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Identify lymphatic metastasis-associated genes in mouse hepatocarcinoma cell lines using gene chip 被引量:19
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作者 BoSong Jian-WuTang +10 位作者 BoWang Xiao-NanCui LiHou LuSun Li-MinMao Chun-HuiZhou YueDu Li-HuiWang Hua-XinWang Ren-ShuZheng LeiSun 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2005年第10期1463-1472,共10页
AIM: In order to obtain lymphogenous metastasisassociated genes, we compared the transcriptional profiles of mouse hepatocarcinoma cell lines Hca-F with highly lymphatic metastasis potential and Hca-P with low lymphat... AIM: In order to obtain lymphogenous metastasisassociated genes, we compared the transcriptional profiles of mouse hepatocarcinoma cell lines Hca-F with highly lymphatic metastasis potential and Hca-P with low lymphatic metastasis potential.METHODS: Total RNA was isolated from Hca-F and Hca-P cells and synthesized into double-stranded cDNA. In vitro transcription double-stranded cDNA was labeled with biotin (i.e. biotin-labeled cRNA, used as the probe). The cRNA probes hybridized with Affymetrix GeneChip() MOE430A (containing 22 690 transcripts, including 14 500 known mouse genes and 4 371 ESTs) respectively and the signals were scanned by the GeneArray Scanner. The results were then analyzed by bioinformatics.RESULTS: Out of the 14 500 known genes investigated,110 (0.8%) were up regulated at least 23 fold. Among the total 4 371 ESTs, 17 ESTs (0.4%) (data were not presented) were up regulated at least 23 fold. According to the Gene Ontology and TreeView analysis, the 110genes were further classified into two groups: differential biological process profile and molecular function profile.CONCLUSION: Using high-throughput gene chip method,a large number of genes and their cellular functions about angiogenesis, cell adhesion, signal transduction, cell motility, transport, microtubule-based process, cytoskeleton organization and biogenesis, cell cycle, transcription,chaperone activity, motor activity, protein kinase activity,receptor binding and protein binding might be involved