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K14和CMV启动子驱动裸鼠体内HPV16 E6/E7基因表达的差异 被引量:2
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作者 潘巍巍 徐营 +5 位作者 曹利仙 沈忠飞 李平 郭连军 邬维娅 宋方洲 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期620-626,共7页
人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是一种无包膜的环状闭合双链DNA病毒,具有严格的嗜人组织的特性.为探讨不同启动子驱动HPVE6/E7癌蛋白在裸鼠体内不同组织的表达效率,构建了带有角蛋白(K14)启动子和带有巨细胞病毒(CMV)启动子的E... 人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是一种无包膜的环状闭合双链DNA病毒,具有严格的嗜人组织的特性.为探讨不同启动子驱动HPVE6/E7癌蛋白在裸鼠体内不同组织的表达效率,构建了带有角蛋白(K14)启动子和带有巨细胞病毒(CMV)启动子的E6/E7腺病毒载体(pAd-K14-E6/E7和pAd-CMV-E6/E7),pAd-K14-E6/E7和pAd-CMV-E6/E7、以及作为对照的重组腺病毒空载体pAdtrack-K14和pAd-CMV同源重组后,分别在293细胞中包装,收集重组病毒Ad-K14-E6/E7、Ad-CMV-E6/E7、Adtrack-K14和Ad-CMV,通过尾缘静脉注射到随机分组的裸鼠体内,并每d向裸鼠腹腔注射0.05 mg雌激素.采用RT-PCR和Western免疫印迹检测不同实验组E6/E7 mRNA和蛋白表达水平,免疫组化法检测P53和Bcl-2蛋白表达.结果显示,注射病毒Ad-K14-E6/E7(实验组1)裸鼠子宫体中E6/E7 mRNA、E6蛋白质、P53和Bcl-2蛋白高表达,而其它组织中低表达;注射病毒Ad-CMV-E6/E7(实验组2)裸鼠各组织E6/E7 mRNA、E6蛋白质、P53和Bcl-2蛋白均低表达.研究表明,在裸鼠体内角蛋白K14启动子可以调控E6/E7在子宫体中表达,CMV启动子未能诱导E6/E7在子宫体中表达. 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 腺病毒 e6/e7基因 裸鼠 CMV启动子 角蛋白K14启动子
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HPV16E6/E7基因及蛋白表达与宫颈癌的相关性研究 被引量:3
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作者 李翎 罗红敏 +1 位作者 陈琳 王春英 《山东医药》 CAS 北大核心 2006年第8期11-13,共3页
目的研究人乳头状瘤病毒16型(HPV16)E6/E7基因及其蛋白表达在宫颈疾病及其癌变中的作用。方法运用PCR技术检测51例宫颈癌(癌症组)、20例富颈上皮瘤变(CIN)Ⅱ~Ⅲ级(CIN组)、20例宫颈炎(炎症组)患者病变组织中HPV16 E6/E7基... 目的研究人乳头状瘤病毒16型(HPV16)E6/E7基因及其蛋白表达在宫颈疾病及其癌变中的作用。方法运用PCR技术检测51例宫颈癌(癌症组)、20例富颈上皮瘤变(CIN)Ⅱ~Ⅲ级(CIN组)、20例宫颈炎(炎症组)患者病变组织中HPV16 E6/E7基因,并运用免疫组化SP法检测癌症组癌组织中HPV16E6、E7的表达情况。结果癌症组、CIN组、炎症组HPV16 E6检出率分别为5%、35%、45%.后两者明显高于前者(P〈0.05),HPV16 E7检出率分别为65%、75%、68.6%,P均〉0.05;癌症组45例HPV16 E6和42例E7蛋白阳性表达(88.2%、82.3%)。HPV16 E6蛋白表达与临床分期、肿瘤分化程度和淋巴结有无转移均无相关性(P〉0.05),HPV16 E7蛋白表达与临床分期和淋巴结有无转移相关(P〈0.05),与肿瘤分化程度无相关性(P〉0.05)。结论HPV16 E6/E7基因与宫颈疾病及其癌变的关系密切。 展开更多
关键词 乳头状瘤病毒 宫颈癌肿瘤 e6/e7基因 基因表达
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HPV E6/E7基因和HPV L1基因DNA检测的比较及意义 被引量:1
