柚皮苷调控miR-199a-5p/ECE1分子轴促进骨损伤修复 被引量：7

1

作者 刘冲 曹慧 +1 位作者 杨彩彩 王震 《昆明医科大学学报》 CAS 2020年第6期32-38,共7页

目的探讨柚皮苷通过调控mi R-199a-5p/ECE1分子轴对骨损伤修复的影响。方法 Western blotting检测ECE1及成骨分化相关标志物的表达水平;RT-qPCR检测mi RNAs相对表达水平;双荧光素酶报告基因验证mi R-199a-5p和ECE1靶向关系;MTT检测MC3T3... 目的探讨柚皮苷通过调控mi R-199a-5p/ECE1分子轴对骨损伤修复的影响。方法 Western blotting检测ECE1及成骨分化相关标志物的表达水平;RT-qPCR检测mi RNAs相对表达水平;双荧光素酶报告基因验证mi R-199a-5p和ECE1靶向关系;MTT检测MC3T3-E1细胞增殖活力;碱性磷酸酶(ALP)检测MC3T3-E1细胞成骨分化能力;茜素红染色检测MC3T3-E1细胞矿化情况。结果柚皮苷处理显著促进MC3T3-E1细胞增殖活力、成骨分化指标Runx2、OPN、BMPs、OC等的表达、ALP活性以及细胞钙化能力水平(P<0.01)。其中20ng/m L浓度处理的效果最优。RT-qPCR检测结果显示,柚皮苷能显著上调mi R-199a-5p的表达水平。双荧光素酶报告基因检测结果表明ECE1是mi R-199a-5p的一个靶基因;并且,mi R-199a-5p靶向下调ECE1的表达。进一步实验表明,敲降mi R-199a-5p显著降低柚皮苷对MC3T3-E1细胞增殖活力、ALP活性和钙矿化的促进作用(P<0.01);敲降ECE1显著促进了柚皮苷对MC3T3-E1细胞增殖活力、ALP活性和生物矿化能力的促进作用(P<0.01);柚皮苷处理加同时敲降mi R-199a-5p和ECE1组MC3T3-E1细胞增殖活力、ALP活性和钙矿化能力与柚皮苷组无显著差异(P>0.05)。对细胞成骨分化标志的检测也证明了上述结果。由此可知,柚皮苷通过上调mi R-199a-5p对ECE1靶向下调作用,进而促进MC3T3-E1细胞增殖活力、成骨分化和矿化能力。结论柚皮苷处理显著促进了MC3T3-E1细胞的成骨分化水平;这种作用是通过上调mi R-199a-5p/ECE1分子轴实现的。 展开更多

关键词 骨损伤修复 柚皮苷 miR-199a-5p ece1 成骨分化

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构建ECE1 3'UTR荧光素酶报告基因载体验证其与miR-199a-5p靶向关系 被引量：1

2

作者 鲍宁 陈凤收 +2 位作者 姜艳华 方波 马虹 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第2期207-210,243,共5页

目的:通过构建双荧光素酶报告基因重组质粒验证miRNA-199a-5p(miR-199a-5p)与ECE1基因的靶向调控关系。方法:通过microRNA靶基因预测软件Targetscan获取miR-199a-5p与ECE1基因3'UTR潜在的互补结合位点,PCR技术扩增ECE1基因3'端... 目的:通过构建双荧光素酶报告基因重组质粒验证miRNA-199a-5p(miR-199a-5p)与ECE1基因的靶向调控关系。方法:通过microRNA靶基因预测软件Targetscan获取miR-199a-5p与ECE1基因3'UTR潜在的互补结合位点,PCR技术扩增ECE1基因3'端非翻译区,将此序列与miR-199a-5p mimics或空质粒(NC)共转染到pmirGLO-ECE1-野生型(WT)的293细胞里;将此序列突变序列与miR-199a-5p mimics或NC共转染到pmirGLO-ECE1-突变型(MUT)的293细胞里,共四组,检测四组细胞中荧光素酶活性。结果:成功构建双荧光素酶报告基因重组质粒pmirGLO-ECE1-WT和pmirGLO-ECE1-MUT。与野生型NC(4.30±0.53)组及突变型miR-199a-5p mimics组(4.465±0.3968)比较,野生型miR-199a-5p mimics组(1.686±0.4098)荧光素酶活性明显降低,P<0.05,有显著差异;突变型miR-199a-5p mimics组(4.465±0.3968)与突变型miR-199a-5p NC(4.18±0.498)组及野生型NC(4.30±0.53)组两两比较,P>0.05,无明显差异。结论:miR-199a-5p与野生型ECE1存在结合位点,miR-199a-5p对野生型ECE1重组质粒荧光活性有明显的抑制作用,证实miR-199a-5p能够靶向调控ECE1基因。 展开更多

