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学术英语语境中小品词“down”的认知语义分析——基于语料库的研究
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作者 赵一卜 宫英瑞 《韩山师范学院学报》 2024年第1期87-95,共9页
英语短语动词由一个动词和一个介词或副词组成,是英语语言的重要组成部分。以往研究多聚焦短语动词习得和语义生成加工机制,或具体某一介词探究其认知语义,鲜有研究将理论发现与教学实践相结合,尤其是结合在教学实践中占重要地位的学术... 英语短语动词由一个动词和一个介词或副词组成,是英语语言的重要组成部分。以往研究多聚焦短语动词习得和语义生成加工机制,或具体某一介词探究其认知语义,鲜有研究将理论发现与教学实践相结合,尤其是结合在教学实践中占重要地位的学术英语写作教学。以LinDEAP语料库中的“verb+down”短语动词为研究对象,借助意象图式与隐喻理论探讨学术英语语境中常用的“verb+down”短语动词结构的基本意义与延伸意义。研究发现,在学术英语写作中,常常用到五种基本意象图式,它们投射到数量域、事件域和时间域三个目标域的频率很高。这说明,在教学实践中,可通过此法促进学生对短语动词的系统理解和使用,使学习过程更具科学性与体系化。 展开更多
关键词 短语动词 小品词“down 意象图式 认知语义
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Top-down控制图法评定石墨炉原子吸收光谱法测定血中铅含量的不确定度
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作者 丁建东 宁攀良 《化学分析计量》 CAS 2024年第2期117-122,共6页
采用Top-down控制图法评定石墨炉原子吸收光谱法测定血中铅含量的不确定度。依据GBZ/T 316.1—2018《血中铅的测定第1部分:石墨炉原子吸收光谱法》,不同人员每周测定铅质量浓度为(104±15)μg/L的冻干牛血质控样品1次,连续测定35次... 采用Top-down控制图法评定石墨炉原子吸收光谱法测定血中铅含量的不确定度。依据GBZ/T 316.1—2018《血中铅的测定第1部分:石墨炉原子吸收光谱法》,不同人员每周测定铅质量浓度为(104±15)μg/L的冻干牛血质控样品1次,连续测定35次。对检测的35组数据进行离群值、正态性、独立性验证,并用Top-down控制图法评定铅含量的不确定度。血中铅质量浓度质控测试结果为(105.97±12.04)μg/L(95%包含概率)。Top-down控制图法评定血中铅含量的不确定度,简单、易操作,可以作为血铅含量检测的质量控制手段,对实验室检测结果进行趋势性分析,发现潜在的影响检测结果的因素,规避实验室风险。 展开更多
关键词 血中铅 Top-down控制图法 不确定度
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利用TOP-DOWN法评定电感耦合等离子体原子发射光谱法测定土壤样品中铅元素含量的不确定度 被引量:1
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作者 蔡凌霄 贾苒 +1 位作者 白正伟 王飞龙 《化学分析计量》 CAS 2023年第7期104-108,共5页
采用自上而下的不确定度评定方法(TOP-DOWN法),对酸溶-电感耦合等离子体原子发射光谱法测定土壤样品中铅元素含量的不确定度进行评定,之后使用自下而上的评价方法(GUM法)评定。TOP-DOWN法评定的铅测量不确定度为3.9 mg/kg,GUM法评定的... 采用自上而下的不确定度评定方法(TOP-DOWN法),对酸溶-电感耦合等离子体原子发射光谱法测定土壤样品中铅元素含量的不确定度进行评定,之后使用自下而上的评价方法(GUM法)评定。TOP-DOWN法评定的铅测量不确定度为3.9 mg/kg,GUM法评定的铅测量不确定度为2.8 mg/kg。结果表明,与GUM法评定结果相比,TOPDOWN法评定的土壤中同一水平铅含量的测量不确定度结果基本一致。在积累了大量质量控制样品数据的情况下,与GUM法相比,TOP-DOWN法评定测量不确定度的过程更简单且易于操作,更能反映出实验室检测的长期精密度和准确度水平。 展开更多
关键词 电感耦合等离子体原子发射光谱法 TOP-down GUM法 不确定度
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“Top-Down-Approach”降水相态分析法在双流机场一次降雪过程中的应用 被引量:1
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作者 褚芸欣 吴妮晏 赵清越 《高原山地气象研究》 2023年第4期146-150,共5页
