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EPSPS regulates cell elongation by disrupting the balance of lignin and flavonoid biosynthesis in cotton
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作者 Qingdi Yan Wei Hu +10 位作者 Chenxu Gao Lan Yang Jiaxian Yang Renju Liu Masum Billah Yongjun Lin Ji Liu Pengfei Miao Zhaoen Yang Fuguang Li Wenqiang Qin 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2024年第10期3437-3456,共20页
EPSPS is a key gene in the shikimic acid synthesis pathway that has been widely used in breeding crops with herbicide resistance.However,its role in regulating cell elongation is poorly understood.Through the overexpr... EPSPS is a key gene in the shikimic acid synthesis pathway that has been widely used in breeding crops with herbicide resistance.However,its role in regulating cell elongation is poorly understood.Through the overexpression of EPSPS genes,we generated lines resistant to glyphosate that exhibit an unexpected dwarf phenotype.A representative line,DHR1,exhibits a stable dwarf phenotype throughout its entire growth period.Except for plant height,the other agronomic traits of DHR1 are similar to its transgenic explants ZM24.Paraffin section observations showed that DHR1 internodes are shortened due to reduced elongation and division of the internode cells.Exogenous hormones confirmed that DHR1 is not a classical brassinolide(BR)-or gibberellin(GA)-related dwarfing mutant.Hybridization analysis and fine mapping confirmed that the EPSPS gene is the causal gene for dwarfism,and the phenotype can be inherited in different genotypes.Transcriptome and metabolome analyses showed that genes associated with the phenylpropanoid synthesis pathway are enriched in DHR1 compared with ZM24.Flavonoid metabolites are enriched in DHR1,whereas lignin metabolites are reduced.The enhancement of flavonoids likely results in differential expression of auxin signal pathway genes and alters the auxin response,subsequently affecting cell elongation.This study provides a new strategy for generating dwarfs and will accelerate advancements in light simplification in the cultivation and mechanized harvesting of cotton. 展开更多
