Drosha水平与胃腺癌恶性程度及侵袭呈负相关 被引量：4

1

作者 张海龙 徐丽云 +3 位作者 周明莉 杜燕娥 文思阳 柳满然 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1519-1522,1527,共5页

目的研究Drosha蛋白在胃腺癌发展进程中的意义及与患者预后的相关性,探究Drosha对胃癌细胞SGC-7901侵袭能力的影响。方法免疫组织化学染色及Image-Pro Plus软件检测组织芯片889例胃腺癌组织样本中Drosha的表达量,统计分析Drosha与各临... 目的研究Drosha蛋白在胃腺癌发展进程中的意义及与患者预后的相关性,探究Drosha对胃癌细胞SGC-7901侵袭能力的影响。方法免疫组织化学染色及Image-Pro Plus软件检测组织芯片889例胃腺癌组织样本中Drosha的表达量,统计分析Drosha与各临床参数及309例胃腺癌患者预后的关系;小干扰RNA(siRNA)干扰人胃腺癌细胞株SGC-7901中Drosha的表达,TranswellTM侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果 Drosha在高分化胃腺癌组织中高表达(吸光度值中位值为0.4195),在中分化胃腺癌中表达降低、在低分化腺癌中低表达;Drosha的表达与肿瘤大小、Lauren分型、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、肿瘤病理分级及病理分期相关;生存分析显示Drosha高表达的患者拥有更高的生存率;敲低SGC-7901细胞的Drosha水平后,细胞侵袭能力显著增强。结论 Drosha蛋白水平随胃腺癌分化程度降低而逐渐降低,敲低Drosha水平可促进胃癌细胞的侵袭。 展开更多

关键词 drosha 胃腺癌 免疫组织化学技术 侵袭能力

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Drosha在子宫内膜癌组织中的差异表达及临床意义 被引量：4

2

作者 何中慧 徐红 +3 位作者 况燕 徐文生 蒙玉刚 徐朝欢 《天津医药》 CAS 2015年第4期383-385,共3页

目的探讨Drosha在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义。方法应用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和Western blot检测正常子宫内膜组织(25例)、不典型增生子宫内膜组织(20例)及子宫内膜癌组织(40例)中Drosha的表达,分析Drosha在子宫内膜癌组织... 目的探讨Drosha在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义。方法应用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和Western blot检测正常子宫内膜组织(25例)、不典型增生子宫内膜组织(20例)及子宫内膜癌组织(40例)中Drosha的表达,分析Drosha在子宫内膜癌组织中的表达与临床病理因素之间的关系。结果子宫内膜癌组Drosham RNA及蛋白表达水平均低于不典型增生子宫内膜组及正常子宫内膜组(均P<0.05),不典型增生子宫内膜组及正常子宫内膜组的表达差异无统计学意义(均P>0.05)。不同年龄、组织分级、病理分型、淋巴结转移、肌层浸润深度和FIGO分期的子宫内膜癌患者的Drosha m RNA表达差异无统计学意义(均P>0.05)。结论 Drosha在子宫内膜癌组织中表达下调,可能与子宫内膜癌的发生发展有关。 展开更多

关键词 子宫内膜癌 印迹法 蛋白质 drosha 实时荧光定量PCR 临床病理特征

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miRNA的重要调节者Dicer和Drosha与子宫内膜异位症的相关性研究 被引量：2

3

作者 林蓓蓓 张怡 +6 位作者 徐扬 裴琛琳 曹娥香 彭国庆 朱欣 赵延华 蔡净亭 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第1期78-85,共8页

利用荧光定量PCR和Western blot检测证实,在异位的子宫内膜组织中Dicer和Drosha的表达低于在位子宫内膜组织,随后体外培养在位子宫内膜组织,采用siRNA干扰Dicer和Drosha,发现与干扰对照组相比,子宫内膜细胞的增殖加快而凋亡减少;同时EL... 利用荧光定量PCR和Western blot检测证实,在异位的子宫内膜组织中Dicer和Drosha的表达低于在位子宫内膜组织,随后体外培养在位子宫内膜组织,采用siRNA干扰Dicer和Drosha,发现与干扰对照组相比,子宫内膜细胞的增殖加快而凋亡减少;同时ELISA检测显示转化生长因子-β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)的表达上调;Western blot检测显示凋亡抑制蛋白Bcl2表达增加而促凋亡蛋白Bax的表达减少.结果表明,miRNA的重要调节者Dicer和Drosha可以影响TGF-β1及Bcl2/Bax的表达进而影响细胞的增殖和凋亡,从而参与了子宫内膜异位症的形成. 展开更多

