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绵羊FGF9基因克隆、生物信息学与表达分析 被引量:3
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作者 贾琪 高倍瑶 +3 位作者 王丹 张双双 夏广军 张立春 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期175-181,共7页
本研究旨在克隆绵羊FGF9基因并对其进行生物信息学分析,同时检测其在小尾寒羊和新吉细毛羊各个组织以及在不同月份皮肤组织中的表达分布。RT-PCR技术克隆绵羊FGF9基因,多种生物软件和在线工具进行生物信息学分析,qRT-PCR技术分析FGF9基... 本研究旨在克隆绵羊FGF9基因并对其进行生物信息学分析,同时检测其在小尾寒羊和新吉细毛羊各个组织以及在不同月份皮肤组织中的表达分布。RT-PCR技术克隆绵羊FGF9基因,多种生物软件和在线工具进行生物信息学分析,qRT-PCR技术分析FGF9基因表达谱。结果表明:本实验成功克隆出绵羊FGF9基因,该基因片段长1 070 bp,含有完整ORF区,编码完整FGF9蛋白序列。蛋白功能预测绵羊FGF9蛋白共208个氨基酸,其分子量为23.38 ku,理论等电点为7.06,为水溶性蛋白;存在21个潜在磷酸化位点,1个N-糖基化潜在位点,亚细胞定位其主要分布于内质网上。进化分析显示绵羊与山羊亲缘性较近,亲缘性最远的是亚洲水牛。FGF9基因在2个品种绵羊各个组织中均有表达,在小尾寒羊肾脏组织中表达量显著高于其他组织,在新吉细毛羊心脏组织中表达量显著高于其他组织。FGF9基因在2个品种绵羊不同月份皮肤组织中表现为相似的表达模式,总体表现为夏季维持较高表达水平。提示FGF9基因可作为进一步研究绵羊羊毛生长发育及性状构成的候选基因。 展开更多
关键词 fgf9 新吉细毛羊 小尾寒羊 基因克隆
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Circ_0080425通过miR-1182/FGF9轴影响高糖环境下血管内皮细胞功能 被引量:1
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作者 李杨 潘妙霞 +1 位作者 蔡兴莉 王玉川 《中国临床医学》 2023年第4期691-696,共6页
目的探讨circ_0080425调控高糖环境下内皮功能的作用及分子机制。方法采用qRT-PCR检测在高糖环境下培养的人血管内皮细胞(human vascular endothelial cells,HUVECs)中circ_0080425的表达变化,通过小干扰RNA(siRNA)对circ_0080425进行敲... 目的探讨circ_0080425调控高糖环境下内皮功能的作用及分子机制。方法采用qRT-PCR检测在高糖环境下培养的人血管内皮细胞(human vascular endothelial cells,HUVECs)中circ_0080425的表达变化,通过小干扰RNA(siRNA)对circ_0080425进行敲低,并利用CCK-8、平板克隆、Transwell和流式细胞术,观察circ_0080425对高糖培养下的HUVECs增殖、迁移以及凋亡等生物学特性的影响。利用生物信息学网站预测circ_0080425的下游miRNA以及靶基因,并通过双荧光素酶报告实验验证分子间的相互结合。此外,通过sponge慢病毒以及质粒转染对目标分子的表达水平进行调控,并采用CCK-8、平板克隆、Transwell和流式细胞术等进行功能学验证。结果Circ_0080425在高糖培养条件下HUVECs中表达上调,且circ_0080425可通过miR-1182/FGF9轴调控高糖条件下HUVECs的增殖、迁移和凋亡(P<0.05)。结论Circ_0080425可通过miR-1182/FGF9轴影响高糖环境下的血管内皮功能。 展开更多
关键词 高血糖 人血管内皮细胞 circ_0080425 miR-1182 fgf9
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TFGF9转基因小鼠的功能及组织表达谱的研究 被引量:4
3
作者 陈晓怡 吴晓林 +2 位作者 顾鸣敏 陆顺元 王铸钢 《诊断学理论与实践》 2009年第5期496-501,共6页
目的:研究突变FGF9转基因小鼠的功能变化,分析Fgf9及其受体Fgfr3的组织表达谱。方法:采用RT-PCR法克隆FGF9,在该基因296位引入点突变为(G→A)后插入pcDNA3.1(-)B载体,通过显微注射建立转基因小鼠;利用PCR法鉴定转基因小鼠基因型,RT-PCR... 目的:研究突变FGF9转基因小鼠的功能变化,分析Fgf9及其受体Fgfr3的组织表达谱。方法:采用RT-PCR法克隆FGF9,在该基因296位引入点突变为(G→A)后插入pcDNA3.1(-)B载体,通过显微注射建立转基因小鼠;利用PCR法鉴定转基因小鼠基因型,RT-PCR及免疫组化鉴定转基因小鼠内源性Fgf9和Fgfr3的组织表达谱。结果:建立了12个系的转基因小鼠模型,虽未检测到转入基因的表达,但检测到内源性Fgf9和Fgfr3在心、脑、肾、肌肉和骨关节等组织中的表达情况。结论:获得Fgf9和Fgfr3组织表达谱及在不同时期小鼠骨关节中的表达情况;推测转入基因未表达与FGF9转入后被沉默或抑制有关,为此正在建立特异点突变FGF9基因敲入小鼠模型。 展开更多