关键词 epspS COTTON T-DNA DWARFISM herbicide resistance
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东方百合高效转基因体系构建及EPSP基因的导入 被引量:1
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作者 张洁 郭文杰 蔡宣梅 《北方园艺》 CAS 北大核心 2023年第4期46-53,共8页
以东方百合‘西伯利亚’无菌鳞茎超薄切片(0.5~1.0 mm)为试材,通过PIC和2,4-D不同浓度筛选愈伤诱导培养条件,采用超薄鳞片直接分化及愈伤分化2种转化方式,测试对Cef、Kan及Hgy的耐受性,分析不同干燥预处理以及MES、AS对转化效果的影响,... 以东方百合‘西伯利亚’无菌鳞茎超薄切片(0.5~1.0 mm)为试材,通过PIC和2,4-D不同浓度筛选愈伤诱导培养条件,采用超薄鳞片直接分化及愈伤分化2种转化方式,测试对Cef、Kan及Hgy的耐受性,分析不同干燥预处理以及MES、AS对转化效果的影响,并通过EPSP基因的导入,验证基因转化阳性率及转化效果,以期优化百合遗传转化的技术参数,建立高效遗传转化体系并进行EPSP基因的导入。结果表明:PIC对百合愈伤诱导有良好效果,MS+1 mg·L^(-1)PIC+0.3 mg·L^(-1)NAA为最佳愈伤诱导培养基;抗生素敏感性测试发现,培养基添加75 mg·L^(-1)Kan或20 mg·L^(-1)Hyg结合250 mg·L^(-1)Cef适宜抗性筛选;超薄鳞片及愈伤在60 min和30 min的干燥预培养下,阳性率均显著提高;MS+10 mmol·L^(-1)MES+200μmol·L^(-1)AS为重悬液处理,超薄鳞片获得48.3%的高效转化率,优于愈伤转化;同时,将EPSP基因转化百合,分子检测表示已获得转基因阳性株。该研究建立以超薄鳞片和愈伤为受体的2套高效遗传转化体系,并成功导入EPSP基因,获得800 mg·L^(-1)的草甘膦抗性,为转基因技术在后续的生产应用奠定技术基础。 展开更多
关键词 百合 epsp基因 遗传转化 转基因
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花粉管通道法转EPSPS基因创制耐草甘膦玉米种质
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作者 李向龙 郑登俞 +2 位作者 张春 张中保 吴忠义 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期524-529,共6页
【目的】对T_(0)-T_(3)代转基因植株进行抗草甘膦EPSPS基因的筛选检测,以期得到遗传稳定的转基因株系。【方法】利用花粉管通道法将EPSPS基因转入优良自交系京92中,通过田间草甘膦筛选和分子检测鉴定外源基因在世代间的遗传表达。【结... 【目的】对T_(0)-T_(3)代转基因植株进行抗草甘膦EPSPS基因的筛选检测,以期得到遗传稳定的转基因株系。【方法】利用花粉管通道法将EPSPS基因转入优良自交系京92中,通过田间草甘膦筛选和分子检测鉴定外源基因在世代间的遗传表达。【结果】在田间用200 mg·L^(-1)的草甘膦除草剂筛选,T_(0)代15个抗性植株经PCR鉴定,共获得10个阳性植株,转化率为1.03%;对各株系从T_(1)代到T_(3)代逐代筛选淘汰,株系内阳性株数逐渐增多,在T_(3)代5个株系中分离出K3和K8两个整合了EPSPS外源基因的稳定遗传株系;进一步对K3和K8两个株系的T_(3)代采用试纸条进行功能表达分析,发现目的基因均能正常表达。【结论】K3和K8两个转基因玉米株系后期可作为培育耐草甘膦的基础材料。 展开更多
关键词 玉米 花粉管通道法 epspS基因 草甘膦耐性
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转EPSPS基因抗除草剂水稻恢复系的培育及育种评价
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作者 肖本泽 王资霖 《中国农学通报》 2023年第2期8-15,共8页