选取ERA5再分析资料和常规气象资料等多源数据,运用“Top-Down-Approach”降水相态分析法,分析了2023年1月16日双流机场降雪过程,重点探究了降水相态的预报着眼点。结果表明:(1)湿度超过85%的-12~-16℃温度层有利于枝状雪花的形成,高浓... 选取ERA5再分析资料和常规气象资料等多源数据,运用“Top-Down-Approach”降水相态分析法,分析了2023年1月16日双流机场降雪过程,重点探究了降水相态的预报着眼点。结果表明:(1)湿度超过85%的-12~-16℃温度层有利于枝状雪花的形成,高浓度云中冰相粒子与水相粒子重叠区有利于低融化比雪花的形成,在预报时需重点关注。(2)当湿球0℃温度层偏低时,可降低降雪预报中对地面温度的限制。(3)结合温度廓线分析,微波辐射计液态水廓线产品可以指示冰云层主要分布高度,还能反映出液态水含量在降雪过程开始前显著增强且在降雪趋于结束时提前降低的变化特征,对降雪过程有一定的指示意义。 展开更多
关键词 降水相态 Top-down-Approach 物理机制 湿球温度
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基于WPS VBA编程的Top-Down法评定化学分析测量不确定度
5
作者 杨嘉晖 王茜 +3 位作者 杨建博 许伟 王旭东 祁春景 《化学分析计量》 CAS 2023年第11期114-118,共5页
在WPS表格平台上利用VBA编程,建立了包含异常值的判别和剔除、测量系统正态性和独立性检验以及不确定度评定三个功能模块的Top-Down法评定程序,采用RB/T 141—2018附录B中实例中的数据对评定程序进行验证,得到的结果与实例中的数据相同... 在WPS表格平台上利用VBA编程,建立了包含异常值的判别和剔除、测量系统正态性和独立性检验以及不确定度评定三个功能模块的Top-Down法评定程序,采用RB/T 141—2018附录B中实例中的数据对评定程序进行验证,得到的结果与实例中的数据相同,表明评定程序是可靠的。该程序的建立可以大幅降低评定人员的计算量,有利于Top-Down评定测量不确定度法在地质、农业、环境等化学检测领域的广泛普及。 展开更多
关键词 Top-down VBA WPS 测量不确定度评定
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橡塑改性沥青路面top-down开裂性能分析
6
作者 何伟 李鑫 《合成橡胶工业》 CAS 北大核心 2023年第3期183-186,共4页
通过劈裂试验、三轴重复荷载试验和小梁弯曲试验对比了橡塑改性沥青混合料与SBS改性沥青混合料的性能,通过构建有限元模型分析了动荷载作用下沥青路面上面层裂缝的应力变化规律。结果表明,橡塑改性沥青混合料的抗拉性能与高温抗变形性... 通过劈裂试验、三轴重复荷载试验和小梁弯曲试验对比了橡塑改性沥青混合料与SBS改性沥青混合料的性能,通过构建有限元模型分析了动荷载作用下沥青路面上面层裂缝的应力变化规律。结果表明,橡塑改性沥青混合料的抗拉性能与高温抗变形性能优于SBS改性沥青混合料,橡塑改性沥青可提高沥青混凝土路面的抗变形能力;橡塑改性沥青混合料的低温抗裂性能优于SBS改性沥青混合料,前者可提高沥青路面抗top-down裂缝开裂性能;在动荷载作用下,沥青路面结构层中的上面层拉应力逐渐增加,导致沥青路面发生top-down裂缝开裂,橡塑改性沥青混合料可增加上面层破坏时的最大拉应力,从而降低沥青路面发生top-down裂缝开裂的可能性。 展开更多
关键词 道路工程 橡塑改性沥青 top-down开裂性能 力学性能 有限元模拟
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Volatile Compounds Fingerprints for White Duck down and White Goose down Determined by Gas Chromatography-Ion Mobility Spectrometry
7
作者 Fei Wang Qihui Zhang +6 位作者 Yiwen Lin Wenjian Chen Hui Wang Kuntai Li Jihua Li Yuliang Chen Leiyu Wang 《Agricultural Sciences》 CAS 2023年第3期432-445,共14页
This work first describes a simple approach for the untargeted profiling of volatile compounds for distinguishing between white duck down (WDD) and white goose down (WGD) based on resolution-optimized GC-IMS combined ... This work first describes a simple approach for the untargeted profiling of volatile compounds for distinguishing between white duck down (WDD) and white