关键词 子宫内膜细胞 DICER drosha 转化生长因子Β1

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下调Drosha基因表达促进MGC-803胃癌细胞对表阿霉素的敏感性 被引量：1

4

作者 徐丽云 陈燕林 +3 位作者 文思阳 杜燕娥 唐曦 柳满然 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1207-1211,共5页

目的构建Drosha基因稳定沉默的胃癌细胞株并探讨其对表阿霉素敏感性的影响。方法将靶向干扰Drosha的序列重组到慢病毒载体并感染MGC-803细胞;采用实时定量PCR检测Drosha mRNA水平、Western blot法检测Drosha蛋白水平;MTT法检测野生型MGC... 目的构建Drosha基因稳定沉默的胃癌细胞株并探讨其对表阿霉素敏感性的影响。方法将靶向干扰Drosha的序列重组到慢病毒载体并感染MGC-803细胞;采用实时定量PCR检测Drosha mRNA水平、Western blot法检测Drosha蛋白水平;MTT法检测野生型MGC-803细胞对表阿霉素的半数抑制剂量(IC50);流式细胞术检测用IC50的表阿霉素处理后各组细胞的凋亡率,Western blot法检测凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-9、Bax、Bcl-2的蛋白水平。结果成功构建稳定Drosha基因沉默的MGC-803细胞株;下调Drosha后,经0.5 mg/L(IC50)表阿霉素处理,MGC-803细胞凋亡率明显增加,MGC-803细胞caspase-3、caspase-9、Bax表达上调,Bcl-2表达降低。结论沉默细胞中Drosha表达能提高胃癌细胞对表阿霉素的敏感性。 展开更多

关键词 drosha MGC-803胃癌细胞 表阿霉素

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甲状腺激素受体与Drosha蛋白互作鉴定分析 被引量：1

5

作者 尚攀 付元帅 +2 位作者 施志仪 喻杰 刘素萍 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期206-212,共7页

为了证明甲状腺激素受体(THR)与Drosha蛋白之间的相互作用,以HEK293细胞为材料,利用免疫共沉淀的方法获得蛋白免疫复合物,再经Western blot检测和质谱分析。结果表明,用THR抗体Western blot检测出有THR蛋白的存在,反之Drosha抗体Western... 为了证明甲状腺激素受体(THR)与Drosha蛋白之间的相互作用,以HEK293细胞为材料,利用免疫共沉淀的方法获得蛋白免疫复合物,再经Western blot检测和质谱分析。结果表明,用THR抗体Western blot检测出有THR蛋白的存在,反之Drosha抗体Western blot检测有Drosha蛋白的存在;同时,THR抗体免疫沉淀后的质谱鉴定存在Drosha蛋白,Drosha抗体免疫沉淀后的质谱鉴定也存在THR蛋白,由此说明甲状腺激素受体与Drosha蛋白之间确实存在相互作用。并且,初步筛选出与两者共同作用的54个蛋白,经Go聚类分析揭示鉴定蛋白主要是细胞膜和细胞核中成分,参与细胞迁移、细胞凋亡、蛋白代谢、免疫应答、信号通路调节及转录调控等生物途径,具有核酸结合、细胞骨架结合等分子功能。 展开更多

关键词 甲状腺激素受体 drosha蛋白 免疫共沉淀 质谱分析 HEK293细胞

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Drosha基因在人卵巢癌顺铂耐药细胞中的表达研究 被引量：1

6

作者 况燕 蔡晶 +3 位作者 李桃 李东林 周隽 王泽华 《广西医学》 CAS 2012年第7期819-821,共3页

目的探讨Drosha基因和卵巢癌顺铂耐药的关系。方法分别采用实时定量PCR和免疫印迹法检测Drosha基因mRNA及其蛋白在A2780/DDP及A2780细胞中表达的差异。结果 A2780/DDP细胞中Drosha基因mRNA及其蛋白的表达量分别是A2780细胞表达量的(56.7... 目的探讨Drosha基因和卵巢癌顺铂耐药的关系。方法分别采用实时定量PCR和免疫印迹法检测Drosha基因mRNA及其蛋白在A2780/DDP及A2780细胞中表达的差异。结果 A2780/DDP细胞中Drosha基因mRNA及其蛋白的表达量分别是A2780细胞表达量的(56.79±1.65)%和(50.16±1.34)%,两者比较差异均有统计学意义(P<0.001)。结论 Drosha基因在A2780/DDP细胞中明显下调,提示Drosha基因和卵巢癌顺铂耐药相关。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 耐药性 drosha基因

