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金钱鱼脑型芳香化酶基因cDNA的克隆及表达分析
被引量：
2
1
作者
张敏智
李广丽
+1 位作者
朱春华
邓思平
《海洋科学》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期72-80,共9页
为了探讨Cyp19a1b基因表达与温度及鱼油添加量的相互关系,奠定金钱鱼人工繁育理论基础,作者采用RT-PCR和RACE法,克隆了金钱鱼（Scatophagus argue Linnaeus）脑型芳香化酶基因（Cyp19a1b）;采用实时荧光定量PCR法,检测了不同温度（23、2...
为了探讨Cyp19a1b基因表达与温度及鱼油添加量的相互关系,奠定金钱鱼人工繁育理论基础,作者采用RT-PCR和RACE法,克隆了金钱鱼（Scatophagus argue Linnaeus）脑型芳香化酶基因（Cyp19a1b）;采用实时荧光定量PCR法,检测了不同温度（23、26和29℃）和不同水平鱼油（0、2%和6%）处理后二龄雌性金钱鱼脑垂体中Cyp19a1b mRNA表达。结果表明：Cyp19a1b cDNA全长2409bp,5′端非编码区164 bp,3′端（不包括poly（A））712 bp,开放阅读框（ORF）1506 bp,编码501个氨基酸,推测其蛋白质分子量为56.697 kDa。序列分析及分子系统进化树结果表明：金钱鱼Cyp19a1b氨基酸序列与黄锡鲷和舌齿鲈Cyp19a1b同源性较高,分别为86.2%、86.5%,与鲤鱼（Cyprinus carpio）、稀有鲫（Gobiocypris rarus）、斑马鱼（Danio rerio）、赤点石斑鱼（Epinephelus akaara）、大黄鱼（Larimichthys crocea）、南方大口鲇（Silurus meridionalis）和鲻鱼（Mugil cephalus）Cyp19a1b同源性为64.1%-84.4%,但与上述7种鱼性腺芳香化酶（Cyp19a1a）同源性低于63.5%,同源性分析结果与根据传统形态学和生化特征分类的结果相一致。荧光定量PCR结果显示,随处理时间的延长,26℃和29℃组金钱鱼脑垂体中Cyp19a1b mRNA的表达量都逐渐降低,但29℃组显著低于26℃组（P〈0.05）,而23℃组在6周时则显著高于26℃和29℃组（P〈0.05）,约为26℃组2倍的表达量;鱼油处理3个投喂组脑垂体中Cyp19a1b mRNA的表达量均逐渐降低,但鱼油对金钱鱼脑垂体中Cyp19a1b mRNA的表达量无显著影响（P〉0.05）。以上结果表明：随着卵巢发育或鱼油含量的提高,可降低雌性金钱鱼脑垂体中Cyp19a1b mRNA的表达,这种降低可能是E2反馈调节所致;水温高于26℃将抑制Cyp19a1b mRNA的表达。
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关键词
金钱鱼(Scatophagus
argue
Linnaeus)
温度
鱼油
芳香化酶
MRNA表达
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职称材料
Cyp19a1基因在中华鳖早期卵巢分化中的功能研究
被引量：
12
2
作者
包海声
蔡晗
+4 位作者
韩伟
张海艳
孙伟
葛楚天
钱国英
《中国科学：生命科学》
CSCD
北大核心
2017年第6期640-649,共10页
芳香化酶是雌激素合成的关键酶,在非哺乳类脊椎动物的早期雌性性腺分化中起重要的调控作用.本研究首先分析了中华鳖(Pelodiscus sinensis)芳香化酶编码基因Cyp19a1在不同组织及不同发育时期雌雄胚胎性腺中的表达情况;其次,利用芳香化酶...
芳香化酶是雌激素合成的关键酶,在非哺乳类脊椎动物的早期雌性性腺分化中起重要的调控作用.本研究首先分析了中华鳖(Pelodiscus sinensis)芳香化酶编码基因Cyp19a1在不同组织及不同发育时期雌雄胚胎性腺中的表达情况;其次,利用芳香化酶抑制剂(AI)和慢病毒RNA干扰及过表达技术,进行Cyp19a1基因的功能验证研究.研究结果表明,Cyp19a1基因在中华鳖成体卵巢组织中高度特异性表达,睾丸和心、肝、脾、肺、肾、肌、肠中未见表达.同时发现,Cyp19a1基因在第18期就呈现雌性性腺特异性表达,早于性腺分化启动时间(第19期).功能缺失实验表明,经过AI及Cyp19a1-shRNA处理后,ZW胚胎性腺皮质区退化,髓质区高度发育,形成原始性索结构,呈现雌性向雄性性逆转现象;同时雌性标记基因Foxl2的表达量下调,雄性标记基因Amh的表达量则显著上调.功能获得实验则表明,Cyp19a1过表达后的ZZ型性腺皮质区高度发育,髓质区退化,形成空洞结构,呈典型雌性特征,同时Foxl2基因的表达量上升,Amh的表达量显著降低.综上所述,本文证明了Cyp19a1是中华鳖早期卵巢分化的关键调控因子,为中华鳖性别分化机制研究奠定了基础.