goose down (WGD) based on resolution-optimized GC-IMS combined with optimized chemometric techniques, namely PCA. The detection method for down samples was established by using GC-IMS. Meanwhile, the reason of unpleasant odors caused by WDD was explained on the basis of the characteristic volatile compounds identification. GC-IMS fingerprinting can be considered a revolutionary approach for a truly fully automatable, cost-efficient, and in particular highly sensitive method. A total of 22 compounds were successfully separated and identified through GC-IMS method, and the significant differences in volatile compounds were observed in three parts of WDD and WGD samples. The most characteristic volatile compounds of WGD belong to aldehydes, whereas carboxylic acids from WDD were detected generated by autoxidation reaction. Meanwhile, the main reason of unpleasant odor generation was possibly attributed to the high concentration of volatile carboxylic acids of WDD. Therefore, the constructed model presents a simple and efficient method of analysis and serves as a basis for down processing and quality control. 展开更多
关键词 Gas Chromatography-Ion Mobility Spectrometry (GC-IMS) Principal Components Analysis (PCA) down Characteristic Volatiles Fingerprints Carboxylic Acids
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GUM法与Top-down精密度法评定白酒中铅的不确定度比较
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作者 陈淼淼 《食品安全导刊》 2023年第15期76-80,共5页
目的:比较GUM法与Top-down精密度法评定白酒中铅的不确定度。方法:按照《食品安全国家标准食品中铅的测定》(GB 5009.12—2017)第一法石墨炉原子吸收光谱法,对质控样和能力验证样进行测定。结果:GUM法评定得到白酒质控样中铅含量的测定... 目的:比较GUM法与Top-down精密度法评定白酒中铅的不确定度。方法:按照《食品安全国家标准食品中铅的测定》(GB 5009.12—2017)第一法石墨炉原子吸收光谱法,对质控样和能力验证样进行测定。结果:GUM法评定得到白酒质控样中铅含量的测定值在0.613~0.656 mg·kg^(-1);Top-down精密度法评定得到白酒质控样中铅含量的测定值在0.596~0.673 mg·kg^(-1);均处于白酒质控样特性值范围0.568~0.694 mg·kg^(-1)内。结论:GUM法与Top-down精密度法均能有效评定白酒中铅的不确定度。当遇到过程较为烦琐的检测,Top-down精密度法评定不确定度较为简单快速、便于操作。 展开更多
关键词 GUM法 Top-down精密度法 白酒中铅不确定度
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Top-down方法评定织物中PAEs测定的不确定度
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作者 宁雨童 徐锦鸿 +1 位作者 葛富全 黄玉燕 《天津纺织科技》 2023年第6期46-48,共3页
