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基于重组核衣壳蛋白的猪德尔塔冠状病毒间接ELISA检测方法的建立
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作者 胡帅琪 丛潇 +5 位作者 练月晓 伍妙梨 朱于军 丛锋 顾有方 闻爱友 《安徽科技学院学报》 2024年第3期25-33,共9页
目的:建立一种关于猪德尔塔冠状病毒(Porcine Deltacoronavirus, PDCoV)抗体的检测方法。方法:对猪德尔塔冠状病毒的核衣壳蛋白(N)进行原核表达,通过Western Blot、SDS-PAGE等方法,对重组蛋白进行鉴定;在获得正确表达的重组蛋白后,以此... 目的:建立一种关于猪德尔塔冠状病毒(Porcine Deltacoronavirus, PDCoV)抗体的检测方法。方法:对猪德尔塔冠状病毒的核衣壳蛋白(N)进行原核表达,通过Western Blot、SDS-PAGE等方法,对重组蛋白进行鉴定;在获得正确表达的重组蛋白后,以此为抗原,对ELISA反应条件进行优化,并对其特异性、敏感性、重复性进行测试,最终建立ELISA检测方法,并对临床样品进行检测。结果:优化后的抗原包被浓度为2μg/孔,37℃孵育1 h;1%BSA 37℃封闭1 h;一抗稀释最佳浓度为1∶1 600,孵育时间为1 h;酶标二抗最佳孵育时间为60 min。重组蛋白能与猪德尔塔冠状病毒血清发生特异性反应,所建立的检测方法具有优良的敏感性、特异性、重复性。结论:本研究建立了一种针对猪德尔塔冠状病毒的间接ELISA检测方法,为猪德尔塔冠状病毒的抗体水平检测及疾病的防控提供了一种有效的方法。 展开更多
关键词 猪德尔塔冠状病毒 重组核衣壳蛋白 间接elisa 诊断方法
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A型塞内卡病毒抗体ELISA检测方法的建立与应用
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作者 柴茂 马震原 +8 位作者 王淑娟 赵雪丽 刘影 王东方 杨海波 谢彩华 王翠 王华俊 闫若潜 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第2期133-139,共7页
为建立基于VP2蛋白、VP3蛋白检测猪塞内卡病毒A(SVA)抗体血清学方法。本研究扩增SVA VP2基因和VP3基因(VP23基因),基因全长1569 bp,并与原核表达载体pGEX-6p-1构建重组载体,IPTG诱导表达可溶性rVP23蛋白,经蛋白酶切除标签蛋白得到sVP23... 为建立基于VP2蛋白、VP3蛋白检测猪塞内卡病毒A(SVA)抗体血清学方法。本研究扩增SVA VP2基因和VP3基因(VP23基因),基因全长1569 bp,并与原核表达载体pGEX-6p-1构建重组载体,IPTG诱导表达可溶性rVP23蛋白,经蛋白酶切除标签蛋白得到sVP23蛋白,分子量约为58 kDa。通过矩阵优化、确定临界值、敏感性分析、特异性鉴定,建立了SVA抗体间接ELISA方法。该方法的S/P临界值标准为0.35,批内批间变异系数均小于7%,与中和试验结果符合率为95.49%。上述结果表明,该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于塞内卡病毒血清抗体检测和流行病学调查。 展开更多
关键词 塞内卡病毒 VP23基因 间接elisa方法 血清学
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旋毛虫海藻糖酶(TsTRE)蛋白的表达及其间接ELISA抗体检测方法的建立
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作者 侯嘉茗 张博涵 +5 位作者 阮入琳 张鉴慧 刘坤 陈颢元 宋铭忻 张子群 《中国人兽共患病学报》 CSCD 北大核心 2023年第12期1174-1180,共7页
目的 以原核表达的旋毛虫海藻糖酶(Trichinella spiralis trehalase, TsTRE)重组蛋白作为检测抗原,建立间接ELISA抗体检测方法。方法 本实验采用RT-PCR技术扩增TsTRE基因,将其与pCold I表达质粒连接并于E.coli BL21感受态细胞中表达。... 目的 以原核表达的旋毛虫海藻糖酶(Trichinella spiralis trehalase, TsTRE)重组蛋白作为检测抗原,建立间接ELISA抗体检测方法。方法 本实验采用RT-PCR技术扩增TsTRE基因,将其与pCold I表达质粒连接并于E.coli BL21感受态细胞中表达。应用亲和柱层析技术获得纯化rTsTRE,分别利用间接免疫荧光技术和Western-blot技术定位TsTRE和检测rTsTRE的免疫反应原性。