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ENO1蛋白及其相关活性位点缺失突变蛋白在昆虫杆状病毒表达系统中的表达与鉴定
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作者 代鹏钰 杨蕊 +2 位作者 章婷婷 马昕芸 刘会玲 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期669-674,共6页
目的:利用昆虫杆状病毒表达系统(昆虫BEVS)表达糖酵解酶α-烯醇化酶(ENO1)及其3种酶活性位点缺失突变的ENO1蛋白ENO1-M1、ENO1-M2和ENO1-M3,为后续宫颈癌的代谢治疗研究奠定基础。方法:利用分子克隆技术将优化后ENO1序列插入pFastBacTM... 目的:利用昆虫杆状病毒表达系统(昆虫BEVS)表达糖酵解酶α-烯醇化酶(ENO1)及其3种酶活性位点缺失突变的ENO1蛋白ENO1-M1、ENO1-M2和ENO1-M3,为后续宫颈癌的代谢治疗研究奠定基础。方法:利用分子克隆技术将优化后ENO1序列插入pFastBacTM1载体,获得含有目的基因的重组质粒pFastBac-ENO1。分别缺失ENO1发挥糖酵解酶功能的3个活性位点,进行优化后将其插入pFastBacTM1载体,获得3个活性位点缺失的重组质粒pFastBac-M1、pFastBac-M2和pFastBac-M3。通过转座、转染后获得重组杆状病毒rBV-ENO1、rBV-M1、rBV-M2和rBV-M3,利用WB法对目的蛋白的表达及特异性进行检测。结果:成功扩增重组杆粒rBacmid-ENO1、rBacmid-M1、rBacmid-M2和rBacmid-M3,获得大小约2000 bp的基因片段,与预期大小相符。昆虫BEVS可表达ENO1蛋白及其3个酶活位点缺失的重组蛋白ENO1-M1、ENO1-M2和ENO1-M3,其分子量约为52000,与预期相符。WB法鉴定这些蛋白能与特异性标签His-tag发生反应。结论:通过昆虫BEVS成功表达目的蛋白ENO1及其酶活性位点缺失蛋白ENO1-M1、ENO1-M2和ENO1-M3,这些蛋白具有反应原性,为后续测定这些蛋白与ENO1单抗亲和力创造了条件。 展开更多
关键词 α-烯醇化酶 昆虫杆状病毒表达系统 蛋白表达 酶活性位点缺失
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近红外荧光成像监测ENO1 mAb在宫颈癌荷瘤小鼠体内生物分布的研究 被引量:1
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作者 赵调红 章婷婷 +5 位作者 陈圆圆 路如霞 赵源旭 裴亚萍 刘会玲 祝秉东 《影像科学与光化学》 CAS 北大核心 2023年第6期350-357,共8页
本研究探讨近红外荧光成像(NIRF)观察烯醇化酶1(ENO1)单克隆抗体(mAb)在宫颈癌荷瘤小鼠体内的分布、代谢及肿瘤靶向效率。利用癌症基因组图谱分析ENO1的表达与肿瘤分期和预后以及肿瘤免疫浸润的关系;Cy7-NHS和FITC与ENO1 mAb偶联成Cy7-E... 本研究探讨近红外荧光成像(NIRF)观察烯醇化酶1(ENO1)单克隆抗体(mAb)在宫颈癌荷瘤小鼠体内的分布、代谢及肿瘤靶向效率。利用癌症基因组图谱分析ENO1的表达与肿瘤分期和预后以及肿瘤免疫浸润的关系;Cy7-NHS和FITC与ENO1 mAb偶联成Cy7-ENO1 mAb和FITC-ENO1 mAb,通过激光共聚焦显微镜验证ENO1 mAb在宫颈癌细胞TC-1的定位,并建立宫颈癌皮下肿瘤模型,尾静脉注射Cy7-ENO1 mAb后在1、6、24、48、72和120 h进行近红外荧光成像,成像24 h后迅速解剖主要脏器进行体外成像。生物信息学分析结果表明ENO1在正常宫颈组织与宫颈癌组织中的表达有显著差异,免疫组织化学(IHC)结果提示ENO1蛋白在宫颈癌组织中高表达;此外,其表达与肿瘤分期和淋巴结分期显著相关,并且ENO1的高表达与多种糖酵解酶相关;激光共聚焦显微镜扫描显示FITC-ENO1 mAb能特异性结合在TC-1细胞膜表面,细胞未见内化;近红外荧光成像证明Cy7-ENO1 mAb主要富集在肝脏、肾脏和肿瘤组织,并且具有较高的肿瘤靶向效率。NIRF成像可以实时、动态监测ENO1 mAb在宫颈癌荷瘤小鼠体内的分布,其代谢器官主要是肝脏和肾脏,并且证实ENO1 mAb具有靶向宫颈癌作用。 展开更多
关键词 近红外荧光成像 eno1 mAb 生物分布 Cy7-NHS
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ENO1对急性髓系白血病细胞增殖与凋亡的影响
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作者 宋鹏 史贺文 +2 位作者 邹颖 李敏敬 杨春燕 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第24期4524-4531,共8页
目的:探讨Enolase 1(ENO1)调节急性髓系白血病(AML)细胞的代谢及分子机制。方法:分析GEO、TCGA等数据库中AML患者ENO1表达情况;运用Kaplan-Meier分析基因表达水平与患者生存期之间的关系;构建ENO1 shRNA慢病毒质粒体系,感染MV4-11、NB4... 目的:探讨Enolase 1(ENO1)调节急性髓系白血病(AML)细胞的代谢及分子机制。方法:分析GEO、TCGA等数据库中AML患者ENO1表达情况;运用Kaplan-Meier分析基因表达水平与患者生存期之间的关系;构建ENO1 shRNA慢病毒质粒体系,感染MV4-11、NB4细胞系构建分组,应用Western blot法检测ENO1在AML两种细胞系中的敲降效率;CCK-8法检测其对AML细胞生长的影响;Annexin V-PE/7-AAD法检测细胞凋亡情况;应用GO、KEGG富集方法分析ENO1在细胞中的功能及相关信号通路。结果:通过GEO、TCGA数据库分析表明ENO1在多数AML患者体内显著高表达(P<0.05,P<0.01),而在其它类型白血病患者中无此变化;ENO1在AML细胞中,在白血病干细胞,在AML小鼠模型造血干细胞中均显著高表达(P<0.001)。Kaplan-Meier分析表明ENO1高表达AML患者生存期显著低于ENO1低表达患者(P<0.05,HR>1)。敲降ENO1显著抑制AML细胞生长,诱导AML细胞凋亡(P<0.01)。富集分析发现,AML细胞中ENO1可能参与组蛋白甲基化、RNA干扰复合物的形成、糖代谢相关生物过程;其负相关共表达基因主要富集在自噬和FOXO信号通路。结论:ENO1在AML患者中尤其是AML干细胞中高表达并与生存期呈负相关。且ENO1高表达可促进AML细胞生长、抑制AML细胞凋亡,ENO1有望为AML患者的治疗和预后提供一定的参考。 展开更多