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实时定量RT-PCR检测乳腺癌组织Drosha基因表达及其意义 被引量：1

7

作者 许国玺 王川 +1 位作者 傅芳萌 陈勇武 《中国现代医生》 2010年第16期1-3,共3页

目的通过检测Drosha在乳腺癌组织中的表达情况,探讨其在乳腺癌发生发展中的意义。方法乳腺癌肿瘤组织与正常乳腺组织标本各78例自身配对分成肿瘤组与正常组,提取总RNA,利用SYBR Green1实时定量RT-PCR方法检测Drosha基因mRNA的表达情况... 目的通过检测Drosha在乳腺癌组织中的表达情况,探讨其在乳腺癌发生发展中的意义。方法乳腺癌肿瘤组织与正常乳腺组织标本各78例自身配对分成肿瘤组与正常组,提取总RNA,利用SYBR Green1实时定量RT-PCR方法检测Drosha基因mRNA的表达情况。结果在mRNA水平上,Drosha基因在71.80%(56/78)的癌组织中下调,28.20%(22/78)上调。经REST软件分析,其表达下调具有统计学意义(P<0.01),Drosha mRNA低表达与TNM分期差异有统计学意义(P<0.01),与患者年龄、月经状态、肿瘤大小、淋巴结是否转移、组织学分级、激素受体状态(ER、PR和HER-2)等差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 Drosha基因在乳腺癌中表达下调,可能与乳腺癌的发生发展有关。 展开更多

关键词 乳腺癌 drosha 基因表达 实时定量RT-PCR

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DROSHA rs10719 T>C遗传变异与胃癌临床病理特征及预后的相关性分析 被引量：1

8

作者 李俊 钟军 +2 位作者 李国庆 吴新生 彭丽香 《实用癌症杂志》 2016年第12期1929-1932,共4页

目的 研究DROSHA rs10719 T〉C与胃癌临床病理特征及预后的关系。方法 97例接受奥沙利铂联合氟尿嘧啶类药物术后辅助化疗的Ⅰ~Ⅲ期胃癌患者,分析rs10719遗传变异与胃癌临床病理特征及预后的相关性。结果全组患者2年DFS为60.8%,3年OS为73... 目的 研究DROSHA rs10719 T〉C与胃癌临床病理特征及预后的关系。方法 97例接受奥沙利铂联合氟尿嘧啶类药物术后辅助化疗的Ⅰ~Ⅲ期胃癌患者,分析rs10719遗传变异与胃癌临床病理特征及预后的相关性。结果全组患者2年DFS为60.8%,3年OS为73.8%。显性模型与淋巴结转移相关,TC＋CC基因型患者淋巴结转移发生率低于TT基因型（P=0.031）。显性模型与临床分期显著相关,TT基因型中Ⅲ期患者明显多于TC＋CC基因型（P=0.021）。有、无淋巴结转移患者3年OS分别为89.3%和63.3%（P=0.013）,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者3年OS分别为100.0%、88.6%和55.8%（P=0.015）,具有显著统计学差异。rs10719遗传变异与患者生存无明显相关性。多因素预后分析显示,淋巴结状态（P=0.014,RR：9.556,95%CI：1.586~57.590）为独立预后因素。结论 DROSHA rs10719 T〉C遗传变异可能与胃癌患者淋巴结转移状态及临床分期相关。 展开更多

关键词 drosha 遗传变异 临床病理特征 预后

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Drosha蛋白在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

9

作者 曾宗跃 贾微 +2 位作者 杨欣 张海龙 柳满然 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期56-58,共3页

目的:探讨胰腺癌组织中Drosha蛋白表达状况及其临床意义。方法:收集胰腺癌样本85例及对应癌旁组织53例,采用H&E和免疫组化法检测胰腺癌组织标本中Drosha蛋白的表达并分析其与临床病理因素之间的关系。采用定量PCR方法检测Drosha基... 目的:探讨胰腺癌组织中Drosha蛋白表达状况及其临床意义。方法:收集胰腺癌样本85例及对应癌旁组织53例,采用H&E和免疫组化法检测胰腺癌组织标本中Drosha蛋白的表达并分析其与临床病理因素之间的关系。采用定量PCR方法检测Drosha基因表达。结果:胰腺癌组织中Drosha的表达阳性率为72.9%(62/85),而相应癌旁Drosha表达阳性率为100%(53/53),两者表达差异有统计学意义(P=0.000),Drosha蛋白在胰腺癌中的阳性强度平均积分值由10.3分降至2.3分。Drosha蛋白的表达与肿瘤的分期(c2=19.2,P=0.0003)、分级(c2=10.8,P=0.013)、淋巴结转移(c2=23.6,P=0.00003)等密切相关。与对应癌旁组织相比,Drosha基因在胰腺癌组织中表达下调(P=0.000)。结论:Drosha蛋白在胰腺癌组织中表达下降,Drosha可能在胰腺癌的发生、发展中具有重要作用。 展开更多

