小鼠IgGFc受体(moFcγRⅡ)稳定表达细胞系的建立及鉴定

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作者 苗现伟 席俊 +6 位作者 刘玺 张改平 邓瑞广 李清州 张利娜 游雷鸣 刘运超 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第2期133-135,共3页

为建立小鼠IgGFc受体(moFcγRⅡ)稳定表达的哺乳动物细胞系,PCR克隆小鼠moFcγRⅡ片段,构建真核表达载体pcDNAmoFcγRⅡ。转染COS-7细胞后通过G418抗性筛选和连续克隆,获得了在COS-7细胞表面稳定表达FcγRⅡ的真核细胞系。玫瑰花环试验... 为建立小鼠IgGFc受体(moFcγRⅡ)稳定表达的哺乳动物细胞系,PCR克隆小鼠moFcγRⅡ片段,构建真核表达载体pcDNAmoFcγRⅡ。转染COS-7细胞后通过G418抗性筛选和连续克隆,获得了在COS-7细胞表面稳定表达FcγRⅡ的真核细胞系。玫瑰花环试验结果显示其阳性率在90%以上。 展开更多

关键词 小鼠IgG受体(fcγrⅡ) 细胞系 玫瑰花环 稳定转染

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吗啡对背根神经节FcγR Ⅰ受体介导神经病理痛的作用及机制

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作者 宋阜彪 梁映霞 类维富 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第3期306-310,共5页

目的:探讨吗啡对背根神经节FcγRⅠ受体介导神经病理痛的作用及机制。方法:60只成年SD大鼠随机均分为模型组(肠线结扎法制作神经病理痛模型)和吗啡组(建神经病理痛模型后给予吗啡注射液干预1周),比较干预前及干预后第3、7及14天时两组... 目的:探讨吗啡对背根神经节FcγRⅠ受体介导神经病理痛的作用及机制。方法:60只成年SD大鼠随机均分为模型组(肠线结扎法制作神经病理痛模型)和吗啡组(建神经病理痛模型后给予吗啡注射液干预1周),比较干预前及干预后第3、7及14天时两组大鼠机械性缩足阈值(MWT)、右后爪热痛潜伏期(TWL),比较干预前及干预后第14天时两组大鼠脊髓组织FcγRⅠmRNA及蛋白表达、背根神经节中生长相关蛋白43(GAP-43)及神经生长因子(NGF)表达。结果:干预前,两组大鼠MWT及TWL数值、脊髓FcγRⅠmRNA及蛋白表达水平、GAP-43及NGF灰度值比较,差异无统计学意义(P> 0. 05);干预后第3、7及14天时吗啡组MWT较模型组同时点显著升高、TWL较同时点模型组显著降低(P <0. 05),干预后第14天时吗啡组FcγRⅠmRNA及蛋白水平较模型组显著降低(P <0. 05)、吗啡组GAP-43、NGF灰度值显著低于模型组,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论:SD大鼠神经病理痛与背根神经节FcγRⅠ受体表达水平上调有关,吗啡可作为神经病理痛的有效镇痛药物,其机制可肯能为抑制背根神经节FcγRⅠ受体、下调背神经根神经节内GAP-43及NGF表达有关。 展开更多

关键词 fcγrⅠ受体 背根神经节 神经病理痛 吗啡 基因表达 生长相关蛋白43 神经生长因子

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FcγR在口腔疾病中的临床意义 被引量：2

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作者 谢玉峰 束蓉 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2004年第2期115-118,共4页

IgGFc功能区的受体 (FcγR)在联系细胞免疫和体液免疫方面有其重要作用。体内多种细胞表面可表达IgGFc受体 ,并通过与免疫复合物的结合参与IgG介导的生理或病理过程 ,调节免疫反应。本文就近年来FcγR的生化特征和在口腔疾病中临床意义... IgGFc功能区的受体 (FcγR)在联系细胞免疫和体液免疫方面有其重要作用。体内多种细胞表面可表达IgGFc受体 ,并通过与免疫复合物的结合参与IgG介导的生理或病理过程 ,调节免疫反应。本文就近年来FcγR的生化特征和在口腔疾病中临床意义的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 IGG fcγ受体(fcγr) 免疫复合物(IC)

