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E2F-1基因和Rb基因在人肺癌组织中的表达及临床意义 被引量:3
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作者 刘小琦 宾晓农 +4 位作者 曾波航 周亦武 王云南 陈家堃 吕嘉春 《广州医学院学报》 2005年第6期52-55,共4页
目的:探讨E2F-1和Rb基因在肺癌中的表达及意义。方法:用免疫组织化学技术对广州医学院第二附属医院、广州市胸科医院自2001年1月至2004年12月手术诊断的60例原发性肺癌组织与34例正常肺组织中E2F-1和Rb基因蛋白进行检测,并分析其表达情... 目的:探讨E2F-1和Rb基因在肺癌中的表达及意义。方法:用免疫组织化学技术对广州医学院第二附属医院、广州市胸科医院自2001年1月至2004年12月手术诊断的60例原发性肺癌组织与34例正常肺组织中E2F-1和Rb基因蛋白进行检测,并分析其表达情况。结果:E2F-1在肺癌组织与正常组织中的阳性表达率分别为75.0%(45/60)和41.1%(14/34),两组间差异有显著性(P<0.05)。抑癌基因Rb在正常组织与肺癌组织中的表达缺失率分别为6.3%(2/32)和23.3%,(14/60),P<0.05。E2F-1和Rb表达呈负相关(相关系数r=-0.319,P=0.013)。但E2F-1、Rb的表达与肺癌组织学类型、临床分期、分化、淋巴结转移等无关联(P>0.05)。结论:E2F-1基因的过度表达以及Rb基因的表达缺失或减低对肺癌的发生发展起协同促进作用。 展开更多
关键词 肺癌 e2f-1基因 RB基因
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E2F-1基因反转录病毒载体的构建及其对人胃癌细胞MGC-803增殖的影响 被引量:1
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作者 钱倩 李雷 +3 位作者 王晓通 苑汐子 谢玉波 肖强 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期381-385,共5页
目的:通过构建人同源基因E2F-1反转录病毒表达载体,观察E2F-1过表达对胃癌细胞MGC-803增殖的影响。方法:应用基因重组技术将E2F-1基因克隆到反转录病毒载体pLXSN中,并将经酶切和RT-PCR检测正确的重组载体转染PA317包装细胞,收集病毒上... 目的:通过构建人同源基因E2F-1反转录病毒表达载体,观察E2F-1过表达对胃癌细胞MGC-803增殖的影响。方法:应用基因重组技术将E2F-1基因克隆到反转录病毒载体pLXSN中,并将经酶切和RT-PCR检测正确的重组载体转染PA317包装细胞,收集病毒上清液感染胃癌细胞MGC-803。应用RT-PCR和Western印迹法检测MGC-803/pLXSN-E2F-1细胞中E2F-1 mRNA和蛋白的表达情况。应用克隆形成实验和MTT法检测细胞的增殖情况。结果:经酶切和RT-PCR检测结果显示,成功构建E2F-1反转录病毒表达载体。与MGC-803和MGC-803/pLXSN组相比,MGC-803/pLXSN-E2F-1组E2F-1mRNA和蛋白的表达明显上调(P<0.05)。MGC-803/pLXSN-E2F-1组的克隆形成率为48%,明显低于MGC-803组的81%和MGC-803/pLXSN组的77%,差异有统计学意义(P<0.01)。MGC-803/pLXSN-E2F-1组的细胞增殖率明显慢于MGC-803组和MGC-803/pLXSN组(P<0.01)。结论:成功构建了E2F-1基因过表达的反转录病毒表达载体,并将其成功感染MGC-803细胞,E2F-1过表达可抑制MGC-803细胞的增殖。 展开更多
关键词 胃肿瘤 反转录病毒科 基因表达 细胞增殖 基因 e2f-1 细胞 MGC-803
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E2F-1基因沉默对人胃癌耐药细胞株SGC7901/顺铂多药耐药性的逆转 被引量:3
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作者 廉超 杨杰 +2 位作者 王晓通 谢玉波 肖强 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期171-176,共6页