关键词 MiRNA-199a-5p ece1基因 荧光素酶报告基因 3’端非翻译区

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端粒酶抑制因子X1过表达对人食管癌EC1细胞增殖及凋亡的影响 被引量：2

3

作者 赵倩 卢桂芳 +4 位作者 刘亚萍 和水祥 任牡丹 李雅睿 杨振威 《国际消化病杂志》 CAS 2023年第1期28-31,38,共5页

目的探究端粒酶抑制因子X1(PinX1)对人食管癌EC1细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养人食管癌细胞系EC1细胞株,并将其分为空白对照(NG)组(空白对照细胞)、pcDNA组(转染阴性对照质粒)、pcDNA-PinX1组(转染PinX1过表达质粒)、N-乙酰-L-半... 目的探究端粒酶抑制因子X1(PinX1)对人食管癌EC1细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养人食管癌细胞系EC1细胞株,并将其分为空白对照(NG)组(空白对照细胞)、pcDNA组(转染阴性对照质粒)、pcDNA-PinX1组(转染PinX1过表达质粒)、N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)组(加入信号通路抑制剂)。采用实时荧光定量PCR法检测各组PinX1 mRNA的表达水平。分别采用CCK-8法和流式细胞术检测各组细胞的增殖、凋亡情况。采用荧光探针法检测各组活性氧簇(ROS)水平。采用蛋白质印迹法检测各组腺苷酸激活蛋白激酶/信号转导与转录激活因子3(AMPK/STAT3)信号通路相关蛋白的表达水平。结果经成功转染细胞后,与NG组、pcDNA组比较,pcDNA-PinX1组细胞的增殖抑制率、凋亡率、ROS水平、p-AMPK/AMPK均升高,而p-STAT3/STAT3均降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。与pcDNA-PinX1组比较,NAC组细胞的增殖抑制率、凋亡率、ROS水平、p-AMPK/AMPK均降低,p-STAT3/STAT3升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论PinX1过表达可抑制人食管癌EC1细胞增殖并诱导其凋亡,可能通过促进ROS/AMPK/STAT3信号通路活化来实现。 展开更多

关键词 端粒酶抑制因子X1 人食管癌EC1细胞 活性氧簇 增殖 凋亡

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滴灌氮肥用量对设施菜地硝态氮含量及环境质量的影响 被引量：22

4

作者 李若楠 武雪萍 +4 位作者 张彦才 王丽英 李孝兰 陈丽莉 翟凤芝 《植物营养与肥料学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1642-1651,共10页

【目的】滴灌施肥较传统施肥更为精准的将肥水输送至作物的根区,减少肥料的用量,降低土壤水分和养分深层渗漏带来的环境风险。本试验研究滴灌管理下不同氮肥(N)用量对设施菜地供氮能力及环境质量的影响,以期获得滴灌水肥一体化管理条件... 【目的】滴灌施肥较传统施肥更为精准的将肥水输送至作物的根区,减少肥料的用量,降低土壤水分和养分深层渗漏带来的环境风险。本试验研究滴灌管理下不同氮肥(N)用量对设施菜地供氮能力及环境质量的影响,以期获得滴灌水肥一体化管理条件下最佳施氮用量。【方法】采用日光温室冬春茬黄瓜-秋冬茬番茄轮作,共设计4个化肥氮用量梯度(N_0、N_1、N_2、N_3,对应冬春茬黄瓜季施氮0、300、600、900 kg/hm^2;秋冬茬番茄季施氮0、225、450、675 kg/hm2)3年定位研究比较不同氮用量下0-100 cm土体硝态氮、电导率(EC_(5:1))、pH动态变化计算了各施氮水平下设施蔬菜生产的氮素表观平衡、氮肥利用率和经济效益。【结果】随着种植年限的延长,N_2和N_3处理0-100 cm土体硝态氮和盐分积累显著土壤硝态氮含量分别由2008年黄瓜季季平均14.4~31.1和14.9~41.0 mg/kg增至2010年番茄季季均76.4~119.8和129.0~184.5 mg/kg,分别增加了1.9~5.1和3.5~7.7倍;两处理EC。分别由2008年黄瓜季季平均379.6~514.3和407.0~476.7S/cm增至2010年番茄季季平均663.0~1212.4和710.0~1359.6μS/cm分别增加了0.3~1.8和0.5~2.0倍。与N_2和N_3处理相比,N_1处理节氮50%~66.7%,经过三年的种植0-100cm土层季均硝态氮含量和EC_(5:1)分别下降了35.5%~67.4%和6.0%~25.2%,pH增加0.06~0.18,氮肥利用率显著增加9.0~13.8个百分点而种植蔬菜的经济效益未有显著下降。【结论】温室滴灌冬春茬黄瓜一秋冬茬番茄经济施氮量分别为N 300和225kg/hm^2,既能保证3年5季蔬菜根层(0-60 cm)土层硝态氮处于相对适宜水平,具有较好的经济和环境效益。 展开更多