为了培育既抗除草剂、综合性状又优良的杂交水稻组合,将3份抗除草剂衍生恢复系(华84EP-1、2、3)与5份不育系(红香2A、Y58S、广占63-4S、华1015S、天源6S)配组,对亲本、杂交组合的除草剂抗性和10个主要农艺性状(单株产量、结实率、千粒... 为了培育既抗除草剂、综合性状又优良的杂交水稻组合,将3份抗除草剂衍生恢复系(华84EP-1、2、3)与5份不育系(红香2A、Y58S、广占63-4S、华1015S、天源6S)配组,对亲本、杂交组合的除草剂抗性和10个主要农艺性状(单株产量、结实率、千粒重、生育期、株高、有效穗数、着力密度、穗总粒数、穗实粒数、穗长)的配合力效应进行了分析。结果表明,所选育的恢复系的除草剂抗性接近完全(>96%),利用苗期喷施农达可有效地提高杂交品种纯度;恢复系、不育系的一般配合力分别在5个性状(结实率、生育期等)、7个性状(结实率、千粒重等)上达到了显著差异;杂交组合的特殊配合力仅在生育期上达到了显著差异。杂交组合中比对照增产最高的分别是天源6S/华84EP-1、红香2A/华84EP-3和华1015S/华84EP-1。因此,利用抗除草剂恢复系配制水稻杂交组合不仅可以提高品种纯度,也可以培育出强优势组合。 展开更多
关键词 抗除草剂 水稻 epspS 配合力 杂种优势
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基于RPA技术对转CP4-EPSPS基因产品的快速检测 被引量:1
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作者 胡秀文 邓波 +6 位作者 王金斌 刘华 唐雪明 王宇 曾海娟 蒋玮 李红 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期227-233,共7页
核酸检测在农产品安全检测中的应用十分广泛,随着转基因作物的商业化种植,迫切需要一种快速、特异、灵敏的转基因作物检测方法。利用重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)技术对含有转基因产品及其制品中CP4-EP... 核酸检测在农产品安全检测中的应用十分广泛,随着转基因作物的商业化种植,迫切需要一种快速、特异、灵敏的转基因作物检测方法。利用重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)技术对含有转基因产品及其制品中CP4-EPSPS基因进行检测,共设计5对引物来筛取最佳引物,并对反应体系和反应温度进行优化。结果表明,该方法采用20μL体系在37℃恒温反应15 min即可对CP4-EPSPS基因进行快速检测。该方法检测转基因的灵敏度阈值为45拷贝,灵敏度高、特异性强,为大规模筛查CP4-EPSPS基因提供了一种新的途径。 展开更多
关键词 重组聚合酶扩增 CP4-epspS 转基因作物 核酸检测
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基于农杆菌介导法将CP4-EPSPS基因转入玉米自交系B73的研究
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作者 韩平安 常悦 +6 位作者 唐宽刚 李晓东 王力伟 梁亚晖 杨静 石海波 吴新荣 《北方农业学报》 2023年第1期31-37,共7页
【目的】建立玉米遗传转化体系培育抗除草剂玉米材料,解决玉米杂草危害问题。【方法】采用农杆菌介导法在玉米自交系B73幼胚中转入抗除草剂基因(CP4-EPSPS),通过PCR、qRT-PCR鉴定转基因植株;利用ddPCR技术筛选低拷贝转基因植株,并对低... 【目的】建立玉米遗传转化体系培育抗除草剂玉米材料,解决玉米杂草危害问题。【方法】采用农杆菌介导法在玉米自交系B73幼胚中转入抗除草剂基因(CP4-EPSPS),通过PCR、qRT-PCR鉴定转基因植株;利用ddPCR技术筛选低拷贝转基因植株,并对低拷贝植株进行草铵膦抗性鉴定。【结果】在所获得的181株抗性植株中12株为阳性,转基因植株的外源抗除草剂基因(CP4-EPSPS)在转录水平上均能正常表达;转基因植株中筛选到低拷贝植株5株;抗性鉴定证明转基因植株均具有草铵膦抗性。收获T1代转基因低拷贝植株种子5份。【结论】建立了以B73为受体,基于农杆菌法介导的玉米遗传转化体系。 展开更多
关键词 玉米 农杆菌介导法 抗草甘膦基因(CP4-epspS) 遗传转化
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进口转基因抗草甘膦油菜籽和大豆中CP4-EPSPS基因的检测比较研究 被引量:35
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作者 潘良文 陈家华 +3 位作者 沈禹飞 胡永强 陶军 韩伟 《生物技术通讯》 CAS 2001年第3期175-177,207,共4页