关键词 eno1 急性髓系白血病 凋亡 SHRNA
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ENO1在肝癌细胞株和肝细胞癌中的表达及与临床病理参数的关系 被引量:5
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作者 闫婷婷 马丽娜 +2 位作者 唐媛媛 雒夏 丁向春 《宁夏医科大学学报》 2017年第7期768-772,F0002,共6页
目的探讨α-烯醇化酶(ENO1)在肝癌细胞株及肝细胞癌(HCC)组织中的表达,分析其表达与临床病理参数之间的关系。方法分别采用RT-PCR、Western blot检测32例肝细胞癌及其相应癌旁组织,L-O2细胞、HepG2细胞及HepG2.215细胞中ENO1mRNA及其蛋... 目的探讨α-烯醇化酶(ENO1)在肝癌细胞株及肝细胞癌(HCC)组织中的表达,分析其表达与临床病理参数之间的关系。方法分别采用RT-PCR、Western blot检测32例肝细胞癌及其相应癌旁组织,L-O2细胞、HepG2细胞及HepG2.215细胞中ENO1mRNA及其蛋白的表达;用组织芯片技术检测80例肝癌组织及对应癌旁组织中ENO1的表达,并分析其与临床病理参数之间的关系。结果与癌旁肝组织相比,肝细胞癌组织中ENO1mRNA和蛋白表达均增高(P<0.05);与正常肝细胞L-O2相比,HepG2细胞和HepG2.215中ENO1mRNA和蛋白表达量均增高(P<0.05),HepG2.215细胞表达量高于HepG2.0细胞(P<0.05);组织芯片结果显示肝癌组织中ENO1蛋白表达高于癌旁组织(P<0.05),并且ENO1的表达水平与年龄、性别、甲胎蛋白(AFP)、肿瘤转移及肿瘤复发无关(P>0.05),与肿瘤大小、HBV感染有关(P<0.05)。结论 ENO1在肝癌细胞系及肝细胞癌组织中均高表达,并与肿瘤大小、HBV感染有关。 展开更多
关键词 肝细胞癌 eno1 RT-PCR Western BLOT 组织芯片
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四川白鹅ENO1基因特征及其在HPG轴组织中发育性表达的研究 被引量:2
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作者 郑梦月 姜冬梅 +2 位作者 康波 何珲 马容 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2014年第1期93-97,共5页
旨为研究鹅ENO1基因分子特征,阐明不同繁殖期鹅下丘脑、垂体和卵巢组织ENO1表达规律。应用生物信息学技术分析并预测四川白鹅ENO1结构和功能,实时荧光定量PCR技术检测产蛋前期(6月龄)和产蛋期(8月龄)鹅下丘脑、垂体和卵巢组织ENO1的表... 旨为研究鹅ENO1基因分子特征,阐明不同繁殖期鹅下丘脑、垂体和卵巢组织ENO1表达规律。应用生物信息学技术分析并预测四川白鹅ENO1结构和功能,实时荧光定量PCR技术检测产蛋前期(6月龄)和产蛋期(8月龄)鹅下丘脑、垂体和卵巢组织ENO1的表达量。结果表明,四川白鹅ENO1是内源性蛋白质,含3个N-糖基化位点和16个磷酸化位点,二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主,主要分布于细胞质(73.9%)和细胞核(13.0%)。四川白鹅ENO1的4个Mg2+结合位点和1个烯醇化酶标签进化保守,但是其纤溶酶原受体结构域和MBP-1结构域分别与人氨基酸序列存在4处(422Arg→Lys、432Arg→Leu、433Ile→Ala和434Asn→Lys)和5处变异(124Ala→Val、141Pro→Ser、176Asp→Ala、177Thr→Asn和223Ala→Gly)。产蛋期鹅下丘脑、垂体和卵巢组织ENO1表达量分别是产蛋前期的1.80(P<0.05),1.64(P<0.05)和3.05倍(P<0.05)。四川白鹅ENO1是多功能的、进化保守的内源性蛋白质,ENO1可通过调节HPG轴功能来参与调控鹅的繁殖功能。 展开更多
关键词 四川白鹅 eno1 生物信息学分析 下丘脑-垂体-性腺轴 基因表达
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子宫内膜异位症患者血清ENO1和CA125的水平变化和临床意义 被引量:4
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作者 余耀华 许爱霞 +2 位作者 闵青 吉丽 李芳 《江西医药》 CAS 2021年第2期243-244,267,共3页
目的探讨子宫内膜异位症(Endometriosis,EMs)患者血清ENO1和CA125变化的意义。方法选取2018年1月至2020年6月我院收治的的子宫内膜异位症患者40例为观察组,入组患者均经腹腔镜或剖腹探查及术后病理检查确诊;同时选取本院体检中心健康体... 目的探讨子宫内膜异位症(Endometriosis,EMs)患者血清ENO1和CA125变化的意义。方法选取2018年1月至2020年6月我院收治的的子宫内膜异位症患者40例为观察组,入组患者均经腹腔镜或剖腹探查及术后病理检查确诊;同时选取本院体检中心健康体检的妇女40例为对照组。比较两组之间以及不同r-AFS分期血清ENO1和CA125水平的差异。结果观察组血清ENO1和CA125水平较对照组明显升高(P<0.01);r-AFSⅢ期血清ENO1和CA125水平较Ⅰ期+Ⅱ期明显升高(P<0.01),且Ⅳ期血清ENO1和CA125水平较Ⅲ期又有明显升高(P<0.01)。结论ENO1和CA125可用于子宫内膜异位症的早期诊断、筛查以及病情程度的判别,但诊断界值和不同r-AFS分期参考区间的确定,更有助于临床早期精准干预。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 eno1 CA125
