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口蹄疫病毒株China/99 P3区一级结构及与参考毒株的比较分析 被引量:3
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作者 张显升 赵启祖 +6 位作者 刘在新 江鹏斐 常惠芸 陈应理 李冬 魏怀录 谢庆阁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期606-610,共5页
用RT -PCR法 ,以口蹄疫病毒China/ 99感染的牛舌水泡皮为材料 ,扩增目的cDNA ,与pGEM TEasy载体连接并转化JM1 0 9菌株 ,再经重组质粒电泳、PCR和EcoR1酶切鉴定。序列测定和分析结果表明 ,猪源毒在 3A基因内缺失 1 0个密码子 ,与牛源毒... 用RT -PCR法 ,以口蹄疫病毒China/ 99感染的牛舌水泡皮为材料 ,扩增目的cDNA ,与pGEM TEasy载体连接并转化JM1 0 9菌株 ,再经重组质粒电泳、PCR和EcoR1酶切鉴定。序列测定和分析结果表明 ,猪源毒在 3A基因内缺失 1 0个密码子 ,与牛源毒的核苷酸和氨基酸序列差异较大。A G和T C的转换率较高 ,而且A G转换导致氨基酸变异的几率大于T C转换 ,它们是影响氨基酸稳定的因素之一。China/ 99P3区编码产物在第 8、1 2 0、1 2 1、1 2 7、1 32、1 93、493、50 1和 538位具有特征性氨基酸 ,可能与该毒株的表型如毒力等有关。 3A基因突变率较高 ,3B、3C和 3D较低 ,3D最为保守 ,这对维持 3C和 3D蛋白酶和 展开更多
关键词 口蹄疫 病毒株 china/99 P3区 一级结构 参考毒株
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口蹄疫病毒O/China/99株多基因植物组成型表达载体的构建及序列分析 被引量:4
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作者 潘丽 张永光 +8 位作者 王永录 王宝琴 王文秀 方玉珍 蒋守田 张维德 董金杰 吕建亮 谢庆阁 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第10期841-844,905,共5页
目的构建包含FMDV结构蛋白P1、非结构蛋白2A、3C以及部分2B的基因片段P12X3C的植物组成型表达载体,为FMDV可饲疫苗的研制奠定基础。方法通过PCR扩增法,从pGEM/P12A质粒和pGEM/3C质粒中扩增P12A及部分2B基因(P12X)、3C基因,将获得的P12X... 目的构建包含FMDV结构蛋白P1、非结构蛋白2A、3C以及部分2B的基因片段P12X3C的植物组成型表达载体,为FMDV可饲疫苗的研制奠定基础。方法通过PCR扩增法,从pGEM/P12A质粒和pGEM/3C质粒中扩增P12A及部分2B基因(P12X)、3C基因,将获得的P12X与3C片段经BamHI/SpeI和SpeI/SalI双酶切后,与经BamHI/SalI双酶切后的pUC18质粒大片段连接,得到重组质粒pUC18/P12X3C,pUC18/P12X3C质粒经BamHI/SalI双酶切后的大片段与经同样双酶切的植物表达载体pBin438连接,转化子经酶切、PCR及测序鉴定后,获得包含FMDV O/China/99株P12X3C片段的植物组成型表达载体pBin438/P12X3C,最后通过三亲交配法,将表达载体pBin438/P12X3C导入农杆菌。结论成功构建FMDV多基因的植物组成型表达载体。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 O/china/99 多基因植物 组成型表达载体 基因序列 可饲疫苗
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口蹄疫病毒强毒株China/99 P2区核苷酸序列测定及比较分析 被引量:2
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作者 张显升 赵启祖 +6 位作者 刘在新 江鹏斐 常惠芸 陈应理 李冬 魏怀录 谢庆阁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期496-500,共5页
以口蹄疫病毒强毒株China/99RNA为反转录模板 ,用一对特异性引物扩增目的cDNA ,然后与 pGEM TEasy载体连接并转化JM10 9菌株 ,再经重组质粒电泳、PCR和EcoR1酶切鉴定。序列测定和分析结果表明 ,该强毒株与A12、O1K和TW 45毒株的核苷酸... 以口蹄疫病毒强毒株China/99RNA为反转录模板 ,用一对特异性引物扩增目的cDNA ,然后与 pGEM TEasy载体连接并转化JM10 9菌株 ,再经重组质粒电泳、PCR和EcoR1酶切鉴定。序列测定和分析结果表明 ,该强毒株与A12、O1K和TW 45毒株的核苷酸差异率分别为 7 78%、6 6 2 %和 13 19%。推导的氨基酸序列差异率分别为 1 2 3%、1 84%和 5 73%。 4个毒株序列比较发现 ,China/99、O1K和TW 45三毒株的 2A/2B连接处为甘氨酸 /脯氨酸 ,A12 为精氨酸 /脯氨酸 ,而且T C转换率和A G转换率较高 ,是点突变的热点核苷酸。氨基酸差异主要存在于 2B和 2C蛋白中 ,2A基因较为保守。 2B蛋白的第 1 4,6 3 6 7,73 78,83 91,116 12 1和 12 6 131区域 ,2A蛋白的第 4 9区域和 2C蛋白的第 9 13,2 2 2 5 ,91 96 ,15 0 15 9,179 188,2 0 1 2 0 7和 2 5 8 2 6 2区域可能是重要的活性中心。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 china/99P2区 核苷酸序列 比较分析