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作者 王慧静 谢旺凯 +6 位作者 王俭 肖兰兰 计苏慧 薛向阳 董海艳 王乐丹 陈向敏 《中外医学研究》 2016年第36期5-8,共4页
目的:比较宫颈组织人乳头瘤病毒16亚型中HPV早期基因(E6/E7)和晚期基因(L1)的检出情况,并分析其作为宫颈癌及癌前病变评价的意义。方法:选择高危型(HR)-HPV16亚型的E6/E7区基因和HR-HPV的L1区基因设计特异性引物,优化条件,建立高危型HP... 目的:比较宫颈组织人乳头瘤病毒16亚型中HPV早期基因(E6/E7)和晚期基因(L1)的检出情况,并分析其作为宫颈癌及癌前病变评价的意义。方法:选择高危型(HR)-HPV16亚型的E6/E7区基因和HR-HPV的L1区基因设计特异性引物,优化条件,建立高危型HPV16分型检测方法。分别收集宫颈组织慢性宫颈炎22例,宫颈上皮内瘤变、宫颈鳞癌54例共76例组织标本,根据病理学诊断结果分为两组,对照组(慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤变(CINⅠ级)和高级别宫颈病变组(CINⅡ级、CINⅢ级、宫颈鳞癌),抽提DNA,采用新建立的方法对HPV早、晚期基因进行PCR检测,同时与临床的杂交捕获二代法(HCⅡ)检测的HPV L1基因进行比较。结果:成功建立了敏感、特异的基于E6/E7和L1基因的PCR检测方法,E6/E7基因HPV16分型检测阳性率为55.3%(42/76),HPV L1和HCⅡ-HPV L1检测阳性率均为25.0%(19/76),E6/E7基因阳性率明显高于HPV L1和HCⅡ-HPV L1,差异有统计学意义(P<0.01);而HPV L1和HCⅡ-HPV L1基因阳性率的差异无统计学意义(P>0.05)。对照组的HPV E6/E7、HPV L1和HCⅡ-HPV L1阳性率分别为29.0%、9.7%和12.9%,显著低于高级别宫颈病变组的73.3%、35.6%和33.3%(P<0.05)。HPV早期基因(E6/E7)与晚期基因(L1)检测结果关联性分析,对照组HPV E6/E7与HPV L1的检测结果有关联(P<0.05);高级别宫颈病变组HPV E6/E7与HPV L1的检测结果有关联(P<0.01);其余检测结果均没有关联(P>0.05)。结论:HPV E6/E7基因比L1基因检测更具灵敏、高效、实用的特点,将E6/E7基因HPV16亚型阳性检测结果与CINⅡ以上病理诊断结果相结合,可作为预测评价临床早期宫颈病变及宫颈癌的有效方法之一。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16亚型 e6/e7基因 L1基因 聚合酶链式反应
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人乳头状瘤病毒16型E6/E7基因对人喉鳞癌细胞系表皮生长因子受体和基质金属蛋白酶9表达的影响
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作者 蔡萍 吴展元 李金荣 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期768-769,共2页
表皮生长因子受体(EGFR)和基质金属蛋白酶(MMP)9在肿瘤的侵袭和转移发生过程中发挥着重要作用,其表达上调能导致肿瘤的侵袭和转移潜能增强。人乳头状瘤病毒16(HPV16)为喉鳞癌的主要致病因素,其主要转化活性部位在E6和E7开放读... 表皮生长因子受体(EGFR)和基质金属蛋白酶(MMP)9在肿瘤的侵袭和转移发生过程中发挥着重要作用,其表达上调能导致肿瘤的侵袭和转移潜能增强。人乳头状瘤病毒16(HPV16)为喉鳞癌的主要致病因素,其主要转化活性部位在E6和E7开放读码框架。我们采用脂质体转染技术将携带有HPV16-E6/E7DNA的真核表达质粒导入HPV阴性的Lscc-02喉鳞癌细胞系,使其在细胞中表达,研究其对Lscc-02喉鳞癌细胞系EGFR和MMP-9mRNA及蛋白表达的影响,探讨HPV16-E6/E7基因与喉鳞癌演进及预后的关系。 展开更多
关键词 人乳头状瘤病毒16 e6/e7基因 基质金属蛋白酶9 表皮生长因子受体 鳞癌细胞系 人喉 HPV16-e6 MMP-9MRNA
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HPV16 E6,E7基因与宫颈疾病及其癌变的关系
5
作者 徐波 卞度宏 《广东医学》 CAS CSCD 2004年第2期159-160,共2页
