本研究旨在探讨表没食子儿茶素没食子酯酸(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)诱导人恶性淋巴瘤CA46细胞系p16基因去甲基化及转录激活的可能机制。以生长曲线、MTT法检测EGCG对CA46细胞生长和增殖的抑制作用;利用流式细胞仪DNA含量分析...本研究旨在探讨表没食子儿茶素没食子酯酸(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)诱导人恶性淋巴瘤CA46细胞系p16基因去甲基化及转录激活的可能机制。以生长曲线、MTT法检测EGCG对CA46细胞生长和增殖的抑制作用;利用流式细胞仪DNA含量分析法探讨EGCG对CA46细胞周期的影响;采用巢式甲基特异性PCR法(nested-methylation specific PCR,n-MSP)及DNA克隆测序分析法检测EGCG作用前后CA46细胞p16基因甲基化状态;应用RT-PCR检测p16、DNA甲基转移酶(DNMT3A、DNMT3B)基因mRNA的表达。结果表明:与对照组相比,3组不同浓度EGCG均能明显抑制CA46细胞生长,G0/G1期细胞增加;不同浓度EGCG作用48小时后p16基因甲基化程度减弱;未处理组细胞p16基因呈微弱表达,未用药组、不同浓度EGCG(6、12、24)μg/ml处理组条带灰度值与β-actin1比值分别为(0.05±0.01)、(0.19±0.03)、(0.39±0.10)、(0.85±0.09),各处理组p16基因mRNA表达明显高于未用药组,其差异有显著意义(p<0.05);与对照组相比,EGCG作用48小时后CA46细胞甲基转移酶DNMT3A、DNMT3B mRNA的表达均下降。结论:EGCG可能通过抑制甲基转移酶DNMT3A、DNMT3B和(或)直接对p16基因去甲基化,使p16基因mRNA表达上调,恢复其活性,从而实现其对细胞周期的调控功能,将细胞阻滞于G0/G1期,抑制CA46细胞的增殖。展开更多
目的:检测子宫内膜异位症(Endometriosis,EMT)患者血IL-16、CA199水平,评估其在诊断、病情程度中的价值研究。方法:选择我院2019年6月至2020年3月收治并行腹腔镜治疗的75例EMT患者为EMT组,根据美国生育协会分期标准分为轻度组(I~II期,40...目的:检测子宫内膜异位症(Endometriosis,EMT)患者血IL-16、CA199水平,评估其在诊断、病情程度中的价值研究。方法:选择我院2019年6月至2020年3月收治并行腹腔镜治疗的75例EMT患者为EMT组,根据美国生育协会分期标准分为轻度组(I~II期,40例)和重度组(III~IV期,35例);另选择同期行健康体检的75例为对照组,分别采用酶联免疫法和电化学发光免疫检测腹腔镜手术当日空腹静脉血IL-16和CA199水平,比较不同患者的表达差异;同时分析单独及联合检测在EMT中的诊断价值。结果:EMT组患者的血IL-16、CA199水平均明显高于对照组(P<0.05);EMT轻度组患者血IL-16、CA199水平均明显低于EMT重度组(P<0.05);血IL-16联合CA199检测诊断EMT的灵敏度为87.5%,特异度为79.3%,曲线下面积(Area under the curve,AUC)为0.898(95%CI:0.805~0.956)。结论:血IL-16、CA199联合检测能够提高EMT的诊断效能,且表达水平随病情严重程度增高。展开更多
目的:对比分析15~24个月及2~5岁CA16感染的普通型与危重症手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)患者外周血中CD8^+T细胞的表达情况,寻找发现与CA16致病有关的免疫病理因素。方法:收集2014年5-8月间昆明市儿童医院感染科确诊的儿...目的:对比分析15~24个月及2~5岁CA16感染的普通型与危重症手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)患者外周血中CD8^+T细胞的表达情况,寻找发现与CA16致病有关的免疫病理因素。方法:收集2014年5-8月间昆明市儿童医院感染科确诊的儿童HFMD病例外周血标本共72例,其中普通型32例,危重症40例,采用流式细胞术对患者外周血CD8^+T淋巴细胞亚群进行检测分析。结果:15~24个月普通型HFMD患者外周血CD8^+T淋巴细胞百分比略高于正常健康儿童参考值,而危重症患者CD8^+T细胞略低于正常参考值。此外,与正常参考值相比,2~5岁普通型及危重症患者外周血中CD8^+T淋巴细胞百分比均减低,其中危重症患者略低于普通型患者。结论:CA16感染后,不同年龄、不同病情的HFMD患者外周血中CD8^+T细胞的表达变化不太明显,说明CA16感染后,患者体内的CD8^+T细胞基本能够发挥正常的抗病毒免疫效应。而在危重症时,两个年龄段患者CD8^+T细胞百分比略低或减低,说明CA16的持续性感染可能对机体CD8^+T细胞的表达产生了影响,使其杀伤病毒效应减低,这可能是CA16感染诱导神经系统并发症发生的免疫病理因素之一。展开更多