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调节Fcγ受体:治疗炎症、自身免疫病及肿瘤的新途径 被引量：1

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作者 崔冬雪 《国际药学研究杂志》 CAS 2007年第4期295-297,300,共4页

正常的免疫系统只对外来抗原发生免疫应答,从而预防机体发生针对自身细胞和自身组织的免疫反应。免疫球蛋白G受体(FcγR)分两种——活化型受体和抑制型受体,它们成对地存在于同一个细胞,在维持免疫反应平衡方面发挥重要作用。FcγR信号... 正常的免疫系统只对外来抗原发生免疫应答,从而预防机体发生针对自身细胞和自身组织的免疫反应。免疫球蛋白G受体(FcγR)分两种——活化型受体和抑制型受体,它们成对地存在于同一个细胞,在维持免疫反应平衡方面发挥重要作用。FcγR信号通路在自身免疫病和肿瘤的发病中发挥了重要作用,因此调节FcγR可能成为治疗上述疾病的新途径。 展开更多

关键词 fcγr受体 免疫球蛋白 自身免疫病 肿瘤 炎症

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IgG Fc受体及其与系统性红斑狼疮发病机制的研究进展

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作者 刘运超 常俊标 +1 位作者 陈玉梅 张改平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1385-1387,共3页

IgG Fc受体(FcγRs)是一类重要的膜表面糖蛋白,是免疫反应的重要调节者,表达于几乎所有的免疫细胞。本文对FcγRs的免疫调节作用及其与系统性红斑狼疮(SLE)等自身免疫性疾病的关系进行综述。

关键词 fc受体(fcγr) 免疫调控 抑制型受体 激活型受体 SLE

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猪FcγRⅠ真核表达载体的构建及稳定表达细胞系的建立

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作者 史平玲 邬成业 +5 位作者 乔松林 张改平 王爱萍 肖治军 祁艳华 卜丹 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期909-914,共6页

本研究旨在建立稳定表达猪FcγRⅠ的Marc-145细胞系。从猪肺泡巨噬细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得猪FcγRⅠ和γ链cDNA,并分别构建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1-FcγRⅠ真核表达质粒;用脂质体共转染Marc-145细胞,经潮霉素B(300μg.mL-1)... 本研究旨在建立稳定表达猪FcγRⅠ的Marc-145细胞系。从猪肺泡巨噬细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得猪FcγRⅠ和γ链cDNA,并分别构建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1-FcγRⅠ真核表达质粒;用脂质体共转染Marc-145细胞,经潮霉素B(300μg.mL-1)和G418(400μg.mL-1)共筛选获得稳定表达猪FcγRⅠ的细胞系;运用RT-PCR、玫瑰花环和流式细胞术对细胞系进行鉴定。结果表明成功构建了猪FcγRⅠ和γ链真核表达载体,建立了稳定表达猪FcγRⅠ的细胞系,且表达于转染细胞表面的poFcγRⅠ受体分子能与猪IgG特异结合。本研究为进一步研究奠定了基础。 展开更多

关键词 猪fcγrⅠ受体 共转染 MArC-145细胞

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猪FcγRⅢ和γ链共转染Marc-145细胞系的建立

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作者 邬成业 史平玲 +5 位作者 乔松林 王爱萍 郝慧芳 杜晓明 王林林 张改平 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2011年第1期6-10,共5页

