期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到10篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
分泌抗鸡Ig单抗杂交瘤细胞系的建立与单抗生物学特性的鉴定 被引量：6
1
作者 梁荣 冯斌 李健强 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期140-144,共5页
从传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞系１Ｄ１０、１Ｇ１中得到了３株能稳定分泌抗鸡免疫球蛋白（Ｉｇ）ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系１Ｂ７、１Ｄ７、３Ｇ６。其抗体类和亚类均属ＩｇＧ２ｂ，腹水的ＥＬＩＳ... 从传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞系１Ｄ１０、１Ｇ１中得到了３株能稳定分泌抗鸡免疫球蛋白（Ｉｇ）ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系１Ｂ７、１Ｄ７、３Ｇ６。其抗体类和亚类均属ＩｇＧ２ｂ，腹水的ＥＬＩＳＡ效价≥１∶２５６００，琼扩效价为１∶８～１∶１６。３株ＭｃＡｂ能与鸡血清中的Ｉｇ出现沉淀反应，琼扩在２４ｈ以内出现清晰的沉淀线，而不能和鸭、鸽、鹌鹑等禽类及异种动物血清出现沉淀线。纯化的鸡ＩｇＧ、ＩｇＭ经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ后，分别用纯化并经辣根过氧化物酶（ＨＰＲ）标记的１Ｂ７、１Ｄ７、３Ｇ６单抗酶结合物进行免疫印迹试验证明，３株单抗识别的均为ＩｇＧ。 展开更多
关键词 鸡 免疫球蛋白 轻链 单克隆抗体
下载PDF
信号肽对鸡Igλ轻链绿色荧光蛋白重组分子在COS7细胞上分泌表达的影响 被引量：3
2
作者 张红 王健 +3 位作者 李姣 易明林 韩鸿鹏 张改平 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2008年第2期99-102,共4页
分别将鸡Igλ轻链信号肽、小鼠纤溶酶原信号肽与pEGFP-C1载体的绿色荧光蛋白N端融合,产生带有信号肽的中间载体pEGFP-SPc和pEGFP-SPm。对鸡Igλ轻链基因的定向克隆,构建了带有纯化标签的鸡Igλ轻链绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-SPc-λ... 分别将鸡Igλ轻链信号肽、小鼠纤溶酶原信号肽与pEGFP-C1载体的绿色荧光蛋白N端融合,产生带有信号肽的中间载体pEGFP-SPc和pEGFP-SPm。对鸡Igλ轻链基因的定向克隆,构建了带有纯化标签的鸡Igλ轻链绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-SPc-λ和pEGFP-SPm-λ。转染COS7细胞后,荧光显微镜观察及Western blotting检测融合蛋白的分泌表达,结果显示,鸡Igλ轻链信号肽能引导鸡Igλ轻链绿色荧光蛋白融合分子的分泌表达;而小鼠纤溶酶原信号肽不具备引导该重组蛋白分泌表达的功能。表明信号肽在蛋白分泌表达中的关键作用,重组蛋白的分泌表达要选择合适的信号肽。 展开更多
关键词 鸡igλ轻链信号肽 小鼠纤溶酶原信号肽 绿色荧光蛋白 分泌表达
下载PDF
鸡Igλ轻链基因克隆、序列分析及其在COS7细胞膜上的定位表达 被引量：1
3
作者 张红 王健 +4 位作者 王丽 席俊 易明林 张改平 章金刚 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2009年第8期132-136,共5页
为了研究鸡B细胞膜免疫球蛋白(mIg)的功能,深入了解鸡免疫系统抗体基因的特点,从鸡法氏囊B细胞cDNA中扩增出Igλ轻链基因,对其核苷酸序列和氨基酸序列进行了分析和比较。该基因cDNA全长873bp,编码含226个氨基酸的Igλ轻链,N-端21个氨基... 为了研究鸡B细胞膜免疫球蛋白(mIg)的功能,深入了解鸡免疫系统抗体基因的特点,从鸡法氏囊B细胞cDNA中扩增出Igλ轻链基因,对其核苷酸序列和氨基酸序列进行了分析和比较。该基因cDNA全长873bp,编码含226个氨基酸的Igλ轻链,N-端21个氨基酸构成轻链信号肽,随后是2个Ig样结构域。运用融合PCR的方法将该基因与牛IgG Fc受体γRⅡ跨膜区序列嵌合形成重组跨膜分子,构建真核表达载体pcDNA-λR2T,转染COS7细胞,荧光抗体染色及流式细胞术检测到重组鸡Igλ轻链在细胞膜上的表达。所扩增的鸡Igλ轻链基因以及构建表达于细胞膜上的重组鸡Igλ轻链跨膜分子,为研究鸡免疫系统中的抗体轻链基因,探索Igλ轻链和B细胞膜免疫球蛋白的功能奠定技术基础。 展开更多