目的 研究人乳头状瘤病毒 1 6型 (HPV1 6 )E6 /E7基因在宫颈疾病及其癌变中的作用。方法 运用PCR的方法扩增HPV1 6E6 /E7基因 ,分子克隆技术进行基因的克隆并进行基因序列的测定 ,病理学的方法确诊宫颈炎、CINⅡ~Ⅲ级和宫颈癌。结果... 目的 研究人乳头状瘤病毒 1 6型 (HPV1 6 )E6 /E7基因在宫颈疾病及其癌变中的作用。方法 运用PCR的方法扩增HPV1 6E6 /E7基因 ,分子克隆技术进行基因的克隆并进行基因序列的测定 ,病理学的方法确诊宫颈炎、CINⅡ~Ⅲ级和宫颈癌。结果 宫颈癌 ,CINⅡ~Ⅲ级 ,宫颈炎组织中HPV1 6E6 /E7总检出率分别为 70 % ,75 %和 6 5 %。其中HPV1 6E7的检出率在三者之间差异无显著性 ,HPV1 6E6的检出率在宫颈癌与CINⅡ~Ⅲ级之间差异无显著性 ,但两者都高于宫颈炎。结论 HPV1 6E6 /E7基因与宫颈疾病及其癌变的关系密切 ,在宫颈疾病的癌变过程中 ,E6基因可能发挥了重要的作用。 展开更多
关键词 宫颈疾病 宫颈癌 人乳头状瘤病毒16 e6/e7基因 聚合酶链反应
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2013年-2015年舟山海岛地区人乳头状瘤病毒E6/E7基因变迁分析
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作者 周晓 杜玲 《中国卫生检验杂志》 CAS 2017年第4期588-589,593,共3页
目的调查和分析2013年-2015年舟山地区妇女的人乳头状瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA阳性率变迁。方法选取2013年1月-2015年12月在本院就诊的本地常住妇女503例,采集宫颈脱落细胞,荧光定量PCR法检测HPV E6/E7 mRNA表达,以HPV E6/E7 mRNA>103... 目的调查和分析2013年-2015年舟山地区妇女的人乳头状瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA阳性率变迁。方法选取2013年1月-2015年12月在本院就诊的本地常住妇女503例,采集宫颈脱落细胞,荧光定量PCR法检测HPV E6/E7 mRNA表达,以HPV E6/E7 mRNA>103为阳性。结果共计HPV E6/E7 mRNA阳性88例,总阳性率为17.49%。≤30岁组中,2015年的HPV E6/E7 mRNA阳性率高于2014年,差异有统计学意义(χ~2=4.08,P<0.05),≥41岁组中,2015年的HPV E6/E7 mRNA阳性率高于2014年,差异有统计学意义(χ~2=8.92,P<0.01)。2015年的乡村组HPV E6/E7 mRNA阳性率高于2014年,差异有统计学意义(χ~2=11.14,P<0.01)。结论舟山地区≥41岁和乡村妇女是HPV E6/E7 mRNA阳性高发人群,有必要对其加强宫颈癌病变监控。 展开更多
关键词 人乳头状瘤病毒 荧光定量聚合酶链式反应 e6/e7基因
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HPV DNA和HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈癌筛查中的应用价值探讨 被引量:35
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作者 蒙志平 黎勇明 +5 位作者 杨玲 吴险 梁金艳 林丽文 梁婷 黄川英 《实用临床医药杂志》 CAS 2016年第11期76-79,共4页
目的探讨HPV DNA和HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈癌筛查中的应用价值。方法选取宫颈病变筛查的受试者407例为研究对象,均行宫颈薄层液基细胞学(TCT)检查,并检测细胞学标本中HPV DNA和HPV E6/E7 mRNA的表达。215例行阴道镜宫颈活检,结合组织... 目的探讨HPV DNA和HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈癌筛查中的应用价值。方法选取宫颈病变筛查的受试者407例为研究对象,均行宫颈薄层液基细胞学(TCT)检查,并检测细胞学标本中HPV DNA和HPV E6/E7 mRNA的表达。215例行阴道镜宫颈活检,结合组织病理诊断结果进行统计分析。结果 407例细胞病理学诊断结果:正常范围(WNL)192例(47.17%)、意义不明的不典型鳞状上皮细胞(ASCUS)106例(26.04%)、低度鳞状上皮内病变(LSIL)70例(17.20%)和高度鳞状上皮内病变(HSIL)39例(9.58%)。