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口蹄疫病毒株China/99L区段核苷酸序列测定及比较分析
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作者 张显升 赵启祖 +7 位作者 刘在新 刘相涛 常惠芸 江鹏斐 陈应理 李冬 魏怀录 谢庆阁 《中国病毒学》 CSCD 2002年第2期158-162,共5页
以口蹄疫病毒株China/ 99RNA为模板 ,反转录并扩增目的cDNA ,然后与 pGEM TEasy载体连接并转化JM10 9菌株 ,提取的重组质粒用电泳、PCRampos和EcoR1酶切法鉴定。该毒株与A10、O1K、O1Campos和TW 45毒株的核苷酸序列差异率分别为 15 .2 7... 以口蹄疫病毒株China/ 99RNA为模板 ,反转录并扩增目的cDNA ,然后与 pGEM TEasy载体连接并转化JM10 9菌株 ,提取的重组质粒用电泳、PCRampos和EcoR1酶切法鉴定。该毒株与A10、O1K、O1Campos和TW 45毒株的核苷酸序列差异率分别为 15 .2 7%、15 .5 6 %、15 .5 6 %和 15 .49% ;氨基酸序列差异率分别为 8.2 9%、8.76 %、9.2 2 %和 10 .14%。五个毒株的L/P1连接处均为苷氨酸 (Gly) /异亮氨酸 (Ile)。序列比较表明 ,T C、A G和A C转换率较高 ,是点突变的热点核苷酸 ,是影响氨基酸稳定的因素之一。第 43 5 3、95 10 5、10 8 111、146 15 3、16 1 173、183 188和 182 187区域极有可能是L蛋白酶的活性中心 ,第 48位的H、5 1的C、6 5位的E、95位的H、10 9位的H、138位的H、148位的H和 16 5位的E可能是L蛋白酶的活性位点 。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒株 china/99L区段 核苷酸序列测定 比较分析
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口蹄疫病毒China/99基因组RNA序列测定及比较分析 被引量:9
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作者 张显升 刘在新 +2 位作者 赵启组 常惠芸 谢庆阁 《中国科学(C辑)》 CSCD 北大核心 2003年第5期461-467,共7页
测定了1999年我国口蹄疫流行毒株(China/99,Tibet)基因组全序列,China/99基因组RNA全长8173个核苷酸(nt),开放阅读框含盖6999nt,编码2332个氨基酸的聚合蛋白。5’和3’非翻译区(UTR)分别长1081和93nt.China/99与12株参考株基因组序列比... 测定了1999年我国口蹄疫流行毒株(China/99,Tibet)基因组全序列,China/99基因组RNA全长8173个核苷酸(nt),开放阅读框含盖6999nt,编码2332个氨基酸的聚合蛋白。5’和3’非翻译区(UTR)分别长1081和93nt.China/99与12株参考株基因组序列比较发现:China/99与英国2001年流行毒、海南和西藏1999年流行毒Id基因的序列同源性高达97%以上,均属泛亚毒株;在牛和猪FMDV的功能未知区、p2和p3区存在较为显著的核苷酸序列差异,3a基因最为显著;l,1a,1b,2a,2c,3b和3d基因没有核苷酸缺失或插入现象,属于病毒必需基因;口蹄疫病毒S片段、功能未知区和内部核糖体进入位点(IRES)二级结构均可分为3种类型。S片段和3’UTR折叠成一个三叶草类似结构。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 china/99基因组 RNA序列测定 比较分析 核苷酸 氨基酸 二级结构
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Sequencing and analysis for the full-length genome RNA of foot-and-mouth disease virus China/99 被引量:3
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作者 ZHANG Xiansheng LIU Zaixin +2 位作者 ZHAO Qizu CHANG Huiyun XIE Qingge 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2004年第1期74-81,共8页
