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FGF5基因编辑细毛羊的健康状况评估 被引量:2
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作者 胡慧宇 任思睿 +5 位作者 刘晨曦 韩冰 李忠慧 玛依拉 刘明军 李文蓉 《草食家畜》 2021年第5期9-18,共10页
动物的健康状况是转基因动物生物安全评价的重要内容之一,而动物的生长发育和生理指标是评估其健康状况的有效手段。课题组前期利用CRISPR/Cas9技术获得了一批成纤维生长因子5(Fibroblast growth factor 5,FGF5)基因功能缺失的中国美利... 动物的健康状况是转基因动物生物安全评价的重要内容之一,而动物的生长发育和生理指标是评估其健康状况的有效手段。课题组前期利用CRISPR/Cas9技术获得了一批成纤维生长因子5(Fibroblast growth factor 5,FGF5)基因功能缺失的中国美利奴细毛羊。为了评估FGF5基因编辑细毛羊的健康状况和生物安全性,本试验对FGF5基因编辑细毛羊与野生型对照羊群体的生长发育性状、血液生理生化指标以及肠道微生物群落结构进行了比较和分析。结果显示:(1)FGF5基因编辑羔羊的0、2、4、6、8月龄的体重、体高、胸围、斜体长与同龄野生型细毛羊无显著差异(P>0.05);(2)不论是羔羊时期还是成年时期,FGF5基因编辑羊的红细胞、白细胞、血小板等15项血常规指标和肾功能、肝功能、醣类代谢、电解质等10项血清生化指标与野生型对照羊相比,二者均无显著差异(P>0.05);(3)利用16S rDNA微生物群落测序技术分析FGF5基因编辑羊与野生型对照羊肠道微生物群落结构。结果显示,在门水平分布中拥有共享优势菌比例达96.2%;α多样性指数差异分析结果显示,二者无显著差异(P>0.05);基因编辑羊与野生型对照羊的PCA图均可以看到明显的聚类;LEfSe分析显示,基因编辑羊有2个生物标记,野生型对照羊有2个生物标记,均为反刍动物肠道内常见菌群。研究表明,FGF5基因功能的缺失未对细毛羊的自身健康造成不利影响。研究结果为FGF5基因编辑细毛羊生物安全评价奠定了基础。 展开更多
关键词 fgf5 细毛羊 基因编辑 健康评估
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不同基因编辑类型对FGF5基因编辑羊羊毛性状的影响 被引量:1
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作者 岳成广 李忠慧 +5 位作者 刘晨曦 贺三刚 马海叶 刘璇 李婧平 李文蓉 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期734-741,共8页
【目的】分析不同基因编辑类型对成纤维生长因子5(FGF5)基因编辑细毛羊羊毛性状的影响,为开展基因编辑细毛羊的羊毛性状遗传参数评估提供理论依据。【方法】收集181只FGF5周岁基因羊,分析编辑细毛羊羊毛自然长度、伸直长度、羊毛纤维直... 【目的】分析不同基因编辑类型对成纤维生长因子5(FGF5)基因编辑细毛羊羊毛性状的影响,为开展基因编辑细毛羊的羊毛性状遗传参数评估提供理论依据。【方法】收集181只FGF5周岁基因羊,分析编辑细毛羊羊毛自然长度、伸直长度、羊毛纤维直径和剪毛量等性状的数据。【结果】FGF5基因编辑细毛羊羊毛自然长度平均值为10.49 cm,变异系数为11.82%。FGF5-InDel和FGF5-HDR基因编辑细毛羊羊毛自然长度和剪毛量均极显著高于野生型(P<0.01)。-28 bp或-26 bp、2 bp和置换(c.61 C>T)的羊毛自然长度和伸直长度均极显著长于wt(P<0.01),-28 bp或-26 bp的剪毛量显著高于wt(P<0.05)。-28 bp基因型的双等位基因编辑和单等位基因编辑突变的羊毛自然长度和伸直长度均极显著长于野生型(P<0.01)。【结论】不同基因编辑类型的FGF5基因编辑细毛羊均可显著提高羊毛自然长度和剪毛量,可利用表型性状突出的后代组建核心编辑羊群体,促进FGF5基因编辑细毛羊选育扩繁。 展开更多