由于国际上对转基因产品的安全性存在较大争议 ,因此对没有加施标签予以声明的情况下大量进入中国市场的转基因产品进行检测就显得十分迫切且意义重大。本研究以进口转基因抗草甘膦油菜籽和大豆为材料 ,通过比较分析外源的CP4 EPSPS基... 由于国际上对转基因产品的安全性存在较大争议 ,因此对没有加施标签予以声明的情况下大量进入中国市场的转基因产品进行检测就显得十分迫切且意义重大。本研究以进口转基因抗草甘膦油菜籽和大豆为材料 ,通过比较分析外源的CP4 EPSPS基因的核苷酸序列和表达的氨基酸序列 ,设计出两对不同的引物 ,采用PCR方法分别对转基因油菜籽和大豆中外源的CP4 展开更多
关键词 抗草甘膦油菜籽 抗草甘膦大豆 CP4-epspS PCR CP4-epspS基因 检测 转基因作物
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油莎豆5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶基因CeEPSPS的克隆与分析 被引量:5
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作者 邹智 肖艳华 +1 位作者 张丽 赵永国 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2023年第1期26-34,共9页
起源于非洲和地中海沿岸的油莎豆以适应性广、产油量高而成为我国的新型油料作物。为促进该物种的开发与利用,研究基于基因组和转录组数据对油莎豆及代表性单子叶植物的EPSPS基因进行系统鉴定。结果表明:与大多数植物类似,油莎豆仅含有1... 起源于非洲和地中海沿岸的油莎豆以适应性广、产油量高而成为我国的新型油料作物。为促进该物种的开发与利用,研究基于基因组和转录组数据对油莎豆及代表性单子叶植物的EPSPS基因进行系统鉴定。结果表明:与大多数植物类似,油莎豆仅含有1个EPSPS基因,其包含7个内含子,命名为CeEPSPS;RT-PCR分离到的CeEPSPS编码区序列为1584 bp,预测编码514个氨基酸,其N端的前70个残基为叶绿体信号肽,77~508位残基为高度保守的EPSP合酶结构域(PF00275);与EPSP合酶结构域相比,信号肽在不同植物中变异较大;CeEPSPS成熟蛋白的理论分子量为47.32 kDa,等电点为5.49,总平均疏水指数为0.069,脂肪族指数为93.76,不稳定系数为31.73,与其他物种相近,均属于稳定的疏水型酸性蛋白;进化分析支持油莎豆划归为禾本目莎草科。序列比对和基因组测序分析结果显示,56份油莎豆种质不存在已报道的草甘膦抗性变异。qRT-PCR分析结果显示,CeEPSPS主要在成熟叶片和块茎中表达,其表达水平显著高于芽、幼嫩叶片、衰老叶片和芽茎。此外,本研究还构建了CeEPSPS的植物过表达载体,这为下一步的草甘膦抗性育种奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 油莎豆 莎草科 油料作物 5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶 草甘膦
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杂草环境下转EPSPS基因大豆NZL06-698的生态适应性研究 被引量:4
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作者 黄鹞 郭汝清 刘标 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期866-871,共6页
为研究转EPSPS基因大豆NZL06-698在杂草环境中的生态适应性,试验设置杂草处理模拟野外环境,研究转基因大豆NZL06-698(GT698)的生存竞争能力以及外源EPSPS蛋白表达情况。结果表明:在相同处理下转基因大豆GT698的株高(R8期)、百粒重显著... 为研究转EPSPS基因大豆NZL06-698在杂草环境中的生态适应性,试验设置杂草处理模拟野外环境,研究转基因大豆NZL06-698(GT698)的生存竞争能力以及外源EPSPS蛋白表达情况。结果表明:在相同处理下转基因大豆GT698的株高(R8期)、百粒重显著高于亲本大豆蒙豆12(MD12),但单株产量、单株籽粒数、结实率显著低于亲本大豆,说明外源基因的存在并未增强转基因大豆的生存竞争力,且转基因大豆在野外的生存竞争能力与亲本大豆相比较弱。试验注意到,杂草环境对转EPSPS基因大豆的生长有明显的限制作用,杂草处理下转基因大豆的单株产量、单株籽粒数、百粒重、结实率等指标均显著低于对照处理。ELISA检测结果表明,转基因大豆叶片及籽粒中外源EPSPS蛋白在杂草处理及对照中均正常表达,且两种处理下的EPSPS蛋白表达量无显著差异。以上结果表明杂草环境中转基因大豆的EPSPS蛋白正常表达,正常提供抗草甘膦性状,但是外源基因的存在并没有增加转基因大豆的生存竞争能力,且转基因大豆的生长受到杂草环境的显著抑制,由此得出结论:与亲本大豆相比,转EPSPS基因大豆NZL06-698在野外环境中生态适应能力较弱。 展开更多