The complete nucleotide sequence of genomic RNA of foot and mouth disease virus (FMDV) strain China/99 from infected bovine tongue epithelium is presented. The nucleotide sequence extending from the 5′ end of the gen... The complete nucleotide sequence of genomic RNA of foot and mouth disease virus (FMDV) strain China/99 from infected bovine tongue epithelium is presented. The nucleotide sequence extending from the 5′ end of the genomic RNA to the 5′ end of poly (A) tail contains 8173 nucleotides (nt). Its open reading frame, which encodes a single polypeptide of 2332 amino acids, encompasses 6999 nt starting from the initiation codon AUG and terminating at the UAA codon 93 bases upstream from the 5′ end of poly (A) tract. The 5′ untranslated region (UTR) is composed of 1081nt. The consensus of the 1d gene of FMDV strain China/99 compared with that of UKG/6/2001, UKG/12/2001, China/99HN4 and China/3/Tibet is over 97%. The result showed the stains belong to the members of the Pan-Asia family. There is a remarkable differentiation in the function-unknown (FUR), p2 and p3 regions between FMDV isolates from infected cattle and swine, especially in 3a gene. No deletion was found in genes l, 1a, 1b, 2a, 2c, 3b, and 3d. These genes might be indispensable to the surviving of FMDV. The secondary structures of small (S) fragments, FUR and an internal ribosome entry site can be classified into three types, and the S fragment and 3′UTR of the positive-sense RNA fold into stem-loop structures similar to the shape of clover. 展开更多
关键词 FMDV china/99 strain reference strains GENOME sequence analysis.
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质子引起天然铀裂变产生医用同位素钼-99的研究 被引量:3
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作者 王洁茹 陈德胜 +10 位作者 黄清钢 秦芝 郭治军 吴晓蕾 初剑 白静 田伟 范芳丽 殷小杰 谈存敏 曹石巍 《同位素》 CAS 2020年第6期347-355,共9页
医用同位素锝-99m(99mTc)被广泛应用于核医学领域,其主要来源于母体核素钼-99(99Mo)的衰变。但是目前国内99Mo基本依赖进口,通常出现99Mo不能稳定供应的现象。为解决这个重大问题,实现国内99Mo自主化生产具有重要意义。本文基于中国科... 医用同位素锝-99m(99mTc)被广泛应用于核医学领域,其主要来源于母体核素钼-99(99Mo)的衰变。但是目前国内99Mo基本依赖进口,通常出现99Mo不能稳定供应的现象。为解决这个重大问题,实现国内99Mo自主化生产具有重要意义。本文基于中国科学院近代物理研究所强流超导直线加速器(China ADS Front End,CAFE)提供的质子束流辐照天然铀靶件,主要开展铀裂变产物中医用同位素99Mo的高效化学分离、纯化及99Mo/99mTc发生器的制备。研究表明:通过α-安息香肟(α-BO)沉淀分离99Mo后,杂质核素去除率大于90%,99Mo的回收率大于90%。通过对99Mo沉淀进行纯化后,大部分杂质核素被去除。提取的99Mo被装配为99Mo/99mTc发生器,发生器淋洗曲线表明:99mTc产品收集在8 mL生理盐水内最为适宜,同时,99mTc回收率大于80%。电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP-OES)测量结果表明,99mTc产品中Al、Mo以及U含量极低;同时,99mTc产品的γ谱图中未出现99Mo和其他杂质核素的γ能量峰。以上研究结果可为国内基于加速器辐照天然铀生产99Mo提供技术参考。 展开更多