诊断为LSIL和HSIL患者中,HPV DNA和HPV E6/E7 mRNA检出率差异无统计学意义(P>0.05);诊断为ASCUS患者中,HPV DNA检出率显著高于HPV E6/E7 mRNA(P<0.01)。215例组织病理学诊断结果:正常109例,阴性106例,包括CINⅠ级44例、CINⅡ级27例、CINⅢ级32例、宫颈鳞癌3例。对于诊断为CINⅡ级、CINⅢ级/宫颈癌患者,HPV DNA和HPV E6/E7 mRNA检测的灵敏度、特异度和阳性预测值差异无统计学意义(P>0.05),但HPV E6/E7 mRNA检测的阴性预测值和准确度显著高于HPV DNA检测(P<0.05或P<0.01)。结论 HPV E6/E7 mRNA检查较HPV DNA检查能更好地评估HPV感染患者宫颈病变恶化风险,联合TCT检测对提高宫颈癌早期筛查和诊断的准确度具有积极意义。 展开更多
关键词 宫颈癌 宫颈上皮内瘤变 人乳头瘤状病毒 HPV DNA e6/e7基因
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宫颈癌HPV E6/R7 mRNA与血清SCCA CEA水平的相关性 被引量:4
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作者 邹科 杨弋弋 +5 位作者 周新欢 杨小卓 王远航 徐小晶 张广敏 雷雯 《安徽医学》 2021年第9期1050-1053,共4页
目的分析宫颈癌患者人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA与血清鳞状细胞癌抗原(SCCA)、癌胚抗原(CEA)水平的相关性。方法选择2018年10月至2020年3月于河南省南阳市中心医院行宫颈病变筛查的178例可疑宫颈癌女性作为研究对象,均完成液基细胞学... 目的分析宫颈癌患者人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA与血清鳞状细胞癌抗原(SCCA)、癌胚抗原(CEA)水平的相关性。方法选择2018年10月至2020年3月于河南省南阳市中心医院行宫颈病变筛查的178例可疑宫颈癌女性作为研究对象,均完成液基细胞学筛查及HPV E6/E7 mRNA检测,并采血测定SCCA、CEA水平。所有对象按阴道细胞学的分类及报告细则(TBS)分为正常/炎症组(n=25)、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)Ⅰ级组(n=22)、CINⅡ级组(n=26)、CINⅢ级组(n=35)、宫颈癌组(n=70);宫颈癌患者均按TNM分期分为I~Ⅱ期组(n=38)、Ⅲ~Ⅳ期组(n=32),按组织学分级分为低分化组(n=8)、中分化组(n=27)与高分化组(n=35)。比较各组HPV E6/E7 mRNA阳性率及血清SCCA、CEA水平差异,采用Spearman相关分析法分析宫颈癌HPV E6/E7 mRNA与SCCA、CEA的相关性。结果宫颈癌患者HPV E6/E7 mRNA阳性率及HPV E6/E7 mRNA copies高于正常/炎症组、CINⅠ级组、CINⅡ级组、CINⅢ级组的患者(P<0.05);CINⅢ级组患者HPV E6/E7 mRNA copies高于正常/炎症组、CINⅠ级组、CINⅡ级组患者(P<0.05),CINⅡ级HPV E6/E7 mRNA copies高于正常/炎症组、CINⅠ级组,CINⅠ级HPV E6/E7 mRNA copies又高于正常/炎症组(P<0.05),差异均有统计学意义。宫颈癌患者血清SCCA、CEA水平均高于正常/炎症组、CINⅠ级组、CINⅡ级组、CINⅢ级组患者(P<0.05),CINⅢ级组血清SCCA水平高于正常/炎症组、CINⅠ级组患者(P<0.05);Ⅲ、Ⅳ期宫颈癌患者血清SCCA、CEA水平均高于Ⅰ、Ⅱ期患者(P<0.05)。低分化组患者SCCA、CEA水平高于高分化组、中分化组患者,中分化组SCCA、CEA水平高于高分化组患者(P<0.05)。HPV E6/E7 mRNA阳性宫颈癌患者血清SCCA、CEA高于阴性患者(P<0.05)。HPV E6/E7 mRNA与血清SCCA、CEA水平呈正相关性(r=0.525、0.655,P均<0.05)。结论随宫颈病变的进展,患者HPV E6/E7 mRNA阳性率及SCCA、CEA表达水平增高;且宫颈癌患者HPV E6/E7 mRNA与血清SCCA、CEA水平呈正相关性。 展开更多
关键词 宫颈癌 人乳头瘤病毒 鳞状细胞癌抗原 癌胚抗原 e6/e7基因
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HPV16、18型E6/E7融合基因痘苗病毒表达载体的构建