in the process of lymphatic metastasis and deserve to be used as potential candidates for further investigation.Cyclin D1, Fosl1, Hsp47, EGFR and AR, and Cav-1 are selected as the possible candidate genes of the metastatic phenotype, which need to be validated in later experiments.ESTs (data were not presented) might indicate novel genes associated with lymphatic metastasis. Validating the function of these genes is helpful to identify the key or candidate gene/pathway responsible for lymphatic metastasis, which might be used as the diagnostic markers and the therapeutic targets for lymphatic metastasis. 展开更多
关键词 淋巴肿瘤 肿瘤转移 小鼠 基因芯片 细胞序列 肝癌 肿瘤细胞
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F81细胞无血清悬浮驯化后培养猫泛白细胞减少症病毒的研究
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作者 张久鑫 邵宝顺 +6 位作者 朱辉 贾浩苒 梁琳 汤新明 崔尚金 梁瑞英 王龙涛 《动物医学进展》 北大核心 2023年第1期48-53,共6页
为解决国内猫泛白细胞减少症生物制品短缺的问题,筛选出适用于猫泛白细胞减少症病毒增殖的猫肾细胞系(F81),通过对贴壁F81进行降血清悬浮驯化培养,得到了无血清全悬浮培养F81细胞系。研究建立的F81细胞系在初始传代细胞密度为1×10^... 为解决国内猫泛白细胞减少症生物制品短缺的问题,筛选出适用于猫泛白细胞减少症病毒增殖的猫肾细胞系(F81),通过对贴壁F81进行降血清悬浮驯化培养,得到了无血清全悬浮培养F81细胞系。研究建立的F81细胞系在初始传代细胞密度为1×10^(6)cells/mL时,培养48 h后细胞密度可达到7.02×10^(6)cells/mL。对培养猫泛白细胞减少症病毒工艺进行摸索,确定最佳接毒工艺为同步接毒法,初始接毒细胞密度为1×10^(6)cells/mL、MOI为3.5×10^(-2),培养72 h后收毒,病毒滴度可达到10^(7.25)TCID_(50)/0.1 mL。该方法使用同源细胞系且未添加动物血清,为猫泛白细胞减少症生物制品生产降低了下游生产纯化难度,同时降低了生产成本,可显著提高产品核心竞争力。研究结果可为其他猫用生物制品相关研究提供参考。 展开更多
关键词 f81细胞 细胞驯化 无血清悬浮培养 猫泛白细胞减少症病毒
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F1t3 RECEPTOR EXPRESSION ON THE SURFACE OF MALIGNANT HEMATOPOIETIC CELLS AND RESPONSES TO F1t3 LIGAND STIMULATION
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作者 许志祥 徐颖 +3 位作者 朱剑昆 李彩霞 李颖 张学光 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2000年第4期263-267,共5页
Objective: To investigate the F1t3 receptor expression on the surface of malignant hematopoietic cells, the effect of TNF( and dexamethasone (DXM) on its expression and the responses of those cells to recombinant huma... Objective: To investigate the F1t3 receptor expression on the surface of malignant hematopoietic cells, the effect of TNF( and dexamethasone (DXM) on its expression and the responses of those cells