg表达质粒基因序是否正确以及能否在小鼠体内进行蛋白表达。结果:对含有pcDNA3-CTLA4质粒的LB菌液进行鉴定测序,目的基因片断大小为288bp,与Genebank上公布的CTLA4序列完全一致,质粒构建正确。利用阳性脂质体载体包被pcDNA3-CTLA4lg转染小鼠,有3只在第7天血清检测CTLA4Ig阳性,显示pcDNA3-CTLA4lg能够在鼠肌细胞内表达。结论:利用基因合成和重组技术成功构建了真核表达载体pcDNA3-CTLA4Ig,利用脂质体法成功的将pcDNA3-CTLA4lg转染到鼠肌细胞内并进行表达。 展开更多
关键词 真核表达 共刺激信号 ctla4lg
下载PDF
人CTLA4Ig腺病毒载体的构建及其生物学功能研究 被引量：3
2
作者 张庆殷 金永柱 +1 位作者 谢蜀生 张海滨 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期45-48,共4页
目的:通过同源重组构建CTLA4Ig腺病毒载体,研究其生物学活性,并用于基因治疗诱导心脏移植耐受。方法:通过基因重组技术,将CTLA4Ig基因克隆至腺病毒穿梭质粒pCA13中。然后将该质粒与腺病毒辅助质粒同源重组,经过293细胞包装,构建CTLA4Ig... 目的:通过同源重组构建CTLA4Ig腺病毒载体,研究其生物学活性,并用于基因治疗诱导心脏移植耐受。方法:通过基因重组技术,将CTLA4Ig基因克隆至腺病毒穿梭质粒pCA13中。然后将该质粒与腺病毒辅助质粒同源重组,经过293细胞包装,构建CTLA4Ig腺病毒载体。用RT-PcR、SDS-PAGE及Western blot等技术,检测包装的病毒感染293细胞后CTLA4Ig蛋白的表达及分泌,通过体外实验,观察病毒感染的293细胞上清对混合淋巴细胞反应(MLR)的抑制作用。通过大鼠体内实验,检测用CTLA4Ig腺病毒载体基因治疗后,CTLA4Ig在体内的表达。结果:CTLA4Ig腺病毒载体构建成功。体外实验证实,CTLA4Ig腺病毒感染的293细胞上清液,能够抑制异基因脾细胞的单向MLR。体内实验表明,经过静脉途径给予受体大鼠CTLA4Ig腺病毒载体,能够诱导移植耐受,延长心脏移植物的存活。结论:构建的CTLA4Ig腺病毒载体,体外感染293细胞能够分泌CTLA4Ig蛋白。该蛋白可抑制T细胞的活化,CTLA4Ig腺病毒载体可用于体内基因治疗诱导移植耐受。 展开更多
关键词 人CTLA4Ig 腺病毒载体 构建 生物学功能 基因治疗 移植耐受
原文传递
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部