与此同时,以rTsTRE蛋白为包被抗原建立间接ELISA抗体检测方法,并对其抗原包被浓度和待测血清稀释度、抗原包被条件、封闭液种类和封闭条件、酶标二抗稀释度和孵育条件、TMB显色时间等进行优化。确定该方法的临界值及评估该方法的重复性、敏感性、特异性和临床检出率等性能。结果 免疫荧光结果显示,在肌幼虫的杆状体、尾部和表皮等部位含有大量的海藻糖酶;Western-blot结果显示,rTsTRE可结合感染旋毛虫42 d小鼠的阳性血清且蛋白分子量约为60 kDa。建立的间接ELISA抗体检测方法的阳性临界值为0.384;批内和批间变异系数分别在5.504%~7.630%和4.664%~9.929%,且均不超过10%;最低检出效价为1∶1 280;与华支睾吸虫、血吸虫、猪蛔虫、猪弓形虫和弓首蛔虫抗体均无交叉反应,特异性较强;临床阴性检出率为0%。结论 本实验成功表达rTsTRE,以该蛋白为包被抗原建立的间接ELISA检测方法具有良好的重复性、敏感性、特异性和临床检测性,可应用于临床样本的检测。 展开更多
关键词 旋毛虫 海藻糖酶 原核表达 间接elisa方法
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人干扰素α2b ELISA配体结合分析检测方法的建立
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作者 代晓阳 张燕 +3 位作者 沈丽红 解翠薇 杨晓春 翁勤洁(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1312-1317,共6页
目的:建立金黄地鼠血浆和组织重组人干扰素α2b定量ELISA检测法,用于药物研发检测。方法:采用双抗夹心法建立金黄地鼠血浆和组织重组人干扰素α2b含量检测方法,确定其检测范围,验证其选择性、精密度与准确度和稀释线性,并对样本稳定性... 目的:建立金黄地鼠血浆和组织重组人干扰素α2b定量ELISA检测法,用于药物研发检测。方法:采用双抗夹心法建立金黄地鼠血浆和组织重组人干扰素α2b含量检测方法,确定其检测范围,验证其选择性、精密度与准确度和稀释线性,并对样本稳定性进行研究。结果:建立的方法检测范围为0.50~16.00 ng/ml。选择性结果显示不同个体来源空白金黄地鼠组血浆和组织匀浆无差异,血浆质控样本准确度为78.62%~104.69%,批内精密度为0.69%~18.21%,批间精密度为6.71%~15.81%,总误差均<30%,稀释线性良好。稳定性样本在3种不同保存条件(冰上放置2 h;−80~−75℃放置4 d;反复冻融3循环)下稳定性较好,回收率均在±20%内。结论:成功建立了基于配体结合的人干扰素α2b ELISA检测法,该方法灵敏度高,重复性好,检测效率高,为新药研发提供了可靠的检测方法。 展开更多
关键词 重组人干扰素Α2B elisa 配体结合 方法学验证
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猪流行性腹泻病毒感染小鼠血清抗体间接ELISA方法的建立
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作者 李沛恒 伊立超 +4 位作者 陈竞 邹万成 张国庆 金宁一 李昌 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第7期64-68,共5页
为建立检测感染小鼠血清中猪流行性腹泻病毒(PEDV)抗体的方法,本研究应用PEDV受体结合区(receptor binding domain, RBD)重组蛋白作为抗原,通过探索各反应的最佳条件,并进行了该方法灵敏度、重复性、特异性分析。结果显示,最佳蛋白包被... 为建立检测感染小鼠血清中猪流行性腹泻病毒(PEDV)抗体的方法,本研究应用PEDV受体结合区(receptor binding domain, RBD)重组蛋白作为抗原,通过探索各反应的最佳条件,并进行了该方法灵敏度、重复性、特异性分析。结果显示,最佳蛋白包被浓度为5μg/mL,待检血清稀释浓度为1∶400,孵育时间为37℃30 min,羊抗鼠IgG-HRP作为二抗,孵育条件为37℃30 min,底物显色时间为15 min。对建立的ELISA检测方法进行验证,阳性对照血清的稀释度为1∶204 800倍时OD450值仍大于临界值,批内和批间的变异系数均小于10%,对猪传染性胃肠炎病毒和猪δ冠状病毒抗体小鼠阳性血清检测均不发生交叉反应。结果表明本研究建立的小鼠血清PEDV抗体间接ELISA方法具有很好的灵敏度、重复性、特异性。为PEDV候选疫苗的小鼠血清特异性抗体检测提供了一种精准、高效的方法。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 受体结合区 小鼠血清 间接elisa方法
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大黄鱼病原菌──溶藻弧菌的ELISA快速检测研究 被引量:22