to recombinant human F1t3 ligand (rhFL). Methods: Eighteen malignant hematopoietic cell lines were determined for the F1t3 receptor expression by flow cytometric analysis. The effect of rhFL on the proliferation of malignant hematopoietic cells in vitro was measured using MTT assay. Results: The expressions of F1t3 receptor on the surface of Raji, Daudi, HL-60, 8266 and XG-6 cells were detected by flow cytometric analysis. Following incubation with 20 ng/ml TNF( for 24h, the number of F1t3 receptor positive cells decreased in Raji and 8266, increased in HL-60 and XG-6, and no difference in Daudi cells. After incubation with 10-6 mol/L DXM for 24h, the number of F1t3 receptor positive cells decreased in all the 5 F1t3 receptor positive cell lines. rhFL stimulated the proliferation of HL-60 and Raji cells. Conclusion: For most of the malignant hematopoietic cells, there was neither the expression of F1t3 receptor nor the response to rhFL. DXM may be useful to reduce the effect of FL on the proliferation of some F1t3 receptor positive malignant hematopoietic cells in vitro and in vivo. 展开更多
关键词 F1t3 receptor RECOMBINANT human F1t3 LIGAND (rhFL) MALIGNANT HEMATOPOIETIC cell lines Proliferation DEXAMETHASONE (DXM)
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动物细胞系的染色体组型与遗传变异率分析 被引量:10
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作者 张德礼 李六金 +21 位作者 夏耕田 何旭玉 高步先 白晓鸿 黄高升 刘尚高 阎隆飞 方福德 胡春雷 王黎军 姜焕宏 冯阿曼 张广民 安社刚 任远强 郭建民 胡淑贤 樊军喜 牛永利 宋占军 李迎 樊胜军 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第4期327-344,T001,T002,共20页
在建立国内首家犬、猫、猴、鼠传代细胞库,即7种动物肾细胞系(F-81、CRFK、MDCK、Vero、Vero-2、MA-104、BHK-21)的种子库和工作库的基础上,通过细胞染色体组型、G带核型、染色体数目变异率、... 在建立国内首家犬、猫、猴、鼠传代细胞库,即7种动物肾细胞系(F-81、CRFK、MDCK、Vero、Vero-2、MA-104、BHK-21)的种子库和工作库的基础上,通过细胞染色体组型、G带核型、染色体数目变异率、结构畸变率分析,了解7种细胞系传代培养不同代次的染色体变异情况。以相应的细胞株皮下接种裸鼠形成肿瘤实验、软琼脂细胞克隆形成率与植物凝集素作用下细胞凝集实验为对照,筛选出无致癌/致瘤性、符合细胞遗传学要求、无传染因子污染的细胞系(F-81、CRFK、Vero、Vero-2)或极低致癌性的MDCK细胞系用于制苗,发现肿瘤细胞系高变异率株可在裸鼠体内快速选育成功。细胞系染色体遗传特征决定致瘤性质并具有种属特异性,得到一些100%成瘤和100%不成瘤的细胞株并探讨了与染色体组型的关系。对于肿瘤的发病机理及实验治疗,都是非常好的模型。一些细胞系不仅成瘤而且还可转移(致恶性横纹肌样瘤的BHK-21和Vero细胞株),其他致瘤细胞株只成瘤不转移或不明显转移。 展开更多
关键词 动物肾细胞系 人类子宫颈癌细胞系 猪肾原代细胞 染色体核型 G带核型 遗传变异率 数目变异 结构畸变