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作者 陈富强 邓金桂 +2 位作者 兰新平 孙业红 李体远 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期653-657,共5页
目的:构建一种含人乳头瘤病毒(HPV)16型、18型E6/E7融合基因痘苗病毒表达载体。方法:PCR扩增HPV16型、18型E6、E7基因,克隆到pSC-A载体中,通过定点突变方法,分别构建成含E6/E7融合基因的质粒,即pSC-A-HPV16 E6/E7和pSC-A-HPV18 mE6/E7,... 目的:构建一种含人乳头瘤病毒(HPV)16型、18型E6/E7融合基因痘苗病毒表达载体。方法:PCR扩增HPV16型、18型E6、E7基因,克隆到pSC-A载体中,通过定点突变方法,分别构建成含E6/E7融合基因的质粒,即pSC-A-HPV16 E6/E7和pSC-A-HPV18 mE6/E7,并将二者连接成载体pSC-A-HPV16 E6/E7-HPV18mE6/E7(pSC-T,HPV16 E6/E7-HPV18mE6/E7:T),最后以痘苗病毒表达载体pJ38为转移载体,构建质粒pJ38-HPV16 E6/E7-HPV18mE6/E7(pJ38-T),对所有重组质粒进行酶切鉴定和测序分析。结果:E6/E7融合基因成功克隆到pJ38上。结论:成功构建表达HPV E6/E7融合基因重组痘苗病毒载体,为研制宫颈癌治疗性疫苗奠定基础。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16 、18型 基因克隆 定点突变 e6/e7融合基因 痘苗病毒表达载体
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反义HPV16 E6/E7-EGFP重组质粒的构建及其对宫颈癌SiHa细胞的促凋亡作用
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作者 司马妮 孔德波 +5 位作者 王薇 罗爱月 王娟 卢运萍 王世宣 马丁 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2006年第12期894-897,I0011,共5页
目的:构建HPV16早期基因E6/E7的反义重组质粒,探讨其对SiHa细胞的促凋亡作用。方法:将HPV16E6/E7基因片段反向克隆于真核表达载体pEGFP-C1并转染SiHa细胞,用RT-PCR方法检测转染后SiHa细胞E6、E7基因mRNA的表达,West-ernblot方法检测转染... 目的:构建HPV16早期基因E6/E7的反义重组质粒,探讨其对SiHa细胞的促凋亡作用。方法:将HPV16E6/E7基因片段反向克隆于真核表达载体pEGFP-C1并转染SiHa细胞,用RT-PCR方法检测转染后SiHa细胞E6、E7基因mRNA的表达,West-ernblot方法检测转染后E6/E7蛋白的表达,流式细胞仪检测转染后细胞的凋亡率。结果:成功构建携带HPV16E6/E7基因反义片段的真核表达载体,转染该质粒后,SiHa细胞E6、E7基因的mRNA和蛋白均明显下调;转染后细胞凋亡率为(59.3±11.3)%,明显高于转染空载体组[(9.4±1.8)%]和未转染组[(2.1±0.4)%](P<0.05)。结论:反义HPV16E6/E7基因可下调宫颈癌细胞中E6/E7癌基因的表达,诱导宫颈癌细胞凋亡,为宫颈癌的基因治疗提供了实验依据。 展开更多
关键词 人乳头状瘤病毒16 e6/e7基因 细胞凋亡 宫颈肿瘤
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人乳头状瘤病毒E6/E7诊断宫颈癌的应用价值 被引量:2
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作者 黄琼琼 许晓佳 《深圳中西医结合杂志》 2022年第1期80-82,共3页
目的:探讨人乳头状瘤病毒(HPV)E6/E7诊断宫颈癌的应用价值。方法:选取2019年1月至2019年12月在揭阳市妇幼保健计划生育服务中心行宫颈病变筛查的受试者100例为研究对象。所有受试者均采用HPV脱氧核糖核酸(DNA)与HPV E6/E7信使核糖核酸(m... 目的:探讨人乳头状瘤病毒(HPV)E6/E7诊断宫颈癌的应用价值。方法:选取2019年1月至2019年12月在揭阳市妇幼保健计划生育服务中心行宫颈病变筛查的受试者100例为研究对象。所有受试者均采用HPV脱氧核糖核酸(DNA)与HPV E6/E7信使核糖核酸(mRNA)进行检测,并以阴道镜组织病理学的诊断结果为金标准,比较两种检测方法的诊断效能,并比较不同年龄段下两种检测方法的诊断结果。结果:HPV E6/E7mRNA的诊断灵敏度、特异度、阳性预测值均高于HPV DNA,差异均具有统计学意义(P<0.05)。两种检测方法下,36~55岁患者的阳性检出率均高于其他年龄段,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:采用HPV E6/E7 mRNA检测宫颈癌的灵敏度、特异度、阳性预测值均高于HPV DNA检测,临床诊断宫颈癌时,除了需考虑阴道镜组织检查、HPV E6/E7 mRNA及HPV DNA临床诊断结果外,还需结合患者年龄因素进行综合判断,避免漏诊。 展开更多