关键词 蔬菜 施氮量 土壤硝态氮含量 EC5∶1 pH

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全反式维甲酸联合LY294002对食管癌EC1细胞增殖、迁移及PI3K、MMP-2表达的影响 被引量：5

5

作者 崔会娟 李娜 +3 位作者 路彦娟 李珊珊 王珍珍 路太英 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2016年第1期1-5,共5页

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)、磷脂酰肌醇激酶-3(PI3K)抑制剂LY294002单独或联合作用对食管癌EC1细胞增殖、迁移及PI3K和MMP-2表达的影响。方法:将常规培养的EC1细胞随机分为ATRA组、LY294002组、ATRA+LY294002组和对照组4组,采用CCK-... 目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)、磷脂酰肌醇激酶-3(PI3K)抑制剂LY294002单独或联合作用对食管癌EC1细胞增殖、迁移及PI3K和MMP-2表达的影响。方法:将常规培养的EC1细胞随机分为ATRA组、LY294002组、ATRA+LY294002组和对照组4组,采用CCK-8检测各组细胞的增殖情况,通过划痕实验测定各组细胞的迁移能力,采用RT-PCR和Western blot方法检测各组细胞中PI3K及MMP-3 mRNA和蛋白的表达情况。结果:作用24、48和72 h后,ATRA+LY294002组的细胞增殖抑制率均高于其他2组(P<0.05);作用24 h后,ATRA+LY294002组细胞迁移能力均低于其他3组(P<0.05);作用48 h后,ATRA+LY294002组细胞PI3K及MMP-2 mRNA和蛋白的表达量均低于其他3组(P<0.05)。结论:ATRA联合LY294002可协同抑制EC1细胞的增殖、迁移和PI3K、MMP-2的表达,进而可能协同抑制肿瘤血管生成。 展开更多

关键词 全反式维甲酸 LY294002 EC1细胞 PI3K MMP-2

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沉默STAT3基因对人食管癌EC1细胞裸鼠移植瘤的抑制作用 被引量：3

6

作者 轩小燕 李珊珊 +2 位作者 郑献召 李娜 王丰 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期456-458,共3页

目的构建STAT3靶向短发夹RNA(shRNA)质粒,研究其对人食管癌EC1细胞裸鼠皮下移植瘤的作用,探讨其在食管癌基因治疗中的可行性和特异性。方法构建STAT3的siRNA真核表达载体pSUPER-EGFP-STAT3,稳定表达该质粒的细胞为实验组,转染空质粒细... 目的构建STAT3靶向短发夹RNA(shRNA)质粒,研究其对人食管癌EC1细胞裸鼠皮下移植瘤的作用,探讨其在食管癌基因治疗中的可行性和特异性。方法构建STAT3的siRNA真核表达载体pSUPER-EGFP-STAT3,稳定表达该质粒的细胞为实验组,转染空质粒细胞及未处理细胞为对照组,建立裸鼠荷瘤模型;监测肿瘤生长变化,HE染色观察肿瘤病理学变化,RT-PCR、免疫组化方法检测STAT3mRNA和蛋白变化。结果裸鼠体内实验显示,实验组肿瘤增长受到明显抑制;HE染色显示对照组肿瘤体积大、异形明显;RT-PCR、免疫组化结果表明实验组STAT3mRNA和蛋白表达下调。结论shRNA沉默STAT3基因能抑制人食管癌EC1细胞裸鼠皮下移植瘤的形成,且能在体内有效下调STAT3mRNA和蛋白的表达,为食管癌的基因治疗提供了新的靶点,开辟了新的思路。 展开更多

关键词 食管癌细胞EC1 基因沉默 裸鼠 STAT3

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顺铂对TRAIL诱导EC1细胞凋亡的增敏效应 被引量：2

7

作者 江亚南 马俊芬 +4 位作者 黄幼田 李沛 李芳芳 杨浩 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2011年第3期346-348,共3页