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ENO1过表达对籽鹅卵泡颗粒细胞凋亡基因Bcl-2表达的影响 被引量:1
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作者 王江璐 计红 +4 位作者 张伟宏 赫荣贺 郭景茹 郭丽 杨焕民 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第7期10-13,共4页
本试验将原代培养的籽鹅卵泡颗粒细胞转染ENO1腺病毒过表达载体,应用实时荧光定量PCR方法检测ENO1过表达对颗粒细胞Bcl-2mRNA表达量的影响。结果发现ENO1过表达使卵泡颗粒细胞Bcl-2mRNA表达量极显著增加(P<0.01)。提示ENO1可能通过使... 本试验将原代培养的籽鹅卵泡颗粒细胞转染ENO1腺病毒过表达载体,应用实时荧光定量PCR方法检测ENO1过表达对颗粒细胞Bcl-2mRNA表达量的影响。结果发现ENO1过表达使卵泡颗粒细胞Bcl-2mRNA表达量极显著增加(P<0.01)。提示ENO1可能通过使Bcl-2基因表达量增加,从而抑制籽鹅卵泡颗粒细胞凋亡,促进卵泡的发育。 展开更多
关键词 籽鹅 eno1过表达 BCL-2基因 颗粒细胞
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烯醇化酶ENO1抑制非小细胞肺癌细胞上皮间质转换 被引量:7
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作者 周鑫 张莹 +5 位作者 韩廼珺 郭素萍 肖汀 程书钧 高燕宁 张开泰 《中国肺癌杂志》 CAS 北大核心 2013年第5期221-226,共6页
背景与目的已有的研究表明:上皮间质转换(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是非小细胞肺癌发展和转移的一个重要过程,受到众多信号通路的精细调节。经典的丝裂原活化激酶(mitogen activatedprotein kinase,MAPK)信号通路是转化... 背景与目的已有的研究表明:上皮间质转换(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是非小细胞肺癌发展和转移的一个重要过程,受到众多信号通路的精细调节。经典的丝裂原活化激酶(mitogen activatedprotein kinase,MAPK)信号通路是转化生长因子(transforming growth factor β,TGFβ)诱导EMT发生的必要条件。本研究以非小细胞肺癌细胞系A549为模型,对烯醇化酶(enolase-1,ENO1)影响细胞EMT过程的分子机制进行了初步研究。方法建立稳定过表达ENO1的A549细胞,用划痕实验检测细胞运动能力;用Western blot技术检测EMT过程相关分子标志物的变化;通过TGFβ-1诱导实验检测ENO1过表达对EMT的影响;通过上皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)诱导实验和Western blot检测ENO1过表达引起胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated protein kinase,ERK)磷酸化的改变。结果 ENO1过表达抑制A549细胞侧向迁移能力。ENO1过表达还会引起上皮样标志物E-cad-herin表达上调,同时间质样标志物N-cadherin和Vimentin表达下降;TGFβ-1诱导实验也证实了ENO1对EMT进程的抑制作用。EGF活化实验显示ENO1对ERK磷酸化的抑制作用。结论在非小细胞肺癌细胞中,ENO1具有抑制细胞EMT的作用,且很可能是通过抑制MAPK通路来实现。 展开更多
关键词 eno1 肺肿瘤 上皮间质转换 ERK1 2
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沉默ENO1对人宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响 被引量:1
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作者 蔡鑫 熊蓉 +6 位作者 范佳杨 汤亚兰 刘康 刘先平 岳秋菊 梁婷 罗岳西 《山西医科大学学报》 CAS 2020年第7期616-622,共7页
目的探讨α-烯醇化酶(ENO1)在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法运用免疫化学染色和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测48例宫颈癌患者的癌组织和癌旁组织中ENO1的表达情况。运用RNA干扰技术对人宫颈癌HeL... 目的探讨α-烯醇化酶(ENO1)在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法运用免疫化学染色和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测48例宫颈癌患者的癌组织和癌旁组织中ENO1的表达情况。运用RNA干扰技术对人宫颈癌HeLa细胞中的ENO1进行干扰,将细胞分为对照组(PBS组)、空载体组(GV102组)和干扰组(shENO1组),采用RT-PCR和Western blot检测干扰效率。通过MTT实验、细胞划痕实验和Transwell实验检测ENO1对细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果ENO1在宫颈癌组织中高表达(P<0.001),与年龄、FIGO分期、淋巴转移、病理类型及分级无明显相关性(P>0.05)。shENO1组ENO1 mRNA和蛋白表达水平较PBS组和GV102组显著降低(P<0.05)。MTT实验、细胞划痕实验和Transwell实验结果显示,shENO1组细胞增殖、迁移和侵袭能力较PBS组和GV102组显著降低(P<0.05)。结论ENO1在宫颈癌组织中呈高表达,体外实验发现沉默ENO1能抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 α-烯醇化酶 eno1 HELA细胞 宫颈癌 增殖 迁移 侵袭