关键词 epspS基因大豆 生存竞争能力 epspS蛋白
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抗除草剂草甘膦EPSPs基因在小麦中的转化 被引量:34
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作者 陈梁鸿 王新望 +3 位作者 张文俊 张晓东 胡道芬 刘广田 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1999年第3期239-243,共5页
通过基因枪法,用抗除草剂车甘膦的EPSPs基因转化小麦京花1号的幼穗约1000个,及幼胚约800个,经草甘膦选择后分别获得38株和4株再生植株。这些再生植株经PCR和(或)Southern杂交证明,其中有部分再生植株的基因组中稳定整合了外源EPSP... 通过基因枪法,用抗除草剂车甘膦的EPSPs基因转化小麦京花1号的幼穗约1000个,及幼胚约800个,经草甘膦选择后分别获得38株和4株再生植株。这些再生植株经PCR和(或)Southern杂交证明,其中有部分再生植株的基因组中稳定整合了外源EPSPs基因,并且转化体中部分是可育的。首次用实验证明,抗除草剂草甘膦的EPSPs基因作为单子叶禾谷类作物小麦基因转化的选择标记是行之有效的。 展开更多
关键词 小麦 epsps基因 基因枪转化
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外源抗草甘膦EPSPs基因在大豆基因组中的整合与定位 被引量:13
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作者 王晓波 蒋凌雪 +7 位作者 魏利 刘林 陆伟 李文欣 王俊 陶波 常汝镇 邱丽娟 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期365-375,共11页
通过基因特异引物扩增和免疫层析试纸法分别对转基因大豆中外源EPSPs基因和其编码的蛋白进行检测,结果表明,EPSPs基因不仅已整合到大豆基因组中,而且EPSPs蛋白可以正常表达。利用染色体步移法获得了转基因大豆插入位点的侧翼序列,序列... 通过基因特异引物扩增和免疫层析试纸法分别对转基因大豆中外源EPSPs基因和其编码的蛋白进行检测,结果表明,EPSPs基因不仅已整合到大豆基因组中,而且EPSPs蛋白可以正常表达。利用染色体步移法获得了转基因大豆插入位点的侧翼序列,序列比对表明35S上游的大豆DNA序列起始于Gm02:7912740,NOS下游的大豆DNA序列起始于Gm02:7777705。在本研究检测序列范围内发现插入位点两侧不同位置有3个不同的未知片段、2个大豆基因组序列倒位,同时发现2个大豆基因组片段丢失。外源基因不是以点插入方式整合,而是导致大豆基因组约135kb片段的移位;NOS下游大豆基因组序列发生重排,导致一个编码HEC1和HEATrepeat两个功能域的基因(Glyma02g09790)结构受到影响,首次发现该基因在ABA和PEG处理时下调表达,推测该基因通过ABA信号通路参与胁迫应答。本研究通过对抗除草剂EPSPs基因在大豆基因组中的插入位点分析,明确了外源EPSPs基因在大豆基因组中的整合、定位及其侧翼序列,为转基因大豆安全评价提供了依据。 展开更多
关键词 转基因大豆 插入位点 基因组 epspS 抗草甘膦 定位 侧翼序列
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农杆菌介导法向玉米茎尖导入抗草甘膦EPSPS基因的研究 被引量:14
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作者 孙传波 李海华 +6 位作者 郭嘉 陶蕊 曲文利 孟凡梅 张举仁 刘文国 袁英 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期91-93,共3页