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猫肾F_(81)传代细胞中犬细小病毒原位PCR检测方法 被引量:8
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作者 刘雪燕 黄韧 +1 位作者 刘忠华 程树军 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2001年第3期146-149,共4页
目的 建立在猫肾F81 细胞中犬细小病毒原位PCR的检测方法。方法 在猫肾F81 细胞上感染犬细小病毒 ,设计特异性引物 ,用直接原位PCR法在染毒 12h ,2 4h ,48h细胞片上检测出犬细小病毒 ,并与常规免疫组化的方法进行了比较。结果 在染毒... 目的 建立在猫肾F81 细胞中犬细小病毒原位PCR的检测方法。方法 在猫肾F81 细胞上感染犬细小病毒 ,设计特异性引物 ,用直接原位PCR法在染毒 12h ,2 4h ,48h细胞片上检测出犬细小病毒 ,并与常规免疫组化的方法进行了比较。结果 在染毒 48h的细胞片上 ,用阳性记分法将两种检测方法得到的阳性细胞进行统计比较 ,差异极显著 (P <0 .0 0 1) ,用原位PCR法所得出的阳性率高。 展开更多
关键词 原位PCR 阳性细胞 染毒 上感 检测方法 常规免疫 感染 犬细小病毒 特异性引物 传代细胞
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顺铂对肝癌细胞凋亡及其细胞周期的影响 被引量:11
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作者 邹丽娟 董志 陈亚敏 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2002年第4期267-269,271,共4页
目的 :探讨顺铂对Hca F细胞凋亡及细胞周期的影响。方法 :采用荧光 ,透射电镜及流式细胞术分析法检测肝癌细胞凋亡 ,细胞周期和增殖指数 (PI)的变化。结果 :CDDP可引起肿瘤细胞凋亡 ,并随着给药时间的延长、药物浓度的增高 ,细胞凋亡率... 目的 :探讨顺铂对Hca F细胞凋亡及细胞周期的影响。方法 :采用荧光 ,透射电镜及流式细胞术分析法检测肝癌细胞凋亡 ,细胞周期和增殖指数 (PI)的变化。结果 :CDDP可引起肿瘤细胞凋亡 ,并随着给药时间的延长、药物浓度的增高 ,细胞凋亡率随之增高 ,细胞凋亡形态结构越发典型 ,表现为核固缩 ,染色质边集 ,核小体形成等。同时药物浓度的升高 ,细胞周期S期比例下降 ,G0 /G1期比例上升 ,PI增殖指数下降。结论 :CDDP可引起细胞凋亡、细胞周期G0 /G1期阻滞 。 展开更多
关键词 顺铂 肝癌细胞 细胞凋亡 细胞周期 化学疗法 流式细胞术 透射电镜
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温热顺铂对肝癌细胞的杀伤效应及其诱导凋亡的研究 被引量:1
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作者 邹丽娟 陈亚敏 +2 位作者 徐晓颖 李秀荣 董志 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2002年第1期12-14,共3页
目的 探讨温热 CDDP对 Hca-F细胞的生长抑制、温度与药效的关系以及诱导凋亡的作用。方法 采用MTT法,透射电镜,DNA电泳以及流式细胞术分析法。结果CDDP对Hca-F细胞有明显的细胞毒性,其IC50值为0.57... 目的 探讨温热 CDDP对 Hca-F细胞的生长抑制、温度与药效的关系以及诱导凋亡的作用。方法 采用MTT法,透射电镜,DNA电泳以及流式细胞术分析法。结果CDDP对Hca-F细胞有明显的细胞毒性,其IC50值为0.57μg/ml。CDDP合并高温(>41℃)加热明显提高了CDDP的杀伤力,二者之间存在着协同增敏作用。其作用强度呈现对药物浓度、作用时间与加热温度的正相关性,且在一定浓度范围内以谤导肿瘤细胞凋亡的发生为主。结论 加热(>41℃)顺铂提高了顺铂的细胞毒性。诱导细胞凋亡的发生是其抗肿瘤作用的主要机制之一。 展开更多
关键词 顺铂 肝癌 细胞毒性 细胞凋亡 化疗
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眼镜蛇毒直接溶解因子对人肝癌细胞株细胞内游离钙动态变化的影响 被引量:6
8
作者 龚海云 乐毅 +1 位作者 余清声 管锦霞 《细胞生物学杂志》 CSCD 1998年第3期137-140,共4页
