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番茄斑萎病毒外壳蛋白原核表达及Dot-blotELISA检测方法的建立
被引量：
9
1
作者
于翠
邓凤林
+1 位作者
杨翠云
吴建祥
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期597-601,共5页
将番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)全长外壳蛋白基因亚克隆到原核表达载体pET-32a中,经限制性酶切分析及测序结果表明插入方向正确且阅读框架无移码突变.将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),SDS-PAGE分析结果证实IPTG...
将番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)全长外壳蛋白基因亚克隆到原核表达载体pET-32a中,经限制性酶切分析及测序结果表明插入方向正确且阅读框架无移码突变.将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),SDS-PAGE分析结果证实IPTG可诱导1个分子量约为48 kDa的融合蛋白表达.利用6×His标签单抗和TSWV FoPaTs1多抗证实所表达的蛋白为TSWV外壳蛋白.以纯化的重组外壳蛋白免疫小鼠,制备杂交瘤细胞培养上清单抗,并用杂交瘤细胞培养液上清建立了可靠、有效检测TSWV的Dot-blot ELISA方法.
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关键词
番茄斑萎病毒
原核表达
Dot—blot
el/sa方法
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职称材料
题名
番茄斑萎病毒外壳蛋白原核表达及Dot-blotELISA检测方法的建立
被引量：
9
1
作者
于翠
邓凤林
杨翠云
吴建祥
机构
上海出入境检验检疫局
浙江大学农业与生物技术学院生物技术研究所
出处
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期597-601,共5页
基金
上海市科委资助项目(07DZ05020)
文摘
将番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)全长外壳蛋白基因亚克隆到原核表达载体pET-32a中,经限制性酶切分析及测序结果表明插入方向正确且阅读框架无移码突变.将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),SDS-PAGE分析结果证实IPTG可诱导1个分子量约为48 kDa的融合蛋白表达.利用6×His标签单抗和TSWV FoPaTs1多抗证实所表达的蛋白为TSWV外壳蛋白.以纯化的重组外壳蛋白免疫小鼠,制备杂交瘤细胞培养上清单抗,并用杂交瘤细胞培养液上清建立了可靠、有效检测TSWV的Dot-blot ELISA方法.
关键词
番茄斑萎病毒
原核表达
Dot—blot
el/sa方法
Keywords
Tomato spotted wilt virus
prokaryotic expression
Dot-blot
el
I
sa
method
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
S432.41 [农业科学—植物病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
番茄斑萎病毒外壳蛋白原核表达及Dot-blotELISA检测方法的建立
于翠
邓凤林
杨翠云
吴建祥
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008
9
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