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含额外拷贝ERG3B基因烟曲霉的表型分析 被引量：2
1
作者 乔建军 刘伟 +1 位作者 李若瑜 万喆 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2008年第1期19-22,共4页
目的克隆烟曲霉ERG3B基因,并构建烟曲霉ERG3B基因额外拷贝株,了解该基因对烟曲霉表型的影响。方法通过同源性比对,在烟曲霉基因组找出烟曲霉可能的ERG3基因的开放读码框(ORF),PCR扩增ERG3B基因ORF连同其上下游各约1kb的DNA片段,将该片... 目的克隆烟曲霉ERG3B基因,并构建烟曲霉ERG3B基因额外拷贝株,了解该基因对烟曲霉表型的影响。方法通过同源性比对,在烟曲霉基因组找出烟曲霉可能的ERG3基因的开放读码框(ORF),PCR扩增ERG3B基因ORF连同其上下游各约1kb的DNA片段,将该片段重组到穿梭质粒pRG-AMA1-NotI。用重组后的质粒转化嘧啶营养缺陷株烟曲霉AF293.1。观察转化子的生长速度并测定转化子对抗真菌药物敏感性。结果①烟曲霉ERG3基因有3个拷贝(ERG3A,ERG3B,ERG3C)。Erg3Ap和Erg3Bp与其他真菌的Erg3同源性高。②烟曲霉ERG3B基因被重组到了pRG-AMA1-NotI,产生质粒pERG3B。用pERG3B和空载体pRG-AMA1-NotI转化AF293.1后,分别得到转化子AF-pERG3B和AF-empty。AF-pERG3B与AF-empty的生长速度无差异;两者对伊曲康唑、伏立康唑、特比萘芬、两性霉素B、卡泊芬净、灰黄霉素的敏感性也无差异。结论额外拷贝的ERG3B基因不影响烟曲霉的生长速度及对伊曲康唑、伏立康唑、特比萘芬、两性霉素B、卡泊芬净、灰黄霉素的敏感性。 展开更多
关键词 烟曲霉 erg3B基因 额外拷贝 抗真菌药物敏感性 菌丝生长
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白念珠菌ERG3基因敲除及其对耐药性的影响 被引量：2
2
作者 王钰婷 刘锦燕 +2 位作者 史册 赵珺涛 项明洁 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期163-170,共8页
目的·构建白念珠菌ERG3基因敲除株,分析ERG3敲除对白念珠菌唑类药物耐药性的影响及其常见耐药基因的表达。方法·使用融合PCR和同源重组技术,以白念珠菌SN152菌株基因组DNA、带有筛选标记的质粒DNA为模板构建敲除组件。采用醋... 目的·构建白念珠菌ERG3基因敲除株,分析ERG3敲除对白念珠菌唑类药物耐药性的影响及其常见耐药基因的表达。方法·使用融合PCR和同源重组技术,以白念珠菌SN152菌株基因组DNA、带有筛选标记的质粒DNA为模板构建敲除组件。采用醋酸锂转染法将敲除组件转染入SN152中,从而获得ERG3^+/-和ERG3^-/-菌株。采用微量肉汤稀释法来判断SN152、ERG3^+/-和ERG3^-/-菌株对唑类药物的耐药性差异,同时使用实时荧光定量PCR检测菌株中的常见耐药基因。结果·获得白念珠菌ERG3敲除株。ERG3^-/-菌株对唑类药物的耐药性明显高于ERG3^+/-和SN152菌株。ERG3^-/-菌株的常见耐药基因(CDR1、CDR2、MDR1、ERG11)表达显著上升(均P<0.05)。结论·成功构建白念珠菌ERG3敲除株。ERG3基因的敲除提高了白念珠菌唑类药物的耐药性,且该基因表达下调的同时伴随其他耐药基因的表达上调。 展开更多
关键词 白念珠菌 erg3基因 基因敲除 耐药性
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香茅醛对指状青霉孢子麦角固醇合成的影响 被引量：1
3
作者 陶能国 蒙奎贤 +1 位作者 于浩淼 欧阳秋丽 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第12期108-114,共7页
