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稳定沉默Rictor表达的前列腺癌CWR22RV1的构建 被引量：1
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作者 陈先国 梁朝朝 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2012年第4期219-222,共4页
目的应用RNA沉默技术下调前列腺癌CWR22RV1细胞株的Rictor基因表达,并筛选具有稳定转染Rictor-shRNA的细胞株,为进一步研究Rictor在前列腺癌中的作用打下基础。方法针对Rictor基因设计合成siRNA序列;鉴定、测序并转染293T细胞观察基因... 目的应用RNA沉默技术下调前列腺癌CWR22RV1细胞株的Rictor基因表达,并筛选具有稳定转染Rictor-shRNA的细胞株,为进一步研究Rictor在前列腺癌中的作用打下基础。方法针对Rictor基因设计合成siRNA序列;鉴定、测序并转染293T细胞观察基因表达情况;构建Rictor-shRNA慢病毒载体;进行Rictor-shRNA慢病毒包装及滴度测定;筛选稳定表达Rictor-shRNA的前列腺癌CWR22RV1细胞株;Western blot检测稳定转染前列腺癌CWR22RV1细胞株Rictor的表达水平。结果 Rictor-shRNA慢病毒成功包装后转染前列腺癌CWR22RV1细胞,进行嘌呤霉素筛选,获得沉默Rictor基因的前列腺癌CWR22RV1细胞株,Western blot检测显示该细胞株Rictor水平明显降低(P<0.01)。结论成功构建了稳定沉默Rictor表达的前列腺癌CWR22RV1细胞株,为后续的实验了打下坚实的基础。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 RICTOR 慢病毒属 cwr22rv1
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比卡鲁胺抑制CWR22Rv1细胞移植裸鼠前列腺癌的机制研究
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作者 李志玲 谢淑武 +7 位作者 张晓芳 刘向云 李冬梅 马丽 谢琛静 吴建辉 曹霖 孙祖越 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期382-388,共7页
目的:探讨比卡鲁胺抗CWR22Rv1细胞移植裸鼠前列腺癌的作用机制。方法:采用瘤块接种的方法制作裸小鼠前列腺癌模型,观察比卡鲁胺治疗后的移植瘤重量和体积,并计算抑瘤率,收集移植瘤标本,使用光镜观察法、免疫组化法、基因芯片法和实时定... 目的:探讨比卡鲁胺抗CWR22Rv1细胞移植裸鼠前列腺癌的作用机制。方法:采用瘤块接种的方法制作裸小鼠前列腺癌模型,观察比卡鲁胺治疗后的移植瘤重量和体积,并计算抑瘤率,收集移植瘤标本,使用光镜观察法、免疫组化法、基因芯片法和实时定量RT-PCR法比较比卡鲁胺组和阴性对照组肿瘤相关指标的差异。结果:①比卡鲁胺低、中、高剂量组抑瘤率分别为10.77%、37.32%和63.28%(P<0.01)。②光镜观察:对照组肿瘤内癌细胞生长旺盛,移植癌细胞保持原有异型性。而比卡鲁胺低、中和高剂量组呈腺癌典型表现,癌细胞出现不同程度的退变。③免疫组化:低、中、高剂量组增殖细胞核抗原增殖指数同阴性对照组相比明显减小(P<0.01)。对照组每200个细胞中平均有180±8个细胞雄激素受体(androgen receptor,AR)呈阳性表达,而高剂量组中AR阳性细胞数较对照组明显减少(P<0.01)。④基因芯片:高剂量组在前列腺癌相关基因表达丰度上明显低于对照组,主要为AR和关联蛋白、细胞黏附分子和细胞周期相关基因,并且实时定量RT-PCR结果与基因芯片结果基本一致。结论:比卡鲁胺抗22Rv1细胞移植裸鼠前列腺癌效果显著,主要通过降低细胞核AR表达、减少细胞黏附、调控细胞周期和抑制细胞增殖等发挥作用。 展开更多
关键词 比卡鲁胺 CWR 22Rv1细胞 前列腺癌 雄激素受体 CDNA芯片
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干扰裸鼠荷人前列腺癌模型中mir-21表达对细胞中PDCD4蛋白表达的影响
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作者 肖亮 佟明 +1 位作者 金艳阳 Sandeep 《中国医学工程》 2012年第5期108-110,共3页
目的探讨干扰裸鼠荷人前列腺癌模型中mir-21表达对细胞中PDCD4蛋白表达的影响。方法采用腋下皮肤接种22Rv1细胞的方法制作SCID鼠前列腺癌模型,待成瘤后给予三种不同处理方法,观察荷瘤部位肿瘤的生长情况,并取肿瘤组织标本,使用RT-PCR以... 目的探讨干扰裸鼠荷人前列腺癌模型中mir-21表达对细胞中PDCD4蛋白表达的影响。方法采用腋下皮肤接种22Rv1细胞的方法制作SCID鼠前列腺癌模型,待成瘤后给予三种不同处理方法,观察荷瘤部位肿瘤的生长情况,并取肿瘤组织标本,使用RT-PCR以及western印痕法检测实验组与对照组肿瘤相关指标的差异。结果①给予mir-21 antagomirs治疗后实验组移植瘤肿瘤体积增长变缓;②RT-PCR检测miR-21在移植瘤中的表达,给予anti-miR21antagomirs治疗组的miR-21表达较空白对照组明显降低,有显著性差异(P<0.05)。而anti-miR21 antagomirs治疗组与anti-miR21 antagomirs合并去势治疗组的miR21的表达不具有显著性差异(P>0.05);③Western blot检测各组PDCD4的变化。给予anti-miR21 antagomirs治疗组对照组PDCD4的表达增高(P<0.05),去势治疗组的PDCD4表达于对照组比较未发现显著性差异(p>0.05)。结论 (1)抑制miRNA-21在肿瘤细胞中的表达,可以延缓裸鼠移植瘤的生长;(2)anti miR-21 antagomirs治疗组移植瘤体积增长慢于手术去势治疗组;(3)在前列腺癌22Rv1细胞裸鼠移植瘤中,PDCD4的表达受到了miRNA-21的反向调节。 展开更多
关键词 cwr22rv1细胞 裸鼠 前列腺癌移植瘤 MIRNA-21 PDCD4
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