目的:观察顺铂(cDDP)对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导EC1细胞凋亡的增敏效应。方法:MTT法检测单用TRAIL(10、50、100、500和1000μg/L)或cDDP(1.0、2.0、4.0、10.0和20.0mg/L)分别作用24、48和72h对EC1细胞增殖的影响。流式... 目的:观察顺铂(cDDP)对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导EC1细胞凋亡的增敏效应。方法:MTT法检测单用TRAIL(10、50、100、500和1000μg/L)或cDDP(1.0、2.0、4.0、10.0和20.0mg/L)分别作用24、48和72h对EC1细胞增殖的影响。流式细胞术检测100μg/LTRAIL和10.0mg/LcDDP单用或联用48h对EC1细胞凋亡和细胞周期的影响,并设空白对照组。结果:单用TRAIL作用24、48和72h对EC1细胞增殖影响不明显(P>0.05),单用cDDP对EC1细胞增殖有抑制作用(P<0.05)。单用TRAIL对EC1细胞凋亡率无影响(FTRAIL=5.836,P=0.250),而单用cDDP可提高EC1细胞凋亡率(FcDDP=20.763,P=0.041),二者联合有交互作用(F交互=57.422,P<0.001)。单用TRAIL和cDDP对EC1细胞周期无影响,二者联用后G0/G1和S期细胞比例下降,G2/M细胞比例上升(P均<0.001)。结论:cDDP可增加EC1细胞对TRAIL的敏感性,二者联用可诱导EC1细胞凋亡,并诱导其在G/M期阻滞。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 顺铂 EC1细胞 细胞凋亡 细胞周期

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曲古菌素A对食管癌细胞系EC1细胞凋亡的影响 被引量：1

8

作者 马俊芬 李沛 +3 位作者 黄幼田 杨洪艳 郑智敏 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第2期180-182,共3页

目的:探讨曲古菌素A(TSA)对食管癌EC1细胞凋亡的影响。方法:用DMSO(对照组)和0.3、0.5及1.0μmol/L的TSA处理EC1细胞24 h,用Annexin V-FITC和PI双染色,流式细胞仪检测4组细胞的凋亡率,West-ern Blot检测4组细胞中Bax及Bcl-2表达的变化... 目的:探讨曲古菌素A(TSA)对食管癌EC1细胞凋亡的影响。方法:用DMSO(对照组)和0.3、0.5及1.0μmol/L的TSA处理EC1细胞24 h,用Annexin V-FITC和PI双染色,流式细胞仪检测4组细胞的凋亡率,West-ern Blot检测4组细胞中Bax及Bcl-2表达的变化。结果:对照组、0.3、0.5及1.0μmol/L TSA组作用24 h后,EC1细胞凋亡率分别为(2.18±0.37)%、(2.96±0.34)%、(7.41±1.01)%和(14.03±1.23)%,Bax蛋白表达水平分别为(0.42±0.23)、(0.45±0.11)、(1.16±0.28)和(1.89±0.30),Bcl-2蛋白表达水平分别为(1.15±0.14)、(1.11±0.15)、(0.59±0.06)和(0.40±0.07),4组间3指标差异均有统计学意义(F=211.96,25.12和33.68,P均<0.001),随TSA作用浓度的增加,EC1细胞凋亡率、Bax蛋白表达均增加,Bcl-2表达减少。结论:一定剂量的TSA可以诱导EC1细胞凋亡,凋亡的发生可能与Bax表达增加和Bcl-2表达减少有关。 展开更多

关键词 曲古菌素A 细胞凋亡 食管癌 BAX BCL-2 EC1细胞

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Juglone联合顺铂抑制食管癌EC1细胞增殖的研究 被引量：1

9

作者 李玲 陈平 +3 位作者 连鸿凯 赵继敏 马俊芬 董子明 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第17期72-73,共2页

目的研究Pinl抑制剂Juglone与化疗药物顺铂(CDDP)单独及联合使用对食管癌EC1细胞增殖的抑制作用。方法使用不同浓度Juglone、CDDP或者两药联用处理食管癌EC1细胞后,应用MTT法测定两药单独或联合使用对食管癌EC1细胞增殖的影响,使用流式... 目的研究Pinl抑制剂Juglone与化疗药物顺铂(CDDP)单独及联合使用对食管癌EC1细胞增殖的抑制作用。方法使用不同浓度Juglone、CDDP或者两药联用处理食管癌EC1细胞后,应用MTT法测定两药单独或联合使用对食管癌EC1细胞增殖的影响,使用流式细胞仪检测其对EC1细胞周期的影响。结果 Juglone对EC1细胞的生长有明显的抑制作用,48 h细胞抑制率从11.5%上升到50.7%,具有显著的剂量效应。Juglone可造成食管癌细胞在G2/M+S期的阻滞;CDDP可增加EC1细胞对于Juglone的敏感性,CDDP与Juglone合用,明显提高了EC1细胞的生长抑制率。结论 Juglone与CDDP联合能显著抑制食管癌EC1细胞的增殖。 展开更多