目的探讨E2F一1基因沉默后对人胃癌顺铂(DDP)耐药细胞株SGC7901/DDP多药耐药性的影响及可能的作用机制。方法将人胃癌耐药细胞株SGC7901/DDP接种于6孔板,并分为以E2F-1基因沉默重组慢病毒颗粒Lv-shRNA—E2F-1感染的SGC7901/DDP细... 目的探讨E2F一1基因沉默后对人胃癌顺铂(DDP)耐药细胞株SGC7901/DDP多药耐药性的影响及可能的作用机制。方法将人胃癌耐药细胞株SGC7901/DDP接种于6孔板,并分为以E2F-1基因沉默重组慢病毒颗粒Lv-shRNA—E2F-1感染的SGC7901/DDP细胞(实验组)、以对照慢病毒颗粒Lv-shRNA,NC感染的SGC7901/DDP细胞(阴性对照组)以及常规培养的SGC7901/DDP细胞(空白对照组)。采用Westernblot技术检测各组细胞中E2F-1蛋白的表达,采用四甲基偶氮唑蓝法检测阿霉素、氟尿嘧啶和DDP对各组细胞的半数抑制浓度(IC50),采用流式细胞术检测各组细胞中阿霉素的泵出率和细胞凋亡率,采用半定量RT—PCR和Westernblot技术检测各组细胞中多药耐药基因1(MDRl)、多药耐药相关蛋白(MRP)及凋亡相关基因cyclinD1、c-Myc、Skp2mRNA和蛋白的表达水平。结果实验组、阴性对照组和空白对照组SGC7901/DDP细胞中E2F-1蛋白的相对表达量分别为0.794±0.033、1.487±0.082和1.5114-0.084,实验组SGC7901/DDP细胞中E2F-1蛋白的相对表达量较阴性对照组和空白对照组分别下降46.6%和47.5%(P〈0.01)。阿霉素、氟尿嘧啶和DDP对实验组SGC7901/DDP细胞的Ic50均较阴性对照组和空白对照组明显降低(均P〈0.01)。实验组、阴性对照组和空白对照组SGC7901/DDP细胞中阿霉素的泵出率分别为(0.16±0.01)%、(0.37±0.01)%和(0.35±0.02)%,实验组SGC7901/DDP细胞中阿霉素的泵出率明显低于阴性对照组和窄白对照组(P〈0.01)。实验组、阴性对照组和空白对照组SGC7901/DDP细胞的凋亡率分别为(33.82±1.26)%、(17.34±0.81)%和(13.164-1.06)%,实验组SGC7901/DDP细胞的凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组(P〈0.01)。与阴性对照组和空白对照组比较,实验组SGC7901/DDP细胞中MDRl、MRP、cyclinD1pMyc和skp2mRNA及蛋白的表达水平均明显降低(均P〈0.01)。结论沉默E2F-1基因的表达可有效提高人胃癌耐药细胞株SGC7901/DDP对化疗药物的敏感性,并可直接或间接下调经典多药耐药相关基因MDRl和MRP的表达,从而逆转胃癌细胞的多药耐药性,其机制可能与cyclinD1、c—Myc和Skp2的表达下调有关。 展开更多
关键词 e2f-1基因 胃肿瘤 抗药性 肿瘤 顺铂
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E2F-1基因在肺癌中的表达及意义 被引量:2
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作者 杨志鸿 阮永华 +2 位作者 金克炜 高倩 张林 《现代生物医学进展》 CAS 2011年第24期4828-4830,共3页
目的:探讨E2F-1基因在肺癌中的表达及意义。方法:采用免疫组化S-P法,检测60例肺癌及20例正常肺组织中E2F-1基因蛋白的表达情况。结果:E2F-1在肺癌组织中的阳性率为91.7%,显著高于正常肺组织的10%,两组间差异有显著性(P<0.05);E2F-1... 目的:探讨E2F-1基因在肺癌中的表达及意义。方法:采用免疫组化S-P法,检测60例肺癌及20例正常肺组织中E2F-1基因蛋白的表达情况。结果:E2F-1在肺癌组织中的阳性率为91.7%,显著高于正常肺组织的10%,两组间差异有显著性(P<0.05);E2F-1与肺癌患者的性别、年龄、组织学类型、分化程度及淋巴结转移等无相关性(P>0.05)。结论:E2F-1的异常高表达在肺癌的发生发展中起重要作用,可作为肺癌基因诊断和治疗的靶点。 展开更多
关键词 肺癌 e2f-1基因
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慢病毒载体介导的E2F-1基因沉默对人胶质瘤U251细胞生物学特征的影响 被引量:4