关键词 鸡igλ轻链 重组跨膜分子 COS7细胞 膜定位表达 牛igGFc受体γRⅡ
下载PDF
鸡Igλ轻链绿色荧光蛋白融合分子在COS7细胞膜的表达
4
作者 张红 宋海涛 +5 位作者 张改平 邢广旭 赵东 杨继飞 柴书军 郝青梅 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2006年第11期102-104,109,共4页
将牛IgG Fc受体γRⅡ的跨膜区序列嵌合入鸡Igλ轻链基因中,并将鸡Igλ轻链信号肽与Pegfp-C1载体的绿色荧光蛋白N端融合产生带有信号肽的中间载体Pegfp-C1-SP。鸡Igλ轻链基因嵌合分子定向克隆入载体的多克隆位点,构建了带有信号肽的鸡I... 将牛IgG Fc受体γRⅡ的跨膜区序列嵌合入鸡Igλ轻链基因中,并将鸡Igλ轻链信号肽与Pegfp-C1载体的绿色荧光蛋白N端融合产生带有信号肽的中间载体Pegfp-C1-SP。鸡Igλ轻链基因嵌合分子定向克隆入载体的多克隆位点,构建了带有信号肽的鸡Igλ轻链/GFP融合蛋白真核表达载体。转染COS7细胞后,荧光显微镜观察,重组鸡Igλ轻链/GFP蛋白在COS7细胞膜及膜周围有明显表达,而载体pEGFP-C1转染的COS7细胞GFP则分布在细胞及细胞核。结果表明,牛IgG Fc受体γRⅡ的跨膜区能介导融合蛋白在细胞膜上的表达。 展开更多
关键词 鸡igγ轻链 牛igG Fc受体γR Ⅱ跨膜区 COS7细胞 GFP融合蛋白
下载PDF
重组鸡Igλ轻链真核细胞分泌表达及其单克隆抗体的制备与鉴定
5
作者 张红 张改平 +4 位作者 章金刚 杨艳艳 易明林 李姣 韩鸿鹏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期260-262,共3页
目的:构建重组载体pcDNA-λ并在COS7细胞分泌表达鸡Igλ轻链,制备抗鸡Igλ轻链的单克隆抗体(mAb)。方法:PCR扩增带有信号肽的鸡Igλ轻链基因,限制性酶切消化后,定向克隆于真核表达载体pcDNA3,构建具有6×His标签、分泌表达的重组载... 目的:构建重组载体pcDNA-λ并在COS7细胞分泌表达鸡Igλ轻链,制备抗鸡Igλ轻链的单克隆抗体(mAb)。方法:PCR扩增带有信号肽的鸡Igλ轻链基因,限制性酶切消化后,定向克隆于真核表达载体pcDNA3,构建具有6×His标签、分泌表达的重组载体pcDNA-λ。重组载体转染COS7细胞后,SDS-PAGE分析真核表达载体pcDNA-λ在COS7细胞的分泌表达。用2×106个雏鸡B淋巴细胞免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞融合,分别采用细胞免疫荧光和间接ELISA筛选阳性杂交瘤克隆。结果:成功构建分泌表达鸡Igλ轻链的重组载体,SDS-PAGE分析表明在COS7细胞上清有目的蛋白的分泌表达。杂交瘤细胞经筛选与鉴定,获得2株分泌抗鸡Igλ轻链mAb的杂交瘤细胞株,Western blot检测到该mAb对重组鸡Igλ轻链的反应性。结论:构建了重组表达载体pcDNA-λ并在COS7细胞上清分泌表达了重组鸡Igλ轻链。并用淋巴细胞杂交瘤技术成功筛选出抗鸡Igλ轻链mAb。为深入研究鸡Igλ轻链的结构与功能奠定了基础。 展开更多
关键词 鸡igλ轻链 pcDNA-λ COS7细胞 真核分泌表达 单克隆抗体
原文传递
鸡肌球蛋白轻链激酶在大肠杆菌中的表达 被引量：3
6
作者 汪渊 桂淑玉 《安徽医科大学学报》 CAS 1997年第6期679-682,共4页