关键词 Pinl抑制剂Juglone EC1细胞系 细胞增殖 顺铂

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5-杂氮-2’-脱氧胞苷和5-氟尿嘧啶对食管癌细胞系中E-Cadherin和TIMP3基因甲基化状态及蛋白表达的影响 被引量：1

10

作者 李沛 赵璇 +3 位作者 马俊芬 赵继敏 杨洪艳 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第5期719-723,共5页

目的:观察去甲基化药物5-杂氮-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)和5-氟尿嘧啶(5-FU)对食管癌细胞系EC1和EC9706(均存在E-Cadherin甲基化改变和TIMP3基因未发生甲基化改变)中2种基因甲基化状态及蛋白表达的影响。方法:用5-Aza-CdR和5-FU分别作用... 目的:观察去甲基化药物5-杂氮-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)和5-氟尿嘧啶(5-FU)对食管癌细胞系EC1和EC9706(均存在E-Cadherin甲基化改变和TIMP3基因未发生甲基化改变)中2种基因甲基化状态及蛋白表达的影响。方法:用5-Aza-CdR和5-FU分别作用于EC1和EC9706细胞,应用甲基化特异性PCR检测2种药物处理前后细胞中E-Cadherin基因和TIMP3基因的甲基化状态,应用免疫细胞化学方法检测TIMP3和E-Cadherin蛋白的表达。结果:5-Aza-CdR或5-FU处理后两种食管癌细胞系中TIMP3基因仍为非甲基化;5-Aza-CdR作用后,两种食管癌细胞系中E-Cadherin基因的甲基化状态发生了逆转,而5-FU作用后,E-Cadherin基因的甲基化状态无改变。EC1和EC9706经5-Aza-CdR处理后TIMP3蛋白表达无改变,而经5-FU处理后表达增强(P<0.05),EC1和EC9706经两种药物处理后E-Cadherin蛋白表达均增强(F=116.835、119.628、191.700和210.532,P<0.001)。结论:5-Aza-CdR能够有效逆转EC1和EC9706细胞中E-Cadherin基因甲基化状态,并使其蛋白恢复表达;对TIMP3基因的甲基化状态和蛋白表达影响不大。 展开更多

关键词 食管癌 甲基化 5-杂氮-2’-脱氧胞苷 5-氟尿嘧啶 E-CADHERIN TIMP3 EC1 EC9706

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地塞米松和1,25-(OH)_2D_3对EC1细胞增殖和细胞周期的影响 被引量：1

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作者 张震 付聪 +4 位作者 王冰一 窦蒙蒙 赵继敏 黄幼田 赵明耀 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2011年第5期664-666,共3页

目的:观察地塞米松(DEX)和1,25-(OH)2D3及2药联用对食管鳞状细胞癌EC1细胞增殖及周期的影响。方法:分别用10-7mol/LDEX与10-7mol/L1,25-(OH)2D3以及同种浓度2药联合处理EC1细胞48、72和96h,并设溶剂对照组。采用MTT法检测细胞增殖情况... 目的:观察地塞米松(DEX)和1,25-(OH)2D3及2药联用对食管鳞状细胞癌EC1细胞增殖及周期的影响。方法:分别用10-7mol/LDEX与10-7mol/L1,25-(OH)2D3以及同种浓度2药联合处理EC1细胞48、72和96h,并设溶剂对照组。采用MTT法检测细胞增殖情况及流式细胞仪检测细胞周期变化。结果:1,25-(OH)2D3单独应用具有抑制EC1细胞增殖的作用(F1,25-(OH)2D3=51.185,P<0.001);DEX单独应用具有阻滞细胞周期的作用(FDEX=8.170,P=0.009)。DEX、1,25-(OH)2D3及时间3种因素两两间均存在交互作用(细胞增殖抑制:F1,25-(OH)2D3×DEX=11.017,P=0.003;F1,25-(OH)2D3×时间=3.668,P=0.041;FDEX×时间=7.887,P=0.002。G0/G1期细胞比率:F1,25-(OH)2D3×DEX=12.381,P=0.002;F1,25-(OH)2D3×时间=6.583,P=0.005;FDEX×时间=5.096,P=0.014),且两药间提示存在拮抗作用。未发现3因素之间存在交互作用(细胞增殖抑制:F1,25-(OH)2D3×DEX×时间=0.512,P=0.606。G0/G1期细胞比率:F1,25-(OH)2D3×DEX×时间=0.410,P=0.668)。结论:DEX和1,25-(OH)2D3单独及联合使用能对EC1细胞增殖起抑制作用,且使EC1细胞周期阻滞在G0/G1期。 展开更多

