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辽宁沈阳株猫泛白细胞减少症病毒VP2基因扩增及生物信息学分析
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作者 刘琪 刘正伟 +4 位作者 梁琳 张利 郝春晖 李玥 赵福庆 《中国畜牧兽医》 CSCD 北大核心 2024年第1期23-32,共10页
【目的】通过生物信息学方法分析1株2022年辽宁沈阳地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus, FPV)LN3株VP2蛋白的分子特征。【方法】利用FPV胶体金试纸条对临床上表现呕吐、腹泻等症状的患病猫粪便进行检测,提取该病猫粪... 【目的】通过生物信息学方法分析1株2022年辽宁沈阳地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus, FPV)LN3株VP2蛋白的分子特征。【方法】利用FPV胶体金试纸条对临床上表现呕吐、腹泻等症状的患病猫粪便进行检测,提取该病猫粪便的病毒DNA进行FPV VP2基因PCR扩增及测序,使用Seqman软件对序列进行拼接。将所获序列与NCBI数据库中FPV和犬细小病毒(Canine parvovirus, CPV)的VP2基因进行相似性比对及遗传进化分析。使用生物信息学软件对该毒株VP2蛋白进行预测,包括理化性质、亲/疏水性、跨膜区、糖基化位点、亚细胞定位、二级结构、三级结构等。【结果】FPV LN3株VP2基因全长1 755 bp,编码584个氨基酸;与GenBank上登录的15株FPV同属一个大分支,相似性为98.9%~99.7%;与CPV处于不同分支上。生物信息学软件预测显示,FPV LN3株VP2蛋白为亲水性蛋白,无跨膜结构;含有7个潜在N-糖基化位点、86个O-糖基化位点和50个磷酸化位点;VP2蛋白在细胞质、细胞核、线粒体中的可能性分别为43.5%、34.8%和21.7%;VP2蛋白二级结构中无规则卷曲、α-螺旋、延伸链、β-转角分别占61.82%、8.90%、24.32%及4.97%,三级结构预测结果与其一致;VP2蛋白共有20个抗原表位。【结论】VP2是FPV遗传变异的关键基因,FPV LN3株VP2蛋白属于亲水性、非跨膜稳定蛋白,共存在20个抗原表位。试验结果为进一步研究FPV VP2蛋白功能及研发新型疫苗提供理论依据。 展开更多
关键词 猫泛白细胞减少症病毒 VP2基因 生物信息学 蛋白结构
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The Comparison of Genetic Variation in the Envelope Protein Between Various Immunodeficiency Viruses and Equine Infectious Anemia Virus 被引量:3
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作者 Qing Yuan Chang Liu +3 位作者 Zhipin Liang Xueqing Chen Danhong Diao Xiaohong Kong 《Virologica Sinica》 CAS CSCD 2012年第4期241-247,共7页
The envelope protein(Env) of lentiviruses such as HIV,SIV,FIV and EIAV is larger than that of other retroviruses.The Chinese EIAV attenuated vaccine is based on Env and has helped to successfully control this virus,de... The envelope protein(Env) of lentiviruses such as HIV,SIV,FIV and EIAV is larger than that of other retroviruses.The Chinese EIAV attenuated vaccine is based on Env and has helped to successfully control this virus,demonstrating that envelope is crucial for vaccine.We compared Env variation of the four kinds of lentiviruses.Phylogenetic analysis showed that the evolutionary relationship of Env between HIV and SIV was the closest and they appeared to descend from a common ancestor,and the relationship of HIV and EIAV was the furthest.EIAV had the shortest Env length and the least number