关键词 fgf9基因 fgf9 FGFR3 转基因小鼠 组织表达谱
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多组学筛选及验证lncRNA CCAT1通过调节miR-148b-3p和FGF9促进结直肠癌发生及发展机制研究 被引量:3
4
作者 才层 郑超 毛睿 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2021年第9期1034-1043,共10页
目的通过生物信息学及分子生物学探讨lncRNA CCAT1对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞增殖的影响,并进一步探讨其机制。方法应用R软件和Bioconductor软件包对9例CRC样本和9例正常样本进行差异表达基因(DEGs)分析,筛选差异表达lncRNA... 目的通过生物信息学及分子生物学探讨lncRNA CCAT1对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞增殖的影响,并进一步探讨其机制。方法应用R软件和Bioconductor软件包对9例CRC样本和9例正常样本进行差异表达基因(DEGs)分析,筛选差异表达lncRNA和mRNA。进一步选择30例CRC组织及匹配的癌旁组织(2016年1月至2019年12月从新疆医科大学第一附属医院CRC外科手术中获得的标本),然后通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CRC组织及CRC细胞中CCAT1、miR-148b-3p、FGF9的表达,采用蛋白免疫印迹试验(Western blotting)检测CRC细胞中FGF9的表达情况。细胞转染后,用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡。采用Transwell迁移实验检测各处理组细胞迁移情况。通过双荧光素酶报告基因检测验证CCAT1与miR-148b-3p、miR-148b-3p与FGF9的靶向关系。结果与癌旁组织及人正常结直肠上皮细胞相比,CCAT1在CRC组织和细胞系中高表达且差异有统计学意义(P<0.05)。进一步分析发现,高表达CCAT1的CRC患者与低表达CCAT1的患者相比,肿瘤较大,TNM分期较晚,总生存率较低。生物学功能测定结果表明,CCAT1具有促进细胞增殖的作用。我们还发现miR-148b-3p可以作为CCAT1在CRC细胞中的作用靶点,miR-148b-3p的过表达可以有效抑制由CCAT1敲低诱导的CRC进程。此外,我们发现FGF9作为miR-148b-3p的靶点在CRC中发挥致癌作用。结论CCAT1可通过调控miR-148b-3p及其靶蛋白FGF9促进CRC细胞增殖,这将为CRC的预防及治疗提供一个有效的治疗靶点及理论依据。 展开更多
关键词 结直肠癌 CCAT1 miR-148b-5p fgf9
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山羊FGF9基因克隆及其在成肌细胞分化中的表达模式研究 被引量:2
5
作者 黄凯 林亚秋 +2 位作者 朱江江 马洁琼 王永 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2019年第3期232-238,共7页
旨在克隆山羊FGF9基因序列并对其进行生物信息学分析,阐明FGF9基因组织表达特性及其在成肌细胞分化过程中的表达差异。试验动物为简州大耳羊,利用RT-PCR技术克隆FGF9基因序列,再用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测FGF9在山羊各组织中... 旨在克隆山羊FGF9基因序列并对其进行生物信息学分析,阐明FGF9基因组织表达特性及其在成肌细胞分化过程中的表达差异。试验动物为简州大耳羊,利用RT-PCR技术克隆FGF9基因序列,再用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测FGF9在山羊各组织中的表达特性及其在成肌细胞不同分化阶段的表达情况。结果显示,克隆得到山羊FGF9基因序列818bp,其中ORF区627bp,编码208个氨基酸,其CDS区核苷酸序列与牛和绵羊有99%的同源性。FGF9蛋白具有1个跨膜结构域和1个FGF家族同源性结构域,为不稳定亲水蛋白。FGF9基因在山羊各组织中均有表达,在肾脏中表达水平最高,极显著高于其他组织(P<0.01)。FGF9基因在诱导分化第2天表达水平显著高于分化前(P<0.05),且在第4天达到极显著水平(P<0.01)。推测其可作为调控山羊成肌细胞分化的候选基因。为进一步探究FGF9基因在山羊肌肉生长中的作用提供理论依据。 展开更多
关键词 山羊 fgf9 克隆 生物信息学分析 表达特性 成肌细胞
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miR-214调控FGF9的表达参与结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞中PI3K/AKT信号通路的免疫调控作用研究 被引量:5