关键词 地塞米松 1 25-(OH)2D3 EC1细胞 细胞周期 食管肿瘤 鳞状细胞癌

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雷帕霉素对食管癌EC1细胞mTOR表达及细胞生长与凋亡的影响 被引量：1

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作者 王贵琴 张威 +2 位作者 陈玉 亚国伟 陈奎生 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第5期709-712,共4页

目的:探讨雷帕霉素对人食管癌EC1细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达及细胞生长、凋亡的影响。方法:采用低、中、高浓度的雷帕霉素(100、150、200nmol/L)分别作用于EC1细胞24、48、72h,同时设溶剂对照组和空白对照组,用免疫细胞化... 目的:探讨雷帕霉素对人食管癌EC1细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达及细胞生长、凋亡的影响。方法:采用低、中、高浓度的雷帕霉素(100、150、200nmol/L)分别作用于EC1细胞24、48、72h,同时设溶剂对照组和空白对照组,用免疫细胞化学及原位杂交法检测EC1细胞中mTOR蛋白与mRNA的表达,MTT法检测EC1细胞的增殖情况,TUNEL法检测各组作用24h后细胞凋亡情况。结果:雷帕霉素作用24、48与72h,5组细胞mTOR蛋白与mRNA的表达差异均有统计学意义(mTOR蛋白:F=29.273、34.328、41.571,P均<0.001;mTORmRNA:F=34.969、53.614、36.943,P均<0.001),细胞生长抑制率差异亦有统计学意义(F=566.732、51.768和186.022,P均<0.001);雷帕霉素低、中、高浓度组EC1细胞mTOR蛋白与mRNA的表达均低于各对照组,且其表达随雷帕霉素浓度的增加及作用时间的延长而减弱(P<0.05)。雷帕霉素低、中、高浓度组细胞生长抑制率均高于各对照组,且随雷帕霉素浓度的增加和作用时间的延长而升高(P<0.05)。作用24h,5组细胞凋亡指数(AI)差异有统计学意义(F=524.563,P<0.001),雷帕霉素低、中、高浓度组AI均高于各对照组,且随雷帕霉素浓度的增加而增高(P<0.05)。结论:雷帕霉素可能通过抑制EC1细胞mTOR蛋白与mRNA的表达从而抑制EC1细胞的增殖,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 雷帕霉素 食管肿瘤 EC1细胞 MTOR 增殖 凋亡

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ECC智能卡在电子邮件安全中的应用 被引量：3

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作者 英海燕 王友波 《微电子学与计算机》 CSCD 北大核心 2007年第4期85-88,共4页

智能卡具备硬件加密的优点,且便于携带,在当今的安全领域得到广泛应用。文中介绍了智能卡的相关概念和安全特性,并根据二元有限域上的算法,在智能卡上实现了椭圆曲线密码算法。还根据该智能卡设计了一种基于混合公钥体制的电子邮件传输... 智能卡具备硬件加密的优点,且便于携带,在当今的安全领域得到广泛应用。文中介绍了智能卡的相关概念和安全特性,并根据二元有限域上的算法,在智能卡上实现了椭圆曲线密码算法。还根据该智能卡设计了一种基于混合公钥体制的电子邮件传输系统。 展开更多

关键词 智能卡 电子邮件 EC—E1Gamal 椭圆曲线密码

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含氟取代苯类化合物lgK_(ow)和-lg1/EC_(50)的QSPR研究 被引量：2

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作者 刘辉 柳红霞 +1 位作者 王遵尧 王连生 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期1-5,共5页

采用Gaussian 98程序,在B3LYP/6-311G**和HF/6-311G**2种水平上全优化计算了24个含氟取代苯化合物的分子结构,基于得到的分子结构描述符,分别建立了用于预测含氟取代苯化合物正辛醇/水分配系数(lgKow)和毒性(-lg1/EC5)0的模型,预测lgKo... 采用Gaussian 98程序,在B3LYP/6-311G**和HF/6-311G**2种水平上全优化计算了24个含氟取代苯化合物的分子结构,基于得到的分子结构描述符,分别建立了用于预测含氟取代苯化合物正辛醇/水分配系数(lgKow)和毒性(-lg1/EC5)0的模型,预测lgKow的模型包含3个变量(偶极矩(μ),总能量(TE)和热能修正值(Et)h),预测-lgl/EC50的模型包含2个变量(分子中原子最负的电荷(q-)和零点振动能(ZPE))。用交叉验证法对模型的稳定性进行了验证(q分别为0.8480和0.9154),并用t-检验和变异膨胀因子(VIF)对2个模型中各变量的显著性和自相关性进行了检验。预测-lg1/EC50的模型的预测能力优于溶剂化能参数得出的模型。 展开更多