of potential N-linked glycosylation sites(PNGS) as well as glycosylation density compared to various immunodeficiency viruses.However,HIV had the longest Env length and the most PNGS.Moreover,the alignment of HIV and SIV showed that PNGS were primarily distributed within extracellular membrane protein gp120 rather than transmembrane gp41.It implies that the size difference among these viruses is associated with a lentivirus specific function and also the diversity of env.There are low levels of modification of glycosylation sites of Env and selection of optimal protective epitopes might be useful for development of an effective vaccine against HIV/AIDS. 展开更多
关键词 马传染性贫血病毒 包膜蛋白 免疫缺陷病毒 遗传变异 环境保护 艾滋病毒 EIAV 弱毒疫苗
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猫传染性腹膜炎病毒的检测及ORF 7 ab、N和S基因遗传进化分析
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作者 高雅 黄金田 +5 位作者 冯心如 付胜 高娃 王文龙 丁玉林 王金玲 《动物医学进展》 北大核心 2023年第12期60-65,共6页
采用剖检、组织病理学和免疫组织化学的方法检测并确诊了2例猫传染性腹膜炎(FIP)病例,并通过RT-PCR扩增2例组织样品中猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)的ORF 7 ab、N和S基因,测序后进行基因遗传进化分析,阐明病毒的遗传进化特征。结果显示,2个... 采用剖检、组织病理学和免疫组织化学的方法检测并确诊了2例猫传染性腹膜炎(FIP)病例,并通过RT-PCR扩增2例组织样品中猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)的ORF 7 ab、N和S基因,测序后进行基因遗传进化分析,阐明病毒的遗传进化特征。结果显示,2个病例均表现典型的混合型FIP的大体病变,腹腔积满浆液纤维素性渗出物,在腹腔浆膜面散在或弥漫分布细小的灰白色结节。组织病理学显示腹膜表面上附着大小不等的炎性细胞浸润灶,以及坏死性肠炎、间质性胰腺炎和间质性肺炎。免疫组织化学染色结果显示,FPIV特异性的强阳性信号见于炎性细胞浸润灶、脾脏和胰腺内。基因同源性和遗传进化分析结果显示,2例基因均属于FCoVⅠ型。IMAU No.11685与浙江杭州ZJU1709毒株(MT239440)同源性最高,亲缘关系最近;IMAU No.11824与湖北武汉QS毒株(MW030108)同源性最高,亲缘关系最近。说明2例FIPV与国内流行毒株起源于共同祖先,其中ORF 7 ab、N基因相对保守,变异不明显,S基因发生一定的变异。研究结果可为我国FIP的分子流行病学研究和防控提供参考。 展开更多
关键词 猫传染性腹膜炎 猫传染性腹膜炎病毒 免疫组织化学 遗传进化
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猫传染性腹膜炎病毒实时荧光定量PCR方法的建立与应用
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作者 刘妍 黄金龙 +6 位作者 杜吉革 朱真 陈小云 王团结 罗玉峰 孙卫东 印春生 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1095-1101,共7页
为建立一种高效准确检测猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)的实时荧光定量PCR方法,以FIPV N基因为靶基因设计特异性探针和引物,构建质粒标准品。通过优化反应条件,建立real-time PCR方法,并进行临床检测。经方法优化,所建立方法的标准曲线为y=-3... 为建立一种高效准确检测猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)的实时荧光定量PCR方法,以FIPV N基因为靶基因设计特异性探针和引物,构建质粒标准品。通过优化反应条件,建立real-time PCR方法,并进行临床检测。经方法优化,所建立方法的标准曲线为y=-3.137x+42.243,R^(2)值为0.999,扩增效率E为108.0%。该方法与猫瘟病毒(FPV)、猫疱疹病毒(FHV)和猫杯状病毒(FCV)无交叉反应,特异性良好;检测最低拷贝数为9.250 copies/μL,比常规PCR方法高出100倍;组内、组间变异系数均小于5.0%,重复性好。采用建立的方法和EvaGreen real-time PCR方法对39份临床样品进行检测,结果,检出阳性样品数分别为24和22,经Kappa检验,两者高度一致。上述结果表明,本研究成功建立了高效、敏感、特异的实时荧光定量PCR方法,可用于FIPV的临床病例检测。 展开更多