用荧光染料FIuo-3标记人肝癌细胞株H_(7402)细胞内游离钙,在粘附式细胞仪观察检测单个细胞内游离钙水平的动态变化,细胞在无钙环境中,直接溶解因子(DLF)刺激下细胞内游离钙迅速升高,达到峰值后下降;在细胞培养皿中加入1mmol/L CaCl_2,DL... 用荧光染料FIuo-3标记人肝癌细胞株H_(7402)细胞内游离钙,在粘附式细胞仪观察检测单个细胞内游离钙水平的动态变化,细胞在无钙环境中,直接溶解因子(DLF)刺激下细胞内游离钙迅速升高,达到峰值后下降;在细胞培养皿中加入1mmol/L CaCl_2,DLF使胞浆游离钙持续升高;加入10mmol/L CaCl_2,DLF刺激后胞浆游离钙水平无明显变化,表明DLF能引起胞内Ca^(2+)释放和胞外Ca^(2+)内流,细胞外高浓度Ca^(2+)能阻断DLF升高细胞内Ca^(2+)浓度的 作用。 展开更多
关键词 心脏毒素 DLF 人肝癌细胞株 游离钙 动态变化
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单叶蔓荆果实中多甲氧基黄酮类成分的分离、鉴定及细胞毒活性分析 被引量:1
9
作者 高雪 陈刚 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期118-120,共3页
单叶蔓荆(Vitex rotundifolia Linn.f.)为马鞭草科(Verbenaceae)牡荆属(Vitex Linn.)多年生落叶灌木,其干燥成熟果实供药用,具有疏散风热的功效[1]。单叶蔓荆生于沙滩、海边及湖畔,主要产于中国安徽、福建、广东、河北、江苏、江... 单叶蔓荆(Vitex rotundifolia Linn.f.)为马鞭草科(Verbenaceae)牡荆属(Vitex Linn.)多年生落叶灌木,其干燥成熟果实供药用,具有疏散风热的功效[1]。单叶蔓荆生于沙滩、海边及湖畔,主要产于中国安徽、福建、广东、河北、江苏、江西、辽宁、山东、台湾和浙江等地,日本、东南亚地区和太平洋群岛也有分布[2]。 展开更多
关键词 单叶蔓荆 果实 多甲氧基黄酮类 人肝癌细胞株Hep G2 细胞毒活性
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尾叶香茶菜二萜类化合物F对肝癌细胞株SMMC-7721的影响
10
作者 孙明莉 孙晓娟 +6 位作者 张宏宇 孔晓霞 袁兆新 穆桂芳 李扬 王冠军 李洪岩 《临床肝胆病杂志》 CAS 2006年第5期344-346,共3页
观察尾叶香茶菜中提取物二萜类化合物F对人肝癌细胞株SMMC-7721的作用并探讨其机制。分别应用MTT法、AO/EB荧光染色法分析细胞存活率和凋亡情况,利用DCFH-DA荧光分光光度法检测细胞内过氧化物(ROS)的水平。二萜类化合物F抑制SMMC-7721... 观察尾叶香茶菜中提取物二萜类化合物F对人肝癌细胞株SMMC-7721的作用并探讨其机制。分别应用MTT法、AO/EB荧光染色法分析细胞存活率和凋亡情况,利用DCFH-DA荧光分光光度法检测细胞内过氧化物(ROS)的水平。二萜类化合物F抑制SMMC-7721细胞增殖,且呈时间剂量依赖性,二萜类化合物F作用的SMMC-7721细胞内ROS水平明显升高。二萜类化合物F可以启动细胞内氧化应激诱导SMMC-7721细胞坏死或凋亡而抑制肝癌细胞株增殖。 展开更多
关键词 二萜类化合物F 尾叶香茶菜 肝癌细胞株 氧化应激
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UO-126对HeLa细胞增殖及对FBW7表达的影响 被引量:6
11
作者 孙迪 沈宜 +3 位作者 汪少华 向自武 谢莹珊 姜歆 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期138-140,144,共4页
目的:观察UO-126对人类宫颈癌细胞株HeLa细胞增殖及对F-盒和含蛋白7的WD重复结构域FBW7表达的影响。方法:采用MTT法观察不同浓度的UO-126对HeLa细胞增殖的影响;免疫荧光法检测FBW7在HeLa细胞中的定位和表达;RT-PCR、Western blot检测FBW... 目的:观察UO-126对人类宫颈癌细胞株HeLa细胞增殖及对F-盒和含蛋白7的WD重复结构域FBW7表达的影响。方法:采用MTT法观察不同浓度的UO-126对HeLa细胞增殖的影响;免疫荧光法检测FBW7在HeLa细胞中的定位和表达;RT-PCR、Western blot检测FBW7 mRNA及蛋白在UO-126阻断丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein ki-nases,MAPK)信号通路前后的表达情况。结果:MTT结果显示各浓度UO-126具有抑制HeLa细胞增殖的作用,且具有剂量依赖性和时间依赖性(P<0.05)。免疫荧光检测显示UO-126处理HeLa细胞后FBW7阳性表达增强。RT-PCR及West-ern blot结果显示,UO-126作用后HeLa细胞FBW7 mRNA及蛋白表达水平较未处理HeLa细胞明显增高(P<0.05)。结论:MAPK信号通路阻断剂UO-126抑制HeLa细胞增殖,FBW7位于MAPK信号通路的下游。 展开更多