关键词 含氟取代苯类化合物 正辛醇/水分配系数(lgKow) 毒性(-lg1/EC50) 定量结构-性质相关(QSPR)

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Smac过表达对食管鳞癌细胞Warburg效应和细胞凋亡的影响 被引量：1

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作者 朱立强 张乐 +4 位作者 李庆华 张彦婷 张璐玉 刘腾飞 关方霞 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2019年第6期789-793,共5页

目的:探究Smac过表达对食管鳞癌细胞Warburg效应和细胞凋亡的影响。方法:以含Smac过表达载体的慢病毒感染食管鳞癌细胞EC1和Eca109(Smac过表达组),以感染含空载体的慢病毒为阴性对照,以未感染细胞为空白对照。采用Western blot法检测3... 目的:探究Smac过表达对食管鳞癌细胞Warburg效应和细胞凋亡的影响。方法:以含Smac过表达载体的慢病毒感染食管鳞癌细胞EC1和Eca109(Smac过表达组),以感染含空载体的慢病毒为阴性对照,以未感染细胞为空白对照。采用Western blot法检测3组细胞Smac蛋白的表达情况。用过氧化氢刺激Smac过表达组和阴性对照组细胞,利用线粒体膜电位检测试剂盒和Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞线粒体膜电位和细胞凋亡情况,并用Western blot法检测细胞中凋亡信号通路相关蛋白[细胞色素C(Cyt-C)、Bcl-2、Caspase-3前体]以及Warburg效应关键蛋白[己糖激酶Ⅱ(HK2)和乳酸脱氢酶(LDH)]的表达。结果:EC1和Eca109 Smac过表达组Smac蛋白表达水平升高,提示成功构建了Smac过表达细胞株。经过氧化氢刺激后,与阴性对照组相比,Smac过表达组HK2和LDH表达水平下降,细胞线粒体膜电位降低,细胞凋亡率升高,Cyt-C的表达水平升高,Bcl-2和Caspase-3前体蛋白的表达水平下降(P<0.05)。结论:氧化应激刺激下,Smac过表达可抑制食管鳞癌细胞的Warburg效应,促进食管鳞癌细胞凋亡。 展开更多

关键词 SMAC蛋白 食管鳞癌 EC1细胞 ECA109细胞 Warburg效应 细胞凋亡

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EC9-1型测风传感器原理与维修介绍 被引量：1

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作者 谭鉴荣 杨用球 蔡耿华 《广东气象》 2001年第4期43-44,共2页

关键词 EC9-1型 测风传感器 原理 维修

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转录因子8在食管癌细胞EC1的表达及其对EC1细胞迁移侵袭的影响

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作者 江亚南 张艳艳 +4 位作者 杨洪艳 田芳 马俊芬 刘康栋 董子明 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第10期1552-1555,共4页

目的:研究食管癌细胞EC1中转录因子8(transcription factor 8,TCF8)的表达对EC1细胞迁移侵袭的影响。方法:通过共聚焦显微镜观察EC1细胞中TCF8的表达;吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidinedithiocarbamate,PDTC)作用于EC1细胞24 h后,West... 目的:研究食管癌细胞EC1中转录因子8(transcription factor 8,TCF8)的表达对EC1细胞迁移侵袭的影响。方法:通过共聚焦显微镜观察EC1细胞中TCF8的表达;吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidinedithiocarbamate,PDTC)作用于EC1细胞24 h后,Western blot法检测NF-κBp65、TCF8和E-cadherin蛋白表达变化,划痕损伤和transwell实验检测对细胞转移和侵袭的影响。结果:TCF8表达于EC1细胞核,PDTC可以导致EC1细胞中NF-κBp65、TCF8表达降低,而E-cadherin表达增高;PDTC组细胞迁移距离和穿过的细胞数明显低于对照组。结论:食管癌细胞EC1中表达TCF8,下调TCF8可上调E-cadherin,抑制EC1细胞的迁移侵袭,为阐明食管癌侵袭转移的分子机制提供理论依据,为临床治疗提供分子靶点。 展开更多

关键词 食管肿瘤 转录因子8 EC1细胞 细胞迁移 细胞侵袭

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雷帕霉素靶蛋白RNA干扰联合雷帕霉素对人食管癌移植瘤生长和移植瘤组织中雷帕霉素蛋白基因表达的影响

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作者 陈玉 亚国伟 +1 位作者 张威 陈奎生 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第6期1135-1138,共4页