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作者 郭宝光 李虹 +2 位作者 李婷 王军 仇波 《解剖科学进展》 2018年第6期622-625,共4页
目的探讨慢病毒载体介导的E2F-1基因沉默对人胶质瘤U251细胞生物学特征的影响。方法构建靶向E2F-1的shRNA重组慢病毒载体,将慢病毒载体转染U251细胞,real-time PCR与Western blot在m RNA与蛋白水平鉴定转染结果,MTT方法检测转染后U251... 目的探讨慢病毒载体介导的E2F-1基因沉默对人胶质瘤U251细胞生物学特征的影响。方法构建靶向E2F-1的shRNA重组慢病毒载体,将慢病毒载体转染U251细胞,real-time PCR与Western blot在m RNA与蛋白水平鉴定转染结果,MTT方法检测转染后U251细胞活力的变化,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡的变化,transwell实验检测细胞侵袭能力的变化。结果 real-time PCR方法与Western blot检测结果均表明成功建立了稳定沉默E2F-1基因的U251细胞株。与空白对照组及阴性对照组比较,转染E2F-1-shRNA的U251细胞活力显著降低,细胞周期被阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率显著升高,侵袭能力显著降低(P<0.01)。结论转染E2F-1-shRNA能够显著降低U251细胞增殖侵袭能力。 展开更多
关键词 胶质瘤 慢病毒载体 e2f-1基因 U251细胞
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膀胱肿瘤组织中Rb、E2F-1及P21的表达及其意义 被引量:12
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作者 程坤 《现代肿瘤医学》 CAS 2010年第8期1588-1590,共3页
目的:检测膀胱肿瘤组织中Rb、E2F-1及P21蛋白的表达,探讨三者在膀胱肿瘤组织发生和发展中的作用及临床价值。方法:采用免疫组织化学方法检测122例膀胱肿瘤组织中Rb、E2F-1及P21蛋白的表达。结果:在膀胱移行细胞乳头状瘤和膀胱移行细胞癌... 目的:检测膀胱肿瘤组织中Rb、E2F-1及P21蛋白的表达,探讨三者在膀胱肿瘤组织发生和发展中的作用及临床价值。方法:采用免疫组织化学方法检测122例膀胱肿瘤组织中Rb、E2F-1及P21蛋白的表达。结果:在膀胱移行细胞乳头状瘤和膀胱移行细胞癌中Rb蛋白表达的阳性率分别为93.3%(28/30)和68.5%(63/92),膀胱癌组低于乳头状瘤组,组间差异有统计学意义(P=0.007)。E2F-1、P21蛋白在膀胱癌与乳头状瘤组中阳性表达率分别为70.7%(65/92)、46.7%(14/30)和72.8%(67/92)、50.0%(15/30),膀胱癌组高于乳头状瘤组,组间差异有统计学意义(P=0.017;P=0.021)。E2F-1和P21蛋白在膀胱癌组织中阳性表达率随组织分化程度的降低而升高。Spearman等级相关分析显示膀胱肿瘤组织中Rb与E2F-1、P21蛋白表达呈负相关(r=-1.000,P<0.05,r=-1.000,P<0.05);E2F-1和P21蛋白表达呈正相关(r=1.000,P<0.05)。结论:Rb、E2F-1及P21蛋白的表达异常可能与膀胱移行细胞癌的发生发展有关,Rb、E2F-1及P21蛋白的联合检测可为诊断膀胱移行细胞癌及临床判断组织恶性程度提供参考。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 RB基因 e2f-1基因 P21基因 免疫组化
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FGFR3、Rb及E2F-1在膀胱肿瘤组织中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 程坤 《现代肿瘤医学》 CAS 2015年第19期2786-2789,共4页