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作者 鄢庆枇 王军 +2 位作者 苏永全 皮灵宝 刘成荣 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2001年第9期47-49,共3页
以灭活溶藻弧菌(0.05%甲醛,30℃,8h)制成菌苗,注射免疫实验兔获得抗血清。该 抗血清经吸附后与副溶血弧菌、河流弧菌等10株对照菌株无交叉反应。用该抗血清进行溶藻 弧菌ELISA检测,其最低检测极限为97000c... 以灭活溶藻弧菌(0.05%甲醛,30℃,8h)制成菌苗,注射免疫实验兔获得抗血清。该 抗血清经吸附后与副溶血弧菌、河流弧菌等10株对照菌株无交叉反应。用该抗血清进行溶藻 弧菌ELISA检测,其最低检测极限为97000cfu/ml。将该方法应用于养殖现场,检测结果为:海 水中溶藻弧菌浓度均低于最低检测限、外观健康大黄鱼肝脏中溶藻弧菌的阳性检出率为 20%、患病大黄鱼的阳性检出率为80%,表明ELISA法不仅可以用于诊断大黄鱼的溶藻弧菌 病,也可以检测无病症带菌大黄鱼。 展开更多
关键词 大黄鱼 溶藻弧菌 elisa检测 病原菌
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新霉素ELISA检测方法的建立 被引量:9
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作者 刘沙洲 桑小雪 +2 位作者 欧阳华学 雷绍荣 白林含 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第14期227-231,共5页
目的:比较直接和间接竞争酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)的优缺点,建立新霉素残留ELISA检测方法。方法:利用自制的新霉素多克隆抗体,采用直接竞争和间接竞争ELISA方法检测新霉素残留,并比较两种方法的优缺点。结... 目的:比较直接和间接竞争酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)的优缺点,建立新霉素残留ELISA检测方法。方法:利用自制的新霉素多克隆抗体,采用直接竞争和间接竞争ELISA方法检测新霉素残留,并比较两种方法的优缺点。结果:新霉素抗血清和庆大霉素的交叉反应率为2.04%,和卡那霉素的交叉反应率为0.02%,和氨苄青霉素、红霉素、四环素的交叉反应率均小于0.01%。初步测试新霉素间接竞争ELISA法的准确性和回收率。板内误差小于4%,板间误差小于11%,回收率为135.5%~191.3%。直接竞争和间接竞争ELISA方法的检测极限分别为28.58ng/mL和51.74ng/mL,达到了国家对新霉素规定的500μg/kg MRL检测限。结论:建立了直接竞争和间接ELISA吸附检测方法,条件优化更成功的间接竞争ELISA可用于开发新霉素检测试剂盒。 展开更多
关键词 新霉素 多克隆抗体 竞争酶联免疫法(enzyme linked IMMUNOSORBENT assay elisa) 方法建立
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水牛早孕诊断方法比较研究
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作者 黄荣春 谭正准 +7 位作者 梁淦 李辉 黄健 鄢胜飞 曾令湖 潘伟军 卢瑛 覃广胜 《中国奶牛》 2024年第2期16-20,共5页
本试验的目的是通过比较几种不同的妊娠诊断方法,建立一套简便而准确的水牛早孕诊断方法。选择体况相似的8头中国沼泽型奶水牛为研究对象,通过视诊法连续观测8头母水牛配种后15个时间点眼睛形态学特征的变化;采用ELISA法检测8头母水牛... 本试验的目的是通过比较几种不同的妊娠诊断方法,建立一套简便而准确的水牛早孕诊断方法。选择体况相似的8头中国沼泽型奶水牛为研究对象,通过视诊法连续观测8头母水牛配种后15个时间点眼睛形态学特征的变化;采用ELISA法检测8头母水牛人工授精后8个时间点晨血的血清中孕酮、雌二醇水平;采用牛早孕试纸检测卡检测尾根血清中的早期妊娠相关糖蛋白,以上早孕检测结果均与B超孕检结果进行对比分析。结果发现:配种后前28d观测水牛的眼部未见异常形态;怀孕母牛的孕酮水平均为5.76ng/mL,自16d开始保持在4.9~8.43ng/mL,至24d有小幅度升高,而未怀孕母牛的孕酮水平则表现下降趋势;配种后28d时采用牛早孕试纸检测卡检测发现有4头水牛怀孕,与B超孕检结果相一致。可以得出,配种后前28d形态学观察法不适用于水牛早期的妊娠诊断;孕牛与未孕母牛的孕酮激素水平变化规律存在差异,可为今后建立水牛早孕诊断方法提供技术支撑;牛早孕试纸检测卡在28d后获得较高的准确率,可应用于水牛早期妊娠诊断。该试验的开展可为今后水牛早期妊娠诊断研究提供参考,同时对促进水牛产业的健康发展具有重要的意义。 展开更多
关键词 水牛 早孕诊断 孕酮 雌二醇 elisa