以玉米自交系郑58的茎尖为受体,通过农杆菌介导法将抗草甘膦EPSPS基因转入玉米中,研究以茎尖为受体的农杆菌转化体系的可行性。98株转化苗,经过300 ppm的除草剂(农达)筛选,共获得13株转基因植株,经PCR检测,其中7株表现阳性,转化率达7.14... 以玉米自交系郑58的茎尖为受体,通过农杆菌介导法将抗草甘膦EPSPS基因转入玉米中,研究以茎尖为受体的农杆菌转化体系的可行性。98株转化苗,经过300 ppm的除草剂(农达)筛选,共获得13株转基因植株,经PCR检测,其中7株表现阳性,转化率达7.14%。初步证明外源基因已经整合到玉米基因组中,以玉米茎尖作为受体的转化系统用于基因转化是可行、高效的。 展开更多
关键词 玉米 茎尖 农杆菌介导 epspS基因
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银杏EPSPS基因克隆及表达分析 被引量:10
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作者 程华 李琳玲 +2 位作者 王燕 姜德志 程水源 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期2365-2372,共8页
利用RACE技术,克隆到银杏EPSPS合酶基因(GbEPSPS)的cDNA序列并对其进行生物信息学分析。结果表明:银杏GbEPSPScDNA长1 403 bp(GenBank登录号GU084139),其包含一个1 035 bp的ORF框,编码344个氨基酸;预测该基因编码蛋白质分子量为36.87 kD... 利用RACE技术,克隆到银杏EPSPS合酶基因(GbEPSPS)的cDNA序列并对其进行生物信息学分析。结果表明:银杏GbEPSPScDNA长1 403 bp(GenBank登录号GU084139),其包含一个1 035 bp的ORF框,编码344个氨基酸;预测该基因编码蛋白质分子量为36.87 kD,其等电点为5.75。系统进化树分析表明,银杏EPSPS蛋白质序列与其他物种的EPSPS同源性较高。半定量RT-PCR分析结果显示,EPSPS基因在银杏的叶和果实中表达量最高,其次为茎,根中表达水平最低。草甘膦处理能显著诱导银杏EPSPS基因表达量升高;紫外光对银杏EPSPS基因的表达具有诱导作用;ABA诱导GbEPSPS表达量先升后降;GbEPSPS转录水平受到42℃高温显著诱导。 展开更多
关键词 银杏 epsp合酶 基因克隆 RACE技术
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Error-prone PCR获得EPSP酶突变基因提高水稻的草甘膦抗性 被引量:10
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作者 苏军 陈建民 +2 位作者 田大刚 朱祯 王锋 《分子植物育种》 CAS CSCD 2008年第5期830-836,共7页
将通过Error-prone PCR方法获得的表达水稻EPSP酶突变基因epsp102和未经修饰的水稻epsp基因分别导入籼稻恢复系明恢86,获得转化克隆84个和109个。对T1、T2代转基因水稻三叶期和分蘖期喷施草甘膦,各选出4个对草甘膦高抗性的T3代材料,进... 将通过Error-prone PCR方法获得的表达水稻EPSP酶突变基因epsp102和未经修饰的水稻epsp基因分别导入籼稻恢复系明恢86,获得转化克隆84个和109个。对T1、T2代转基因水稻三叶期和分蘖期喷施草甘膦,各选出4个对草甘膦高抗性的T3代材料,进行分子鉴定。对其中的3个株系进行农艺性状考察,并各选1个株系作为父本与其他优良恢复系进行杂交,进一步考察epsp和epsp102基因在不同遗传背景下的抗性和农艺性状表现。Southern结果显示:epsp的整合拷贝数为2~3拷贝,epsp102拷贝数为1~2拷贝。萌发种子、三叶期及分蘖期对草甘膦抗性检测显示:转基因萌发种子对草甘膦的抗性提高15倍;三叶期对草甘膦的抗性提高3~4倍。分蘖期剂量效应检测结果显示:非转基因对照在施0.1倍以上的致死剂量农达时,植株显著失水,而转基因株系水分生理正常。两地两季的农艺性状考察显示:与对照相比转基因株系的穗数明显增多,转基因株系ep-3和ep102-20结实率和单株重与对照没有显著差异;以ep-3和ep102-20作父本,与4个恢复系杂交的F2代对草甘膦的抗性没有降低,两个组合的结实率显著增加,SK/ep-3组合结实率显著下降,其余组合的结实率与对照持平。 展开更多
关键词 水稻 ERROR-PRONE PCR epsp酶突变基因 草甘膦
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抗除草剂bar基因与EPSPS基因在转基因甘蔗中的应用研究 被引量:7