关键词 fgf5基因编辑细毛羊 编辑类型 羊毛自然长度 剪毛量 基因 突变类型
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CRISPR/Cas9介导的MSTN/FGF5基因编辑陕北白绒山羊粪便菌群分析 被引量:1
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作者 李陇平 杨吉 +2 位作者 朱海鲸 黄帅 屈雷 《中国农学通报》 2018年第14期134-139,共6页
为了从绒山羊粪便微生物群落变化的角度对MSTN/FGF5基因编辑陕北白羊绒山的自身健康和环境安全性进行研究,利用6种不同培养基分别对MSTN/FGF5基因编辑和野生型陕北白绒山羊粪便中的微生物进行培养、计数,并做菌群结构的显著性检验分析... 为了从绒山羊粪便微生物群落变化的角度对MSTN/FGF5基因编辑陕北白羊绒山的自身健康和环境安全性进行研究,利用6种不同培养基分别对MSTN/FGF5基因编辑和野生型陕北白绒山羊粪便中的微生物进行培养、计数,并做菌群结构的显著性检验分析。结果表明:FGF5/MSTN基因编辑和野生型陕北白绒山羊F0代和F1代公羊和母羊新鲜粪样经LB琼脂、伊红美蓝琼脂、TPY琼脂、胆硫乳琼脂、肠球菌琼脂和甘露醇盐琼脂培养后微生物计数分别为,F0代:公羊6.35±0.68,5.89±0.25;5.32±0.10,5.27±0.34;6.64±0.57,6.71±0.35;5.03±0.53,5.32±0.14;4.12±0.13,4.15±0.21;5.34±0.18,5.25±0.25;母羊6.62±0.45,6.64±0.31;4.80±0.51,4.75±0.45;7.20±0.30,7.15±0.55;4.30±0.52,4.42±0.62;5.83±0.51,5.73±0.86;6.24±0.28,6.24±0.21。F1代:公羊6.92±0.12,7.08±0.04;4.02±0.64,3.99±0.51;6.32±0.15,6.25±0.30;5.21±0.28,5.17±0.20;3.66±0.50,3.88±0.67;4.06±0.50,3.97±0.46;母羊7.12±0.24,6.96±0.19;4.15±0.19,4.25±0.24;6.45±0.30,6.56±0.45;4.97±0.42,4.87±0.38;4.04±0.96,3.96±0.57;4.10±0.28,3.85±0.37。F0和F1代MSTN/FGF5基因编辑陕北白绒山羊与野生型陕北白绒山羊粪便中菌群结构之间不存在显著性差异(P>0.05)。本研究为FGF5/MSTN基因编辑陕北白绒山羊的安全性评价研究提供了试验数据和研究基础。 展开更多
关键词 MSTN/fgf5基因 基因编辑 陕北白绒山羊 粪便菌群结构 生物安全
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BSA对FGF5基因编辑绵羊精液冷冻的效果分析
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作者 毛林军 玛依拉 +3 位作者 杜鹏程 雷熙 齐·阿拉达尔 彭新荣 《草食家畜》 2022年第5期9-17,共9页
