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用全DNA转化法构建多功能石油降解菌 被引量:12
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作者 高枫 张心平 +2 位作者 梁凤来 刁虎欣 刘如林 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期158-162,共5页
以嗜蜡的不动杆菌4-1 作为受体菌,经溶菌酶破壁后,用嗜胶的假单胞菌Z17 的全DNA 转化,经再生后用只含高胶油的选择培养基筛选出转化子不动杆菌ZH20.破壁及再生的最佳条件为:溶菌酶浓度1.5m g/m L,37℃水... 以嗜蜡的不动杆菌4-1 作为受体菌,经溶菌酶破壁后,用嗜胶的假单胞菌Z17 的全DNA 转化,经再生后用只含高胶油的选择培养基筛选出转化子不动杆菌ZH20.破壁及再生的最佳条件为:溶菌酶浓度1.5m g/m L,37℃水浴保温40m in,破壁率为93.8% ,再生率达到30.2% ;转化条件为:30% PEG6000,50m m ol/LCaCl2 ,于37℃保温20m in.ZH20 具有嗜高胶油和高蜡油的双重性状,50℃条件下使高胶油粘度降低22.2% ,使高蜡油的凝固点降低2.5℃,且保持了受体菌的耐热和耐盐性能.液蜡培养基连续传代10 次,性能稳定. 展开更多
关键词 不动杆菌sp 假单胞菌sp dna转化 石油降解
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离子束介导外源全DNA转化对作物改良的原理初探 被引量:10
2
作者 卞坡 霍裕平 +1 位作者 秦广雍 王燕 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2002年第12期8-10,共3页
远缘杂交的实质是分子水平的片段杂交 ,进化过程中物种间的渐渗杂交是远缘杂交的自然形式 ,从而认为物种间分子水平上的片段杂交具有进化意义。离子束介导外源全DNA转化具有相似的机理。一些渐渗杂交引起的进化现象 。
关键词 作物改良 物种进化 渐渗杂交 远缘杂交 离子束介导全dna转化 物种形成 技术原理
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离子束介导甘蓝全DNA转化拟南芥菜的RAPD分析 被引量:5
3
作者 卞坡 秦广雍 +2 位作者 余增亮 霍裕平 王燕 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期350-353,共4页
在离子束介导甘蓝外源全DNA转化拟南芥菜的当代发现了 2株表型变异株 ,以其中的1株 (编号为T6)作为研究对象 ,用 40对 1 0碱基的随机引物对该株和其后代株进行RAPD分析 ,发现S1 68号引物对T6和其后代株的RAPD结果与对照相比有明显差异 ... 在离子束介导甘蓝外源全DNA转化拟南芥菜的当代发现了 2株表型变异株 ,以其中的1株 (编号为T6)作为研究对象 ,用 40对 1 0碱基的随机引物对该株和其后代株进行RAPD分析 ,发现S1 68号引物对T6和其后代株的RAPD结果与对照相比有明显差异 ,说明离子束介导外源基因转化可以引起受体基因组变异 ,并且该变异有遗传性。对差异条带测序后同拟南芥菜基因组序列比对 。 展开更多
关键词 甘蓝 dna转化 离子束介导 拟南芥菜 RAPD分析
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DNA转化和共培养研究淋球菌对大观霉素的耐药机制 被引量:3
4
作者 蒋法兴 朱文 +1 位作者 乐文静 苏晓红 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第9期1006-1009,共4页
目的通过DNA转化和共培养研究淋球菌(NG)对大观霉素的耐药机制。方法将3株大观霉素耐药环丙沙星敏感的供体NG[大观霉素最小抑菌浓度(MIC)512 mg/L]与大观霉素敏感环丙沙星耐药的受体NG共培养,并将耐药菌株的DNA转化至大观霉素敏感的受... 目的通过DNA转化和共培养研究淋球菌(NG)对大观霉素的耐药机制。方法将3株大观霉素耐药环丙沙星敏感的供体NG[大观霉素最小抑菌浓度(MIC)512 mg/L]与大观霉素敏感环丙沙星耐药的受体NG共培养,并将耐药菌株的DNA转化至大观霉素敏感的受体菌中。分别将供体菌、受体菌及共培养和DNA转化得到的NG的16sRNA基因扩增并测序,分析可能导致大观霉素耐药的基因突变。结果共培养后和DNA转化得到耐大观霉素的NG株(大观霉素MIC 512 mg/L),PCR扩增和DNA测序分析发现所有大观霉素耐药的NG均发现16sRNA基因胞嘧啶(C)1192胸腺嘧啶(T)突变,大观霉素敏感的受体菌未发现突变。结论共培养和DNA转化可以用于NG耐药机制研究,NG16SrRNA基因C1192T突变导致大观霉素对NG耐药。 展开更多