目的:探讨RNA干扰技术联合雷帕霉素对人食管癌裸鼠移植瘤生长和移植瘤组织中雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因表达的影响。方法:①构建裸鼠食管癌EC1细胞移植瘤模型,待肿瘤长出1周后,将荷瘤小鼠随机分为雷帕霉素治疗组[(腹腔注射雷帕霉素,50μg... 目的:探讨RNA干扰技术联合雷帕霉素对人食管癌裸鼠移植瘤生长和移植瘤组织中雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因表达的影响。方法:①构建裸鼠食管癌EC1细胞移植瘤模型,待肿瘤长出1周后,将荷瘤小鼠随机分为雷帕霉素治疗组[(腹腔注射雷帕霉素,50μg/(kg.次)]、mTOR小分子干扰RNA(siRNA)治疗组[腹腔注射mTORsiRNA,3μg/次]和联合治疗组(先腹腔注射mTORsiRNA,第2天腹腔注射雷帕霉素),另设空白对照组(腹腔注射PBS代替药物)和顺铂治疗组[腹腔注射常规化疗药顺铂,1mg/(kg.次)];每组各5只。连续治疗2周,治疗结束取瘤组织,分析治疗前后移植瘤体积的变化。②采用免疫组化及原位杂交技术观察各组瘤组织中mTOR蛋白及mRNA的表达。结果:①单用雷帕霉素(F=185.00,P<0.001)或mTORsiRNA(F=199.01,P<0.001)均能降低裸鼠移植瘤体积;雷帕霉素和mTORsiRNA有交互作用(F=30.30,P<0.001),2者联合应用后,裸鼠移植瘤体积有更大幅度的下降。顺铂治疗后,裸鼠移植瘤体积与联合治疗的效果差异无统计学意义(t=0.426,P=0.682)。②单用雷帕霉素(F=395.76,F=550.04,P均<0.001)或mTORsiRNA(F=367.58,F=573.39,P均<0.001)均能降低裸鼠移植瘤组织中mTOR蛋白及mRNA的表达;雷帕霉素和mTORsiRNA有交互作用(F=11.68,P=0.004;F=10.23,P=0.006),2者联合应用后,裸鼠移植瘤组织中mTOR蛋白及mRNA的表达有更大幅度的下降。顺铂治疗后,裸鼠移植瘤组织中mTOR蛋白(7.15±0.56)及mRNA(6.88±0.59)的表达与联合治疗的效果差异无统计学意义(t=0.622,P=0.551;t=0.572,P=0.583)。结论:应用RNA干扰技术沉默mTOR基因及应用雷帕霉素治疗均可有效抑制肿瘤的生长,下调裸鼠食管癌移植瘤组织中mTOR蛋白及mRNA的表达,且2者联合效果最佳。 展开更多

关键词 雷帕霉素 食管肿瘤 EC1细胞 裸鼠 RNA干扰

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HP根治前后ASCG胃肠激素及G、D、EC_1细胞变化的研究

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作者 黄卫昆 董树强 张宇民 《西南国防医药》 CAS 2004年第4期360-363,共4页

目的 :探讨HP感染的慢性活动性浅表性胃炎 (ASCG)患者HP根治前后胃粘膜中胃肠激素Gas、SS、SP和G、D、EC1细胞变化及其相关性。方法 :对 3 5例HP感染的ASCG病人 ,HP根治前后分别用放射免疫法及免疫组化染色图像定量分析检测其胃窦粘膜中... 目的 :探讨HP感染的慢性活动性浅表性胃炎 (ASCG)患者HP根治前后胃粘膜中胃肠激素Gas、SS、SP和G、D、EC1细胞变化及其相关性。方法 :对 3 5例HP感染的ASCG病人 ,HP根治前后分别用放射免疫法及免疫组化染色图像定量分析检测其胃窦粘膜中Gas、SS、SP含量和G、D、EC1细胞密度、灰度。结果 :HP阳性的ASCG病人经药物治疗根除后胃粘膜Gas含量均较治疗前明显降低 (P <0 0 1或 <0 0 5 )。图像定量分析示 ,HP根治前后胃粘膜G、D、EC1细胞密度差异不显著 (P >0 0 5 )。结论 :HP感染干扰了Gas、SS激素分泌释放的调控 ,是HP相关性胃炎的发病机制之一。SP抑制胃泌素分泌释放 ,而对生长抑素无抑制作用 ,具有胃粘膜保护功能。 展开更多

关键词 ASCG 胃肠激素 G细胞 D细胞 EC1细胞 慢性活动性浅表性胃炎 幽门螺杆菌 胃粘膜

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IEC104规约在茂名电网的应用实践 被引量：1

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作者 朱子坤 《广东输电与变电技术》 2007年第3期30-32,共3页

在阐明IEC104规约,分析该规约在电力监控系统应用中的优势的基础上,介绍了该规约在茂名电网变电站远动通信系统中应用实践。

关键词 1EC 104远动规约 电网监控

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