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作者 苏维娜 李晓晶 +1 位作者 张丽丽 包志伟 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第11期48-54,61,共8页
目的探究miR-214对结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞中免疫调控的作用机制。方法培养肺泡Ⅱ型细胞系A549,分别使用结核分枝杆菌疫苗株BCG和结核分枝杆菌标准株H37Rv感染A549细胞。对A549细胞进行分组,并进行H37Rv感染。qRT-PCR检测各组细胞... 目的探究miR-214对结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞中免疫调控的作用机制。方法培养肺泡Ⅱ型细胞系A549,分别使用结核分枝杆菌疫苗株BCG和结核分枝杆菌标准株H37Rv感染A549细胞。对A549细胞进行分组,并进行H37Rv感染。qRT-PCR检测各组细胞中miR-214和FGF9的表达情况,Western blot检测各组细胞中FGF9蛋白的表达。ELISA检测细胞中免疫相关因子SP-A、SP-D、TLR2和TLR4,炎症因子IL-10、TNF-α、TNF-γ、IL-1β和IL-8的含量。Western blot检测PI3K/AKT信号通路成员PI3K、AKT、p-AKT的表达。结果和BCG相比,H37Rv感染后的A549细胞中miR-214表达升高,FGF9表达降低。和NC mimic+oe-NC组相比,miR-214 mimic+oe-NC组细胞SP-A、SP-D、IL-10含量显著降低,TLR2、TLR4、TNF-α、TNF-γ、IL-1β、IL-8含量显著升高,PI3K、AKT/p-AKT表达显著升高。NC mimic+oe-FGF9组SP-A、SP-D、IL-10含量显著升高,TLR2、TLR4、TNF-α、TNF-γ、IL-1β、IL-8含量显著降低,PI3K、AKT/p-AKT表达显著升高降低。和miR-214 mimic+oe-NC组相比,miR-214 mimic+oe-FGF9组SP-A、SP-D、IL-10含量显著升高,TLR2、TLR4、TNF-α、TNF-γ、IL-1β、IL-8含量显著降低,PI3K、AKT/p-AKT表达显著降低。结论 miR-214通过抑制FGF9的表达,进而激活PI3K/AKT信号通路,导致结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞过度免疫反应,从而导致炎症发展。 展开更多
关键词 miR-214 fgf9 PI3K/AKT信号通路 结核分枝杆菌 肺泡Ⅱ型细胞 免疫调控
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少突胶质细胞条件性敲除FGF9基因小鼠模型的建立、鉴定及初步表型 被引量:2
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作者 李端 刘亚坤 +2 位作者 段冰霞 杜娟 郭默然 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期455-460,共6页
目的建立少突胶质细胞特异性敲除成纤维生长因子9(FGF9)小鼠模型,进一步研究FGF9在神经发育中的作用。方法将Olig1-Cre转基因小鼠与FGF9转基因小鼠(FGF9^(flox/flox))杂交,选取雌性FGF9^(flox/wt)/Olig1-Cre^(+)与雄性FGF9^(flox/flox)... 目的建立少突胶质细胞特异性敲除成纤维生长因子9(FGF9)小鼠模型,进一步研究FGF9在神经发育中的作用。方法将Olig1-Cre转基因小鼠与FGF9转基因小鼠(FGF9^(flox/flox))杂交,选取雌性FGF9^(flox/wt)/Olig1-Cre^(+)与雄性FGF9^(flox/flox)合笼交配,F3代获得少突胶质细胞特异性敲除FGF9基因小鼠(FGF9^(flox/flox)/Olig1-Cre^(+))。为了证实条件性基因敲除的特异性及有效性,提取鼠尾组织基因组DNA,通过PCR技术鉴定其基因型,利用蛋白电泳以及激光共聚焦验证FGF9蛋白的表达,并对其表型进行观察。结果从基因水平和蛋白水平证实了成功构建了FGF9^(flox/flox)/Olig1-Cre^(+)小鼠。初步表型分析显示,敲除组小鼠可活可育,生存期与对照组相同,但发育缓慢体重显著减轻。结论成功获得少突胶质细胞中特异性敲除FGF9基因小鼠,FGF9基因条件性敲除后引起小鼠发育缓慢。 展开更多
关键词 fgf9基因 少突胶质细胞 Cre/Loxp 表型分析
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条件性敲除软骨组织中FGF9基因小鼠模型的建立 被引量:2
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作者 翁梦佳 章筱悦 陈振琦 《中国口腔颌面外科杂志》 CAS 2019年第5期412-417,共6页