目的:探讨FGFR3、Rb及E2F-1蛋白在膀胱肿瘤组织中的表达及临床意义。方法:以不同浓度的FGFR3、Rb及E2F-1蛋白,应用免疫组织化学SP法检测122例膀胱肿瘤组织中三种蛋白的表达。结果:FGFR3和E2F-1蛋白在膀胱移行细胞癌与乳头状瘤组中表达... 目的:探讨FGFR3、Rb及E2F-1蛋白在膀胱肿瘤组织中的表达及临床意义。方法:以不同浓度的FGFR3、Rb及E2F-1蛋白,应用免疫组织化学SP法检测122例膀胱肿瘤组织中三种蛋白的表达。结果:FGFR3和E2F-1蛋白在膀胱移行细胞癌与乳头状瘤组中表达的阳性率分别为81.5%(75/92)、56.7%(17/30)和70.7%(65/92)、46.7%(14/30),移行细胞癌组的表达明显高于乳头状瘤组,组间差异有统计学意义(P=0.008;P=0.017)。在移行细胞癌和乳头状瘤中Rb蛋白的阳性表达率分别为68.5%(63/92)和93.3%(28/30),移行细胞癌组的表达低于乳头状瘤组,组间差异有统计学意义(P=0.007)。Spearman等级相关分析显示FGFR3与E2F-1蛋白在膀胱肿瘤组织中的表达呈正相关关系(r=1.000,P<0.05)。Rb与FGFR3、E2F-1蛋白在膀胱肿瘤组织中的表达呈负相关关系(r=-1.000,P<0.05,r=-1.000,P<0.05)。结论:FGFR3、Rb及E2F-1蛋白的表达情况显示膀胱移行细胞癌的发生发展可能与之有关,将三者联合检测对于膀胱移行细胞癌的诊断及判断恶性程度有一定的实用价值。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 FGFR3基因 RB基因 e2f-1基因 免疫组化
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E2F-1对胃癌细胞侵袭转移影响的观察 被引量:6
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作者 马玉林 肖强 +1 位作者 谢玉波 李雷 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2008年第23期1783-1786,共4页
目的:探讨E2F-1对人胃癌细胞MGC-803生物学行为的影响。方法:利用脂质体将pCMV-E2F-1-HA质粒和pCMV-HA质粒分别转染人胃癌细胞MGC-803,应用RT-PCR和蛋白质印迹法检测MGC-803细胞中E2F-1基因的表达;应用体外侵袭实验、迁移实验、细胞基... 目的:探讨E2F-1对人胃癌细胞MGC-803生物学行为的影响。方法:利用脂质体将pCMV-E2F-1-HA质粒和pCMV-HA质粒分别转染人胃癌细胞MGC-803,应用RT-PCR和蛋白质印迹法检测MGC-803细胞中E2F-1基因的表达;应用体外侵袭实验、迁移实验、细胞基质黏附实验和克隆实验分别检测E2F-1对胃癌细胞MGC-803的侵袭力、迁移力、黏附能力和增殖力的影响。结果:转染pCMV-E2F-1-HA质粒的MGC-803细胞检测到E2F-1的表达;转染pCMV-E2F-1-HA质粒的MGC-803细胞的侵袭力、迁移能力和增殖力较转染pCMV-HA质粒的MGC-803细胞和未转染的MGC-803细胞明显降低(P<0.05),细胞黏附能力未见明显变化,P=0.072。结论:E2F-1高表达对人胃癌细胞MGC-803的生物学特性有较大的影响,具有抑制其侵袭转移的作用。 展开更多
关键词 胃肿瘤 基因 e2f-1 转染
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Expression of E2F-1, Rb and ER in Peripheral Papil-loma and Ductal Carcinoma in Situ of the Breast and its Significance
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作者 Yun Niu Yuxia Gao +3 位作者 Xue Yang Yu Li Yong Yu Ajuan Lu 《Chinese Journal of Clinical Oncology》 CSCD 2007年第4期259-263,共5页
OBJECTIVE To investigate the correlation of E2F-1, Rb and ER expression with peripheral papilloma (Peri-PM) and ductal carcinoma in situ of the breast (DCIS), and further explore some molecular mechanisms of the c... OBJECTIVE To investigate the correlation of E2F-1, Rb and ER expression with peripheral