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番茄斑萎病毒外壳蛋白原核表达及Dot-blotELISA检测方法的建立 被引量:9
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作者 于翠 邓凤林 +1 位作者 杨翠云 吴建祥 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期597-601,共5页
将番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)全长外壳蛋白基因亚克隆到原核表达载体pET-32a中,经限制性酶切分析及测序结果表明插入方向正确且阅读框架无移码突变.将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),SDS-PAGE分析结果证实IPTG... 将番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)全长外壳蛋白基因亚克隆到原核表达载体pET-32a中,经限制性酶切分析及测序结果表明插入方向正确且阅读框架无移码突变.将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),SDS-PAGE分析结果证实IPTG可诱导1个分子量约为48 kDa的融合蛋白表达.利用6×His标签单抗和TSWV FoPaTs1多抗证实所表达的蛋白为TSWV外壳蛋白.以纯化的重组外壳蛋白免疫小鼠,制备杂交瘤细胞培养上清单抗,并用杂交瘤细胞培养液上清建立了可靠、有效检测TSWV的Dot-blot ELISA方法. 展开更多
关键词 番茄斑萎病毒 原核表达 Dot—blot EL/SA方法
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ELISA及电化学法检测藠头中氨基甲酸酯类农药残留 被引量:9
10
作者 胡芹芹 李娜 +4 位作者 张华 李凤 杜丹 刘德立 熊丽 《农药》 CAS 北大核心 2009年第5期352-354,359,共4页
建立了克百威ELISA检测技术,配合电化学法对200份出口藠头样品进行氨基甲酸酯类农药残留检测。ELISA法对克百威的最低检测限达10-7g/L,检出10例,检出率5﹪;电化学法检测,对乙酰胆碱酯酶抑制率超过60%的样品有7例,检出率3.5%。对比分析... 建立了克百威ELISA检测技术,配合电化学法对200份出口藠头样品进行氨基甲酸酯类农药残留检测。ELISA法对克百威的最低检测限达10-7g/L,检出10例,检出率5﹪;电化学法检测,对乙酰胆碱酯酶抑制率超过60%的样品有7例,检出率3.5%。对比分析检测结果得出2种方法检测结果基本吻合。 展开更多
关键词 氨基甲酸酯类农药残留 藠头 电化学法 高效液相色谱法 酶联免疫吸附分析法
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间接竞争ELISA检测大豆11S球蛋白和7S伴球蛋白 被引量:9
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作者 彭楠 刘建峰 +1 位作者 梁运祥 葛向阳 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期661-664,共4页
采用酸沉淀、亲和层析(ConA-Sepharose 4B)等手段,成功地分离纯化了大豆11S球蛋白和7S伴球蛋白,SDS-PAGE检测表明2种蛋白纯度分别达到95%和90%。将纯化的11S球蛋白和7S伴球蛋白分别免疫大白兔获得抗血清,并建立起间接竞争ELISA检测大豆... 采用酸沉淀、亲和层析(ConA-Sepharose 4B)等手段,成功地分离纯化了大豆11S球蛋白和7S伴球蛋白,SDS-PAGE检测表明2种蛋白纯度分别达到95%和90%。将纯化的11S球蛋白和7S伴球蛋白分别免疫大白兔获得抗血清,并建立起间接竞争ELISA检测大豆豆粕及其深加工产品中11S和7S抗原蛋白含量的方法。 展开更多
关键词 11S球蛋白 7S伴球蛋白 亲和层析 间接竞争elisa
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9例核酸反应性标本与对应ELISA、CLIA法检测HBV的关联分析 被引量:21
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作者 张毓 孙国栋 +1 位作者 张丽 王学刚 《临床输血与检验》 CAS 2018年第2期206-208,共3页