目的:利用Cre-LoxP系统建立可调控的软骨组织条件性敲除成纤维细胞生长因子9(fibroblast growth factor,FGF9)小鼠模型。方法:构建针对小鼠Fgf9基因2号外显子的重组载体,电穿孔转染胚胎干细胞(ES细胞)。选择药物G418和Ganc,筛选阳性ES... 目的:利用Cre-LoxP系统建立可调控的软骨组织条件性敲除成纤维细胞生长因子9(fibroblast growth factor,FGF9)小鼠模型。方法:构建针对小鼠Fgf9基因2号外显子的重组载体,电穿孔转染胚胎干细胞(ES细胞)。选择药物G418和Ganc,筛选阳性ES细胞并进行PCR鉴定。利用显微注射将ES细胞注入C57BL/6J小鼠囊胚,移入假孕小鼠子宫,获得含Neo的flox杂合小鼠。该小鼠去Neo后,与ColⅡ-Cre转基因小鼠杂交,并以他莫昔芬诱导,其后代软骨细胞内flox纯合、Cre阳性小鼠的flox区域被敲除。结果:Fgf9基因flox杂合子小鼠无明显异常,可稳定繁殖。该flox小鼠与ColⅡ-Cre转基因小鼠交配后,成功建立条件性敲除软骨组织中Fgf9基因小鼠模型。结论:利用Cre-LoxP系统,可成功建立Fgf9基因条件性敲除小鼠模型,为后续研究FGF9在骨软骨发育及骨关节稳态维持中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 fgf9 条件性基因敲除 ColⅡ-Cre转基因小鼠
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FGF9调节性腺分化研究进展 被引量:3
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作者 廖冰 林秀坤 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第5期80-83,共4页
性别决定过程是双潜能胚胎发育成睾丸或卵巢的过程。通过小鼠基因敲除试验以及在遗传水平分析性反转病人证明该过程是由多个基因调控的。论文综述了睾丸发育通路中信号分子成纤维细胞生长因子9(FGF9)在性腺分化中的作用。FGF9基因参与... 性别决定过程是双潜能胚胎发育成睾丸或卵巢的过程。通过小鼠基因敲除试验以及在遗传水平分析性反转病人证明该过程是由多个基因调控的。论文综述了睾丸发育通路中信号分子成纤维细胞生长因子9(FGF9)在性腺分化中的作用。FGF9基因参与调节早期睾丸发育的3个重要事件,为调节性腺体腔上皮细胞增殖,促进Sertoli前体细胞形成,调节中肾细胞迁移,影响睾丸索的形成,FGF9诱导FGFR2在核内定位,并维持Sox9的表达。 展开更多
关键词 性别决定 成纤维细胞生长因子9 SERTOLI细胞 睾丸发育
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两种慢性应激对ICR小鼠抑郁样行为表现及海马中FGF2/FGF9含量的影响 被引量:5
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作者 吴莉峰 石镇港 +3 位作者 曾贵荣 唐娅辉 邵亚杰 姜德建 《中南药学》 CAS 2019年第3期394-398,共5页
目的研究慢性束缚应激(CRS)与慢性温和不可预刺激(CUMS)两种不同的造模方法对ICR小鼠抑郁样行为表现及海马中FGF2/FGF9含量的影响。方法雄性ICR小鼠50只,体重18.5~22.4 g,按体重随机分为3组,即正常对照组、CRS模型组与CUMS模型组,正常... 目的研究慢性束缚应激(CRS)与慢性温和不可预刺激(CUMS)两种不同的造模方法对ICR小鼠抑郁样行为表现及海马中FGF2/FGF9含量的影响。方法雄性ICR小鼠50只,体重18.5~22.4 g,按体重随机分为3组,即正常对照组、CRS模型组与CUMS模型组,正常对照组10只,其余各组20只。除正常对照组外,各组小鼠连续造模28 d后根据糖水偏爱结果选出造模成功的小鼠10只。对各组小鼠分别进行糖水偏爱、强迫游泳、悬尾及自主活动等行为学检测,取海马组织检测海马组织成纤维生长因子2(FGF2)与成纤维生长因子9(FGF9)含量并进行组织病理学检测。结果造模28 d后CRS模型组与CUMS模型组小鼠的体重均明显下降(P <0.05,P <0.01);糖水偏爱指数、活动时间与活动次数明显降低(P <0.01),海马组织匀浆中FGF2含量明显减少且FGF9含量明显增加(P <0.01),海马组织病理变化为海马细胞排列系数紊乱,正常椎体细胞数目明显减少。与CRS模型组比较,CUMS模型组小鼠活动时间与活动次数明显降低且海马组织匀浆中FGF2含量明显减少(P <0.01)。结论造模28 d后两种慢性应激均可致ICR小鼠出现抑郁样行为且CUMS致小鼠抑郁程度更重,其机制可能与海马中FGF2/FGF9含量有关。 展开更多
关键词 慢性束缚刺激 慢性温和不可预刺激 抑郁 成纤维生长因子2( FGF2) 成纤维生长因子9 ( fgf9)
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FGF9/ADPN对ICR小鼠认知障碍的影响 被引量:1