papilloma (Peri-PM) and ductal carcinoma in situ of the breast (DCIS), and further explore some molecular mechanisms of the canceratin of Peri-PM.METHODS Imunohistochemistry was used to examine the expression of E2F-1, Rb and ER in 60 Peri-PM, 60 Peri-PM with atypical ductal hyperplasia (Peri-PM with ADH) and 60 DCIS. Normal breast tissues were selected as a control group.RESULTS Based on immunohistochemical staining, the positive rate of E2F-1 expression in Peri-PM, Peri-PM with ADH and DCIS was 21.7%, 46.7% and 78.3% respectively. The positive rate of Rb expression was 83.3 %, 53.9% and 21.7% and the ER expression was 86.7%,61.7% and 55.0%. Significant differences were found among the 3 groups (Peri-PM, Peri-PM with ADH and DCIS) (P〈0.05). Significant differences existed between any 2 groups (P〈0.05) except for the rate of ER positive expression comparing Peri-PM with ADH verus DCIS (P〉0.05). The expression of E2F-1 was nega- tively correlated with ER and Rb, and at the same time the expression of ER was positively correlated with Rb. Following the degree of breast epithelial hyperplasia involved and its development into carcinoma, the positive rate of E2F-1 expression displayed an elevating tendency, but that of Rb and ER expression showed a tendency to decline.CONCLUSION The interaction of the 3 indexes studied may play an important role in the conversion of precancerous lesions to early in situ breast carcinoma, and the evaluation of these indexes might provide a valuable basis for screening high-risk cases of Peri-PM. 展开更多
关键词 e2f-1 RB eR breast peripheral papilloma ductal carcinoma in situ.
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E2F-1和Rb基因表达与乳腺乳头状瘤病及导管内癌的相关性 被引量:12
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作者 牛昀 李妤 +2 位作者 牛瑞芳 吕阿娟 傅西林 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期290-293,共4页