关键词 宫颈癌 人乳头状瘤病毒 e6/e7基因
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TCT联合HPVE6/E7在宫颈癌筛查中的应用 被引量:8
12
作者 陈颖 林文毅 周萍 《检验医学与临床》 CAS 2017年第15期2216-2218,共3页
目的探讨薄层液基细胞学(TCT)和人乳头瘤病毒致癌基因E6/E7(HPV E6/E7)检测对宫颈癌筛查的临床价值分析。方法选择该院7 434例同时进行TCT和HPV E6/E7联合筛查宫颈病变的女性患者作为研究对象。对筛查结果异常的患者进行进一步检查,即... 目的探讨薄层液基细胞学(TCT)和人乳头瘤病毒致癌基因E6/E7(HPV E6/E7)检测对宫颈癌筛查的临床价值分析。方法选择该院7 434例同时进行TCT和HPV E6/E7联合筛查宫颈病变的女性患者作为研究对象。对筛查结果异常的患者进行进一步检查,即进行阴道镜检查或活体组织检查。结果 7 434例女性就诊者中阴性患者6 375例,阳性患者1 059例,阳性率为14.27%;在阳性患者中,HPV E6/E7mRNA拷贝数为1~1 000共407例,HPV E6/E7mRNA拷贝数≥1 000共652例。随着HPV E6/E7mRNA拷贝数的增加,HPV-mRNA的表达水平也在增强,患者患宫颈上皮内病变及宫颈癌的风险也在增加。同时,将TCT单独筛查结果与TCT联合HPV E6/E7mRNA两组相比较,TCT单独筛查灵敏度59.12%,特异度36.03%;TCT联合HPV E6/E7mRNA筛查组灵敏度85.74%,特异度76.73%,差异均有统计学意义(P<0.05)。将HPV E6/E7mRNA拷贝数1~1 000及拷贝数≥1 000两组联合TCT筛查方案进行比较,前者灵敏度74.00%,特异度91.88%;后者灵敏度81.77%,特异度55.83%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TCT联合HPV E6/E7进行宫颈癌筛查,可以对宫颈上皮内病变的进展进行有效的风险评估,能更准确的判断宫颈上皮内病变的程度及预后发展。 展开更多
关键词 薄层液基细胞学 人乳头瘤病毒致癌基因e6/e7 宫颈癌
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HPV58在宫颈癌组织中的感染分析及其转化基因的克隆(英文) 被引量:1
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作者 高艳娥 金雯 +2 位作者 薛琴琴 惠慧 赵艳 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期647-651,655,共6页
目的分析中国陕西宫颈癌组织中HPV58的感染情况并克隆其E6、E7主要转化基因。方法采用HPVGP5+/GP6+通用引物PCR扩增58例宫颈癌组织DNA粗提物,继之将荧光偏振技术与模板指导的末端延伸反应(TDI-FP)结合,应用探针杂交延伸反应检测HPV58。... 目的分析中国陕西宫颈癌组织中HPV58的感染情况并克隆其E6、E7主要转化基因。方法采用HPVGP5+/GP6+通用引物PCR扩增58例宫颈癌组织DNA粗提物,继之将荧光偏振技术与模板指导的末端延伸反应(TDI-FP)结合,应用探针杂交延伸反应检测HPV58。用特异性引物随机从1例HPV58阳性标本中PCR扩增HPV58E6、E7基因,将其分别与pGEM-TEasy载体连接,所获得的重组质粒经内切酶消化和测序鉴定。结果58例宫颈癌标本中10例(17.24%)为HPV58阳性,克隆获得的HPV58E6、E7重组质粒经BLAST分析证实分别含有HPV58完整的E6、E7基因,与GenBank收录的标准株比较,E6、E7基因分别有5个和2个硷基发生变异,可导致相应的蛋白质氨基酸序列中分别有4个和1个氨基酸替换。结论中国陕西人宫颈癌组织中HPV58感染较为多见,且HPV58E6和E7转化基因的硷基序列与标准株有所差异。本研究为下一步HPV58相关肿瘤诊断试剂及疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒58型 e6/e7基因 荧光偏振 克隆 宫颈癌