关键词 dna转化 共培养 淋球菌 大观霉素 16SrRNA
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赤霉菌原生质体DNA转化 被引量:6
5
作者 朱平 杨金玲 +1 位作者 朱慧新 程克棣 《菌物系统》 CSCD 北大核心 2000年第2期283-287,共5页
Methods for the protoplast preparation and DNA transformation of Gibberella fujikuroi were established. The protoplasts were transformed with plasmid pAN7-1, which carries hygromycin B resistant gene (hPh), and the tr... Methods for the protoplast preparation and DNA transformation of Gibberella fujikuroi were established. The protoplasts were transformed with plasmid pAN7-1, which carries hygromycin B resistant gene (hPh), and the transformation frequency was about 10. Some transformants grew vigorously on the selectivemedium containing 400μg / ml of hygromycin B, while the minimum inhibitory concentration (MIC) of the antibiotic to the recipient strain was oniy 20μg / ml. Southern hybridization showed that the hph gene has integrated into the genomic DNA of the recipient strain in different manners. 展开更多
关键词 赤霉菌 原生质体 dna转化 潮霉素B抗性基因
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不同离子剂量介导外源薄荷全DNA转化对拟南芥菜生长发育的影响 被引量:3
6
作者 卞坡 苏明杰 +2 位作者 陈林海 秦广雍 霍裕平 《激光生物学报》 CAS CSCD 2003年第5期332-336,共5页
在离子束介导外源全DNA转化中,外源DNA包含有供体的所有遗传信息,对受体的影响是多方面的,因此转化效果无法用统一的转化率来衡量,这也增加了转化过程中最佳转化条件的选择难度。本论文的主要工作是根据不同离子剂量介导外源全DNA转化... 在离子束介导外源全DNA转化中,外源DNA包含有供体的所有遗传信息,对受体的影响是多方面的,因此转化效果无法用统一的转化率来衡量,这也增加了转化过程中最佳转化条件的选择难度。本论文的主要工作是根据不同离子剂量介导外源全DNA转化的拟南芥菜在遗传和生理上的变化选择合适的转化剂量。剂量实验结果表明:拟南芥菜种子的剂量-存活率曲线为"马鞍型",在"鞍桥"上选择0.5×1017ions/cm2、1.5×1017ions/cm2和2.5×1017ions/cm2三个有代表性的剂量介导薄荷全DNA转化拟南芥菜,三个转化当代群体的出芽、成苗长势以及表型变异情况有明显的不同,综合分析表明:1.5×1017ions/cm2为离子束介导外源全DNA转化拟南芥菜的合适剂量。 展开更多
关键词 拟南芥菜 dna转化 最佳剂量
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柑橘和拟南芥RIN4基因的过表达载体构建及其对沙田柚的DNA转化 被引量:1