文中探索了Top-down方法在纺织品中邻苯二甲酸酯测量不确定度评定过程中的应用。采用试验室DBP、DEHP及DIBP 3种邻苯物质的9次加标回收率质控数据及重复测试数据,对其测量不确定度进行分析评定。结果显示:3种邻苯二甲酸酯物质重复测定... 文中探索了Top-down方法在纺织品中邻苯二甲酸酯测量不确定度评定过程中的应用。采用试验室DBP、DEHP及DIBP 3种邻苯物质的9次加标回收率质控数据及重复测试数据,对其测量不确定度进行分析评定。结果显示:3种邻苯二甲酸酯物质重复测定引入的不确定度分量u(R_(w))分别为5.37%、3.21%、6.88%;偏倚的不确定度分量u(bias)分别为5.02%、8.21%、6.51%,最终相对扩展不确定度U分别为14.70%、17.64%、18.94%。由此表明,Top-down方法可以在减少工作量的同时,对纺织品中邻苯二甲酸酯的测量不确定度进行有效评定。 展开更多
关键词 纺织品 邻苯二甲酸酯 Top-down方法 测量不确定度
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Integrating Downstream Ecological, Social and Economic Effects of Hydropower to Hydraulic Modeling: A Review
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作者 J. Bastian Höller Anders G. Andersson J. Gunnar I. Hellström 《World Journal of Mechanics》 2023年第8期149-172,共24页
Hydropower gains increasing importance as a steerable and controllable power source in a renewable energy mix and deregulated markets. Although hydropower produces fossil-free energy, it has a significant impact on th... Hydropower gains increasing importance as a steerable and controllable power source in a renewable energy mix and deregulated markets. Although hydropower produces fossil-free energy, it has a significant impact on the local environment. This review investigates the effects of flow alterations by hydropower on the downstream river system and the possibilities to integrate these effects into hydraulic modeling. The results show that various effects of flow regulation on the ecosystem, but also social and economic effects on related communities were observed in the last decades. The application of hydraulic models for investigations of ecological effects is common. Especially hydraulic effects and effects on fish were extensively modeled with the help of hydraulic 1D- and 2D-simulations. Current applications to investigate social and economic effects integrated into hydraulic modeling are meanwhile limited. Approaches to realizing this integration are presented. Further research on the economic valuation of ecosystems and integration of social and economic effects to hydraulic models is necessary to develop holistic tools to support decision-making on sustainable hydropower. 展开更多
关键词 Sustainable Hydropower Hydraulic Simulation River Regulation down-stream Effects Integrated Modeling