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人乳头瘤病毒16型早基因E6/E7编码区序列变异研究 被引量:4
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作者 余南 辜为为 +1 位作者 刘红娥 孙洪青 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2009年第1期1-3,10,共4页
目的获取人乳头瘤病毒16型早基因E6/E7的编码区序列并进行变异分析,为新型分子诊断方法的研发提供目标序列。方法通过导流杂交基因芯片技术获取人乳头瘤病毒16型感染宫颈脱落细胞。设计特异性引物,扩增人乳头瘤病毒16型早基因E6/E7的编... 目的获取人乳头瘤病毒16型早基因E6/E7的编码区序列并进行变异分析,为新型分子诊断方法的研发提供目标序列。方法通过导流杂交基因芯片技术获取人乳头瘤病毒16型感染宫颈脱落细胞。设计特异性引物,扩增人乳头瘤病毒16型早基因E6/E7的编码区序列,克隆后测序并对序列进行变异分析。结果通过导流杂交基因芯片技术进行宫颈脱落细胞的分型检测,获得了人乳头瘤病毒16型感染阳性标本;选择其中3份阳性标本核酸为模板,通过特异性引物均成功扩增出大小介于750 bp和1 000 bp之间的目的序列;分别克隆到T载体上并测序,得到3条人乳头瘤病毒16型早表达基因E6/E7的编码区序列,克隆并测序后向GenBank核酸数据库提交获收录,登录号分别为EU869316、EU869317和EU869318;经BLAST分析,3条序列与GenBank序列PPH16(Accession:K02718)的E6/E7编码区序列一致性均为99%,且存在8种碱基置换,其中4种为同义突变,另4种则可引起所编码的相应氨基酸残基改变。结论本研究得到了与HPV高危型16型PPH16高度相似的E6/E7编码序列,为HPV致病机制和新型分子检测方法研究奠定了基础。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 基因e6/e7 编码区序列 变异
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HPV E6E7、宫颈液基细胞学、阴道镜活检在宫颈癌的筛查价值研究进展 被引量:9
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作者 秦会影 杨贵霞 +2 位作者 徐阳 张欢 赵佳丽 《中国妇产科临床杂志》 CSCD 2022年第3期332-334,共3页
宫颈癌常因高危型人乳头状瘤病毒(HPV)持续感染进展而来,患者早期症状常不显著,仅在宫颈癌晚期出现阴道出血等症状,通过接种疫苗和定期筛查是预防宫颈癌最有效的方法。HPV E6E7检测、宫颈液基细胞学检查(TCT)和阴道镜活检是常用的宫颈... 宫颈癌常因高危型人乳头状瘤病毒(HPV)持续感染进展而来,患者早期症状常不显著,仅在宫颈癌晚期出现阴道出血等症状,通过接种疫苗和定期筛查是预防宫颈癌最有效的方法。HPV E6E7检测、宫颈液基细胞学检查(TCT)和阴道镜活检是常用的宫颈癌筛查检测手段,本研究总结国内外相关研究,综述了TCT、HPV E6E7检测和阴道镜活检在宫颈癌筛中的应用,以期为推进宫颈癌的防治提供一定的理论基础。 展开更多
关键词 致癌基因e6/e7 宫颈液基细胞学 阴道镜活检 宫颈癌
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口咽和非口咽鳞状细胞癌中Trk蛋白的表达:人乳头瘤病毒感染的临床意义和可能的作用 被引量:1
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作者 Cho YA Chung JM +1 位作者 Ryu H 赵泽亮 《中国口腔颌面外科杂志》 CAS 2018年第6期510-510,共1页