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作者 吴莉峰 唐娅辉 +2 位作者 曾贵荣 石镇港 姜德建 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期702-703,共2页
目的研究FGF9/ADPN对ICR模型小鼠认知障碍的影响。方法采用慢性不可预知性刺激建立ICR小鼠认知障碍模型。选择造模成功雄性8周龄小鼠30只,体质量22.3~24.5 g,随机分为CUMS模型对照组、ADPN侧脑室注射组和FGF9抗体侧脑室注射组,每组10... 目的研究FGF9/ADPN对ICR模型小鼠认知障碍的影响。方法采用慢性不可预知性刺激建立ICR小鼠认知障碍模型。选择造模成功雄性8周龄小鼠30只,体质量22.3~24.5 g,随机分为CUMS模型对照组、ADPN侧脑室注射组和FGF9抗体侧脑室注射组,每组10只。另取10只8周龄雄性ICR小鼠作为正常对照组,正常对照组和CUMS模型对照组侧脑室注射溶媒PBS 2μL,ADPN侧脑室注射组侧脑室注射脂联素2μL,FGF9抗体侧脑室注射组侧脑室注射FGF9抗体2 uL。注射后2 d进行Morris水迷宫、新物体识别检测及血液生化及海马组织病理学检测。结果与正常对照组比较,CUMS模型对照组工作记忆潜伏期明显增加(P<0.05),新物体辨别指数明显降低(P<0.01);血清和海马匀浆组织中ADPN含量明显下降(P<0.01),血清和海马匀浆组织中FGF9含量明显升高(P<0.05);海马组织病理表现为海马细胞排列稀疏紊乱,正常椎体细胞数目明显减少。与CUMS模型对照组比较,ADPN侧脑室注射组与FGF9抗体侧脑室注射组工作记忆潜伏期明显减少(P<0.05),辨别指数明显升高(P<0.01);ADPN侧脑室注射组血清中ADPN明显升高(P<0.05),血清与海马组织匀浆中FGF9含量明显下降(P<0.05);FGF9抗体侧脑室注射组血清与海马匀浆组织中FGF9含量明显下降(P<0.01);ADPN侧脑室注射组与FGF9抗体侧脑室注射组小鼠海马细胞排列稀疏紊乱,正常椎体细胞数目明显升高。结论侧脑室注射ADPN和FGF9抗体对ICR小鼠的认知障碍有明显的改善作用。FGF9/ADPN可调控认知障碍的发生发展。 展开更多
关键词 fgf9 认知障碍 ADPN
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FGF9/ADPN对脂联素基因敲除小鼠认知障碍的影响 被引量:1
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作者 吴莉峰 唐娅辉 +2 位作者 曾贵荣 石镇港 姜德建 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期702-702,共1页
目的研究FGF9/ADPN对脂联素基因敲除模型小鼠认知障碍的影响。方法采用慢性不可预知性刺激建立Adipo-/-小鼠认知障碍模型。选择造模成功雄性4月龄小鼠20只,体质量33.2~35.7g,随机分为CUMS模型对照组和FGF9抗体侧脑室注射组,每组10只。... 目的研究FGF9/ADPN对脂联素基因敲除模型小鼠认知障碍的影响。方法采用慢性不可预知性刺激建立Adipo-/-小鼠认知障碍模型。选择造模成功雄性4月龄小鼠20只,体质量33.2~35.7g,随机分为CUMS模型对照组和FGF9抗体侧脑室注射组,每组10只。另取10只4月龄雄性Adipo-/-小鼠作为正常对照组,正常对照组和CUMS模型对照组侧脑室注射溶媒PBS 2μL,FGF9抗体侧脑室注射组侧脑室注射FGF9抗体2μL。注射后2 d进行Morris水迷宫、新物体识别检测及血液生化及海马组织病理学检测。结果与正常对照组比较,CUMS模型对照组过平台次数明显减少,新物体辨别指数明显降低(P<0.01);血清与海马匀浆组织中ADPN含量明显下降(P<0.01),血清与海马匀浆组织中FGF9含量明显升高(P<0.05);海马组织病理表现为海马细胞排列稀疏紊乱,正常椎体细胞数目明显减少。与CUMS模型对照组比较,FGF9抗体侧脑室注射组过平台次数明显增加,辨别指数明显升高(P<0.05);海马匀浆组织中ADPN含量明显升高,血清与海马匀浆组织中FGF9含量明显下降(P<0.05);FGF9抗体侧脑室注射组小鼠海马细胞排列稀疏紊乱,正常椎体细胞数目明显升高。结论侧脑室注射FGF9抗体对Adipo-/-小鼠的认知障碍有明显的改善作用。FGF9/ADPN与认知障碍的发生发展有着一定相关性。 展开更多
关键词 fgf9 认知障碍 脂联素
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miR-140-5p调控FGF9在拇外翻中的作用
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作者 罗纯猛 金日龙 +3 位作者 杜健 李力 马健 佟智慧 《中国医药导报》 CAS 2016年第24期4-7,11,共5页