关键词 胰腺癌 drosha 免疫组化 临床意义

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人卵巢癌顺铂耐药细胞EZH2基因沉默对Drosha基因表达的影响

10

作者 况燕 蔡晶 +3 位作者 李桃 李东林 周隽 王泽华 《广西医学》 CAS 2012年第6期660-662,共3页

目的探讨RNA干扰沉默果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)基因对卵巢癌获得性耐药细胞株A2780/DDP的Drosha基因表达的影响。方法获得稳定表达EZH2短发夹状RNA(shRNA)的人卵巢癌获得性耐药细胞株A2780/DDP-shEZH2,实时荧光定量PCR法和免疫... 目的探讨RNA干扰沉默果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)基因对卵巢癌获得性耐药细胞株A2780/DDP的Drosha基因表达的影响。方法获得稳定表达EZH2短发夹状RNA(shRNA)的人卵巢癌获得性耐药细胞株A2780/DDP-shEZH2,实时荧光定量PCR法和免疫印记法检测转染株的Drosha基因表达。结果以未转染组A2780/DDP细胞Drosha的表达水平为100.00%,EZH2-shRNA转染组A2780/DDP-shEZH2细胞Drosha的mRNA及蛋白水平分别上升(53.33±9.24)%和(51.28±3.25)%。结论沉默EZH2基因可以上调Drosha基因的表达。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 EZH2基因 drosha基因 MicroRNA 抗药性

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三疣梭子蟹Drosha和Exportin 5基因克隆及其在性腺发育过程中的表达分析 被引量：1

11

作者 张小辉 孟宪亮 +4 位作者 高保全 刘萍 王竹青 张杰 蔡影 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2018年第3期126-136,共11页

本研究利用RACE技术克隆了三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)Drosha和Exportin 5基因的cDNA全长序列,Drosha基因长度为3443 bp,编码1038个氨基酸,预测蛋白质包含2个相邻的RNA酶Ⅲ结构域(RⅢDa和RⅢDb)和1个双链RNA结合结构域(dsRBD)... 本研究利用RACE技术克隆了三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)Drosha和Exportin 5基因的cDNA全长序列,Drosha基因长度为3443 bp,编码1038个氨基酸,预测蛋白质包含2个相邻的RNA酶Ⅲ结构域(RⅢDa和RⅢDb)和1个双链RNA结合结构域(dsRBD)。Exportin 5基因全长为5000 bp,编码1208个氨基酸,预测蛋白质包含1个Importin-βN-末端结构域(IBN-N)和1个核输出蛋白结构域(XPO-1)。同源分析显示,三疣梭子蟹Drosha氨基酸序列与其他物种高度相似,与日本对虾(Marsupenaeus japonicus)相似度最高,达94%。qRT-PCR分析结果显示,Drosha和Exportin 5基因在三疣梭子蟹各组织中均有表达,其在卵巢和肝胰腺中的表达量最高(P<0.05);在精巢不同发育时期,2个基因表达量的变化趋势一致,均在Ⅱ期(精母细胞增殖、分化期)表达量最高;在卵巢发育过程中,2个基因表达量的变化趋势也大致相同,随着卵巢发育(Ⅱ~Ⅴ期)逐渐升高。研究表明,Drosha和Exportin 5基因可能通过调控miRNA的合成来影响三疣梭子蟹性腺发育过程,为深入解析三疣梭子蟹性腺发育调控机制提供了重要参考。 展开更多

关键词 三疣梭子蟹 drosha Exportin5 基因克隆 基因表达

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人结直肠癌细胞Drosha基因敲除细胞模型的构建

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作者 李芸侨 李尚泽 +3 位作者 宋伟 王任先 张晓东 王琳芳 《医学研究杂志》 2014年第6期21-24,共4页