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非小细胞肺癌患者肿瘤组织和外周血血浆中ENO1蛋白水平分析 被引量:17
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作者 张莹 李敏 +5 位作者 刘宇 韩迺珺 张开泰 肖汀 程书钧 高燕宁 《中国肺癌杂志》 CAS 2010年第12期1089-1093,共5页
背景与目的肺癌严重威胁人类生存健康,有效的肿瘤标志物可以辅助诊断、判断预后和指导治疗。本研究旨在检测非小细胞肺癌患者肿瘤组织和血浆中烯醇化酶1(alpha-enolase,ENO1)蛋白水平,初步探讨ENO1作为肺癌相关蛋白标志物的可能性。方... 背景与目的肺癌严重威胁人类生存健康,有效的肿瘤标志物可以辅助诊断、判断预后和指导治疗。本研究旨在检测非小细胞肺癌患者肿瘤组织和血浆中烯醇化酶1(alpha-enolase,ENO1)蛋白水平,初步探讨ENO1作为肺癌相关蛋白标志物的可能性。方法采用Western blot方法检测16例肺鳞癌患者的肿瘤组织及其配对正常肺组织中ENO1蛋白水平。采用双抗体夹心酶联免疫吸附分析(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定42例健康体检者、34例肺部良性疾病患者和84例非小细胞肺癌患者三组人群血浆中ENO1蛋白水平。结果在87.5%(14/16)的肺鳞癌患者肿瘤组织中ENO1蛋白表达量高于其配对正常肺组织;非小细胞肺癌患者血浆中ENO1蛋白水平高于健康体检者(P=0.031)和肺部良性疾病者(P=0.019),且ENO1蛋白在肺腺癌患者血浆中的水平高于肺鳞癌患者(P=0.023)。结论非小细胞肺癌肿瘤组织和血浆中ENO1蛋白水平升高,提示ENO1可作为潜在的非小细胞肺癌相关血浆蛋白标志物。 展开更多
关键词 肺肿瘤 烯醇化酶1 血浆 酶联免疫吸附分析
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雌雄驯鹿茸皮组织ENO1基因cDNA克隆与表达 被引量:1
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作者 韩若冰 韩磊 +1 位作者 王强辉 李和平 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期92-95,100,共5页
选用雌、雄驯鹿(Rangifer tarandus)顶端茸皮组织为试验材料,参考Genebank数据库中白尾鹿(Odocoileus virginianus)、牛(Bos taurus)、羊(Ovis aries)等同源物种的ENO1基因序列设计同源引物,采用PCR及T-A克隆技术以雄性驯鹿茸皮组织为... 选用雌、雄驯鹿(Rangifer tarandus)顶端茸皮组织为试验材料,参考Genebank数据库中白尾鹿(Odocoileus virginianus)、牛(Bos taurus)、羊(Ovis aries)等同源物种的ENO1基因序列设计同源引物,采用PCR及T-A克隆技术以雄性驯鹿茸皮组织为材料克隆ENO1基因的c DNA序列,并运用荧光定量PCR技术对ENO1基因在雌、雄驯鹿茸皮组织中的表达量进行对比分析。结果表明:成功克隆获得驯鹿ENO1基因,其编码区片段大小为1 305 bp,共编码434个氨基酸;ENO1基因编码的蛋白的相对分子质量为47 342.09,其二级结构以α-螺旋为主;Blastp比对显示,驯鹿ENO1基因与羊、白尾鹿、牛的同源性最高,均为99%。构建系统进化树发现,驯鹿ENO1基因与白尾鹿的亲缘关系最近,与白头鹰(Haliaeetus leucocephalus)的亲缘关系最远;荧光定量PCR结果显示,ENO1基因在茸皮组织中的表达量在雌、雄之间存在差异,其中在雄性驯鹿茸皮组织中的表达量是雌性驯鹿茸皮组织中的(3.35±0.12)倍。 展开更多
关键词 驯鹿 eno1基因 荧光定量PCR
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抗ENO1抗体与狼疮性视网膜病变的相关性
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作者 张琳崎 赵静 +6 位作者 王红彦 王宗沂 李英妮 汤稷旸 李思莹 曲进锋 赵明威 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1099-1105,共7页
目的:研究抗α烯醇化酶抗体[抗ENO1(enolase 1)抗体]水平与狼疮性视网膜病变及系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)活动性的相关性。方法:选择2017年4月至2022年5月北京大学人民医院风湿免疫科住院的活动性SLE患者,分为SL... 目的:研究抗α烯醇化酶抗体[抗ENO1(enolase 1)抗体]水平与狼疮性视网膜病变及系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)活动性的相关性。方法:选择2017年4月至2022年5月北京大学人民医院风湿免疫科住院的活动性SLE患者,分为SLE合并和不合并狼疮性视网膜病变两组,同时以年龄匹配且不合并视网膜病变的健康志愿者作为阴性对照组,应用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组血清中抗ENO1抗体水平和阳性率,同时收集前两组SLE患者活动性相关的临床特征和实验室结果,分析抗ENO1抗体水平与其他SLE临床资料与实验室指标之间的相关性。结果:SLE合并狼疮性视网膜病变患者眼底出现了多种视网膜病变,占比排名前三的是视网膜出血(14/32,43.75%)、棉絮斑(8/32,25.00%)和视网膜静脉阻塞(3/32,9.38%)。