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沥青路面Top-Down裂缝的断裂力学分析 被引量:24
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作者 赵延庆 王抒红 +1 位作者 周长红 谭忆秋 《同济大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第2期218-222,共5页
采用移动荷载模式,在有限元方法中利用动态模量主曲线和时间-温度位移因子来表征沥青混合料的力学性质,利用断裂力学的方法分析了温度、车速、裂缝长度和基层类型等对沥青路面Top-Down裂缝裂尖应力强度因子的影响.研究表明随着裂缝长度... 采用移动荷载模式,在有限元方法中利用动态模量主曲线和时间-温度位移因子来表征沥青混合料的力学性质,利用断裂力学的方法分析了温度、车速、裂缝长度和基层类型等对沥青路面Top-Down裂缝裂尖应力强度因子的影响.研究表明随着裂缝长度增加和温度降低,张开型应力强度因子(KⅠ)和剪切型应力强度因子(KⅡ)的峰值增加.行车速度对应力强度因子的作用频率有显著影响,较慢的行车速度会加速Top-Down裂缝的扩展.与采用粒料基层相比,采用半刚性基层可降低裂尖应力强度因子.随着温度升高和裂缝长度增加,KⅠ对裂缝扩展的贡献减小,而KⅡ的贡献逐渐增加. 展开更多
关键词 沥青路面 Top-down裂缝 应力强度因子 行车速 裂缝长度 移动荷载
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“自顶向下(top-down)”的蛋白质组学--蛋白质变体的规模化鉴定 被引量:9
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作者 孙瑞祥 罗兰 +2 位作者 迟浩 刘超 贺思敏 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2015年第2期101-114,共14页
高分辨率质谱技术的快速发展使得"自顶向下"的蛋白质组学(top-down proteomics)研究逐渐成熟起来.在完整蛋白质水平上研究蛋白质组可以提供更精准、更丰富的生物学信息,特别是对于蛋白质上发生了多种关联性的翻译后修饰的情况... 高分辨率质谱技术的快速发展使得"自顶向下"的蛋白质组学(top-down proteomics)研究逐渐成熟起来.在完整蛋白质水平上研究蛋白质组可以提供更精准、更丰富的生物学信息,特别是对于蛋白质上发生了多种关联性的翻译后修饰的情况.另外,由于基因突变、RNA可变剪接和大量蛋白质翻译后修饰的存在,同一个基因往往最终会产生多个"蛋白质变体"(proteoform),而要准确地鉴定这些蛋白质变体,也离不开"自顶向下"的蛋白质组学.在蛋白质水平上的分离技术、质谱技术与生物信息学技术是完整蛋白质鉴定最关键的三项技术.高效的分离技术是实现规模化蛋白质变体鉴定的前提,有效的质谱碎裂是提供可靠鉴定的核心,而快速准确的质谱鉴定算法则是数据分析效率的保障.本文对这三项技术进行了详细总结,重点集中在生物信息学相关技术上,包括对完整蛋白质的质谱数据预处理、数据库搜索鉴定以及翻译后修饰定位等几个计算问题的讨论. 展开更多
关键词 “自顶向下(top-down)”的蛋白质组学 串联质谱技术 生物信息学 蛋白质鉴定
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领导力的整合:Trickle-down模式下的领导效应 被引量:18
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作者 薛会娟 杨静 《心理科学进展》 CSSCI CSCD 北大核心 2014年第3期474-481,共8页
Trickle-down模式正逐渐成为领导效应研究的新范式。它阐释了组织中较高层次领导的行为或其认知如何沿着组织的垂直管理层次自上而下层层滴漏。该模式通过对领导行为联动效应和多层配对的剖析,弥补了传统研究聚焦于单一层次领导研究的... Trickle-down模式正逐渐成为领导效应研究的新范式。它阐释了组织中较高层次领导的行为或其认知如何沿着组织的垂直管理层次自上而下层层滴漏。该模式通过对领导行为联动效应和多层配对的剖析,弥补了传统研究聚焦于单一层次领导研究的不足。系统梳理trickle-down模式下的领导效应之涵义特征、理论基础、效能机制,并深入探讨已有研究的欠缺,对于实现领导力的整合、拓展本土化的领导行为研究具有重要意义。 展开更多
关键词 Trickle-down模式 领导效应 跨层次 系统
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多维液相色谱 bottom-up top-down 阵列式 完整蛋白质 蛋白质分离 被引量:11
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作者 高明霞 关霞 +1 位作者 洪广峰 张祥民 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期551-555,共5页