7
作者 李菊 程春振 +3 位作者 张永艳 钟云 钟广炎 陆智明 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期16-21,共6页
用逆转承-cDNA聚合酶链式扩增(RT-PCR)方法 ,分别从克里曼丁橘和拟南芥中克隆出RIN4基因,连接到表达载体pFGC5941,构建了柑橘CcRIN4和拟南芥AtRIN4基因的过表达载体,并成功转入EHA105农杆菌.通过农杆菌介导法将过表达载体转入沙田柚,获... 用逆转承-cDNA聚合酶链式扩增(RT-PCR)方法 ,分别从克里曼丁橘和拟南芥中克隆出RIN4基因,连接到表达载体pFGC5941,构建了柑橘CcRIN4和拟南芥AtRIN4基因的过表达载体,并成功转入EHA105农杆菌.通过农杆菌介导法将过表达载体转入沙田柚,获得柑橘和拟南芥RIN4基因的转基因沙田柚植株各6株. 展开更多
关键词 表达载体构建 转基因 拟南芥 沙田柚 dna转化 柑橘 农杆菌介导法 dna聚合酶
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洁净DNA转化获得2mG2-epsps基因单拷贝整合的抗草甘膦水稻 被引量:7
8
作者 赵艳 邓春泉 邓丽蝶 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期15-22,共8页
洁净DNA转化是基因枪介导外源基因表达框导入植物的转化技术,能从根本上消除载体框架序列对转基因植株的不利影响。2mG2-epsps基因是具有重要育种价值的草甘膦除草剂抗性基因。以日本晴为材料,研究了草甘膦对水稻愈伤组织生长及分化的影... 洁净DNA转化是基因枪介导外源基因表达框导入植物的转化技术,能从根本上消除载体框架序列对转基因植株的不利影响。2mG2-epsps基因是具有重要育种价值的草甘膦除草剂抗性基因。以日本晴为材料,研究了草甘膦对水稻愈伤组织生长及分化的影响,采用洁净DNA转化技术将2mG2-epsps基因表达框导入水稻。结果表明:1)草甘膦对水稻愈伤组织的生长及分化有明显的抑制作用,当草甘膦浓度为2mmol/L时,愈伤组织绿苗分化率为18.97%,较对照71.67%显著降低。2)基因枪介导2mG2-epsps基因表达框转化水稻时,经草甘膦筛选获得抗性愈伤后,在植株再生培养基中去除筛选剂利于抗性愈伤的分化,转化率为17.20%。经Southern杂交分析,2mG2-epsps基因表达框均以单拷贝整合到受体基因组。52.17%(12/23)转基因株系可耐受12~50mmol/L的草甘膦。 展开更多
关键词 水稻 2mG2-epsps 洁净dna转化 单拷贝
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3种丝状真菌的原生质体制备条件、耐药性和DNA转化之研究
9
作者 朱平 赵鸿莲 +2 位作者 朱慧欣 程克棣 J.F.Peberdy 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第S1期72-72,共1页
本文探讨了构巢曲霉(Aspergillus nidulans)、米曲霉(Aspergillus oryzae)和赤霉菌(Gibberella fujikuroi)的原生质体制备条件以及耐药情况,首先以构巢曲霉为受体菌进行了以苯菌灵抗性为选择标记的DNA转化.为在以后的DNA转化中有效地利... 本文探讨了构巢曲霉(Aspergillus nidulans)、米曲霉(Aspergillus oryzae)和赤霉菌(Gibberella fujikuroi)的原生质体制备条件以及耐药情况,首先以构巢曲霉为受体菌进行了以苯菌灵抗性为选择标记的DNA转化.为在以后的DNA转化中有效地利用抗药标记,分析了构巢曲霉和米曲霉对于抗真菌抗生素潮霉素(Hygromycin B)的天然耐受性.二者尤其是米曲霉,对潮霉素的敏感性非常低,甚至在潮霉素浓度为400μg/mL时,米曲霉仍能较为旺盛地生长;潮霉素浓度为300μg/mL时构巢曲霉也不能完全抑制.假若完全抑制其生长,用药量将很大,鉴于潮霉素价格较为昂贵,故潮霉素抗性作为这两个菌株转化后的筛选标记不太合适.测定了构巢曲霉、米曲霉和赤霉菌对于杀真菌剂苯菌灵的天然耐受性,3个菌种对苯菌灵均十分敏感,最低抑菌浓度(MIC)大约在2.0~3.0μg/mL的范围.因此用苯菌灵抗性作为这3个菌株DNA转化后筛选标记是可取的.由于苯菌灵浓度在2.0~3.0μg/mL范围时上述菌种仍然有十分缓慢的残余生长,筛选转化子时苯菌灵在选择性培养基中的浓度可适当提高.质粒pBT6含有苯菌灵抗性基因[该基因系从脉孢菌(Neurospora crassa)抗性变株中克隆得到的β-tubulin基因],首先用其转化构巢曲霉原生质体.实验中观察到直接把转化后的原生质体涂布到含药? 展开更多