Cho YA,Chung JM,Ryu H,et al.Investigating Trk protein expression between oropharyngeal and non-oropharyngeal squamous cell carcinoma:clinical implications and possible roles of human papillomavirus infection.Cancer Re... Cho YA,Chung JM,Ryu H,et al.Investigating Trk protein expression between oropharyngeal and non-oropharyngeal squamous cell carcinoma:clinical implications and possible roles of human papillomavirus infection.Cancer Res Treat,2018Oct 24.目的:头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)与原肌球蛋白相关激酶(Trk)亚型之间的关系尚未得到深入研究。本研究评估了TrkA、TrkB和panTrk的表达模式及其临床病理学意义:以及与p16表达和人乳头瘤病毒(H由)状态的关系。材料与方法:共纳入396例根治性ISl咽部(n=121)和非口咽部(n=275)HNSCCs。进行TrkA、TrkB和panTrk的免疫组织化学染色。此外,进行p16免疫组织化学染色以评估HPV状态。使用HPV阴性HNSCC细胞系FaDu和CAL27.转染HPVl6型E6/E7基因.然后分析TrkA和TrkB表达的变化。结果:在HNSCC临床样本中.TrkA和panTrk的高表达与口咽和p16阳性鳞状细胞癌(SCC)的关系更为密切。在完全切除(R0切除)的口咽SCC患者中.TrkA高表达与总生存期和无复发生存期(RFS)相关。在R0切除的口腔SCC患者中,panTrk高表达与RFS较差有关。在HPV型E6,E7基因转染的FaDu和CAL27细胞系中.观察到TrkA表达增加。结论:panTrk和TrkA的表达模式似乎因HNSCC的解剖部位而不同.并且与p16表达和患者预后密切相关。 展开更多
关键词 头颈部鳞状细胞癌 人乳头瘤病毒感染 TRKA 原肌球蛋白 临床意义 口咽部 免疫组织化学染色 e6/e7基因
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皮肤科学基础
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《中国医学文摘(皮肤科学)》 2007年第2期75-80,共6页
关键词 科学基础 人乳头瘤病毒16 表皮黑素细胞 e6/e7基因 RBL-2H3 氧化苦参碱 皮肤 黑素生成
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人乳头瘤病毒引起裸鼠生殖系统病变的研究
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作者 潘巍巍 曹利仙 +5 位作者 易发平 徐营 卜友泉 赖国旗 马永平 宋方洲 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期35-40,共6页
重组的腺病毒Ad-CMV-E6/E7和Ad-K14-E6/E7在293细胞中包装后得到上清液,将Ad-CMV-E6/E7和Ad-K14-E6/E7病毒上清液以及做为对照的重组腺病毒空载体pAd-CMV和pAdtrack-K14的上清液,经过纯化后,通过裸鼠的尾缘静脉注射到裸鼠体内,每天注射0... 重组的腺病毒Ad-CMV-E6/E7和Ad-K14-E6/E7在293细胞中包装后得到上清液,将Ad-CMV-E6/E7和Ad-K14-E6/E7病毒上清液以及做为对照的重组腺病毒空载体pAd-CMV和pAdtrack-K14的上清液,经过纯化后,通过裸鼠的尾缘静脉注射到裸鼠体内,每天注射0.05 mg雌激素给注射病毒的裸鼠,同时做对照。12周后给裸鼠注射2.5%的阿佛丁进行麻醉,取其子宫、阴道、卵巢、乳腺等组织,浸泡在3.75%的多聚甲醛中4℃固定过夜,做石蜡包埋切片、HE染色、免疫组化检测P53蛋白和Bcl-2蛋白的表达,取裸鼠的各个组织提取DNA、RNA和蛋白质,然后分别检测有无重组腺病毒的感染、病毒表达的情况及E6蛋白的表达。HE染色结果显示注射腺病毒Ad-K14-E6/E7的裸鼠(实验组2)子宫颈-子宫体移行组织增生明显。SP法免疫组化检测突变型P53和Bcl-2在该组裸鼠的子宫基质细胞表达增加,并且RT-PCR检测该组裸鼠子宫组织也有E6/E7的表达,Western Blot检测该组子宫组织也有E6蛋白的表达。动物实验结果表明K14启动子增加了E6/E7在裸鼠子宫组织的表达,同时也发现该组裸鼠的子宫颈-子宫体移行组织有增生改变。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 腺病毒 e6/e7基因 裸鼠
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