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作者 王文治 杨本鹏 +6 位作者 蔡文伟 熊国如 冯翠莲 王俊刚 武媛丽 沈林波 张树珍 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期73-78,共6页
通过农杆菌介导法,分别将bar基因和EPSPS基因导入到甘蔗中,分别获得了抗草铵膦和草甘膦两种除草剂的转基因甘蔗。通过直接喷洒田间施用浓度的草铵膦和草甘膦除草剂,证明了转基因甘蔗T0、T1代、宿根1代和宿根2代外源基因遗传稳定,且均具... 通过农杆菌介导法,分别将bar基因和EPSPS基因导入到甘蔗中,分别获得了抗草铵膦和草甘膦两种除草剂的转基因甘蔗。通过直接喷洒田间施用浓度的草铵膦和草甘膦除草剂,证明了转基因甘蔗T0、T1代、宿根1代和宿根2代外源基因遗传稳定,且均具有稳定的耐除草剂的功能。因此转耐除草剂基因的甘蔗,可以与转耐除草剂基因的玉米、大豆、油菜和棉花一样,有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 转基因甘蔗 耐除草剂 BAR基因 epspS基因 草铵膦 草甘膦
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陆地棉EPSPS基因的克隆及其组织特异性表达分析 被引量:20
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作者 童旭宏 吴玉香 祝水金 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2009年第4期259-264,共6页
5-烯醇式丙酮莽草酸-3-磷酸合成酶(EPSPS)是莽草酸途径中的一个重要酶,它是非选择性除草剂草甘膦的靶标酶,在高等植物中定位于叶绿体质膜上。根据EST拼接的序列设计引物,从陆地棉品种珂字棉312中获得了全长为1834 bp的cDNA序列,其最大... 5-烯醇式丙酮莽草酸-3-磷酸合成酶(EPSPS)是莽草酸途径中的一个重要酶,它是非选择性除草剂草甘膦的靶标酶,在高等植物中定位于叶绿体质膜上。根据EST拼接的序列设计引物,从陆地棉品种珂字棉312中获得了全长为1834 bp的cDNA序列,其最大可读框为1565bp,编码521个氨基酸。陆地棉EPSPS基因与其它植物中同类酶在氨基酸水平上有广泛的同源性。通过与已知的其它高等植物叶绿体转运肽剪切位点比对,推断棉花EPSPS基因含有74个氨基酸叶绿体运输肽和447个氨基酸组成的熟蛋白。该酶具有保守的PEP结合位点及催化位点的特征序列。半定量分析表明,该基因产物广泛存在于棉花根、茎和叶等各组织中,在叶片中表达量较高。进一步扩增棉花核基因组获得了3344 bp的DNA序列,它包含8个内含子和7个外显子。棉花EPSPS基因的克隆为抗草甘膦棉花种质资源的创制提供了理论基础。 展开更多
关键词 陆地棉 epspS 草甘膦 表达序列标签
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转EPSPS基因抗草甘膦棉花的遗传分析 被引量:7
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作者 燕树锋 祝水金 +2 位作者 刘海芳 卢彩霞 铁双贵 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2015年第3期54-57,共4页
为分析转基因抗草甘膦棉花早代遗传情况,以花粉管通道法获得的26个转5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶基因(EPSPS)抗草甘膦棉花转化事件为材料,以其背景亲本中棉所49为对照,喷施草甘膦后对转基因棉T1、T2分离比例进行考察。T1田间抗性... 为分析转基因抗草甘膦棉花早代遗传情况,以花粉管通道法获得的26个转5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶基因(EPSPS)抗草甘膦棉花转化事件为材料,以其背景亲本中棉所49为对照,喷施草甘膦后对转基因棉T1、T2分离比例进行考察。T1田间抗性鉴定结果表明,经卡方检测20个转化事件T1分离符合3∶1的分离规律,即外源基因插入1个位点;6个转化事件不符合1对基因的分离规律,出现了偏分离。T2田间抗性鉴定结果表明,通过花粉通管法共获得152个纯合株系,分别来源于25个转化事件;对T2不纯合株系继续进行分离比例的考察,发现来源于15个转化事件的57个株系符合3∶1的分离规律;此外卡方检测结果表明,每个转化事件都有不符合3∶1分离规律的株系,且其中10个转化事件没有符合3∶1分离规律的株系。表明通过花粉管通道法获得的转基因植株中外源基因的整合和遗传均较复杂。 展开更多
关键词 棉花 草甘膦 epspS基因 遗传分析