在32例SLE合并狼疮性视网膜病变患者中,有13例(40.63%)出现了两种及以上的视网膜病变。SLE合并狼疮性视网膜病变患者的血清抗ENO1抗体水平和阳性率显著高于不合并狼疮性视网膜病变组(P<0.05),狼疮性视网膜病变患者具有更高的SLE疾病活动度评分(P<0.001)。将SLE患者分为抗ENO1抗体阳性和阴性两组进行研究发现,在临床表现上,抗ENO1抗体阳性与发热和尿潜血有关的可能性大(P=0.011,P=0.042);在实验室指标上,与抗ENO1抗体阴性的SLE患者相比,抗ENO1抗体阳性的SLE患者具有更高的红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)和血小板计数(blood platelet count,PLT,P<0.01),此外,抗ENO1抗体阳性患者还具有更高的免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA,P<0.05)。结论:合并狼疮性视网膜病变的SLE患者血清中抗ENO1抗体的水平和阳性率明显升高,且具有更高的疾病活动性。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 狼疮性视网膜病变 自身抗体 α烯醇化酶 eno1抗体
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人ENO1基因的克隆及其重组逆病毒载体ENO1-pBABE-Puro的构建
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作者 李海红 王秋香 +4 位作者 王海琳 刘会玲 祝秉东 王千千 朱晓艳 《实用癌症杂志》 2014年第1期4-7,共4页
目的构建含人烯醇化酶1(ENO1)目的基因的重组逆转录病毒载体。方法从人癌细胞中提取总RNA合成cDNA,PCR扩增目的基因ENO1,用sal1和BamH1双酶切ENO1及pbabe质粒,然后用连接酶将ENO1插入pbabe中,最后将重组质粒转化感受态E.coli DH 5α大... 目的构建含人烯醇化酶1(ENO1)目的基因的重组逆转录病毒载体。方法从人癌细胞中提取总RNA合成cDNA,PCR扩增目的基因ENO1,用sal1和BamH1双酶切ENO1及pbabe质粒,然后用连接酶将ENO1插入pbabe中,最后将重组质粒转化感受态E.coli DH 5α大肠杆菌,提取质粒进行酶切鉴定及DNA测序。结果重组逆转录病毒载体ENO1-pBABE-Puro测序结果与GenBank上的序列完全一致,克隆的目的基因已经正确插入到逆转录病毒载体pBABE-Puro中。结论成功构建了含有ENO1目的基因的重组逆转录病毒载体,为进一步观察ENO1在肿瘤发生、发展中的作用及与宫颈癌细胞化疗敏感性的相关性做好准备。 展开更多
关键词 eno1基因 PCR 质粒构建 逆转录病毒载体 宫颈癌
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基于Oncomine数据库分析ENO1在卵巢癌中的表达及其预后价值
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作者 张涛红 熊莉莉 +3 位作者 王小伟 王伟红 刘英 安瑞芳 《海南医学院学报》 CAS 2019年第18期1405-1409,共5页
目的:拟探讨α-烯醇化酶(α-enolase,ENO1)在卵巢癌中的表达及其预后意义。方法:收集Oncomine数据库中关于ENO1的信息,并对目前数据库中资料进行二次分析,对其在卵巢癌中的作用进行荟萃分析,同时利用Kaplan-Meier Plotter进行卵巢癌患... 目的:拟探讨α-烯醇化酶(α-enolase,ENO1)在卵巢癌中的表达及其预后意义。方法:收集Oncomine数据库中关于ENO1的信息,并对目前数据库中资料进行二次分析,对其在卵巢癌中的作用进行荟萃分析,同时利用Kaplan-Meier Plotter进行卵巢癌患者生存分析。结果:Oncomine数据库中共有14项研究涉及ENO1在卵巢癌组织和正常组织中的表达,共包括1 001个样本。与对照组相比,ENO1在卵巢癌组织中高表达(P<0.05)。高表达ENO1的卵巢癌患者总体生存率较高,而低表达ENO1的卵巢癌患者预后较差(P<0.05)。进一步亚组分析发现,ENO1表达水平对浆液性卵巢癌患者预后有显著影响,而在子宫内膜样卵巢癌患者中,其表达水平对预后无显著影响(P<0.05)。结论:通过对Oncomine基因芯片数据库中肿瘤相关基因信息的深入挖掘,发现ENO1在卵巢癌中高表达,且与卵巢癌的预后有关,可作为肿瘤预后标志物及替代药物治疗的新靶点。 展开更多
关键词 卵巢癌 Oncomine数据库 α-烯醇化酶(eno1) 总体生存率 Kaplan-Meier Plotter数据库
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Analysis of the expression and prognostic value of ENO1 in ovarian cancer based on Oncomine database
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作者 Tao-Hong Zhang Li-Li Xiong +3 位作者 Xiao-Wei Wang Wei-Hong Wang Ying Liu Rui-Fang An 《Journal of Hainan Medical University》 2019年第18期45-48,共4页