目的为研究核酸酶Drosha与结直肠癌的关系,利用腺相关病毒(AAV)介导的染色体同源重组技术,构建Drosha基因敲除的HCT116结直肠癌细胞模型。方法设计引物通过PCR扩增Drosha基因的同源臂,构建Drosha的AAV病毒打靶载体,通过病毒的包装、感... 目的为研究核酸酶Drosha与结直肠癌的关系,利用腺相关病毒(AAV)介导的染色体同源重组技术,构建Drosha基因敲除的HCT116结直肠癌细胞模型。方法设计引物通过PCR扩增Drosha基因的同源臂,构建Drosha的AAV病毒打靶载体,通过病毒的包装、感染、抗生素新霉素(G418)药物筛选、PCR以及Western blot鉴定获得基因敲除阳性细胞株,通过Cre病毒感染去除抗性基因,最终建立敲除Drosha基因的结直肠癌细胞模型。结果经过两轮打靶,分别将DNA双链上的Drosha基因去除并经Western blot鉴定,获得Drosha-/-阳性的HCT116细胞株。结论通过AAV病毒介导的染色体同源重组技术,成功构建Drosha基因敲除的HCT116细胞系。 展开更多

关键词 基因敲除 同源重组 结直肠癌

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miRNA成熟相关基因DICER、DROSHA、RAN基因多态性与不明原因复发流产的相关性研究 被引量：3

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作者 符梅 许文明 +1 位作者 覃太周 徐克惠 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期880-885,共6页

目的探讨miRNA成熟关键基因DICER、DROSHA和RAN的基因多态性与女性复发流产的相关性。方法收集2013年6月至2015年12月于四川大学华西第二医院就诊的不明原因复发流产(URSA)患者共217例,至少有1次生育史的育龄妇女为正常对照组390例,对... 目的探讨miRNA成熟关键基因DICER、DROSHA和RAN的基因多态性与女性复发流产的相关性。方法收集2013年6月至2015年12月于四川大学华西第二医院就诊的不明原因复发流产(URSA)患者共217例,至少有1次生育史的育龄妇女为正常对照组390例,对照组为同期进行体检和孕前检查育龄妇女。采用病例对照研究的方法,应用PCR-限制性片段长度多态性技术检测miRNA成熟过程中关键基因DICER rs3742330、DROSHArs10719和RAN rs14035单核苷酸多态性。结果 DICERrs3742330,DROSHArs10719和RANrs14035各等位基因和基因型频率在URSA组和对照组差异无统计学意义(P>0.05)。联合分析发现,DICERrs3742330/DROSHArs10719GG/TT+TC协同会增加复发流产的风险(OR=1.657,95%CI=1.006~2.731,P=0.047)。虽然DICERrs3742330/RANrs14035GG/TT+TC在URSA组较对照组增高,但差异无统计学意义(OR=1.977,95%CI=0.956~4.087,P=0.066),而DROSHA10719/RAN14035TT+TC/TT+TC与复发流产无相关性(OR=0.958,95%CI=0.679~1.353,P=0.808)。结论DICERrs3742330联合DROSHA rs10719可能与URSA相关。 展开更多

关键词 DICER drosha RAN 基因多态性 复发流产

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miRNA成熟关键基因DROSHA和DICER的多态性与无精症的相关性 被引量：3

14

作者 符梅 徐克惠 +1 位作者 叶峻杰 许文明 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期365-368,共4页

目的探讨miRNA成熟关键基因DICER和DROSHA多态性与男性无精症的相关性。方法应用PCR-限制性片段长度多态性技术，检测330例原发性无精症和282名正常生育男性DICER基因rs3742330和DROSHA基因rs10719多态位点的基因型和等位基因频率。结... 目的探讨miRNA成熟关键基因DICER和DROSHA多态性与男性无精症的相关性。方法应用PCR-限制性片段长度多态性技术，检测330例原发性无精症和282名正常生育男性DICER基因rs3742330和DROSHA基因rs10719多态位点的基因型和等位基因频率。结果病例组中DICER基因rs3742330位点A等位基因频率显著高于对照组（72．0％vs．64．4％），差异有统计学意义（P=0．004），病例组DICER基因rs3742330位点AA基因型频率高于对照组（53．0％vs．41．8％，95％CI：1．071-3．124），差异有统计学意义（P=0．027），而DROSHA基因rs10719位点等位基因频率及基因型频率在两组间的差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论DICER基因rs3742330位点多态性与无精症有关联，rs3742330AA基因型可能与无精症的发生存在关联。 展开更多

关键词 DICER基因 drosha基因 单核苷酸多态性 无精症

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基于p38 MAPK/Drosha信号通路探讨脑出血患者继发性脑损伤及神经细胞凋亡的机制 被引量：4

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作者 李丹 徐沙丽 周志林 《华南国防医学杂志》 CAS 2021年第11期786-791,795,共7页