目的为保障临床输血的安全性,比较已知酶联免疫吸附试验(ELISA)、ALT阴性合并核酸检测(NAT)反应性标本与对应化学发光(CLIA)法检测HBV的结果,对三种检测方法进行相关性分析。方法对17508例无偿献血者(排除ELISA法初复检公共阳性、ALT阳... 目的为保障临床输血的安全性,比较已知酶联免疫吸附试验(ELISA)、ALT阴性合并核酸检测(NAT)反应性标本与对应化学发光(CLIA)法检测HBV的结果,对三种检测方法进行相关性分析。方法对17508例无偿献血者(排除ELISA法初复检公共阳性、ALT阳性等)进行NAT,并对NAT反应性标本进行CLIA检测。结果经核酸检测出9例HBV DNA反应性标本,未检出HCV RNA和HIV RNA反应性标本,其中1例为ELISA法"阴性高值"标本;对应CLIA法HBV"两对半"检测出现2例HBsAg(-)抗-HBs(-)抗-HBc(+)及5例HBs Ag(-)抗-HBs(+)抗-HBc(+)血清型,可能为OBI,2例均无反应性,可能为窗口期标本。结论无偿献血者的现有血液筛查方法 NAT检测和ELI SA法具有互补性,NAT检测可弥补ELISA法检测的"窗口期"问题;NAT与CLIA法检测结果具有一致性;OBI可能是本地区NAT检测HBV DNA献血者的主要类型;对可能影响血液质量的ELISA法"阴性高值"标本的淘汰,会降低输血感染风险。 展开更多
关键词 核酸检测 elisa CLIA法 HBV
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鱼肠道弧菌间接ELISA快速检测法的建立 被引量:7
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作者 吴晓春 邓灯 +2 位作者 程顺峰 刘慧 姜令绪 《水产科学》 CAS 北大核心 2013年第5期284-288,共5页
为准确、快速诊断鱼肠道弧菌感染所致的海水鱼类全身性败血症,以鱼肠道弧菌为抗原,制备抗鱼肠道弧菌多克隆抗体,建立了鱼肠道弧菌间接酶联免疫吸附检测方法。该方法最佳反应条件为:抗原包被密度为107 cfu/mL,免疫血清稀释度为1∶211。... 为准确、快速诊断鱼肠道弧菌感染所致的海水鱼类全身性败血症,以鱼肠道弧菌为抗原,制备抗鱼肠道弧菌多克隆抗体,建立了鱼肠道弧菌间接酶联免疫吸附检测方法。该方法最佳反应条件为:抗原包被密度为107 cfu/mL,免疫血清稀释度为1∶211。病原菌检测灵敏度为每孔105 cfu/mL。抗血清与迟缓爱德华氏菌、杀鲑气单胞菌、恶臭假单胞菌、鱼肠道弧菌、副溶血弧菌、鳗弧菌、溶藻胶弧菌、秦皇岛弧菌8种水产致病菌的交叉反应结果呈阴性。用该法检测人工感染后的牙鲆和健康牙鲆,在发病鱼的肝脏、肾脏、脾脏、腹水等处检测出病原菌而健康鱼则为阴性。该技术能够准确、快速检测出鱼肠道弧菌。 展开更多
关键词 鱼肠道弧菌 间接elisa技术 检测方法
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胸腺素α1间接ELISA测定方法的建立及其在转基因蓝藻中的应用 被引量:2
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作者 朱笃 陈天圣 +3 位作者 李元广 叶勤 章军 周克夫 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期1-4,共4页
利用胸腺素α1(Tα1)_小牛血清白蛋白融合蛋白免疫新西兰兔获得的抗体 ,建立了Tα1间接酶联免疫吸附测定法 (ELISA) ,以定量检测转Tα1基因聚球藻7942外源基因表达产物胸腺素α1 ,实验结果表明该方法灵敏度高、专一性强、重复性好 ,可... 利用胸腺素α1(Tα1)_小牛血清白蛋白融合蛋白免疫新西兰兔获得的抗体 ,建立了Tα1间接酶联免疫吸附测定法 (ELISA) ,以定量检测转Tα1基因聚球藻7942外源基因表达产物胸腺素α1 ,实验结果表明该方法灵敏度高、专一性强、重复性好 ,可用于转基因微藻Tα1表达量的定量检测 ,同时表明Tα1基因能在聚球藻7942中稳定表达。 展开更多
关键词 胸腺素Α1 间接elisa 测定方法 转基因蓝藻 应用 酶联免疫测定法 聚球藻7942
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坦布苏病毒NS1蛋白的表达及ELISA检测方法的建立 被引量:6
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作者 提金凤 李志杰 +3 位作者 李秀丽 张敏敏 张媛媛 刁有祥 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期970-977,共8页