目的探讨miR-140—5p调控FGF9在拇外翻中的作用,从基因层面阐明拇外翻的发病机制,为临床预防和治疗拇外翻提供基础理论依据。方法收集2013—2015年于抚顺市中心医院就诊的拇外翻患者(10例)和非拇外翻患者(5例)的第一跖骨内侧骨组... 目的探讨miR-140—5p调控FGF9在拇外翻中的作用,从基因层面阐明拇外翻的发病机制,为临床预防和治疗拇外翻提供基础理论依据。方法收集2013—2015年于抚顺市中心医院就诊的拇外翻患者(10例)和非拇外翻患者(5例)的第一跖骨内侧骨组织及表面软组织样本,运用Western blot以及real—timePCR检测各组织中miR-140—5p和FGF9的表达.并对其表达差异进行分析。利用人成骨细胞系hFOBI.19对骨保护素(OPG)和骨钙素(OCN)进行Western blot分析,验证miR-140—5p和FGF9的调控关系和对成骨细胞成骨能力的影响。结果拇外翻患者第一跖趾关节与非拇外翻患者比较,miR-140—5p表达显著下降(P=0.0065),FGF9表达明显增高(P=0.0055)。上调miR-140—5p后FGF9mRNA表达显著下降(P=0.0050),而下调miR-140—5p后FGF9mRNA表达显著增加(P=0.0035)。与未转染组比较上调miR-140—5p后OPG(P=0.0045)和OCN蛋白(P=0.0037)表达明显增强,而下调miR-140—5p后OPG(P=0.0047)和OCN蛋白(P=0.0049)表达减弱。结论本研究初步证明了miR-140—5p与FGF9在拇外翻的病理过程中具有重要作用,这为拇外翻的病因以及诊治研究提供了新的方向。 展开更多
关键词 拇外翻 miR-140—5p fgf9 成骨细胞
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血清NRG1、FGL2、FGF9与急性缺血性脑卒中后癫痫的关系及其预测价值研究
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作者 李伟 李宗奇 +2 位作者 宁波 祝美蓉 钟利 《现代生物医学进展》 CAS 2024年第13期2587-2591,2541,共6页
目的:探讨血清神经调节素-1(NRG1)、纤维蛋白原样蛋白2(FGL2)、成纤维细胞生长因子9(FGF9)与急性缺血性脑卒中(AIS)后癫痫的关系及其预测价值。方法:选取2021年1月~2022年3月四川大学华西医院龙泉医院收治的AIS患者450例,随访1年根据是... 目的:探讨血清神经调节素-1(NRG1)、纤维蛋白原样蛋白2(FGL2)、成纤维细胞生长因子9(FGF9)与急性缺血性脑卒中(AIS)后癫痫的关系及其预测价值。方法:选取2021年1月~2022年3月四川大学华西医院龙泉医院收治的AIS患者450例,随访1年根据是否发生癫痫分为癫痫组(n=41)与非癫痫组(n=409)。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清NRG1、FGL2、FGF9水平。采用多因素Logistic回归分析影响AIS后癫痫的因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清NRG1、FGL2、FGF9水平对AIS后癫痫的预测价值。结果:与非癫痫组比较,癫痫组血清NRG1、FGL2水平升高,FGF9水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,前循环梗死和梗死面积增加、出血转化、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分增加及NRG1、FGL2升高为影响AIS后癫痫的独立危险因素,FGF9升高为独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清NRG1、FGL2、FGF9水平联合预测AIS后癫痫的曲线下面积为0.921,大于血清NRG1、FGL2、FGF9水平单独预测的0.789、0.779、0.795。结论:血清NRG1、FGL2水平升高和FGF9水平降低与AIS后癫痫发生密切相关,血清NRG1、FGL2、FGF9水平联合检测对预测AIS后癫痫发生具有较高价值。 展开更多
关键词 急性缺血性脑卒中 癫痫 NRG1 FGL2 fgf9 预测价值
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FGF9与FGFR3受体在骨发育与疾病中的作用 被引量:4
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作者 陈晓怡 吴晓林 顾鸣敏 《现代生物医学进展》 CAS 2009年第4期739-741,共3页
成纤维细胞生长因子9(fibroblast growth factor,FGF9)最初发现于人类神经胶质瘤细胞,是成纤维细胞生长因子家族的成员之一。研究发现FGF9在多种组织的发育及疾病的发生中起重要作用。FGF9与肝素结合活化FGFR3受体,可作用于软骨细胞,在... 成纤维细胞生长因子9(fibroblast growth factor,FGF9)最初发现于人类神经胶质瘤细胞,是成纤维细胞生长因子家族的成员之一。研究发现FGF9在多种组织的发育及疾病的发生中起重要作用。FGF9与肝素结合活化FGFR3受体,可作用于软骨细胞,在骨骼发育及损伤过程中抑制软骨细胞增生和软骨内骨化。FGF9基因缺失或突变可分别导致骨骼发育不良或肿瘤。本文简要综述FGF9与FGFR3受体在骨发育中的作用及其致病机制的研究进展。 展开更多