为了探讨在常规精液冷冻保护剂中添加不同浓度的牛血清白蛋白(BSA)对FGF5基因编辑绵羊精液冷冻的效果。用人工采精法进行精液采集,在常规的精液冷冻保护剂中分别添加浓度为0.2%、0.5%、1%的牛血清白蛋白(BSA),以不添加BSA的常规精液冷... 为了探讨在常规精液冷冻保护剂中添加不同浓度的牛血清白蛋白(BSA)对FGF5基因编辑绵羊精液冷冻的效果。用人工采精法进行精液采集,在常规的精液冷冻保护剂中分别添加浓度为0.2%、0.5%、1%的牛血清白蛋白(BSA),以不添加BSA的常规精液冷冻保护剂作为对照,利用液氮熏蒸法对精液进行冷冻,对解冻后精子的活率、活力、顶体完整性和膜完整性进行评价,筛选BSA最佳保护浓度。浓度为0.5%的BSA在精液冷冻-解冻后,精子的活率、活力、顶体完整率各项指标能显著高于对照组(0%)和其他浓度(0.2%、1%)(P<0.05),精子的畸形率显著低于对照组和实验组(P<0.05)。浓度为0.5%的BSA在FGF5基因编辑绵羊精液冷冻中保护效果最佳,精子的各项指标得到一定的改善。本研究为FGF5基因编辑绵羊及相关品种公羊精子的冷冻保存提供了一种新的途径和有益的参考。 展开更多
关键词 fgf5基因编辑绵羊 精液冷冻 牛血清白蛋白
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绵羊FGF5基因Exon 3多态性对毛用性状的影响 被引量:6
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作者 张立春 尹峰 +6 位作者 柳俭强 李梦姝 王春昕 曹阳 朴庆林 金海国 张明新 《中国草食动物科学》 CAS 2018年第6期1-5,共5页
为探寻不同细毛羊品种FGF5基因多态性及其对毛用性状的影响,采用PCR-SSCP方法对苏博美利奴羊和东北细毛羊两个群体的FGF5基因Exon 3区进行了多态性分析,并在苏博美利奴羊群体中对不同基因型个体与其毛用性状进行了差异显著性分析。结果... 为探寻不同细毛羊品种FGF5基因多态性及其对毛用性状的影响,采用PCR-SSCP方法对苏博美利奴羊和东北细毛羊两个群体的FGF5基因Exon 3区进行了多态性分析,并在苏博美利奴羊群体中对不同基因型个体与其毛用性状进行了差异显著性分析。结果表明:苏博美利奴羊群体FGF5基因Exon 3区存在5种基因型,分别是DD、EE、FF、DE和EF,而东北细毛羊群体只存在DD、EE和DE三种基因型;苏博美利奴羊F等位基因由CDs区c.618和c.733多态位点构成,其中c.733位点C->G突变导致E等位基因型个体氨基酸L->V变异。苏博美利奴羊群体只有FF基因型个体在产毛量指标上显著高于DD基因型个体(P<0.05)。不同毛用绵羊品种FGF5基因多态性及其与毛用性状相关性的研究可为利用FGF5基因进行毛用性状选育奠定基础。 展开更多
关键词 苏博美利奴羊 东北细毛羊 fgf5 羊毛性状 基因多态性
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CRISPR/Cas9编辑绒山羊FGF5基因细胞株的建立 被引量:5
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作者 阿力玛 高原 +1 位作者 苏小虎 周欢敏 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期41-47,共7页
拟利用CRISPR/Cas9技术建立编辑FGF5基因的绒山羊细胞株。在FGF5基因的第一外显子设计靶点并合成gRNA靶点引物,构建2个编辑FGF5基因的Cas/gRNA真核表达质粒载体。电穿孔法转染绒山羊成纤维细胞后T7核酸内切酶(T7E1)检测载体活性,选择活... 拟利用CRISPR/Cas9技术建立编辑FGF5基因的绒山羊细胞株。在FGF5基因的第一外显子设计靶点并合成gRNA靶点引物,构建2个编辑FGF5基因的Cas/gRNA真核表达质粒载体。电穿孔法转染绒山羊成纤维细胞后T7核酸内切酶(T7E1)检测载体活性,选择活性最高的载体转染细胞,单细胞接种并扩繁,提取基因组DNA,PCR及测序鉴定。经测序分析共获得20个FGF5基因敲除细胞株(包括FGF5+/-和FGF5-/-),总突变率为14.81%。双敲除突变细胞株可作为供体细胞进行重构胚构建,为创造高产绒性状的FGF5基因编辑绒山羊奠定基础。 展开更多
关键词 绒山羊 fgf5 CRISPR/Cas9 基因编辑
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