关键词 真菌 原生质 dna转化 耐药性
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不同水稻受体材料对洁净DNA转化效率的影响
10
作者 赵潇 《江苏农业科学》 北大核心 2014年第6期43-46,共4页
选取不同诱导条件(28℃光照、28℃黑暗、32℃光照、32℃黑暗),不同继代次数初代培养、1次继代培养、2次继代培养的愈伤组织,分别作为转化受体材料,研究不同受体材料对洁净DNA转化效率的影响。结果表明,32℃光培养诱导的愈伤经过1次继代... 选取不同诱导条件(28℃光照、28℃黑暗、32℃光照、32℃黑暗),不同继代次数初代培养、1次继代培养、2次继代培养的愈伤组织,分别作为转化受体材料,研究不同受体材料对洁净DNA转化效率的影响。结果表明,32℃光培养诱导的愈伤经过1次继代后作为转化受体材料,得到的转化效率最高,达到9.32%。 展开更多
关键词 水稻 受体材料 洁净dna转化 转化效率
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耐辐射球菌中priA类似基因突变对DNA修复和DNA转化的影响 被引量:2
11
作者 王媛 华跃进 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期73-79,共7页
DNA损伤很易阻断复制叉的前进。损伤DNA的修复以及接下来停止复制叉的重启动过程对细胞生存极为重要。依赖于PriA的复制重启动机制是细菌复制重启动的主要途径。为了解priA类似基因Dr2606在耐辐射球菌中的作用,并检测Dr2606在DNA修复中... DNA损伤很易阻断复制叉的前进。损伤DNA的修复以及接下来停止复制叉的重启动过程对细胞生存极为重要。依赖于PriA的复制重启动机制是细菌复制重启动的主要途径。为了解priA类似基因Dr2606在耐辐射球菌中的作用,并检测Dr2606在DNA修复中的作用,本研究用卡那霉素抗性基因代替Dr2606阅读框,构建了Dr2606缺失突变株,并对突变株进行UV和丝裂霉素处理,测定了Dr2606突变株的转化效率。Dr2606的突变导致菌体生长缓慢,细胞生存率急剧下降。意外的是,耐辐射球菌的DNA修复能力没有削弱。但突变株的转化效率大大削弱。这说明在耐辐射球菌中priA类似基因Dr2606对停止复制叉的重启动过程并不是必需的;耐辐射球菌不依赖于原点的复制重启动过程可能与其他细菌不同。 展开更多
关键词 PRIA 耐辐射球菌 dna修复 dna转化效率
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东方拟无枝酸菌DNA转化系统的建立 被引量:1
12
作者 贾素娟 陈代杰 许文思 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期332-335,共4页
对东方拟无枝酸菌HCCB10007原生质体制备和再生条件进行了探索,结果表明以含2%甘氨酸的TSB培养基培养菌丝体,28℃经1mg/ml溶菌酶处理30min,形成的原生质体约达107个/ml,原生质体再生率为2.5%。将来源于HCCB10007的gtfE基因通过安普霉素... 对东方拟无枝酸菌HCCB10007原生质体制备和再生条件进行了探索,结果表明以含2%甘氨酸的TSB培养基培养菌丝体,28℃经1mg/ml溶菌酶处理30min,形成的原生质体约达107个/ml,原生质体再生率为2.5%。将来源于HCCB10007的gtfE基因通过安普霉素抗性基因插入失活,构建质粒pLY26并经PEG介导转化HCCB10007原生质体,PCR鉴定结果表明转化成功。 展开更多
关键词 东方拟无枝酸菌 dna转化系统 原生质体 再生条件 疗效
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电穿孔脉冲宽度对细胞融合及DNA转化的作用研究 被引量:1
13
作者 郭明霞 汪和睦 《山西医药杂志》 CAS 1996年第4期285-286,共2页