文摘本研究旨在探讨表没食子儿茶素没食子酯酸(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)诱导人恶性淋巴瘤CA46细胞系p16基因去甲基化及转录激活的可能机制。以生长曲线、MTT法检测EGCG对CA46细胞生长和增殖的抑制作用;利用流式细胞仪DNA含量分析法探讨EGCG对CA46细胞周期的影响;采用巢式甲基特异性PCR法(nested-methylation specific PCR,n-MSP)及DNA克隆测序分析法检测EGCG作用前后CA46细胞p16基因甲基化状态;应用RT-PCR检测p16、DNA甲基转移酶(DNMT3A、DNMT3B)基因mRNA的表达。结果表明:与对照组相比,3组不同浓度EGCG均能明显抑制CA46细胞生长,G0/G1期细胞增加;不同浓度EGCG作用48小时后p16基因甲基化程度减弱;未处理组细胞p16基因呈微弱表达,未用药组、不同浓度EGCG(6、12、24)μg/ml处理组条带灰度值与β-actin1比值分别为(0.05±0.01)、(0.19±0.03)、(0.39±0.10)、(0.85±0.09),各处理组p16基因mRNA表达明显高于未用药组,其差异有显著意义(p<0.05);与对照组相比,EGCG作用48小时后CA46细胞甲基转移酶DNMT3A、DNMT3B mRNA的表达均下降。结论:EGCG可能通过抑制甲基转移酶DNMT3A、DNMT3B和(或)直接对p16基因去甲基化,使p16基因mRNA表达上调,恢复其活性,从而实现其对细胞周期的调控功能,将细胞阻滞于G0/G1期,抑制CA46细胞的增殖。
文摘目的:检测子宫内膜异位症(Endometriosis,EMT)患者血IL-16、CA199水平,评估其在诊断、病情程度中的价值研究。方法:选择我院2019年6月至2020年3月收治并行腹腔镜治疗的75例EMT患者为EMT组,根据美国生育协会分期标准分为轻度组(I~II期,40例)和重度组(III~IV期,35例);另选择同期行健康体检的75例为对照组,分别采用酶联免疫法和电化学发光免疫检测腹腔镜手术当日空腹静脉血IL-16和CA199水平,比较不同患者的表达差异;同时分析单独及联合检测在EMT中的诊断价值。结果:EMT组患者的血IL-16、CA199水平均明显高于对照组(P<0.05);EMT轻度组患者血IL-16、CA199水平均明显低于EMT重度组(P<0.05);血IL-16联合CA199检测诊断EMT的灵敏度为87.5%,特异度为79.3%,曲线下面积(Area under the curve,AUC)为0.898(95%CI:0.805~0.956)。结论:血IL-16、CA199联合检测能够提高EMT的诊断效能,且表达水平随病情严重程度增高。
文摘目的:对比分析15~24个月及2~5岁CA16感染的普通型与危重症手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)患者外周血中CD8^+T细胞的表达情况,寻找发现与CA16致病有关的免疫病理因素。方法:收集2014年5-8月间昆明市儿童医院感染科确诊的儿童HFMD病例外周血标本共72例,其中普通型32例,危重症40例,采用流式细胞术对患者外周血CD8^+T淋巴细胞亚群进行检测分析。结果:15~24个月普通型HFMD患者外周血CD8^+T淋巴细胞百分比略高于正常健康儿童参考值,而危重症患者CD8^+T细胞略低于正常参考值。此外,与正常参考值相比,2~5岁普通型及危重症患者外周血中CD8^+T淋巴细胞百分比均减低,其中危重症患者略低于普通型患者。结论:CA16感染后,不同年龄、不同病情的HFMD患者外周血中CD8^+T细胞的表达变化不太明显,说明CA16感染后,患者体内的CD8^+T细胞基本能够发挥正常的抗病毒免疫效应。而在危重症时,两个年龄段患者CD8^+T细胞百分比略低或减低,说明CA16的持续性感染可能对机体CD8^+T细胞的表达产生了影响,使其杀伤病毒效应减低,这可能是CA16感染诱导神经系统并发症发生的免疫病理因素之一。