目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)/Drosha信号通路对脑出血(intracerebral hemorage,ICH)继发性脑损伤(secondary brain injury,SBI)及神经细胞凋亡的影响。方法通过胶原酶注射建立的ICH小鼠模型... 目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)/Drosha信号通路对脑出血(intracerebral hemorage,ICH)继发性脑损伤(secondary brain injury,SBI)及神经细胞凋亡的影响。方法通过胶原酶注射建立的ICH小鼠模型。同时,将经氧合血红蛋白(oxyhemoglobin,OxyHb)处理的SH-SY5Y细胞用作体外ICH模型。小干扰RNA(siRNA)用于抑制ICH小鼠和SH-SY5Y细胞中p38表达。分别通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法和Nissl染色观察血肿形成及Nissl小体形成情况。Western blot分析p38 MAPK/Drosha信号通路表达情况。流式细胞术评估细胞凋亡情况。结果siRNA介导的p38敲除有效缓解了ICH小鼠血肿形成(P<0.05),减少了海马组织CA1和皮质区域的Nissl小体数量(P<0.05),增加了脑干重/湿重比值(P<0.05),并降低了神经行为评分(P<0.05)。此外,p38的敲除显著增加了ICH小鼠和OxyHb处理的SH-SY5Y细胞中Drosha蛋白水平(P<0.05),显著降低了OxyHb诱导的神经元凋亡率(P<0.01)。结论p38上调通过抑制miRNA生物合成中的关键酶Drosha的表达介导ICH后SBI发展。 展开更多

关键词 p38 MAPK/drosha信号通路 脑出血 继发性脑损伤 神经细胞凋亡 小鼠

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鱼藤酮下调对BV-2小胶质细胞中Drosha蛋白水平和白介素-1β表达影响的研究 被引量：1

16

作者 刘琪 朱宗红 《中国预防医学杂志》 CAS CSCD 2017年第6期447-451,共5页

目的在鱼藤酮处理BV-2小胶质细胞后,观测细胞中Drosha蛋白水平的变化以及相关炎症因子的表达改变。方法在不同浓度及时间的鱼藤酮处理后,用蛋白免疫印迹检测细胞中Drosha的蛋白水平,同时通过荧光定量PCR的方法检测Drosha下游miR-181a及... 目的在鱼藤酮处理BV-2小胶质细胞后,观测细胞中Drosha蛋白水平的变化以及相关炎症因子的表达改变。方法在不同浓度及时间的鱼藤酮处理后,用蛋白免疫印迹检测细胞中Drosha的蛋白水平,同时通过荧光定量PCR的方法检测Drosha下游miR-181a及其靶向炎症因子白介素-1β的表达。随后,在使用miRNA mimics补偿miR-181a的水平降低后,进一步观测白介素-1β的表达改变。结果在鱼藤酮处理BV-2小胶质细胞后,Drosha蛋白水平呈现为浓度和时间依赖地降低,同时,其下游miR-181a的表达水平也被下调,而miR-181a的靶向炎症因子白介素-1β的表达增强。在使用miRNA mimics增加miR-181a的水平后,可抑制白介素-1β的表达增强。结论鱼藤酮在BV-2小胶质细胞通过影响Drosha蛋白及其下游miR-181a的水平,调节白介素-1β的表达。 展开更多

关键词 BV-2小胶质细胞 鱼藤酮 drosha蛋白 白介素-1Β miR-181a 帕金森病

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雌激素孕激素联合紫杉醇对人卵巢癌细胞生长调控及Drosha表达的影响 被引量：2

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作者 杨云洁 韩克 谢玉莲 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期578-584,共7页