目的 研究细胞周期调控因子E2F 1和Rb与乳腺乳头状瘤病及导管内癌的相关性 ,探讨乳头状瘤病癌变的某些分子机制。方法 采用原位杂交法和免疫组化法对 4 0例乳腺轻度乳头状瘤病、4 0例重度乳头状瘤病和 4 0例导管内癌进行了检测 ,观察E... 目的 研究细胞周期调控因子E2F 1和Rb与乳腺乳头状瘤病及导管内癌的相关性 ,探讨乳头状瘤病癌变的某些分子机制。方法 采用原位杂交法和免疫组化法对 4 0例乳腺轻度乳头状瘤病、4 0例重度乳头状瘤病和 4 0例导管内癌进行了检测 ,观察E2F 1和Rb基因mRNA和蛋白的表达情况。结果 E2F 1mRNA表达阳性率在乳腺轻度乳头状瘤病、重度乳头状瘤病和导管内癌中分别为17.5 %、4 5 .0 %和 80 .0 % ;蛋白表达阳性率分别为 2 0 .0 %、4 7.5 %和 77.5 %。E2F 1mRNA和蛋白表达三组间差异有显著性 (P <0 .0 1) ,组间两两比较 ,差异也有显著性 (P <0 .0 1)。Rb基因mRNA表达阳性率在乳腺轻度乳头状瘤病、重度乳头状瘤病和导管内癌中分别为 90 .0 %、5 0 .0 %和 2 0 .0 % ;蛋白表达阳性率分别为 85 .0 %、5 2 .5 %和 2 2 .5 %。Rb基因mRNA和蛋白表达三组间差异有显著性 (P <0 .0 1) ,组间两两比较 ,差异也有显著性 (P <0 .0 1)。随着乳腺乳头状瘤病程度的加重最终进展为癌 ,E2F 1mRNA和蛋白表达阳性率呈上升趋势 ;RbmRNA和蛋白表达阳性率呈下降趋势。E2F 1和RbmRNA表达均与蛋白表达呈正相关 ,但这两种调控因子的表达呈负相关。结论 E2F 1和Rb基因mRNA和蛋白表达可作为癌症早期较有价值的参考指标 。 展开更多
关键词 e2f-1基因 RB基因 基因表达 乳腺 乳头状瘤 导管内癌 肿瘤 免疫组化法
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慢病毒RNA干扰E2F-1对人胃癌裸鼠皮下瘤耐药性的影响 被引量:5
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作者 孔凡彪 王晓通 +1 位作者 谢玉波 肖强 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期655-659,共5页
目的观察E2F-1基因沉默的慢病毒载体E2F-1/RNAi—LV对人胃癌裸鼠皮下瘤耐药性的影响。方法将人胃癌SGC7901-顺铂(DDP)耐药细胞接种于裸鼠皮下,建立人胃癌耐药裸鼠皮下瘤模型。将成瘤的36只裸鼠随机分为E2F-1/RNAi—LV组、LV—scrR... 目的观察E2F-1基因沉默的慢病毒载体E2F-1/RNAi—LV对人胃癌裸鼠皮下瘤耐药性的影响。方法将人胃癌SGC7901-顺铂(DDP)耐药细胞接种于裸鼠皮下,建立人胃癌耐药裸鼠皮下瘤模型。将成瘤的36只裸鼠随机分为E2F-1/RNAi—LV组、LV—scrRNAi组和PBS组,每组12只。隔日向3组裸鼠肿瘤内分别注射E2F—1/RNAi—LV、LV—scrRNAi或PBS,并按体重腹腔注射DDP,共9次。注射期间和处死裸鼠后测量各组裸鼠的肿瘤体积。应用TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡指数,应用半定量RT—PCR和Western blot法检测肿瘤组织中E2F-1、c—Myc、survivin、多药耐药基因1(MDRl)和多药耐药相关蛋白(MRP)mRNA和蛋白的表达。结果注射慢病毒后,E2F-1/RNAi—LV组肿瘤的生长速度明显减慢。处死裸鼠后,E2F-1/RNAi—LV组裸鼠的肿瘤体积为(745.13±154.42)mm^3,明显低于LV—scrRNAi组[(1988.80±171.35)mm^3]和PBS组[(1633.48±215.25)mm^3,P〈0.05]。E2F-1/RNAi-LV组肿瘤组织的凋亡指数为(27.5±9.7)%,明显高于LV-scrRNAi组[(7.0±1.1)%]和PBS组[(7.3±1.2)%,P〈0.05]。E2F-1/RNAi—LV组肿瘤组织中E2F-1mRNA和蛋白的表达量分别为0.40±0.32和0.35±0.01,明显低于LV-scrRNAi组和PBS组(P〈0.05)。E2F-1/RNAi—LV组c—Myc、survivin、MDR1和MRPmRNA和蛋白的表达量亦明显低于LV-scrRNAi组和PBS组(均P〈0.05)。结论慢病毒载体E2F-1/RNAi-LV瘤内注射可降低人胃癌SGC7901-DDP耐药细胞对DDP的耐药性,抑制人胃癌耐药裸鼠皮下瘤的生长。 展开更多
关键词 e2f-1基因 胃肿瘤 抗药性 肿瘤 裸鼠
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