利用细胞电穿孔技术,在不同宽度的RC放电脉冲条件下,对BALB/C小鼠的脾细胞和NSI骨髓瘤细胞的融合率及质粒PUC—18导入E.coliHB101细胞的转化率进行了检测。实验结果显示出细胞电穿孔技术中,脉冲宽度选择... 利用细胞电穿孔技术,在不同宽度的RC放电脉冲条件下,对BALB/C小鼠的脾细胞和NSI骨髓瘤细胞的融合率及质粒PUC—18导入E.coliHB101细胞的转化率进行了检测。实验结果显示出细胞电穿孔技术中,脉冲宽度选择的重要性。 展开更多
关键词 细胞电穿孔 细胞电融合 dna转化 脉冲宽度
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大赖草总DNA转化小麦叶片mRNA差异显示技术中总RNA提取和反转录活性研究
14
作者 李静 赵民安 +4 位作者 郝秀英 王晓军 曹玉锦 胡石开 唐晓义 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第11期4917-4919,共3页
[目的]研究大赖草总DNA转化小麦叶片mRNA差异显示技术中总RNA的质量及反转录活性。[方法]在大赖草总DNA转化小麦幼苗叶片mRNA差异显示相关试验中,利用改进的TRIzol法,从幼苗叶片中提取总RNA,紫外光谱分析,1.2%琼脂糖电泳检测,并进行随... [目的]研究大赖草总DNA转化小麦叶片mRNA差异显示技术中总RNA的质量及反转录活性。[方法]在大赖草总DNA转化小麦幼苗叶片mRNA差异显示相关试验中,利用改进的TRIzol法,从幼苗叶片中提取总RNA,紫外光谱分析,1.2%琼脂糖电泳检测,并进行随机引物RT-PCR扩增。[结果]OD260 nm/OD280 nm比值为1.95~1.98;总RNA和RT-PCR电泳条带均表现出整齐、清晰。[结论]获得的总RNA质量好、纯度高,有很高的反转录活性,完全适合于进一步的分子生物学研究。 展开更多
关键词 大赖草总dna转化小麦 差别显示 RNA 提取 反转录活性
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植物病原真菌的DNA转化
15
作者 但汉鸿 吴纯仁 +1 位作者 王道本 李国庆 《生物技术通报》 CAS CSCD 1994年第3期1-5,共5页
一、绪论 所有植物都易受真菌侵害。全世界由植物病原真菌引起的植物病害对栽培植物和森林树木造成了严重的损害。已知的植物病原真菌大约8000种,分属于真菌所有的主要分类类群。它们的生理特性及生活方式各不相同,包括从营专性寄生到... 一、绪论 所有植物都易受真菌侵害。全世界由植物病原真菌引起的植物病害对栽培植物和森林树木造成了严重的损害。已知的植物病原真菌大约8000种,分属于真菌所有的主要分类类群。它们的生理特性及生活方式各不相同,包括从营专性寄生到兼性寄生等类型。 过去,由于成功地培育和采用了抗病性增强的植物品种,加之运用多种化学防治方法,真菌病害得到了控制,但未能被消除。 展开更多
关键词 植物病原真菌 dna转化 抗生素抗性 转化 专性寄生 潮霉素 兼性寄生 选择标记 氟乳清酸 化学防治方法
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血型链球茵的DNA转化及其生态学特征的研究
16
作者 边专 樊明文 《口腔医学纵横》 CSCD 1990年第3期136-139,共4页
人类口腔中血型链球菌的转化率为14.3%.血链耐链霉素转化子能在成年大白鼠口腔中定居且定居时间长达55天。临床新鲜分离株在大白鼠口腔中定居的时间明显较实验室保存株长,采用洗必太预处理大白鼠口腔有助于接种菌在大白鼠口腔中的定居。
关键词 血型链球菌 dna转化 接种 洗必太
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用离子束介导外源全DNA转化拟南芥菜的诱变体
17
《生物技术通报》 CAS CSCD 2005年第4期81-82,共2页
植物特别是高等植物在漫长的历史形成过程中所具有的遗传保守性一般很不易打破,但用生物技术方法,目前可以打破,且可创造新的突变体和新物种,由此可达此目的。例如郑州大学离子束生物工程实验室的卞坡博士和华中农业大学食品科技学... 植物特别是高等植物在漫长的历史形成过程中所具有的遗传保守性一般很不易打破,但用生物技术方法,目前可以打破,且可创造新的突变体和新物种,由此可达此目的。例如郑州大学离子束生物工程实验室的卞坡博士和华中农业大学食品科技学院的谈重芳先生等利用离子束介导外源全DNA转化拟南芥菜的诱变效应就是例证之一。 展开更多
关键词 离子束 外源全dna转化 诱变体 遗传保守性 生物技术 拟南芥菜 十字花科