关键词 猫传染性腹膜炎病毒 实时荧光定量PCR 鉴别诊断
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猫细小病毒洛阳分离株VP2蛋白原核表达及多克隆抗体制备 被引量:1
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作者 王文婕 茹鹏辉 +5 位作者 郁川 杜付熙 陈松彪 尚珂 张春杰 程相朝 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1511-1521,共11页
【目的】研究旨在对猫细小病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)洛阳分离株VP2蛋白进行原核表达和鼠源多克隆抗体制备。【方法】根据已公布的FPV VP 2基因序列(GenBank登录号:EU018143.1)设计1对特异性引物,以洛阳地区7例疑似FPV感染... 【目的】研究旨在对猫细小病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)洛阳分离株VP2蛋白进行原核表达和鼠源多克隆抗体制备。【方法】根据已公布的FPV VP 2基因序列(GenBank登录号:EU018143.1)设计1对特异性引物,以洛阳地区7例疑似FPV感染猫粪便为样本提取DNA,对VP 2基因进行PCR鉴定及测序,利用Mega 11.0软件对VP 2基因进行遗传进化分析;应用在线软件预测分离株VP2蛋白结构特征并找出优势抗原表位,克隆VP2优势抗原(sVP2)并连接pET-32a(+)载体,构建pET-32a-sVP2重组质粒,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞后进行诱导表达,对重组蛋白表达条件进行优化,并使用SDS-PAGE与Western blotting方法进行鉴定;将pET-32a-sVP2用镍柱亲和层析蛋白纯化后免疫BABL/c小鼠,制备多克隆抗体,采用ELISA法检测抗体效价。【结果】分离得到1株FPV,命名为LY-1。遗传进化分析发现,该毒株属于FPV-G2亚群,与北京株(GenBank登录号:MT270581)亲缘关系最近。生物信息学分析显示,VP2属于稳定膜内蛋白,无信号肽与跨膜区,在N-端具有丰富的B细胞抗原表位(1―800 bp,sVP2)。试验成功构建pET-32a-sVP2重组质粒并表达,SDS-PAGE显示重组蛋白分子质量约50 ku,主要以包涵体形式存在,在30℃、1 mmol/L IPTG诱导6 h蛋白表达量最佳;Western blotting结果表明,重组蛋白能与鼠抗His单克隆抗体发生特异性反应;ELISA结果表明,该重组蛋白抗体效价为1∶128000,能够较好地识别免疫原sVP2和原核表达VP2蛋白并发生特异性反应。【结论】本试验克隆获得FPV sVP2片段,并制备多克隆抗体,为进一步研究VP2在FPV复制和致病过程中的作用及建立诊断FPV方法提供参考。 展开更多
关键词 猫细小病毒(FPV) 洛阳分离株 VP 2基因 原核表达 多克隆抗体
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表达猫瘟病毒VP2蛋白重组减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-VP2)构建及特性研究
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作者 王文婕 杜付熙 +9 位作者 郁川 尚珂 余祖华 李静 贾艳艳 廖成水 丁轲 张春杰 程相朝 陈松彪 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期189-197,共9页
为构建稳定表达猫瘟病毒(FPV)免疫原性蛋白VP2减毒鼠伤寒沙门菌重组菌株,以洛阳分离株基因组为模板扩增VP2基因,并克隆至原核表达载体pYA3493,然后电转化至减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔcrpΔasd,构建重组菌株SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-VP2)... 为构建稳定表达猫瘟病毒(FPV)免疫原性蛋白VP2减毒鼠伤寒沙门菌重组菌株,以洛阳分离株基因组为模板扩增VP2基因,并克隆至原核表达载体pYA3493,然后电转化至减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔcrpΔasd,构建重组菌株SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-VP2),并对其表型及生长特性、遗传稳定性、生物被膜、运动性以及毒力等进行分析。