关键词 fgf9 FGFR3 骨发育 软骨细胞 信号通路
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牛性别决定新基因Fgf9的克隆及生物信息学分析 被引量:3
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作者 廖冰 吴宁 +1 位作者 韩凤桐 林秀坤 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期45-50,共6页
Fgf9基因是脊椎动物性别决定中重要的信号因子,它在睾丸发育过程中参与Sertoli细胞的增殖和睾丸索的形成。基于表达序列标签(expressed sequence tags,ESTs)克隆原理,采用序列拼接和RT-PCR方法获得了荷斯坦奶牛Fgf9基因的cDNA序列,并对... Fgf9基因是脊椎动物性别决定中重要的信号因子,它在睾丸发育过程中参与Sertoli细胞的增殖和睾丸索的形成。基于表达序列标签(expressed sequence tags,ESTs)克隆原理,采用序列拼接和RT-PCR方法获得了荷斯坦奶牛Fgf9基因的cDNA序列,并对其组织表达特征进行分析。利用生物信息学方法对Fgf9基因序列和蛋白结构进行分析。结果显示:Fgf9基因定位于牛12号染色体上,cDNA全长为697bp,开放阅读框为627bp,编码208个氨基酸,分子量23.38245kDa,等电点7.0600。RT-PCR证实该开放阅读框正确,在牛的各组织中均有表达,且与牛其他cDNA无同源性,获得GenBank登陆号为:EU693028。功能结构分析显示Fgf9蛋白具有典型的FGF家族保守结构域,包括受体相互作用位点和肝素结合位点。信号肽预测显示牛Fgf9蛋白可能不存在信号肽序列。 展开更多
关键词 Fej9 性别决定 基因克隆 生物信息学
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miR-369-3p靶向FGF9信号通路调控肝癌细胞增殖与侵袭 被引量:1
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作者 李江斌 何丽 +2 位作者 董瑞 徐岩 鲁建国 《现代生物医学进展》 CAS 2020年第9期1601-1608,共8页
目的:阐明脂代谢相关mi R-369-3p在肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)病理组织中的表达特征及其与临床预后的相关性,解析mi R-369-3p在HCC细胞中的作用性质及相应分子机理。方法:实时定量PCR法检测mi R-369-3p在HCC病理组织和细胞中... 目的:阐明脂代谢相关mi R-369-3p在肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)病理组织中的表达特征及其与临床预后的相关性,解析mi R-369-3p在HCC细胞中的作用性质及相应分子机理。方法:实时定量PCR法检测mi R-369-3p在HCC病理组织和细胞中的表达变化,并通过Spearman’s法分析mi R-369-3p表达水平与临床病理资料相关性;CCK-8检测、Transwell穿透小室实验和裸鼠荷瘤实验检测敲低内源性mi R-369-3p表达后对HCC细胞增殖和侵袭性的影响作用;利用生物信息学分析、瞬时转染、定点突变和荧光素酶报告基因活性检测分析mi R-369-3p对纤维母细胞生长因子9(fibroblast growth factor 9,FGF9)的转录后调控作用。结果:mi R-369-3p在HCC病理组织(n=68)和细胞中异常低表达,且此低表达趋势与HCC患者预后呈显著负相关关系(x^2=6.907,P=0.0086);敲低内源性mi R-369-3p可显著促进HCC细胞的增殖、侵袭性;参与调控这一抑瘤效应的关键分子机制可能是miR-369-3p与FGF9的3’-UTR区直接结合,在转录后水平抑制FGF9 m RNA的稳定性,进而抑制后者表达水平。结论:miR-369-3p可通过靶向FGF9信号在转录后调控水平负性调控肝癌细胞增殖和侵袭过程,在肝癌发生和进展过程中发挥关键抑癌作用。 展开更多
关键词 肝癌 miR-369-3p 增殖 侵袭 纤维母细胞生长因子9 转录后调控
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人类遗传病致病基因克隆及其生物学功能研究进展
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作者 王铸钢 顾鸣敏 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1171-1174,共4页
近20年来,遗传病致病基因克隆及其生物学功能研究取得了快速发展。然而,仍有许多突变基因的致病机制仍未明确。该文简要介绍了遗传病的基本特征,综述了遗传病致病基因克隆和机制研究的进展,并介绍了遗传病基因功能研究的2项进展,其中之... 近20年来,遗传病致病基因克隆及其生物学功能研究取得了快速发展。然而,仍有许多突变基因的致病机制仍未明确。该文简要介绍了遗传病的基本特征,综述了遗传病致病基因克隆和机制研究的进展,并介绍了遗传病基因功能研究的2项进展,其中之一是成纤维细胞生长因子9(FGF9)的错义突变(S99N)导致多发性骨性连接综合征;另一个例子是Palladin敲除小鼠出现神经管闭合不全,伴有内脏外露、胎肝萎缩及胚胎造血功能障碍,最后导致胚胎死亡。 展开更多