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关键词
cyp19al
性腺分化
雌性
中华鳖
原文传递
题名
金钱鱼脑型芳香化酶基因cDNA的克隆及表达分析
被引量：
2
1
作者
张敏智
李广丽
朱春华
邓思平
机构
广东海洋大学水产学院南海水产经济动物增养殖广东普通高校重点实验室
出处
《海洋科学》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期72-80,共9页
基金
国家自然科学基金资助项目(31272640)
文摘
为了探讨Cyp19a1b基因表达与温度及鱼油添加量的相互关系,奠定金钱鱼人工繁育理论基础,作者采用RT-PCR和RACE法,克隆了金钱鱼（Scatophagus argue Linnaeus）脑型芳香化酶基因（Cyp19a1b）;采用实时荧光定量PCR法,检测了不同温度（23、26和29℃）和不同水平鱼油（0、2%和6%）处理后二龄雌性金钱鱼脑垂体中Cyp19a1b mRNA表达。结果表明：Cyp19a1b cDNA全长2409bp,5′端非编码区164 bp,3′端（不包括poly（A））712 bp,开放阅读框（ORF）1506 bp,编码501个氨基酸,推测其蛋白质分子量为56.697 kDa。序列分析及分子系统进化树结果表明：金钱鱼Cyp19a1b氨基酸序列与黄锡鲷和舌齿鲈Cyp19a1b同源性较高,分别为86.2%、86.5%,与鲤鱼（Cyprinus carpio）、稀有鲫（Gobiocypris rarus）、斑马鱼（Danio rerio）、赤点石斑鱼（Epinephelus akaara）、大黄鱼（Larimichthys crocea）、南方大口鲇（Silurus meridionalis）和鲻鱼（Mugil cephalus）Cyp19a1b同源性为64.1%-84.4%,但与上述7种鱼性腺芳香化酶（Cyp19a1a）同源性低于63.5%,同源性分析结果与根据传统形态学和生化特征分类的结果相一致。荧光定量PCR结果显示,随处理时间的延长,26℃和29℃组金钱鱼脑垂体中Cyp19a1b mRNA的表达量都逐渐降低,但29℃组显著低于26℃组（P〈0.05）,而23℃组在6周时则显著高于26℃和29℃组（P〈0.05）,约为26℃组2倍的表达量;鱼油处理3个投喂组脑垂体中Cyp19a1b mRNA的表达量均逐渐降低,但鱼油对金钱鱼脑垂体中Cyp19a1b mRNA的表达量无显著影响（P〉0.05）。以上结果表明：随着卵巢发育或鱼油含量的提高,可降低雌性金钱鱼脑垂体中Cyp19a1b mRNA的表达,这种降低可能是E2反馈调节所致;水温高于26℃将抑制Cyp19a1b mRNA的表达。
关键词
金钱鱼(Scatophagus
argue
Linnaeus)
温度
鱼油
芳香化酶
MRNA表达
Keywords
Scatophagus argus
temperature
fish oil
cyp19al
mRNA expression
分类号
S917 [农业科学—水产科学]
下载PDF
职称材料
题名
Cyp19a1基因在中华鳖早期卵巢分化中的功能研究
被引量：
12
2
作者
包海声
蔡晗
韩伟
张海艳
孙伟
葛楚天
钱国英
机构
浙江万里学院生物与环境学院
上海海洋大学水产与生命学院
出处
《中国科学：生命科学》
CSCD
北大核心
2017年第6期640-649,共10页
基金
浙江省自然科学基金(批准号:LY14C190008)
浙江省农业(水产)新品种选育重大科技专项(批准号:2016C02055-4-1)
浙江省重中之重学科"生物工程"开发基金(批准号:ZS2016007)资助
文摘
芳香化酶是雌激素合成的关键酶,在非哺乳类脊椎动物的早期雌性性腺分化中起重要的调控作用.本研究首先分析了中华鳖(Pelodiscus sinensis)芳香化酶编码基因Cyp19a1在不同组织及不同发育时期雌雄胚胎性腺中的表达情况;其次,利用芳香化酶抑制剂(AI)和慢病毒RNA干扰及过表达技术,进行Cyp19a1基因的功能验证研究.研究结果表明,Cyp19a1基因在中华鳖成体卵巢组织中高度特异性表达,睾丸和心、肝、脾、肺、肾、肌、肠中未见表达.同时发现,Cyp19a1基因在第18期就呈现雌性性腺特异性表达,早于性腺分化启动时间(第19期).功能缺失实验表明,经过AI及Cyp19a1-shRNA处理后,ZW胚胎性腺皮质区退化,髓质区高度发育,形成原始性索结构,呈现雌性向雄性性逆转现象;同时雌性标记基因Foxl2的表达量下调,雄性标记基因Amh的表达量则显著上调.功能获得实验则表明,Cyp19a1过表达后的ZZ型性腺皮质区高度发育,髓质区退化,形成空洞结构,呈典型雌性特征,同时Foxl2基因的表达量上升,Amh的表达量显著降低.综上所述,本文证明了Cyp19a1是中华鳖早期卵巢分化的关键调控因子,为中华鳖性别分化机制研究奠定了基础.
关键词
cyp19al
性腺分化
雌性
中华鳖
Keywords
Cyp19a1, gonadal differentiation, female, Pelodiscus sinensis
分类号
S917.4 [农业科学—水产科学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
金钱鱼脑型芳香化酶基因cDNA的克隆及表达分析
张敏智
李广丽
朱春华
邓思平
《海洋科学》
CAS
CSCD
北大核心
2014
2
下载PDF
职称材料
2
Cyp19a1基因在中华鳖早期卵巢分化中的功能研究
包海声
蔡晗
韩伟
张海艳
孙伟
葛楚天
钱国英
《中国科学：生命科学》
CSCD
北大核心
2017
12
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