为了建立坦布苏病毒(TMUV)感染鸭群的抗体检测方法,以TMUV NS1的原核表达蛋白质作为包被抗原,建立了间接ELISA方法,并对该方法进行了检测条件的优化。将TMUV NS1全基因序列克隆至pET-28a(+),利用BL21(DE3)表达NS1蛋白,纯化后其质量浓度... 为了建立坦布苏病毒(TMUV)感染鸭群的抗体检测方法,以TMUV NS1的原核表达蛋白质作为包被抗原,建立了间接ELISA方法,并对该方法进行了检测条件的优化。将TMUV NS1全基因序列克隆至pET-28a(+),利用BL21(DE3)表达NS1蛋白,纯化后其质量浓度为4.16μg·μL^(-1)。通过方阵试验,确定了NS1蛋白的最佳包被质量浓度是100ng·孔-1,检测血清的最佳稀释倍数为40倍。随后对检测条件进行了优化,优化后的结果:抗原的最佳包被条件是4℃作用过夜;酶标二抗的最佳工作条件是稀释5 000倍,37℃作用1h;阴阳血清的临界值为0.278。一系列试验验证了该检测方法具有很强的特异性、敏感性、重复性。对采集自山东各地的80份血清样品进行检测,其检测结果显示,该方法与经典的鸡胚中和试验检测结果的符合率为93.5%以上,且比传统的中和试验更敏感。对TMUV感染鸭群的血清进行检测,描述了TMUV感染后鸭群抗体水平的消长规律,为该病的防治提供重要的理论依据。以NS1蛋白为包被抗原的间接ELISA方法的建立为临床上TMUV的感染提供了一种新的抗体检测方法,尤其是在TMUV早期感染的检测方面有着更为广泛的应用前景。 展开更多
关键词 鸭坦布苏病毒 NS1蛋白 间接elisa 检测方法
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猪轮状病毒性腹泻的ELISA双抗夹心法检测及防治建议 被引量:7
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作者 王玲 蒲万霞 +4 位作者 孟小琴 邓海平 崔东安 焦硕 杨志强 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第5期1990-1990,2013,共2页
[目的]为猪轮状病毒的针对性防治提供建议。[方法]以不同来源、不同饲养方式下218头猪的粪便为材料,用ELISA双抗夹心法检测其中的轮状病毒(RV)抗原,结合流行病学调查对猪轮状病毒的发病因素及发病特点进行分析。[结果]RV多为隐性感染,... [目的]为猪轮状病毒的针对性防治提供建议。[方法]以不同来源、不同饲养方式下218头猪的粪便为材料,用ELISA双抗夹心法检测其中的轮状病毒(RV)抗原,结合流行病学调查对猪轮状病毒的发病因素及发病特点进行分析。[结果]RV多为隐性感染,且感染率较高。从所取218份样品中共检测出RV阳性50头份,阳性率为22.94%,其中,仔猪170头份,阳性率22.35%,中猪48头份,阳性率25.0%;笼养模式下猪的发病率最低,为17.43%,农户圈养方式下猪的发病率最高,达36.84%。[结论]流行病学调查结果显示,仔猪对RV的感染率高于中猪,采取笼养模式,并对仔猪进行RV防治可降低猪RV的发病率。 展开更多
关键词 猪轮状病毒 流行病学 elisa双抗夹心法
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J亚群禽白血病ELISA抗体检测方法的建立 被引量:8
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作者 郭艳 付朝阳 +6 位作者 宋素泉 高宏雷 王笑梅 王英 张厚双 王晓艳 胡建民 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期304-307,共4页
本研究分离纯化了具有反应活性的J亚群禽白血病JL_2株gp85表达蛋白,并以其为抗原,开展了相关反应条件、特异性、重复性、敏感性、现地应用以及国外试剂盒符合率等方面的研究,初步建立了J亚群禽白血病ELISA诊断方法。
关键词 J亚群禽白血病 gp85表达蛋白 elisa诊断方法
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ELISA、胶体硒和免疫印迹试验检测HIV抗体结果分析 被引量:6
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作者 张洪花 史晓燕 +2 位作者 赵国有 汪照国 张西江 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2006年第5期338-340,共3页
目的复检和确认初筛HIV抗体阳性血清,并对比分析试验结果。方法对初筛阳性血清,用胶体硒和ELISA试验复检,任一复检试验阳性的血清再用western blot(WB)试验确认。结果224份初筛阳性血清经复检84份阳性,WB确认61份HIV-1抗体阳性,不确定10... 目的复检和确认初筛HIV抗体阳性血清,并对比分析试验结果。方法对初筛阳性血清,用胶体硒和ELISA试验复检,任一复检试验阳性的血清再用western blot(WB)试验确认。结果224份初筛阳性血清经复检84份阳性,WB确认61份HIV-1抗体阳性,不确定10份,阴性13份。以WB结果为标准,ELISA、胶体硒法的阳性符合率分别为84.72%和82.43%。ELISA的敏感性为100%,特异性为96.84%,胶体硒法的敏感性为100%,特异性为95.03%。阳性、不确定和阴性组血清ELISA平均S/CO分别为20.550,2.244和1.434。ELISA和胶体硒法复检同时阳性,在阳性组、不确定组、阴性组分别为100%(61/61),10%(1/10)和0(0/13)。结论胶体硒和ELISA复检可排除大部分初筛假阳性,但两种复检试验均存在一定的假阳性。3种试验的不符情况仅出现在HIV抗体阴性和不确定组,确定HIV感染依赖于WB确认试验。 展开更多
