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壳聚糖与重组人骨形成蛋白2复合物体外成骨作用的研究 被引量：4
1
作者 梁东春 左爱军 +1 位作者 王宝利 张镜宇 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期721-724,共4页
目的探讨复合重组人骨形成蛋白2(recombinanthumanbonemorphogeneticprotein2,rhBMP-2)的壳聚糖-明胶支架的体外成骨作用。方法将rhBMP-2与壳聚糖-明胶支架复合,按2×104/ml的密度接种成骨细胞系或成肌细胞系至rhBMP-2复合材料上,... 目的探讨复合重组人骨形成蛋白2(recombinanthumanbonemorphogeneticprotein2,rhBMP-2)的壳聚糖-明胶支架的体外成骨作用。方法将rhBMP-2与壳聚糖-明胶支架复合,按2×104/ml的密度接种成骨细胞系或成肌细胞系至rhBMP-2复合材料上,以及无rhBMP-2复合的对照材料上。A组(2T3成骨细胞接种组),其中实验A组复合有rhBMP-2的材料14块,分别于接种培养第3、7、14和21天各取3块,以管家基因β-tubulin为内参照,RT-PCR行半定量分析,测定骨钙素基因表达水平,余2块于第14天终止培养,茜素红-S染色观察钙盐沉积情况;对照A组未复合rhBMP-2的材料5块,接种培养至14d终止,其中3块用于测定骨钙素基因表达,2块测定钙盐沉积。B组(C2C12成肌细胞接种组),实验组及对照组情况、培养时间及检测指标同A组。另取接种有rhBMP-2的材料2块接种2T3成骨细胞,培养3d后扫描电镜观察细胞与材料的黏附情况。结果A组培养3d,扫描电镜可见成骨细胞紧密黏附于多孔材料网表面,生长状态良好。实验A组成骨细胞中骨钙素基因的表达为1.28±0.17,对照A组14d为0.56±0.09,表明复合rhBMP-2可促进材料中骨钙素基因表达,两者差异有统计学意义(P<0.01);rhBMP-2还可诱导不表达骨钙素基因的C2C12成肌细胞出现基因表达,B组培养21d,实验B组为0.58±0.13,对照B组为0,差异有统计学意义(P<0.01)。茜素红-S染色可见,A组材料网络内均有不同程度的钙盐沉积。接种相同的细胞时,复合有rhBMP-2的材料中有更多的钙盐沉积。结论复合有rhBMP-2的壳聚糖-明胶人工骨支架材料在体外具有良好的诱导成骨能力。 展开更多
关键词 壳聚糖-明胶 重组人骨形成蛋白2 复合物 骨形成
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含重组人骨形态发生蛋白2复合材料的制备及体内外成骨实验研究 被引量：2
2
作者 孙婷 张秀华 +4 位作者 邵华荣 何小华 曾庆恺 刘飞 凌沛学 《药物生物技术》 2021年第3期221-226,共6页
将重组人骨形态发生蛋白2(Recombinant human bone morphogenetic protein-2,rh BMP-2)负载于所制备的明胶/羟基磷灰石/卵磷脂复合材料中,评价其体内外诱导成骨的能力。利用冷冻干燥技术,制备出负载rh BMP-2的明胶/羟基磷灰石/卵磷脂复... 将重组人骨形态发生蛋白2(Recombinant human bone morphogenetic protein-2,rh BMP-2)负载于所制备的明胶/羟基磷灰石/卵磷脂复合材料中,评价其体内外诱导成骨的能力。利用冷冻干燥技术,制备出负载rh BMP-2的明胶/羟基磷灰石/卵磷脂复合支架材料,通过体外细胞实验,评价复合材料的毒性及体外诱导成骨活性;建立小鼠肌袋植入模型,24只动物分4组处理,空白组做假手术,其余3组分别植入空白复合材料、负载rh BMP-2的复合材料或直接注射rhBMP-2溶液,术后4 w评价复合材料体内的异位成骨能力。结果显示,复合材料在电镜下呈多孔海绵状,孔隙直径平均为2050μm,孔间互相连通。L929细胞与复合材料培养1,3,5 d后细胞相对增殖率均在90%以上,说明材料无细胞毒作用;体外成骨诱导3 d后,C2C12细胞中碱性磷酸酶活性显著高于对照组(P<0.05),且随rh BMP-2浓度的增加,表现出剂量依赖性升高。术后4 w X-射线及大体观察发现,rh BMP-2溶液组、负载rh BMP-2复合材料组有骨样物质形成,且负载rh BMP-2复合材料组血液中碱性磷酸酶活力显著高于其余3组(P<0.05);组织学观察发现,负载rh BMP-2复合材料组的骨小梁数量、厚度以及胶原纤维生成量明显优于rh BMP-2溶液组,展现出良好的异位成骨能力。研究结果表明制备的负载rh BMP-2的明胶/羟基磷灰石/卵磷脂复合材料具有良好的生物相容性及骨诱导性,可望作为骨组织工程支架用于修复骨损伤、促进骨愈合。 展开更多
关键词 重组人骨形态发生蛋白2 明胶 羟基磷灰石 卵磷脂 异位成骨 骨组织工程
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