为了建立稳定表达猪FcγRⅢ(Porcine Fc gamma receptorⅢ,poFcγRⅢ)的Marc-145细胞系,从PAM细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得猪FcγRⅢ和γ链的cDNA,并构建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1-FcγRⅢ真核表达质粒;用脂质体共转染Marc-145细胞... 为了建立稳定表达猪FcγRⅢ(Porcine Fc gamma receptorⅢ,poFcγRⅢ)的Marc-145细胞系,从PAM细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得猪FcγRⅢ和γ链的cDNA,并构建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1-FcγRⅢ真核表达质粒;用脂质体共转染Marc-145细胞,经潮霉素B(300 mg/L)和G418(400 mg/L)共筛选获得稳定表达猪FcγRⅢ的细胞系;运用RT-PCR、玫瑰花环试验和流式细胞术对细胞系进行了鉴定。结果表明,成功构建了猪FcγRⅢ和γ链真核表达载体,建立了稳定表达猪FcγRⅢ的细胞系,表达于转染细胞表面的猪FcγRⅢ受体分子能与猪IgG特异结合。 展开更多

关键词 猪fcγrⅢ受体 γ链 共转染 Marc145细胞

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中和抗体阻断FcγR Ⅰ降低脂多糖诱导的大鼠PC12细胞凋亡 被引量：1

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作者 陈艳杰 梁映霞 张岩 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期746-750,共5页

目的探讨IgG Fc受体Ⅰ(FcγRⅠ)在脂多糖(LPS)诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞凋亡中的作用。方法将PC12细胞接种于培养板中,用(50、125、250、500、1000)μg/mL LPS处理24 h,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率,选取合适的LPS剂量。... 目的探讨IgG Fc受体Ⅰ(FcγRⅠ)在脂多糖(LPS)诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞凋亡中的作用。方法将PC12细胞接种于培养板中,用(50、125、250、500、1000)μg/mL LPS处理24 h,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率,选取合适的LPS剂量。待细胞处于对数生长期,采用随机数字表法分为空白对照组:不进行任何处理,继续培养24 h;LPS组:培养液中加入500μg/mL LPS,孵育24 h;LPS联合FcγRⅠ中和抗体组:培养液中加入500μg/mL LPS和0.2μg/mL FcγRⅠ中和抗体,孵育24 h。处理结束后,实时荧光定量PCR和Western blot法检测各组FcγRⅠmRNA和蛋白含量,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)染色结合流式细胞术检测细胞凋亡,采用免疫组织化学染色法检测各组细胞caspase-3、Bcl-2和BAX的蛋白水平。结果随着LPS剂量的增加,PC12细胞的活力逐渐下降;与对照组相比,LPS处理组FcγRⅠmRNA和蛋白水平增加,caspase-3、Bcl-2和BAX蛋白水平增加,细胞凋亡率增加;与LPS组相比,LPS联合FcγRⅠ中和抗体组FcγRⅠmRNA和蛋白水平降低,caspase-3、BAX蛋白水平显著降低,细胞凋亡率降低,Bcl-2蛋白水平增加。结论FcγRⅠ参与LPS诱导的PC12细胞凋亡。 展开更多

关键词 IGG fc受体Ⅰ(fcγr Ⅰ) 脂多糖 PC12细胞 细胞凋亡

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Fc-gammaⅠ型受体在阿尔茨海默病患者和模型小鼠脑皮质的表达

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作者 孙健茹 仇文颖 +1 位作者 钱晓菁 马超 《基础医学与临床》 2022年第5期740-744,共5页

目的探讨高亲和力IgG受体Fc-gammaⅠ型(FcγRⅠ)在阿尔茨海默病(AD)脑皮层的表达变化。方法选用正常人脑组织样本和神经病理诊断为AD患者脑组织样本,6月龄野生型小鼠和APP/PS1小鼠。免疫荧光和免疫蛋白印迹检测脑皮层FcγRⅠ的细胞定位... 目的探讨高亲和力IgG受体Fc-gammaⅠ型(FcγRⅠ)在阿尔茨海默病(AD)脑皮层的表达变化。方法选用正常人脑组织样本和神经病理诊断为AD患者脑组织样本,6月龄野生型小鼠和APP/PS1小鼠。免疫荧光和免疫蛋白印迹检测脑皮层FcγRⅠ的细胞定位和表达。结果人和小鼠脑皮层的神经元均普遍表达FcγRⅠ。与健康人脑相比,AD患者脑皮层的FcγRⅠ表达显著降低(P<0.05)。与野生型小鼠脑相比,AD模型小鼠脑皮层的FcγRⅠ表达也呈现出显著降低(P<0.05)。结论IgG高亲和力受体FcγRⅠ在AD患者脑和AD模型小鼠脑皮层的表达显著下降,可能与AD的神经病理机制相关。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病(AD) 神经元 免疫球蛋白G(IgG) fc-gammaⅠ型受体(fcγrⅠ)