Objective:Ovarian cancer is one of the leading causes of death in women,because of late diagnosis,recurrence and resistance to chemotherapy.Therefore,it's necessary to design a novel sensitive and specific maker t... Objective:Ovarian cancer is one of the leading causes of death in women,because of late diagnosis,recurrence and resistance to chemotherapy.Therefore,it's necessary to design a novel sensitive and specific maker to diagnose and treat patients of ovarian cancer.However,this study intends to explore the expression and prognostic value of ENO1 in ovarian cancer.Method:ENO1 data were collected from Oncomine database,and then were performed subgroup analysis and systematic analysis.Meanwhile,the prognostic significance of ENO1 was analyzed by an online survival analysis tool"Kaplan-Meier Plotter"(KM plotter)database.Results:In Oncomine database,a total of 14 studies were involved ENO1 in ovarian cancer tissues and normal tissues,including a total of 1001 samples.Comparing with normal tissues,ENO1 expression is higher(P<0.05).Moreover,the overall survival of ENO1 high expression in ovarian cancer is closely related with high survival(P<0.05).Further study indicated that ENO1 expression showed negative relation to the prognosis of serous ovarian cancer patients while ENO1 expression showed no effects on the prognosis of endometrioid ovarian cancer patients.Conclusion:Through exploration of tumor gene information in Oncomine database,ENO1 was found highly expressed in ovarian cancer and related to the prognosis of ovarian cancer,which might be a new marker for ovarian cancer prognosis and alternative drug therapy. 展开更多
关键词 OVARIAN CANCER Oncomine databaseαdenolase(eno1) Overall SURVIVAL Kaplan-Meier Plotter DATABASE
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血清中ENO1自身抗体联合CEA、 Cyfra21-1进行肺癌诊断的应用价值分析
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作者 张凤岐 《医学检验与临床》 2022年第2期23-25,共3页
目的:探讨血清中α-烯醇化酶(ENO1)自身抗体联合癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)进行肺癌诊断的应用价值。方法:选定本院2017年5月~2019年5月收诊的30例肺癌患者,同期选择30例肺部良性疾病患者以及40例健康体检者,按照疾病... 目的:探讨血清中α-烯醇化酶(ENO1)自身抗体联合癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)进行肺癌诊断的应用价值。方法:选定本院2017年5月~2019年5月收诊的30例肺癌患者,同期选择30例肺部良性疾病患者以及40例健康体检者,按照疾病不同分为A组(30例,肺癌)、B组(30例,肺部良性疾病)、C组(40例,健康体检者),比较三组的CYFRA21-1水平、ENO1自身抗体水平、CEA水平,以及上述三项血清肿瘤标志物的特异度、灵敏度。结果:A组的CYFRA21-1(9.82±1.35)ng/ml、ENO1自身抗体(21.56±3.22)μg/L、CEA(59.73±5.28)ng/ml,均较B、C组高(P<0.05);B组的CYFRA21-1(3.34±0.37)ng/ml、ENO1自身抗体(17.93±2.06)μg/L、CEA(2.62±0.35)ng/ml,较C组高(P<0.05)。受试者以CYFRA21-1、ENO1自身抗体、CEA进行联合检测的灵敏度均较单项检测高(P<0.05),但特异度比较,并无统计学意义(P>0.05)。结论:肺癌诊断时以血清中ENO1自身抗体联合CEA、Cyfra21-1作相应检测,灵敏度较高,有助于肺癌早期检测,减少漏诊。 展开更多
关键词 肺癌 CYFRA21-1 CEA eno1
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抗ENO1抗体联合二甲双胍通过靶向肿瘤干细胞逆转人非小细胞肺癌A549细胞对西妥昔单抗的抵抗 被引量:5
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作者 张蕙雯 杨婷 +5 位作者 禹卓玥 孙立新 刘军 遇珑 孙力超 冉宇靓 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期239-246,共8页