探讨了香茅醛对指状青霉抑霉唑敏感(Pds01)和抗性(Pdw03)菌株孢子萌发过程中麦角固醇合成的影响。结果表明:不同含量香茅醛能显著抑制Pds01和Pdw03孢子萌发,半抑制浓度分别为0.8μL/mL和3.2μL/mL。经半抑制浓度香茅醛处理不同时间后,Pd... 探讨了香茅醛对指状青霉抑霉唑敏感(Pds01)和抗性(Pdw03)菌株孢子萌发过程中麦角固醇合成的影响。结果表明:不同含量香茅醛能显著抑制Pds01和Pdw03孢子萌发,半抑制浓度分别为0.8μL/mL和3.2μL/mL。经半抑制浓度香茅醛处理不同时间后,Pds01和Pdw03孢子麦角固醇含量显著降低,羊毛固醇含量显著升高;麦角固醇合成关键基因表达受到显著影响,Pds01的ERG9基因上调表达峰值早于Pdw03,两者ERG3基因的表达量皆显著下调。本研究表明香茅醛通过抑制ERG3的表达降低Pds01和Pdw03孢子麦角固醇合成,进而影响孢子萌发,可为柑橘采后病害绿色防腐保鲜剂的开发提供理论依据。 展开更多
关键词 指状青霉 香茅醛 孢子萌发 erg3基因 麦角固醇
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无菌部位侵袭性念珠菌感染的临床特征、药物敏感性及风险因素分析 被引量：2
4
作者 夏金星 鲁凡博 +1 位作者 黄玮 徐元宏 《实用临床医药杂志》 CAS 2022年第7期1-7,共7页
目的探讨住院患者无菌部位侵袭性念珠菌感染的菌株分布、临床特征、药物敏感性及风险因素。方法跟踪收集116例住院患者无菌部位样本,通过真菌培养、分离与MALDI-TOF MS全自动生物质谱鉴定系统共获80株念珠菌;采用真菌药敏试验检验抗菌... 目的探讨住院患者无菌部位侵袭性念珠菌感染的菌株分布、临床特征、药物敏感性及风险因素。方法跟踪收集116例住院患者无菌部位样本,通过真菌培养、分离与MALDI-TOF MS全自动生物质谱鉴定系统共获80株念珠菌;采用真菌药敏试验检验抗菌药物敏感性,结合患者临床资料分析念珠菌菌株分布、临床特征及药敏特点;对唑类耐药热带念珠菌进行ERG3和ERG11基因测序,以探讨其唑类耐药可能分子机制。结果白色念珠菌是侵袭性念珠菌感染最常见致病菌(45.00%),其次为光滑念珠菌(32.50%)和热带念珠菌(13.75%)。分离标本以尿液(50.00%)为主,分泌物(22.75%)和血液(5.00%)次之。患者年龄、住院时间、相关侵袭性操作及癌症与侵袭性念珠菌感染显著相关(P<0.05)。两性霉素B和5-氟胞嘧啶对念珠菌均有良好的体外抑菌活性。唑类药物对大多数念珠菌体外敏感性较好;而热带念珠菌对唑类药物敏感性普遍较低(54.50%~81.80%),且唑类耐药性热带念珠菌ERG11基因测序显示皆存在2处错义突变(A395T和C461T)。结论白色念珠菌为住院患者侵袭性念珠菌感染主要致病菌;患者特征性自身因素和临床有创性干预应考虑作为侵袭性念珠菌无菌部位感染主要危险因子;临床常用抗真菌药物对非热带念珠菌呈现良好体外抑菌活性,而热带念珠菌ERG11基因突变蛋白产物(Y132F和S154F)或与其唑类耐药相关。 展开更多
关键词 侵袭性念珠菌 菌种分布 药物敏感性 热带念珠菌 ERG11基因 erg3基因 风险因素
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ERG11和ERG3基因突变与念珠菌对氟康唑耐药的关系 被引量：7
5
作者 王小红 刘鹏 曹先伟 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期387-390,共4页
目的探讨热带念珠菌、白念珠菌的ERG3、ERG11基因突变与其对唑类抗真菌药物耐药的关系,以初步探讨热带念珠菌对唑类药物耐药的机制。方法收集本院2015年3月-2016年10月期间临床分离的念珠菌52株,经体外药敏试验得到耐氟康唑的热带念珠菌... 目的探讨热带念珠菌、白念珠菌的ERG3、ERG11基因突变与其对唑类抗真菌药物耐药的关系,以初步探讨热带念珠菌对唑类药物耐药的机制。方法收集本院2015年3月-2016年10月期间临床分离的念珠菌52株,经体外药敏试验得到耐氟康唑的热带念珠菌6株、白色念珠菌1株;提取基因组DNA,通过PCR分别扩增6株热带念珠菌与1株白色念珠菌ERG11、ERG3基因,将扩增后的产物分别进行双向测序;将测序结果与热带假丝酵母菌标准菌株、白色念珠菌标准株的序列通过BLAST比对分析,找出突变基因。结果 6株热带念珠菌ERG11基因序列共发现3个同义突变与2个错义突变,ERG3基因共发现4个同义突变,6个错义突变;1株白色念珠菌耐药株ERG11基因共发现2个同义突变与2个错义突变,ERG3基因共发现2个同义突变,未发现错义突变。结论耐药菌株ERG11或ERG3存在不同程度的突变,这些突变可能参与热带念珠菌、白念珠菌耐药性的形成。 展开更多
关键词 白念珠菌 热带念珠菌 erg3基因 ERG11基因
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