结果显示,携带FPVVP2基因重组减毒沙门菌SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-VP2)重组菌构建成功并表达出外源蛋白;SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-VP2)的生化、生长特性与空载体互补菌SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493)相似,较亲本菌株SL1344失去了利用麦芽糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇等碳源能力,生长速度、运动性、生物膜形成能力相较亲本株SL1344均发生了显著降低,但小鼠LD50较亲本株提高126倍。结果表明,成功构建了稳定携带FPV VP2蛋白新型减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-VP2),该重组菌能够有效递呈所携带外源基因并稳定表达,为进一步预防FPV感染和新型疫苗研发提供理论依据。 展开更多
关键词 猫瘟病毒 VP2 减毒鼠伤寒沙门菌 特性
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猫泛白细胞减少症病毒的分离鉴定及其结构蛋白VP2可溶性表达的调控
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作者 刘丽春 徐国伟 +9 位作者 茹毅 李亚军 杨明星 梁超 刘晓飞 张世栋 李建喜 王学智 孙研 周雨霞 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期706-714,共9页
为了研究猫泛白细胞减少症病毒(FPV)的生物学特性,可溶性表达FPV结构蛋白,研发基于VP2的新型亚单位疫苗,采集40份疑似FPV阳性的中华田园猫粪便样本,通过qPCR对样本检测后利用细胞培养、血凝试验、PCR和电镜观察等试验鉴定分离株,并对其... 为了研究猫泛白细胞减少症病毒(FPV)的生物学特性,可溶性表达FPV结构蛋白,研发基于VP2的新型亚单位疫苗,采集40份疑似FPV阳性的中华田园猫粪便样本,通过qPCR对样本检测后利用细胞培养、血凝试验、PCR和电镜观察等试验鉴定分离株,并对其VP2基因进行同源性比对。同时,构建pET-28a-VP2、pET-28a-SUMO-VP2和pET-22a-SUMO-VP2重组质粒并利用大肠杆菌进行表达。结果显示,成功分离出1株FPV毒株;生物信息学分析表明,该毒株的VP2基因与此前报道的毒株同源性高达99%。蛋白表达结果显示,单独使用SUMO标签对VP2蛋白的可溶性表达影响较低;然而,当带有SUMO标签的重组质粒与4个分子伴侣(pG-KJE8、pGro7、pKJE7、pTf16)分别共表达时,可溶性VP2的表达量可显著提高。该研究可为FPV亚单位疫苗研发提供数据和有效的生物材料。 展开更多
关键词 猫泛白细胞减少症病毒 中华田园猫 SUMO标签 分子伴侣 亚单位疫苗
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F81细胞无血清悬浮驯化后培养猫泛白细胞减少症病毒的研究
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作者 张久鑫 邵宝顺 +6 位作者 朱辉 贾浩苒 梁琳 汤新明 崔尚金 梁瑞英 王龙涛 《动物医学进展》 北大核心 2023年第1期48-53,共6页
为解决国内猫泛白细胞减少症生物制品短缺的问题,筛选出适用于猫泛白细胞减少症病毒增殖的猫肾细胞系(F81),通过对贴壁F81进行降血清悬浮驯化培养,得到了无血清全悬浮培养F81细胞系。研究建立的F81细胞系在初始传代细胞密度为1×10^... 为解决国内猫泛白细胞减少症生物制品短缺的问题,筛选出适用于猫泛白细胞减少症病毒增殖的猫肾细胞系(F81),通过对贴壁F81进行降血清悬浮驯化培养,得到了无血清全悬浮培养F81细胞系。研究建立的F81细胞系在初始传代细胞密度为1×10^(6)cells/mL时,培养48 h后细胞密度可达到7.02×10^(6)cells/mL。对培养猫泛白细胞减少症病毒工艺进行摸索,确定最佳接毒工艺为同步接毒法,初始接毒细胞密度为1×10^(6)cells/mL、MOI为3.5×10^(-2),培养72 h后收毒,病毒滴度可达到10^(7.25)TCID_(50)/0.1 mL。该方法使用同源细胞系且未添加动物血清,为猫泛白细胞减少症生物制品生产降低了下游生产纯化难度,同时降低了生产成本,可显著提高产品核心竞争力。研究结果可为其他猫用生物制品相关研究提供参考。 展开更多
关键词 F81细胞 细胞驯化 无血清悬浮培养 猫泛白细胞减少症病毒
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猫泛白细胞减少症病毒研究进展
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作者 刘昱欣 李卓宸 +2 位作者 吕爽 吕文雪 赵传芳 《特产研究》 2023年第5期147-153,共7页
猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPLV),又称为猫瘟病毒、猫细小病毒(Feline parvovirus,FPV)或猫传染性肠炎病毒,具有很强的传播性,变异快,分布广,会导致猫科和部分其他科的动物突然发病并且精神沉郁、体温上升、出... 猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPLV),又称为猫瘟病毒、猫细小病毒(Feline parvovirus,FPV)或猫传染性肠炎病毒,具有很强的传播性,变异快,分布广,会导致猫科和部分其他科的动物突然发病并且精神沉郁、体温上升、出血性肠炎、腹泻、呕吐、白细胞显著减少等。各年龄的猫都能感染猫细小病毒,其中幼龄猫最为易感。猫瘟可以发生在各个季节,其中秋冬季节更常见。该病会造成猫养殖行业的严重经济损失。近年来,由于猫细小病毒导致严重疫情的相关报道越来越多,猫细小病毒也越发引起大家的关注。本文从病原学特征、流行病学、临床特征、病理特征、临床检测方法、治疗和预防等方面对FPV进行了综述,以期为猫泛白细胞减少症病毒疫苗的研制提供理论基础。 展开更多
关键词 猫泛白细胞减少症病毒 病原学 流行病学 检测
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北京地区猫泛白细胞减少症病毒VP2基因的遗传进化分析
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作者 董悦欣 张启龙 +6 位作者 程敏姮 王林 栗云鹏 傅彩霞 张永红 崔德凤 张玮 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第9期76-82,共7页
猫泛白细胞减少症病毒(FPV)对猫科动物危害较大,病毒VP2基因在决定其抗原性和宿主范围中起重要作用。为了解FPV的流行状况及其VP2基因遗传变异和进化方向,本研究对北京地区宠物医院疑似感染FPV的猫采样,共采集到16份粪便样品;对FPV VP2... 猫泛白细胞减少症病毒(FPV)对猫科动物危害较大,病毒VP2基因在决定其抗原性和宿主范围中起重要作用。为了解FPV的流行状况及其VP2基因遗传变异和进化方向,本研究对北京地区宠物医院疑似感染FPV的猫采样,共采集到16份粪便样品;对FPV VP2基因进行PCR扩增和测序,得到12条长度1755 bp的VP2序列;利用软件将获得的VP2基因序列与国内外报道的流行株进行同源性比对、遗传进化分析,结果显示,12条VP2序列均属于G1基因群,与参考株M38246相比亲缘关系较远。本研究为北京地区猫泛白细胞减少症的有效防控提供理论依据。 展开更多
关键词 猫泛白细胞减少症 VP2基因 遗传进化
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猫泛白细胞减少症病毒、猫杯状病毒和猫疱疹病毒1型三重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用
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作者 陈林文 冀伟 +5 位作者 曹龙龙 王莹 李秋燕 曹胜波 陈清秀 周登元 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1141-1147,1198,共8页
为建立一种能够快速检测猫泛白细胞减少症病毒(FPV)、猫杯状病毒(FCV)和猫疱疹病毒1型(FHV-1)的三重荧光定量RT-PCR方法,本研究根据FPV VP2基因、FCV ORF2基因和FHV-1 TK基因分别设计引物与探针,采用上述引物经PCR分别扩增上述3种病原... 为建立一种能够快速检测猫泛白细胞减少症病毒(FPV)、猫杯状病毒(FCV)和猫疱疹病毒1型(FHV-1)的三重荧光定量RT-PCR方法,本研究根据FPV VP2基因、FCV ORF2基因和FHV-1 TK基因分别设计引物与探针,采用上述引物经PCR分别扩增上述3种病原的目的基因并克隆至pMD18-T载体中,构建重组质粒标准品pMD18-T-FPV、pMD18-T-FCV和pMD18-T-FHV-1,并均经PCR和测序鉴定。将3种重组质粒标准品稀释到同一浓度1×10^(8)拷贝/μL,按体积比1∶1∶1混合后作为模板,采用方阵法优化各反应条件后,建立了检测上述病原的三重TaqMan荧光定量RT-PCR方法。以FPV、FCV、FHV-1、猫博卡病毒、猫冠状病毒、猫支原体、猫白血病病毒、猫星状病毒的基因组为模板采用本研究建立的方法检测,评估该方法的特异性,结果显示,该方法仅能检测到FPV、FCV、FHV-1,而其他病原的检测结果均为阴性。选取1×10^(0)拷贝/μL~1×10^(6)拷贝/μL的混合质粒标准品和10^(-0.5) TCID_(50)/mL~10^(5.5) TCID_(50)/mL的混合病毒液分别作为模板,采用本研究建立的方法检测,评估该方法检测重组质粒和病毒的敏感性,结果显示,该方法对重组质粒标准品pMD18-T-FPV、pMD18-T-FCV和pMD18-T-FHV-1的检测限均为1.0×10^(1)拷贝/μL,对3种病毒的检测限均约为10^(0.5) TCID_(50)/mL;以1×10^(7)拷贝/μL、1×10^(5)拷贝/μL、1×10^(3)拷贝/μL质粒标准品混合物作为模板分别进行组内和组间的重复性试验,结果显示,组内和组间重复性试验的变异系数(CV)均低于3%。