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鸡Igλ轻链绿色荧光蛋白融合分子在COS7细胞膜的表达

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作者 张红 宋海涛 +5 位作者 张改平 邢广旭 赵东 杨继飞 柴书军 郝青梅 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2006年第11期102-104,109,共4页

将牛IgG Fc受体γRⅡ的跨膜区序列嵌合入鸡Igλ轻链基因中,并将鸡Igλ轻链信号肽与Pegfp-C1载体的绿色荧光蛋白N端融合产生带有信号肽的中间载体Pegfp-C1-SP。鸡Igλ轻链基因嵌合分子定向克隆入载体的多克隆位点,构建了带有信号肽的鸡I... 将牛IgG Fc受体γRⅡ的跨膜区序列嵌合入鸡Igλ轻链基因中,并将鸡Igλ轻链信号肽与Pegfp-C1载体的绿色荧光蛋白N端融合产生带有信号肽的中间载体Pegfp-C1-SP。鸡Igλ轻链基因嵌合分子定向克隆入载体的多克隆位点,构建了带有信号肽的鸡Igλ轻链/GFP融合蛋白真核表达载体。转染COS7细胞后,荧光显微镜观察,重组鸡Igλ轻链/GFP蛋白在COS7细胞膜及膜周围有明显表达,而载体pEGFP-C1转染的COS7细胞GFP则分布在细胞及细胞核。结果表明,牛IgG Fc受体γRⅡ的跨膜区能介导融合蛋白在细胞膜上的表达。 展开更多

关键词 鸡Igγ轻链 牛IgG fc受体γr Ⅱ跨膜区 COS7细胞 GFP融合蛋白

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电化学发光免疫分析法在评价治疗性单抗与FcγRⅠ结合活性中的应用 被引量：3

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作者 徐刚领 郭莎 +3 位作者 张峰 于传飞 王文波 王兰 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期39-44,共6页

目的:建立电化学发光免疫分析(electrochemiluminescence immunoassay,ECLI)测定贝伐珠单抗与免疫球蛋白G Fc段受体Ⅰ(FcγRⅠ)结合活性的方法,并评价贝伐珠单抗生物类似药(similar biotherapeutic products,SBP)候选物和其原研药(refer... 目的:建立电化学发光免疫分析(electrochemiluminescence immunoassay,ECLI)测定贝伐珠单抗与免疫球蛋白G Fc段受体Ⅰ(FcγRⅠ)结合活性的方法,并评价贝伐珠单抗生物类似药(similar biotherapeutic products,SBP)候选物和其原研药(reference biotherapeutic product,RBP)与FcγRⅠ结合活性的相似性。方法:先使用封闭液对链霉亲和素(streptavidin,SA)预包被的96孔MSD板进行封闭,再将生物素(biotin)标记的FcγRⅠ与之结合,之后加入不同稀释倍数的贝伐珠单抗,最后加入SULFO-TAG(Ru(bpy)_3^(2+))标记的羊抗人检测抗体上机读数。按照试验设计分别对FcγRⅠ浓度、单抗样品初始浓度、倍比稀释倍数、检测抗体浓度等试验参数进行优化,并对优化后方法的准确性和精密性进行初步验证,还将建立的方法用于评价贝伐珠单抗SBP候选药和RBP与FcγRⅠ结合活性的相似性。结果:采用优化后的方法检测,贝伐珠单抗与FcγRⅠ的结合呈现良好的剂量效应曲线,R^2>0.99。该方法具有较好的准确性和精密性,靶值为50%～150%样品的回收率在95.2%～103.7%之间;RSD均小于10%。贝伐珠单抗SBP候选药与FcγRⅠ的相对结合活性均在为RBP相对结合活性均值±3SD之间。结论:电化学发光免疫分析法能够用于评价抗体与FcγRⅠ的结合活性,并可应用于对SBP候选药和RBP与FcγRⅠ结合活性的相似性分析。该方法的灵敏度和准确性较好,为评价抗体与FcγRⅠ的结合提供了新的技术手段。 展开更多