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EPSP合成酶的特性及新抑制剂的研究进展 被引量:8
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作者 向文胜 张文吉 +1 位作者 王相晶 覃兆海 《农药学学报》 CAS CSCD 2000年第2期1-8,共8页
概述了 EPSP合成酶的生理作用。高等植物前体 EPSP合成酶进入叶绿体后 ,经剪切而成成熟 EPSP合成酶并定位于叶绿体内质膜上 ;EPSP合成酶的三维结构上存在三个活性区域 ,改变活性区域的氨基酸残基可对草甘膦产生抗性 ,同时表明了酶与草... 概述了 EPSP合成酶的生理作用。高等植物前体 EPSP合成酶进入叶绿体后 ,经剪切而成成熟 EPSP合成酶并定位于叶绿体内质膜上 ;EPSP合成酶的三维结构上存在三个活性区域 ,改变活性区域的氨基酸残基可对草甘膦产生抗性 ,同时表明了酶与草甘膦的结合位点 ;不同生物的 EPSP合成酶有高的同源性。 EPSP合成酶催化底物反应机理为 :PEP首先与酶形成过渡态 ,而后和 S3P形成缩酮四面体 ,最后生成 EPSP。草甘膦与 EPSP合成酶、EPSP形成三元复合物而阻断了 EPSP合成酶的催化作用 ;以 EPSP和 S3P· glyphosate为分子模型 ,设计合成的化合物对 EPSP合成酶的活性有抑制作用。 展开更多
关键词 epsp合成酶 抑制剂 5-烯醇式丙酮酸莽草酸-3-磷酸合成酶 生理作用 草甘磷 催化机理 除草剂 特性
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薤白EPSP合成酶基因转化烟草提高其草甘膦抗性 被引量:5
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作者 黄丽华 蒋向 +2 位作者 李博 李育强 张学文 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期855-860,共6页
葱属植物薤白具有较强的草甘膦抗性。将薤白中与草甘膦抗性相关的EPSP合成酶基因(EPSPsA)cDNA重组到植物表达载体pWM101中,构建薤白植物表达EPSPsA重组载体,采用根癌农杆菌介导法将其转入烟草品种WS38,获得转薤白EPSPsA基因烟草。PCR分... 葱属植物薤白具有较强的草甘膦抗性。将薤白中与草甘膦抗性相关的EPSP合成酶基因(EPSPsA)cDNA重组到植物表达载体pWM101中,构建薤白植物表达EPSPsA重组载体,采用根癌农杆菌介导法将其转入烟草品种WS38,获得转薤白EPSPsA基因烟草。PCR分析表明,目的基因已经整合进烟草基因组中。对转基因烟草愈伤组织及幼苗进行的草甘膦抗性检测表明,转基因烟草对草甘膦的耐受性明显提高。 展开更多
关键词 薤白 epsp合成酶基因 烟草转化 草甘膦抗性
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棉花品系Y18在草甘膦胁迫下的epsps基因表达分析研究 被引量:8
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作者 刘东军 张锐 +4 位作者 郭三堆 孟志刚 孙国清 王成社 张宏纪 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期55-59,共5页
5-烯醇丙酮酰-莽草酸-3-磷酸合成酶(5-enolpyruvyl-shikimate-3-phosphate synthase,EPSPS)是植物或微生物体内合成芳香族氨基酸所必需的一个关键酶,但其受广谱性除草剂草甘膦的强烈抑制。通过对草甘膦胁迫下的棉花品系Y18进行研究发现... 5-烯醇丙酮酰-莽草酸-3-磷酸合成酶(5-enolpyruvyl-shikimate-3-phosphate synthase,EPSPS)是植物或微生物体内合成芳香族氨基酸所必需的一个关键酶,但其受广谱性除草剂草甘膦的强烈抑制。通过对草甘膦胁迫下的棉花品系Y18进行研究发现:棉花品系Y18具有两个不同的5-烯醇丙酮酰-莽草酸-3-磷酸合成酶基因epsps1和epsps2,并且两个基因的编码区与其他植物的epsps基因具有较高的同源性,在草甘膦胁迫作用下,棉花的epsps1基因中表达较为稳定,epsps2基因表达量却提高了1.85~2.3倍,初步认为epsps基因的表达量提高是生物在受到胁迫作用时的一种应激反应。 展开更多
关键词 epspS 草甘膦 应激反应机理
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