目的探讨雌激素、孕激素和紫杉醇对人卵巢癌细胞生长调控及Drosha表达的影响。方法雌激素、孕激素和紫杉醇体外作用人卵巢癌细胞，四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞抑制率，流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期，实时荧光定量PCR和Weste... 目的探讨雌激素、孕激素和紫杉醇对人卵巢癌细胞生长调控及Drosha表达的影响。方法雌激素、孕激素和紫杉醇体外作用人卵巢癌细胞，四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞抑制率，流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期，实时荧光定量PCR和Westernblot法检测DroshamRNA和蛋白的表达。结果对照组、雌激素组、孕激素组、紫杉醇组、雌激素联合紫杉醇组和孕激素联合紫杉醇组的细胞生长抑制率分别为0％、（31．53±8．21）％、（25．22±15．50）％、（46．71±4．25）％、（69．46±3．71）％和（47．35±39．02）％，雌激素组、孕激素组、紫杉醇组、雌激素联合紫杉醇组和孕激素联合紫杉醇组的细胞生长抑制率与对照组比较，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。相对于ER（-）的卵巢癌细胞，雌激素组、孕激素组、紫杉醇组、雌激素联合紫杉醇组和孕激素联合紫杉醇组的DroshamRNA表达水平分别为1．62±0．10、1．60±0．10、1．75±0．16、1．95±0．20和1．53±0．06，与对照组（1．00）差异均有统计学意义（均P〈0．05）；相对于ER（＋）的卵巢癌细胞，雌激素组、孕激素组、紫杉醇组、雌激素联合紫杉醇组和孕激素联合紫杉醇组的DroshamRNA表达水平分别为1．03±0．14、1．60±0．09、1．75±0．16、1．60±0．10和1．53±0．06，孕激素组、紫杉醇组、雌激素联合紫杉醇组和孕激素联合紫杉醇组的DroshamRNA表达水平与对照组差异均有统计学意义（均P〈0．05）。相对于ER（-）的卵巢癌细胞，对照组、雌激素组、孕激素组、紫杉醇组、雌激素联合紫杉醇组和孕激素联合紫杉醇组的Drosha蛋白表达水平分别为0．25±0．05、0．87±0．30、0．85±0．38、1．30±0．21、1．75±0．83和1．62±0．82，雌激素组、孕激素组、紫杉醇组、雌激素联合紫杉醇组和孕激素联合紫杉醇组的Drosha蛋白表达水平与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；相对于ER（＋）的卵巢癌细胞，对照组、雌激素组、孕激素组、紫杉醇组、雌激素联合紫杉醇组和孕激素联合紫杉醇组的Drosha蛋白表达水平分别为0．25±0．05、0．28±0．16、0．85±0．38、1．30±0．21、0．94±0．18和1．62±0．82，孕激素组、紫杉醇组、雌激素联合紫杉醇组和孕激素联合紫杉醇组的Drosha蛋白表达水平与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论雌激素、孕激素联合紫杉醇能够抑制人卵巢癌细胞的生长，且雌激素、孕激素和紫杉醇均能改变细胞的凋亡率，雌激素和紫杉醇能够改变细胞周期。雌激素、孕激素联合紫杉醇通过上调Drosha的表达，起到抑癌或增敏作用，且与雌激素受体的表达相关。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 雌激素 孕激素 紫杉醇 drosha基因 细胞生长过程 细胞 凋亡

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敲低Drosha基因可抑制人胃癌HGC-27细胞的迁移和侵袭

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作者 陈燕林 赵茂嘉 +4 位作者 席磊 杨丹 郎磊 阴嘉莉 柳满然 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期1735-1740,共6页

为了探讨抑制人胃癌细胞核糖核酸酶Ⅲ家族成员Drosha蛋白的表达对胃癌HGC-27细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其与转染效率浓度梯度依赖的关系,本研究通过质粒构建的方法,采用Crispr-Cas9基因编辑网站设计针对敲除人Drosha基因的单guid... 为了探讨抑制人胃癌细胞核糖核酸酶Ⅲ家族成员Drosha蛋白的表达对胃癌HGC-27细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其与转染效率浓度梯度依赖的关系,本研究通过质粒构建的方法,采用Crispr-Cas9基因编辑网站设计针对敲除人Drosha基因的单guide RNA (gRNA)序列;利用转染试剂Lipo2000浓度梯度(2μL, 3μL, 5μL)依赖的方式将单g RNA质粒及阴性对照转染入胃癌HGC-27细胞中;利用实时荧光定量PCR (qPCR)检测阴性对照细胞和以Lipo2000浓度梯度依赖的g RNA细胞的Drosha基因表达情况;利用蛋白质免疫印记Western blotting检测不同浓度处理组Drosha蛋白的表达情况;采用CCK8法检测阴性对照细胞和以Lipo2000浓度梯度依赖的g RNA细胞的增殖能力;采用Wound healing实验比较阴性对照细胞和以Lipo2000浓度梯度依赖的g RNA细胞的迁移能力;利用Transwell TM实验比较阴性对照细胞和以Lipo2000浓度梯度依赖的g RNA细胞的侵袭能力。成功设计针对敲除人Drosha基因的单Guide RNA (gRNA)序列;与对照组相比,实验组成功抑制了人胃癌HGC-27细胞Drosha的基因及蛋白表达,增殖能力无明显改变(p>0.05),但是抑制了人胃癌细胞HGC-27的迁移和侵袭能力(p<0.05),其中当Lipo2000浓度为3μL时,转染效率最高,迁移和侵袭抑制率也最明显。表明了抑制Drosha基因在人胃癌HGC-27细胞中的表达量,可以以Drosha表达量依赖的方式抑制细胞的迁移和侵袭。本研究有助于为胃癌的早期诊断和与治疗提供新的分子靶标。 展开更多