关键词 强流超导直线加速器 天然铀 钼-99 分离工艺路线 99Mo/99mTc发生器
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′99世界杯中国男排前排进攻效果分析 被引量:2
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作者 张欢 《西安体育学院学报》 2000年第2期45-48,共4页
通过对′99世界杯赛中国男排与前六名队的前排进攻效果分析比较 ,目前中国队的前排进攻与世界强队相比差距很大。中国队已失去“以快为主”的特点。同’ 98世界男排锦标赛时相比 ,一年来 ,中国男排前排攻水平呈下降趋势。
关键词 '99世界杯男子排球寒 中国 前排进攻
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口蹄疫病毒基因组内部核糖体进入位点一级和二级结构分析 被引量:3
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作者 张显升 赵启祖 +6 位作者 刘在新 江鹏斐 常惠芸 陈应理 李冬 魏怀录 谢庆阁 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期142-148,共7页
以口蹄疫病毒 (foot-and -mouthdiseasevirus,FMDV)强毒China/ 99株牛舌水泡皮为材料 ,用RT -PCR法提取RNA及扩增目的cDNA ,然后与 pGEM -TEasy载体连接并转化JM10 9菌株 ,再经重组质粒电泳、PCR和 EcoRI酶切鉴定。用DNAstar软件比较了... 以口蹄疫病毒 (foot-and -mouthdiseasevirus,FMDV)强毒China/ 99株牛舌水泡皮为材料 ,用RT -PCR法提取RNA及扩增目的cDNA ,然后与 pGEM -TEasy载体连接并转化JM10 9菌株 ,再经重组质粒电泳、PCR和 EcoRI酶切鉴定。用DNAstar软件比较了内部核糖体进入位点 (IRES)的序列差异 ,并用RNAdraw软件绘制和分析了该区段的二级结构。 8株FMDVIRES核苷酸序列比较表明该区段较为保守 ,并对非保守区域进行了分析。二级结构分析表明 ,FMDVIRES至少有 3种二级结构图形 :第一型有 5个结构域 ,与Pilipenko等报道的一致 ;第二和三型分别有 6和 11个结构域 ,与Pilipenko等报道的结果不同。无论FMDVIRES二级结构如何不同 ,但单链区大部分核苷酸序列或基序相同 ,如AACUCC、GAAA、CUUU、AGG、AACC、GUAA等。茎环柄部核苷酸对维持二级结构的空间构像具有十分重要的作用 ,环中或单链区序列 (基序 )在维持其功能方面具有很重要的作用 。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 基因组 内部核糖体进入位点 二级结构 一级结构
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南海北部大气气相多溴联苯醚的含量及来源 被引量:4
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作者 李琦路 李军 +2 位作者 刘向 徐维海 张干 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第8期2533-2537,共5页
通过"实验三号"开放航次在南海北部采集了32个大气样品,用气相色谱/质谱联用仪分析了样品中的多溴联苯醚(PBDEs)同系物,并对其含量、组成特征、空间分布及主要来源进行了研究.结果表明,南海北部大气中7种PBDEs总浓度为0.07~3... 通过"实验三号"开放航次在南海北部采集了32个大气样品,用气相色谱/质谱联用仪分析了样品中的多溴联苯醚(PBDEs)同系物,并对其含量、组成特征、空间分布及主要来源进行了研究.结果表明,南海北部大气中7种PBDEs总浓度为0.07~35.9 pg.m-3,四溴(BDE-47)和五溴(BDE-99和-100)化合物为主要组成,分别约占PBDEs总量的51.5%和36.9%,显示工业五溴联苯醚的使用是其主要来源;中国东南沿海和菲律宾附近PBDEs浓度较高,南海靠近越南中部海域大气PBDEs含量较低.后推气流轨迹分析指出:我国东南沿海,特别是珠江三角洲,以及我国台湾和菲律宾等地区陆源污染物的外溢是引起南海北部地区PBDEs浓度较高的主要原因. 展开更多
关键词 BDE-47 BDE-99 中国南海 大气传输 后推气流轨迹
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