关键词 单克隆抗体 贝伐珠单抗 免疫球蛋白G fc段受体Ⅰ(fcγrⅠ) 电化学发光免疫分析(ECLI) 结合活性

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HLA-B27异常表达在免疫相关性血细胞减少疾病中的临床意义及相关机制研究 被引量：6

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作者 吴强强 孙黎飞 +3 位作者 韩冰 李钢 马向杉 郝红峰 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期499-502,506,共5页

目的观察免疫相关性血细胞减少(immunorelated hematocytopenia,IRH)和免疫相关性全血细胞减少(immunorelated pancytopenia,IRP)患者HLA-B27群体表达情况,分析HLA-B27检测分型对该类疾病诊疗的临床意义。方法①ELISA方法检测患者血清HL... 目的观察免疫相关性血细胞减少(immunorelated hematocytopenia,IRH)和免疫相关性全血细胞减少(immunorelated pancytopenia,IRP)患者HLA-B27群体表达情况,分析HLA-B27检测分型对该类疾病诊疗的临床意义。方法①ELISA方法检测患者血清HLA-B27抗原、IL-12、IL-17和IFN-γ水平。②细胞免疫化学(immunochemistry,IC)染色观察骨髓中抗原递呈细胞(APC)HLA-DR表达情况。③原位免疫荧光(immunofluorescence,IF)染色,观察患者骨髓造血细胞表面抗人球蛋白IgG、FcγⅡR、甘露糖受体(MR)、IL-12和IL-17A表达情况。④根据HLA-B27和血沉等检测指标对IRH/IRP分型选择治疗方案。结果①106例IRH/IRP中45例(42.45%)血清HLA-B27显著升高(70.03±8.21)pmol/L,对照组仅2例(6.0%),P<0.01。②HLA-B27+组血清IL-17和IFN-γ血清质量浓度分别为(50.26±3.67)pg/ml和(42.95±3.64)pg/ml,显著高于HLA-B27-组(36.11±2.17)pg/ml和(28.875±5.81)pg/ml,P值均<0.05。③IRH/IRP患者骨髓中树突状细胞(DC)和巨噬细胞(Mφ)捕获和吞噬血细胞现象活跃,活化的DC与Mφ高表达HLA-DR抗原,HLA-B27+组骨髓中可见到淋巴细胞攻击造血细胞现象;粒细胞减少的患者骨髓中嗜酸性粒细胞攻击粒细胞现象多见。④IRH/IRP患者骨髓中部分造血细胞表面表达抗人IgG,DC和Mφ表达MR、IL-12和IL-17A,并介导对病变造血细胞的捕获和吞噬和炎性损伤。⑤在伴有IgG和ESR升高的患者骨髓中活化的Mφ高表达FcγRⅡ受体,发挥ADCC效应介导对病变造血细胞的损伤。结论 IRH/IRP是一类涉及细胞免疫和体液免疫多个环节,主要累及骨髓造血细胞且具有基因易感性的免疫相关性血细胞减少性疾病。部分患者发病与HLA-B27基因活化状态有一定关联,HLA-B27+伴体液免疫指标活化者病情更重。HLA-B27检测对疾病的评估、治疗和预后有着重要的临床意义。 展开更多

关键词 免疫相关性血细胞减少 HLA-B27 抗人球蛋白抗体 IL-17 fcγrⅡ受体

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