关键词 胃癌 drosha 迁移 侵袭

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靶向EZH2基因的shRNA干扰对人卵巢癌细胞Drosha基因表达的影响

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作者 况燕 蔡晶 +3 位作者 曹晋 韩庆 李桃 王泽华 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2013年第1期127-130,共4页

目的:探讨RNA干扰沉默果蝇zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)基因对卵巢癌细胞株A2780的Drosha基因表达的影响。方法:获得稳定表达EZH2短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)的人卵巢癌细胞株A2780-shEZH2,实... 目的:探讨RNA干扰沉默果蝇zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)基因对卵巢癌细胞株A2780的Drosha基因表达的影响。方法:获得稳定表达EZH2短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)的人卵巢癌细胞株A2780-shEZH2,实时定量PCR法(qRT-PCR)和免疫印记法(Western blot)检测转染株的Drosha基因表达。结果:以未转染组A2780细胞Drosha的表达水平为100%,EZH2-shRNA转染组A2780-shEZH2细胞Drosha的mRNA及蛋白水平分别上升(53.02±4.32)%和(51.26±1.35)%,与未转染组比较差异有统计学意义(P<0.001)。结论:沉默EZH2基因可以上调Drosha基因的表达。 展开更多

关键词 EZH2基因 drosha基因 MICRORNA 卵巢肿瘤

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Drosha通过调控微RNA-195-5P促进胃癌细胞的迁移和侵袭 被引量：2

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作者 彭美茜 徐丽云 +5 位作者 杨丹 赵茂嘉 秦旖璐 刘水清 曾欢 柳满然 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期925-932,共8页

目的 :探讨Drosha对胃癌MGC-803和SGC-7901细胞迁移和侵袭能力的影响及其可能的作用机制。方法:将携带有Drosha-shRNA的重组慢病毒感染胃癌MGC-803和SGC-7901细胞,以感染携带有阴性对照(negative control,NC)-shRNA的重组慢病毒作为对... 目的 :探讨Drosha对胃癌MGC-803和SGC-7901细胞迁移和侵袭能力的影响及其可能的作用机制。方法:将携带有Drosha-shRNA的重组慢病毒感染胃癌MGC-803和SGC-7901细胞,以感染携带有阴性对照(negative control,NC)-shRNA的重组慢病毒作为对照。采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测转入Drosha-shRNA后对MGC-803和SGC-7901细胞中Drosha mRNA和蛋白表达的影响,Transwell小室迁移和侵袭实验分别检测Drosha下调对MGC-803和SGC-7901细胞迁移和侵袭能力的影响;实时荧光定量PCR检测Drosha下调的MGC-803和SGC-7901细胞中微RNA-195-5P(microRNA-195-5P,miR-195-5P)的表达水平。在Drosha下调的胃癌细胞中采用脂质体法同时转入miR-195-5P-inhibitor,实时荧光定量PCR检测miR-195-5P的下调效果,Transwell小室迁移和侵袭实验分别检测下调miR-195-5P表达对细胞迁移和侵袭能力的影响。采用脂质体法将miR-195-5P-mimics转染MGC-803和SGC-7901细胞,实时荧光定量PCR检测miR-195-5P过表达的效果,Transwell小室迁移和侵袭实验分别检测miR-195-5P过表达对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响。结果 :感染Drosha-shRNA重组慢病毒后,MGC-803和SGC-7901细胞中Drosha mRNA和蛋白表达水平均较对照组明显下调(P值均<0.01),细胞的迁移和侵袭能力均明显被抑制(P值均<0.05),miR-195-5P的表达水平明显上调(P值均<0.001)。成功在Drosha下调的胃癌MGC-803和SGC-7901细胞中下调miR-195-5P的表达水平(P值均<0.05),miR-195-5P表达下调可以恢复Drosha下调对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响(P值均<0.05)。成功将miR-195-5P-mimics瞬时转入MGC-803和SGC-7901细胞,MGC-803和SGC-7901细胞中miRNA-195-5P的表达水平明显上调(P值均<0.01),细胞的迁移和侵袭能力均明显降低(P值均<0.01)。结论 :Drosha可促进胃癌细胞的迁移和侵袭能力。Drosha与miR-195-5P的表达呈负相关性,Drosha通过调控miR-195-5P的表达促进胃癌细胞的迁移和侵袭。 展开更多

关键词 胃肿瘤 细胞运动 基因表达 drosha 微RNA-195-5P

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