蛋白质组学出现之后,多维高效液相色谱(multidimensional HPLC,MD-HPLC)系统以其快速、高效、自动化程度高以及容易与质谱等其他技术联用等优势而成为蛋白质组学相关分析技术中研究应用的热点。本文主要以本实验室在蛋白质组学研究中... 蛋白质组学出现之后,多维高效液相色谱(multidimensional HPLC,MD-HPLC)系统以其快速、高效、自动化程度高以及容易与质谱等其他技术联用等优势而成为蛋白质组学相关分析技术中研究应用的热点。本文主要以本实验室在蛋白质组学研究中的技术进展为主线,介绍了多维高效液相色谱技术的发展,包括经典的“bottom-up”技术和“top-down”式的多维高效液相色谱技术路线,以及为了提高系统的分离通量而自行设计搭建的阵列式多维高效液相色谱平台,这些技术路线在蛋白质组学研究中有着极大的潜在应用价值。 展开更多
关键词 多维液相色谱 BOTTOM-UP TOP-down 阵列式 完整蛋白质 蛋白质分离
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Top-Down方法在成型模具设计中的应用 被引量:6
15
作者 葛正浩 徐锋 李思益 《工程塑料应用》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期41-43,共3页
介绍模具Top-Down设计的基本思想、设计流程及其主要特点,并基于Pro/Engineer软件平台,以一鞋楦模具为设计对象,例示出模具Top-Down设计方法的主要设计过程。采用先进的Top-Down模具设计方法可以帮助设计者提高设计速度,避免一般设计中... 介绍模具Top-Down设计的基本思想、设计流程及其主要特点,并基于Pro/Engineer软件平台,以一鞋楦模具为设计对象,例示出模具Top-Down设计方法的主要设计过程。采用先进的Top-Down模具设计方法可以帮助设计者提高设计速度,避免一般设计中容易发生的错误,降低设计制造成本,加快交货期限。 展开更多
关键词 Top-down方法 成型模具 设计 应用 PRO/ENGINEER
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Top-down技术控制图法评定电感耦合等离子体质谱法测定菠菜中铜含量的不确定度 被引量:8
16
作者 程刚 赵峰 +4 位作者 胡炜 王宇 张雪琰 崔淑华 崔伟佳 《食品安全质量检测学报》 CAS 2017年第11期4220-4224,共5页
目的使用Top-down技术控制图法评定电感耦合等离子体质谱法(inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS)测定菠菜中铜含量的不确定度。方法按照GB 5009.268-2016《食品中多元素的测定》规定的分析方法,使用菠菜质控样品,在... 目的使用Top-down技术控制图法评定电感耦合等离子体质谱法(inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS)测定菠菜中铜含量的不确定度。方法按照GB 5009.268-2016《食品中多元素的测定》规定的分析方法,使用菠菜质控样品,在期间精密度条件下,进行铜含量的测定,基于Top-down控制图法的原理对积累的数据进行检验和分析。结果通过绘制的x图与MR图,可看出测量系统处于统计受控状态。在证明分析结果偏移受控及正态分布的情况下,计算得到不确定的结果 U=0.6 mg/kg。结论 Top-down技术用于化学分析不确定评估将不确定评估与实验室内部质量控制工作有机地结合起来,减少了工作量,具有广泛的应用前景。 展开更多
关键词 铜含量 菠菜 Top-down技术控制图法 不确定度 电感耦合等离子体质谱法
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应用nested和touch down PCR技术分离牦牛CAPN1大亚基基因EST 被引量:6
17
作者 蔡欣 吴建平 +3 位作者 徐明旭 张利平 汪虹英 刘雅楠 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2005年第2期14-18,共5页
 钙激活中性蛋白酶1(CAPN1)基因是影响肉嫩度的侯选基因。根据GeneBank中已公布的CAPN1基因cDNA序列设计同源PCR引物,通过RT,nested和touch-downPCR技术从牦牛肌肉组织总RNA中分离目的序列,与pGEM-T-easy载体连接后转化DH5α感受态菌株...  钙激活中性蛋白酶1(CAPN1)基因是影响肉嫩度的侯选基因。根据GeneBank中已公布的CAPN1基因cDNA序列设计同源PCR引物,通过RT,nested和touch-downPCR技术从牦牛肌肉组织总RNA中分离目的序列,与pGEM-T-easy载体连接后转化DH5α感受态菌株,通过PCR扩增、限制性酶切和测序分析鉴定阳性克隆。分离到的基因片段为牦牛CAPN1大亚基的部分编码序列,在GeneBank中的注册号为AY197555,与奶牛、人、食蟹猴、小鼠、绵羊以及大鼠相应序列的同源性分别为98%,89%,89%,83%,96%和81%,在不同物种之间具有较强的保守性。CAPN1基因EST的分离为进一步研究牦牛CAPN1基因奠定了基础。此研究表明,在总RNA质量不理想的情况下,同时采用这2种技术可以较大限度地获取目的序列。 展开更多