目的:探究抗烯醇化酶1(enolase 1,ENO1)抗体、二甲双胍(metformin,MET)通过靶向肿瘤干细胞对西妥昔单抗(cetuximab,CTX)耐药型非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭和干性的影响及其可能的作用机制。方法:10 mmol/L MET联合40μg/ml抗E... 目的:探究抗烯醇化酶1(enolase 1,ENO1)抗体、二甲双胍(metformin,MET)通过靶向肿瘤干细胞对西妥昔单抗(cetuximab,CTX)耐药型非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭和干性的影响及其可能的作用机制。方法:10 mmol/L MET联合40μg/ml抗ENO1抗体处理CTX(35μg/ml)耐药型非小细胞肺癌细胞A549,4 d后通过增殖、克隆形成、迁移、侵袭、甲基纤维素成球实验等检测联合治疗对A549肺癌细胞的影响。同时通过流式细胞术检测CTX、MET和抗ENO1抗体分别以单药及三药联合处理对ALDH+和CD44+两种肺癌干细胞亚群的影响。结果:CTX、MET和抗ENO1抗体联合处理显著抑制A549细胞的增殖、迁移、侵袭能力及A549细胞的自我更新能力。流式细胞术分析发现MET可显著抑制ALDH+干细胞亚群,而抗ENO1抗体可显著抑制CD44+干细胞亚群,三药联合处理可同时显著抑制ALDH+和CD44+干细胞亚群。结论:MET和抗ENO1抗体分别靶向ALDH+和CD44+肿瘤干细胞亚群,两者联合可有效逆转A549细胞对CTX的抗性,从而更有效地抑制A549细胞的干性、增殖、迁移和复发。 展开更多
关键词 西妥昔单抗 二甲双胍 抗烯醇化酶1抗体 肺癌干细胞 A549细胞 联合治疗
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PRMT6 promotes tumorigenicity and cisplatin response of lung cancer through triggering 6PGD/ENO1 mediated cell metabolism 被引量:1
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作者 Mingming Sun Leilei Li +25 位作者 Yujia Niu Yingzhi Wang Qi Yan Fei Xie Yaya Qiao Jiaqi Song Huanran Sun Zhen Li Sizhen Lai Hongkai Chang Han Zhang Jiyan Wang Chenxin Yang Huifang Zhao Junzhen Tan Yanping Li Shuangping Liu Bin Lu Min Liu Guangyao Kong Yujun Zhao Chunze Zhang Shu-Hai Lin Cheng Luo Shuai Zhang Changliang Shan 《Acta Pharmaceutica Sinica B》 SCIE CAS CSCD 2023年第1期157-173,共17页
Metabolic reprogramming is a hallmark of cancer,including lung cancer.However,the exact underlying mechanism and therapeutic potential are largely unknown.Here we report that protein arginine methyltransferase 6(PRMT6... Metabolic reprogramming is a hallmark of cancer,including lung cancer.However,the exact underlying mechanism and therapeutic potential are largely unknown.Here we report that protein arginine methyltransferase 6(PRMT6)is highly expressed in lung cancer and is required for cell metabolism,tumorigenicity,and cisplatin response of lung cancer.PRMT6 regulated the oxidative pentose phosphate pathway(PPP)flux and glycolysis pathway in human lung cancer by increasing the activity of 6-phosphogluconate dehydrogenase(6PGD)and a-enolase(ENO1).Furthermore,PRMT6 methylated R324 of 6PGD to enhancing its activity;while methylation at R9 and R372 of ENO1 promotes formation of active ENO1 dimers and 2-phosphoglycerate(2-PG)binding to ENO1,respectively.Lastly,targeting PRMT6 blocked the oxidative PPP flux,glycolysis pathway,and tumor growth,as well as enhanced the antitumor effects of cisplatin in lung cancer.Together,this study demonstrates that PRMT6 acts as a posttranslational modification(PTM)regulator of glucose metabolism,which leads to the pathogenesis of lung cancer.It was proven that the PRMT6-6PGD/ENO1 regulatory axis is an important determinant of carcinogenesis and may become a promising cancer therapeutic strategy. 展开更多