关键词 HIV抗体 elisa 胶体硒法 免疫印迹
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脱氧雪腐镰刀菌烯醇(don)直接竞争elisa方法的建立 被引量:2
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作者 张银志 金萍 +2 位作者 孙秀兰 徐丹 邵景东 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期28-32,共5页
利用前期制备得到的DON酶标抗原(辣根过氧化物酶标记)以及抗DON抗体,建立检测食品中DON含量的直接竞争ELISA方法。该方法的检测范围1~100ng/mL,灵敏度达0.56ng/mL,半数抑制浓度IC50为10ng/mL;与DON类似物T-2毒素的交叉反应率为12%;玉... 利用前期制备得到的DON酶标抗原(辣根过氧化物酶标记)以及抗DON抗体,建立检测食品中DON含量的直接竞争ELISA方法。该方法的检测范围1~100ng/mL,灵敏度达0.56ng/mL,半数抑制浓度IC50为10ng/mL;与DON类似物T-2毒素的交叉反应率为12%;玉米淀粉样品回收率在80.2%~91.1%之间,平均批间变异<15%,平均批内变异<3%。 展开更多
关键词 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(don) 酶标抗原 抗体 直接竞争elisa 辣根过氧化物酶(hrp)
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ELISA法筛选抗新孢子虫中药的研究(英文) 被引量:5
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作者 孔琳 鞠玉琳 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2008年第6期102-103,共2页
[Objective] The study was to screen the Chinese medicines with good resistance to Neospora caninum. [Method] Healthy Kunming mice pretreated with methylprednisolone for the purpose of immunity decrease were randomly d... [Objective] The study was to screen the Chinese medicines with good resistance to Neospora caninum. [Method] Healthy Kunming mice pretreated with methylprednisolone for the purpose of immunity decrease were randomly divided into 15 groups, and each mouse was intraperitoneally inoculated with 1.0 ×104 N. caninum. Four hours later, the mice were gavaged with various Chinese medicines. Seven days post-administration, eyeball blood sampling was conducted and the serum was used for antibody level detection with ELISA method. [Result] Four among the 15 Chinese medicines showed lower antibody positive rates. [Conclusion] Scutellaria baicalensis, Stemona sessilifolia, Gastrodia elata and Coptis chinensis could enhance the immunity level of mice infected by N. caninum. 展开更多
关键词 elisa method Chinese MEDICINE NEOSPORA caninum ANTIBODY LEVEL
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