关键词 UO-126 宫颈癌细胞株(HeLa细胞) FBW7 MAPK
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球毛壳菌素F对Poly(I∶C)诱导的RAW264.7细胞TNF-α水平的影响
12
作者 赵俊丽 《南京晓庄学院学报》 2011年第6期69-72,共4页
该实验主要研究球毛壳菌素F对聚肌苷酸胞苷酸Poly(I∶C)诱导的小鼠巨噬细胞系RAW264.7 TNF-α表达水平的影响.采用不同浓度的Poly(I∶C)(50μg.mL-1、100μg.mL-1和200μg.mL-1)和球毛壳菌素F(2μg.mL-1)对RAW264.7进行处理,运用流式细... 该实验主要研究球毛壳菌素F对聚肌苷酸胞苷酸Poly(I∶C)诱导的小鼠巨噬细胞系RAW264.7 TNF-α表达水平的影响.采用不同浓度的Poly(I∶C)(50μg.mL-1、100μg.mL-1和200μg.mL-1)和球毛壳菌素F(2μg.mL-1)对RAW264.7进行处理,运用流式细胞术检测细胞内TNF-α的表达水平.结果表明,各浓度的Poly(I∶C)与对照组相比均能极显著提高RAW264.7的TNF-α水平(P<0.001),并且具有浓度依赖性;球毛壳菌素F能够极显著地降低Poly(I∶C)诱导的细胞TNF-α水平(P<0.01).结论,球毛壳菌素F可能是通过降低炎症因子TNF-α的分泌而达到抗炎作用的. 展开更多
关键词 球毛壳菌素F 聚肌苷酸胞苷酸 肿瘤坏死因子Α 小鼠巨噬细胞系RAW264.7
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体外分层渗透共培养研究胆管癌细胞株QBC939对正常内皮细胞的作用
13
作者 李大江 陈健 +2 位作者 熊燕 李哓武 王曙光 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期843-847,共5页
目的在体外分层渗透共培养体系中研究胆管癌细胞对正常内皮细胞的作用。方法建立胆管癌细胞株QBC939与正常内皮细胞的体外分层渗透共培养体系,以同期单独培养的正常内皮细胞为对照,用免疫荧光法检测内皮细胞与胆管癌细胞共培养后,内... 目的在体外分层渗透共培养体系中研究胆管癌细胞对正常内皮细胞的作用。方法建立胆管癌细胞株QBC939与正常内皮细胞的体外分层渗透共培养体系,以同期单独培养的正常内皮细胞为对照,用免疫荧光法检测内皮细胞与胆管癌细胞共培养后,内皮细胞Factin,pp125FAK,蛋白水解酶MMP-2、MMP-9、uPA蛋白表达变化,用Realtime PCR,Western印迹检测内皮细胞共培养前后,pp125FAK,MMP-2、MMP-9、uPA的mRNA及蛋白表达变化。结果与同期单独培养的正常内皮细胞对照相比,内皮细胞Factin表达增强,pp125FAK、MMP-2、MMP-9、uPA的mRNA及蛋白表达增加(P〈0.01)。结论胆管癌细胞能通过旁分泌作用导致内皮细胞骨架系统改变,并能诱导内皮细胞蛋白水解酶的基因表达及蛋白合成,表明肿瘤细胞对邻近内皮细胞还可以通过肿瘤细胞的内分泌、旁分泌等作用分泌各种细胞因子,作用于内皮细胞上的特异性受体,发挥其对内皮细胞mRNA表达的调控作用,而导致内皮细胞发生形态、行为的改变。 展开更多
关键词 胆管肿瘤 共同培养 QBC939细胞株 内皮细胞 蛋白水解酶 F—actin
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舌鳞癌F-肌动蛋白骨架变化对细胞形态的影响
14
作者 韩德昌 王永奎 韩新光 《中华口腔医学研究杂志(电子版)》 CAS 2009年第1期11-13,共3页
目的探讨舌鳞癌F-肌动蛋白骨架变化对细胞形态的影响。方法用不同药物浓度的Rho/ROCK通路特异性抑制剂Y-27632作用于人舌鳞癌Tca8113细胞株,用异硫氰酸荧光素(FITC)标记的鬼笔环肽标记F-肌动蛋白,用激光扫描共聚焦显微镜观察舌癌细胞形... 目的探讨舌鳞癌F-肌动蛋白骨架变化对细胞形态的影响。方法用不同药物浓度的Rho/ROCK通路特异性抑制剂Y-27632作用于人舌鳞癌Tca8113细胞株,用异硫氰酸荧光素(FITC)标记的鬼笔环肽标记F-肌动蛋白,用激光扫描共聚焦显微镜观察舌癌细胞形态和细胞内F-肌动蛋白排列和分布的变化。结果经低浓度处理后,细胞的F-肌动蛋白排列和分布及细胞形态变化不明显,经高浓度处理后,变化明显。结论F-肌动蛋白骨架变化影响舌鳞癌细胞形态。 展开更多
关键词 形态学 Y-27632 TCA8113细胞 F-肌动蛋白 细胞骨架
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