关键词 nested和touch-down PCR EST分离 CAPN1大亚基基因 牦牛
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沥青路面Top-Down开裂成因的有限元分析 被引量:30
18
作者 李峰 孙立军 《公路交通科技》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期1-4,共4页
源于路表面的轮迹带附近的纵向开裂(Top-Down开裂)是重交通沥青路面的主要损坏类型之一,也是国际沥青路面工程界对道路损坏研究的新热点。为此在实测轮胎接地压力的基础上,建立了路面结构的三维有限元模型,计算出4条实际道路的最大拉、... 源于路表面的轮迹带附近的纵向开裂(Top-Down开裂)是重交通沥青路面的主要损坏类型之一,也是国际沥青路面工程界对道路损坏研究的新热点。为此在实测轮胎接地压力的基础上,建立了路面结构的三维有限元模型,计算出4条实际道路的最大拉、剪应力值及其位置,绘制了它们的等值线图。对最大拉、剪应力位置与开裂现象,最大应力值与应力强度进行了比较和分析。分析结果表明,轮载下强大的剪应力是造成Top-Down开裂的主要原因。 展开更多
关键词 沥青路面 TOP-down开裂 三维有限元 拉应力 剪应力
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GST Pull-down实验鉴定NF-κB相互作用多肽 被引量:5
19
作者 李生茂 梁华平 +1 位作者 徐祥 刘东擘 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期94-97,共4页
目的体外鉴定NF-κB相互作用多肽与p50和p65间的相互作用。方法首先构建GST-作用多肽融合蛋白的原核表达载体pET-42a/polypeptide及NF-κB p50和p65亚基保守结构域的原核表达载体pET22b/p50和pET22b/p65,并在大肠杆菌E.coliBL-21中诱导... 目的体外鉴定NF-κB相互作用多肽与p50和p65间的相互作用。方法首先构建GST-作用多肽融合蛋白的原核表达载体pET-42a/polypeptide及NF-κB p50和p65亚基保守结构域的原核表达载体pET22b/p50和pET22b/p65,并在大肠杆菌E.coliBL-21中诱导表达,后进行GST pull-down实验验证多肽与NF-κB p50和p65的结合效应。结果经诱导表达获得了可溶性的GST-多肽融合蛋白和具有DNA结合活性的p50p、65蛋白,GST pull-down实验证实3条多肽与p50发生特异地相互作用。结论证实3条多肽在体外能与p50发生物理性的相互作用,这为获得靶向NF-κB的功能拮抗多肽工作奠定了基础。 展开更多
关键词 GST Pull—down实验 多肽 NF—κB p50/p65 蛋白间相互作用
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GST pull-down技术验证CIPK7蛋白激酶与CBL1蛋白的相互作用 被引量:3
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作者 黄聪琳 丁硕 +1 位作者 姜华 安黎哲 《兰州大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期828-832,共5页
采用DNA重组技术,构建pGEX-4T-3-CIPK7和pET28-CBL1蛋白表达载体,转化大肠杆菌并诱导表达目的蛋白,利用亲和层析纯化法纯化GST标签、His标签融合蛋白,通过GST pull-down试验验证CIPK7与CBL1之间的相互作用.成功构建了CBL1和CIPK7的重组... 采用DNA重组技术,构建pGEX-4T-3-CIPK7和pET28-CBL1蛋白表达载体,转化大肠杆菌并诱导表达目的蛋白,利用亲和层析纯化法纯化GST标签、His标签融合蛋白,通过GST pull-down试验验证CIPK7与CBL1之间的相互作用.成功构建了CBL1和CIPK7的重组质粒,经诱导表达及纯化获得了可溶性GSTCIPK7和CBL1-His融合蛋白,GST pull-down试验证实了CBL1能够与CIPK7结合.CIPK7蛋白与CBL1蛋白之间存在直接的相互作用,为进一步研究蛋白激酶CIPK7的功能奠定了基础. 展开更多
关键词 CBL1蛋白 GST pull-down CIPK7蛋白 蛋白质相互作用
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