马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒株DLV是EIAV驴强毒株DV在驴白细胞中传代125代减毒而成。为阐明EIAV疫苗致弱及作用机理,本研究克隆和分析了减毒过程中第61代毒前病毒基因组DNA。以该代次毒基因组DNA为模板,设计了特异性引物,进行3次LA-PCR(...马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒株DLV是EIAV驴强毒株DV在驴白细胞中传代125代减毒而成。为阐明EIAV疫苗致弱及作用机理,本研究克隆和分析了减毒过程中第61代毒前病毒基因组DNA。以该代次毒基因组DNA为模板,设计了特异性引物,进行3次LA-PCR(Long accurate PCR)扩增,均获得了7941bp的DNA片段,并将PCR产物克隆至pMD18-T载体。经PCR鉴定、酶切鉴定及核酸序列测定,得到了16株DLV第61代的全基因组克隆及其基因组核苷酸序列。根据所测序列,对该基因组中各主要基因序列的多样性以及与已发表的我国EIAV强毒辽宁株LV和疫苗株DLV等的相应序列进行了比较分析。本研究结果为进一步探讨马传贫疫苗的致弱机理及免疫保护机制提供了有益的参考数据。展开更多
文摘马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒株DLV是EIAV驴强毒株DV在驴白细胞中传代125代减毒而成。为阐明EIAV疫苗致弱及作用机理,本研究克隆和分析了减毒过程中第61代毒前病毒基因组DNA。以该代次毒基因组DNA为模板,设计了特异性引物,进行3次LA-PCR(Long accurate PCR)扩增,均获得了7941bp的DNA片段,并将PCR产物克隆至pMD18-T载体。经PCR鉴定、酶切鉴定及核酸序列测定,得到了16株DLV第61代的全基因组克隆及其基因组核苷酸序列。根据所测序列,对该基因组中各主要基因序列的多样性以及与已发表的我国EIAV强毒辽宁株LV和疫苗株DLV等的相应序列进行了比较分析。本研究结果为进一步探讨马传贫疫苗的致弱机理及免疫保护机制提供了有益的参考数据。