关键词 遗传病 致病基因 发病机制 fgf9基因 多发性骨性连接综合征 Palladin基因 神经管闭合不全
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成纤维细胞生长因子9在抑郁症及其运动干预调节中的作用 被引量:2
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作者 夏杰 刘微娜 漆正堂 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期591-598,共8页
成纤维细胞生长因子9(fibroblast growth factor 9,FGF9)是成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)家族成员之一,属于一种自分泌或旁分泌生长因子。在脑组织中,FGF9主要表达于海马和皮质区,具有促进细胞增殖和维持细胞存活... 成纤维细胞生长因子9(fibroblast growth factor 9,FGF9)是成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)家族成员之一,属于一种自分泌或旁分泌生长因子。在脑组织中,FGF9主要表达于海马和皮质区,具有促进细胞增殖和维持细胞存活的功能。研究发现,FGF家族在抑郁症患者的多个脑区出现表达紊乱,FGF9在抑郁行为中扮演着负调控角色,但其介导抑郁行为的分子机制尚不清楚。本文综述了FGF9及其家族成员在抑郁中的作用;围绕其受体(FGFR)信号在中枢神经系统中的功能特点,深入分析FGF9调节抑郁行为中的作用机制;结合运动抗抑郁的神经营养假说,提出经由FGFR/GSK3β/β-catenin通路的FGF信号,可能介导抑郁症的运动干预机制的假设。这些将为FGF9介导抑郁行为和运动抗抑郁的有关研究提供理论的基础和探索的思路。 展开更多
关键词 抑郁 运动 成纤维细胞生长因子9 FGFR/GSK3β/β-catenin通路
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山药多糖对大鼠急性心肌梗死后心肌细胞凋亡的抑制作用及其机制 被引量:9
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作者 王静 洪炳哲 +2 位作者 张习敬 葛鲁敏 任海勤 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2020年第8期1707-1711,共5页
目的探讨山药多糖(CYPS)对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及其机制。方法大鼠心肌细胞随机分为空白对照(NC)组、缺氧/复氧(H/R)组、H/R+75 mg/L CYPS组、H/R+150 mg/L CYPS组、H/R+300 mg/L CYPS组,噻唑蓝(MTT)法检测心肌细胞存活... 目的探讨山药多糖(CYPS)对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及其机制。方法大鼠心肌细胞随机分为空白对照(NC)组、缺氧/复氧(H/R)组、H/R+75 mg/L CYPS组、H/R+150 mg/L CYPS组、H/R+300 mg/L CYPS组,噻唑蓝(MTT)法检测心肌细胞存活率;流式细胞术检测心肌细胞凋亡率;Western印迹法检测心肌细胞细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Cleaved caspase)-3、成纤维细胞生长因子(FGF)9蛋白表达。比较FGF9过表达及沉默FGF9表达对H/R损伤心肌细胞存活率及凋亡率的影响。观察CYPS不同剂量组及FGF9表达对心肌细胞中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)含量的影响。结果与NC组相比,H/R组心肌细胞存活率显著降低(P<0.05),CDK4蛋白水平及GSH-Px、SOD含量显著降低(P<0.05),而细胞凋亡率与Cleaved caspase-3蛋白水平显著升高(P<0.05);与H/R组相比,CYPS不同剂量组心肌细胞存活率显著升高(P<0.05),CDK4蛋白水平及GSH-Px、SOD含量显著升高(P<0.05),而细胞凋亡率与Cleaved caspase-3蛋白水平显著降低(P<0.05);CYPS可促进H/R损伤心肌细胞中FGF9表达水平升高(P<0.05);FGF9过表达对H/R损伤心肌细胞具有保护作用;沉默FGF9逆转CYPS对H/R损伤心肌细胞的保护作用。结论CYPS可通过上调FGF9表达对H/R损伤的心肌细胞发挥保护作用,其作用机制可能与抑制心肌细胞凋亡及增强抗氧化能力有关。 展开更多
关键词 山药多糖 成纤维细胞生长因子 心肌细胞 凋亡
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