目的建立鸡肌球蛋白轻链激酶（ｍｙｏｓｉｎｌｉｇｈｔｃｈａｉｎｋｉｎａｓｅ，ＭＬＣＫ）ｃＤＮＡ表达克隆。方法将ＭＬＣＫ功能区（自动抑制区、钙调蛋白识别区和活性催化区）的ｃＤＮＡ插入质粒ｐＢＫｒｓｖ中，重组质粒（ｐＢＫｒ... 目的建立鸡肌球蛋白轻链激酶（ｍｙｏｓｉｎｌｉｇｈｔｃｈａｉｎｋｉｎａｓｅ，ＭＬＣＫ）ｃＤＮＡ表达克隆。方法将ＭＬＣＫ功能区（自动抑制区、钙调蛋白识别区和活性催化区）的ｃＤＮＡ插入质粒ｐＢＫｒｓｖ中，重组质粒（ｐＢＫｒｓｖ－ＭＬＣＫ）转化入大肠杆菌中并获得表达。结果Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹试验表明表达产物的分子量与插入片段ｃＤＮＡ所含信息相一致。结论所获重组克隆在体外表达。 展开更多
关键词 质粒 大肠杆菌 遗传学 酶 MLCL
下载PDF
鸡肌球蛋白轻链激酶表达载体的构建 被引量：4
7
作者 汪渊 桂淑玉 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第5期520-524,共5页
鸡肌球蛋白轻链激酶（ＭＬＣＫ）在调节平滑肌细胞收缩中具有重要作用．用ＰＣＲ产生构建所需的限制性内切酶ＳａｌⅠ位点，将鸡ＭＬＣＫｃＤＮＡ插入质粒ｐＢＫｒｓｖ中，构建成ｐＢＫｒｓｖ－ＭＬＣＫ，并通过酶切图谱、ＳａｌⅠ位点... 鸡肌球蛋白轻链激酶（ＭＬＣＫ）在调节平滑肌细胞收缩中具有重要作用．用ＰＣＲ产生构建所需的限制性内切酶ＳａｌⅠ位点，将鸡ＭＬＣＫｃＤＮＡ插入质粒ｐＢＫｒｓｖ中，构建成ｐＢＫｒｓｖ－ＭＬＣＫ，并通过酶切图谱、ＳａｌⅠ位点序列分析得到证实．重组质粒在大肠杆菌中获得表达． 展开更多
关键词 肌球蛋白 轻链激酶 表达载体 鸡
原文传递
人抗HBs轻链基因的序列测定及序列分析
8
作者 石小枫 刘杞 王志毅 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2004年第5期594-596,650,共4页
目的 :获得人源性乙型肝炎病毒抗HBs轻链基因。方法 :从已构建的人源性噬菌体抗体库中 ,用固相化HBsAg对构建的人源性噬菌体抗体库进行三轮淘筛 ,经ELISA实验 ,筛选到抗HBs噬菌体抗体 (P/N :2 .4 15 )的阳性克隆 ,根据已知序列合成一对... 目的 :获得人源性乙型肝炎病毒抗HBs轻链基因。方法 :从已构建的人源性噬菌体抗体库中 ,用固相化HBsAg对构建的人源性噬菌体抗体库进行三轮淘筛 ,经ELISA实验 ,筛选到抗HBs噬菌体抗体 (P/N :2 .4 15 )的阳性克隆 ,根据已知序列合成一对轻链引物 ,进行PCR扩增 ,扩增出轻链目的基因片段 ,将目的基因片段定向克隆入质粒pUC18,进行序列测定及分析。结果 :筛选出的克隆具有HBsAg特异性亲和力 ,构建了pUCl8-抗HBsκ链重组质粒 ,序列分析其为κ链 ,为 6 4 3bp包括了可变区和恒定区。结论 :利用抗原抗体特异性反应从噬菌体抗体库中筛选到抗HBs轻链基因。 展开更多
关键词 人源性ig轻链 序列分析 HBSAG
下载PDF
鸡免疫球蛋白λ轻链绿色荧光蛋白重组分子在COS7细胞的分泌表达
9
作者 张红 刘钧珂 +4 位作者 张改平 宋海涛 王青 段艳华 赵光辉 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期204-206,241,共4页
将鸡Igλ轻链信号肽与pEGFP-C1载体的绿色荧光蛋白N端融合产生带有信号肽的中间载体pEGFP-C1-SP,通过对鸡Igλ轻链基因的定向克隆,构建了带有纯化标签的鸡Igλ轻链绿色荧光蛋白真核表达载体.转染COS7细胞后,荧光显微镜观察及Western blo... 将鸡Igλ轻链信号肽与pEGFP-C1载体的绿色荧光蛋白N端融合产生带有信号肽的中间载体pEGFP-C1-SP,通过对鸡Igλ轻链基因的定向克隆,构建了带有纯化标签的鸡Igλ轻链绿色荧光蛋白真核表达载体.转染COS7细胞后,荧光显微镜观察及Western blotting检测均证明融合蛋白在COS7细胞的分泌表达. 展开更多
关键词 鸡igλ轻链 绿色荧光蛋白 COS7细胞 分泌表达
下载PDF
鸡免疫球蛋白(GIgG)轻链的分离纯化及其抗血清的制备 被引量：3
10
作者 李庆章 刘忠贵 《兽医大学学报》 CSCD 1989年第1期37-41,共5页
经硫酸铵盐析、柱色谱分离得到纯化的鸡血清IgG。继用2-巯基乙醇还原、碘乙酰胶烷化拆开IgG的轻、重链,再经Sephadex G100凝胶过滤柱色谱分离得到IgG轻链。以IgG轻链免疫家兔制得兔抗鸡IgG轻链抗血清。
关键词 鸡 家兔 抗血清 免疫球蛋白 轻链
原文传递
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部