关键词 Lung cancer Metabolic reprogramming Post-translational modification PRMT6 Pentose phosphate pathway flux GLYCOLYSIS 6-Phospho-gluconate dehydrogenase a-enolase eno1
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卵巢高低级别浆液性腺癌组织中FBXW7和ENO1的表达和意义 被引量:5
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作者 沈爱红 李月红 +2 位作者 宿敬存 郑宏江 张军 《中国综合临床》 2018年第6期496-502,共7页
目的 研究FBXW7和ENO1在卵巢不同级别浆液性腺癌的表达情况及意义.方法 收集2006年1月至2011年5月冀中能源峰峰集团总医院妇产科卵巢浆液性腺癌标本60例,应用免疫组化的方法研究FBXW7和ENO1在60例高低级别卵巢浆液性腺癌表达情况,并与... 目的 研究FBXW7和ENO1在卵巢不同级别浆液性腺癌的表达情况及意义.方法 收集2006年1月至2011年5月冀中能源峰峰集团总医院妇产科卵巢浆液性腺癌标本60例,应用免疫组化的方法研究FBXW7和ENO1在60例高低级别卵巢浆液性腺癌表达情况,并与相应正常组织进行对比,分析FBXW7和ENO1蛋白与卵巢高低级别浆液性腺癌的预后.结果 FBXW7在40例卵巢高级别腺癌中表达阳性为9例,表达阳性率为22.5%(9/40),在15例正常输卵管中的表达阳性为10例,表达阳性率66.7%(10/15),差异有统计学意义(P=0.003).FBXW7在20例低级别腺癌表达阳性5例,阳性率25.0%(5/20),在15例正常卵巢组织中的表达阳性9例,阳性率为60.0%(9/15),差异有统计学意义(P=0.04).ENO1蛋白在40例高级别腺癌中表达阳性27例,表达阳性率是67.5%(27/40),在15例正常输卵管中的表达阳性5例,阳性率33.3%(5/15),差异有统计学意义(P=0.024).ENO1蛋白在20例低级别腺癌中有15例阳性表达,表达阳性率是75.0%(15/20),15例正常卵巢组织中的4例阳性表达,阳性率26.7%(4/15),差异有统计学意义(P=0.006).在卵巢高级别腺癌中FBXW7低表达与ENO1高表达无相关性(P=0.199),在卵巢低级别腺癌中FBXW7低表达与ENO1高表达有显著的相关性(r=-0.733,P〈0.001).在低级别浆液性腺癌中FBXW7蛋白高表达组和低表达组比较,5年生存率分别为:44.4%与32.1%,差异无统计学意义(P=0.052).在卵巢高级别浆液性腺癌中,高表达组和低表达组,5年生存率分别为:20.0%与7.7%,差异无统计学意义(P=0.097).ENO1在卵巢低级别浆液性腺癌中,高表达组5年生存率是7.4%,低表达组5年生存率是50.0%(P=0.023).在高级别浆液性腺癌中ENO1,高表达组与低表达组比较,5年生存率分别为:0与40.0%,差异有统计学意义(P=0.001).结论 FBXW7在卵巢高低级别腺癌中呈现低表达,表明FBXW7在卵巢浆液性腺癌中可能作为抑癌基因,ENO1在卵巢高低级别腺癌中呈现高表达,表明ENO1可能作为癌基因,且FBXW7在浆液性腺癌中高表达组生存率高于低表达组,ENO1在浆液性腺癌中高表达组生存率低于低表达组,因此,二者可能成为卵巢浆液性腺癌新的诊断指标和治疗靶点. 展开更多
关键词 FBXW7 eno1 卵巢低级别浆液性腺癌 卵巢高级别浆液性腺癌 免疫组化
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PGK1和ENO1介导的有氧糖酵解在脑胶质瘤血管生成中的作用 被引量:4
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作者 王清湲 卢金靖 +2 位作者 许鑫 薛一雪 刘丽波 《解剖科学进展》 2019年第4期405-409,413,共6页
目的研究磷酸甘油酸激酶1(phosphoglycerate kinase 1,PGK1)和α-烯醇化酶(α-Enolase,ENO1)在脑胶质瘤微血管内皮细胞(Glioma microvascular endothelial cells,GECs)的表达,以及介导的有氧糖酵解在脑胶质瘤血管生成中的作用。方法培... 目的研究磷酸甘油酸激酶1(phosphoglycerate kinase 1,PGK1)和α-烯醇化酶(α-Enolase,ENO1)在脑胶质瘤微血管内皮细胞(Glioma microvascular endothelial cells,GECs)的表达,以及介导的有氧糖酵解在脑胶质瘤血管生成中的作用。方法培养正常人脑为血管内皮细胞(norma lmicrovascular endothelial cells,NECs)和GECs,应用Real-timePCR和WesternBlot方法检测PGK1和ENO1的表达水平;设计并构建PGK1和ENO1表达沉默的质粒以及相应的对照质粒,分别转染hCMEC/D3细胞,筛选出稳定表达细胞株后建立PGK1和ENO1表达沉默的GECs;应用葡萄糖检测试剂盒检测细胞的葡萄糖摄取量,无血清培养法检测乳酸产量,SeahorseXF24细胞能量代谢分析仪检测细胞的细胞外酸化率;应用CCK8实验检测细胞增殖能力变化,Transwell实验检测细胞迁移变化,Matrigel基质胶实验检测血管形成能力的变化。结果与NECs相比,PGK1和ENO1mRNA和蛋白表达水平在GECs中显著增高;PGK1和ENO1表达沉默均显著抑制了GECs的葡萄糖摄取量、乳酸产量和细胞外酸化率,显著降低了GECs的增殖、迁移和血管形成能力。结论PGK1和ENO1介导的有氧糖酵解促进脑胶质瘤微血管内皮细胞增殖、迁移和血管生成。 展开更多
关键词 PGK1 eno1 有氧糖酵解 血管生成 胶质瘤
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