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基于矿石纳米材料的DNA转化的机理初探及方法改进 被引量:2
18
作者 谭海东 王磊 +1 位作者 林金涛 赵宗保 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1379-1384,共6页
一种价格便宜、资源丰富和对人体无害的矿石纳米材料——海泡石,用于微生物DNA转化。该法简便、快速、对人体健康无害,但对这种转化方法机制的理解还有很多问题。通过小片段RNA竞争试验,发现了与先前报道不同的转化机制。同时,对该法进... 一种价格便宜、资源丰富和对人体无害的矿石纳米材料——海泡石,用于微生物DNA转化。该法简便、快速、对人体健康无害,但对这种转化方法机制的理解还有很多问题。通过小片段RNA竞争试验,发现了与先前报道不同的转化机制。同时,对该法进行了优化,结果可以实现对冷藏1个月的大肠杆菌EscherichiacoliDH5α单菌落直接转化,无需感受态制备和处理后的温育过程,可得到比钙转高的转化率。由于可优化的参数很多,所以这种转化方法可以提升的空间很大。同时,该方法可用于探索其他用钙转和电转未成功的微生物。 展开更多
关键词 矿石纳米纤维材料 海泡石 dna转化 转化机制
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红曲霉T-DNA插入转化库中桔霉素突变子的筛选 被引量:2
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作者 丁月娣 邵彦春 +1 位作者 许一平 陈福生 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期52-57,共6页
以农杆菌介导法建立的红曲霉T—DNA转化库为实验材料,采用抑菌圈法从5,000多个转化子中筛选出200株桔霉素突变子的候选菌株,用高效液相色谱法进一步筛选得到53株与出发菌株相比产桔霉素能力发生显著变化的突变子,其红曲中桔霉素含... 以农杆菌介导法建立的红曲霉T—DNA转化库为实验材料,采用抑菌圈法从5,000多个转化子中筛选出200株桔霉素突变子的候选菌株,用高效液相色谱法进一步筛选得到53株与出发菌株相比产桔霉素能力发生显著变化的突变子,其红曲中桔霉素含量介于0.04~154.57μg/g之间。进一步分析了突变子的红曲色价,发现突变子产桔霉素能力与产色素能力之间有一定的相关性。这些研究结果为进一步从分子水平上探讨红曲霉产桔霉素和色素等次生代谢产物之间的关系提供了材料和基础。 展开更多
关键词 红曲霉 桔霉素 高效液相色谱 农杆菌介导的dna转化
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黑曲霉柠檬酸工业菌株原生质体制备与转化 被引量:12
20
作者 张晓立 郑小梅 +5 位作者 满云 罗虎 于建东 郑平 刘浩 孙际宾 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期171-177,共7页
黑曲霉是柠檬酸工业化生产的主要发酵菌株。尽管现代遗传操作技术在黑曲霉的实验室菌株、蛋白质生产菌株等的应用中获得了成功,但是柠檬酸工业菌株遗传转化异常困难,成为柠檬酸工业持续升级的重要限制因素。以柠檬酸工业生产实际应用的... 黑曲霉是柠檬酸工业化生产的主要发酵菌株。尽管现代遗传操作技术在黑曲霉的实验室菌株、蛋白质生产菌株等的应用中获得了成功,但是柠檬酸工业菌株遗传转化异常困难,成为柠檬酸工业持续升级的重要限制因素。以柠檬酸工业生产实际应用的黑曲霉菌株为研究对象,对其原生质体的制备与再生以及PEG介导的转化等条件进行了细致优化。结果表明,柠檬酸高产工业菌株原生质体的制备需选取丰富培养基中培养48 h的年轻菌丝体,在1.5%裂解酶-0.5%蜗牛酶-0.2%溶菌酶的复合酶解体系下裂解2.5 h,原生质体的制备浓度可达106个/m L以上,原生质体再生效率可达90%以上。原生质体的浓度是原生质体-PEG介导转化方法的关键,当原生质体浓度达到106个/m L以上时,高产柠檬酸菌株的转化效率大幅提高。成功建立了由原生质体-PEG所介导的高产柠檬酸黑曲霉菌株的遗传转化体系。 展开更多
关键词 黑曲霉 柠檬酸 遗传操作系统 原生质体 dna转化
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