利用建立的该三重荧光定量RT-PCR和常规PCR对81份临床样品(77份猫的眼、鼻、咽、肛混合拭子样品和4份组织病料样品)分别检测,结果显示三重荧光定量RT-PCR检测出47份FPV、13份FCV和13份FHV-1阳性样品,而常规PCR分别检测出39份FPV、9份FCV和6份FHV-1阳性样品,该三重荧光定量RT-PCR与FPV、FCV、FHV-1常规PCR的总符合率分别为90.12%、95.06%、92.59%。本研究建立的三重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,为FPV、FCV、FHV-1临床样品的快速鉴别检测提供了有力技术支持。 展开更多
关键词 猫泛白细胞减少症病毒 猫杯状病毒 猫疱疹病毒1型 三重荧光定量RT-PCR
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猫泛白细胞减少症病毒YB-1株的分离鉴定及其与疫苗株的差异性分析
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作者 胡春意 薛皓文 +5 位作者 谢佳良 宋彦昊 祝昆儒 马浩原 付兢锋 高旭 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期649-653,共5页
为了解我国吉林省猫泛白细胞减少症病毒(FPV)VP2基因的特征及其与疫苗株的差异,本研究采集吉林省疑似患有猫泛白细胞减少症的猫肛门拭子样品,经PCR检测后将FPV阳性样品接种F81细胞,连续盲传至出现显著细胞病变(CPE),经电镜观察可见直径... 为了解我国吉林省猫泛白细胞减少症病毒(FPV)VP2基因的特征及其与疫苗株的差异,本研究采集吉林省疑似患有猫泛白细胞减少症的猫肛门拭子样品,经PCR检测后将FPV阳性样品接种F81细胞,连续盲传至出现显著细胞病变(CPE),经电镜观察可见直径约20 nm~24 nm的病毒粒子,与FPV形态一致,表明分离出一株FPV,命名为YB-1。经PCR扩增FPV YB-1株VP2全长基因,测序后比对分析并构建进化树,结果显示,该病毒株的VP2蛋白氨基酸序列与GenBank中选取的其他参考株的同源性为96.8%~99.8%;分离株与来自匈牙利的病毒株(933/07,EU360958)处于同一进化分支,与两个疫苗株(EU498681、EU498680)的遗传距离较远。进一步比对该分离株与GenBank中FPV疫苗株的VP2氨基酸序列差异性,发现存在3个氨基酸位点的突变:A^(91)S、I^(232)V、L^(562)V,其中有2个位点A^(91)S、I^(232)V正位于抗原位点结构位置,推测是该病毒株在本地区自然环境、动物宿主内环境中自然选择下逐渐出现的变异,这可能是疫苗造成免疫失败的原因之一。本研究在国内首次对FPV分离株与商品化疫苗株之间的基因差异进行了分析,丰富了国内FPV的资料,为后续FPV疫苗的研发以及风险防控提供了数据支持。 展开更多
关键词 猫泛白细胞减少症病毒 分离鉴定 序列分析 疫苗
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猫泛白细胞减少症主要病原研究进展
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作者 郑好 黄欣桐 +2 位作者 杨智博 金艺鹏 张跃平 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第4期85-91,共7页
猫泛白细胞减少症(FPL)是一种常见的猫科动物接触性传染病,主要由猫细小病毒(FPV)和一些犬细小病毒2型(CPV-2)的变异株导致。近期,我国FPL的临床病例数量呈现增多趋势。本文将对FPV和CPV-2在分子生物学方面的研究进展,以及目前FPL的流... 猫泛白细胞减少症(FPL)是一种常见的猫科动物接触性传染病,主要由猫细小病毒(FPV)和一些犬细小病毒2型(CPV-2)的变异株导致。近期,我国FPL的临床病例数量呈现增多趋势。本文将对FPV和CPV-2在分子生物学方面的研究进展,以及目前FPL的流行病学、致病机制、临床症状、病理表现、诊疗手段和疫苗研究现状进行综述,以期为该病的诊疗和防治提供思路。 展开更多
关键词 猫细小病毒 犬细小病毒2型 猫泛白细胞减少症 诊治 疫苗
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猫传染性腹膜炎的研究进展 被引量:3
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作者 李锦宏 李欣婷 +2 位作者 朱虎全 付强 曹嫦妤 《佛山科学技术学院学报(自然科学版)》 CAS 2023年第1期72-80,共9页
猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)是猫冠状病毒家族的成员,猫传染性腹膜炎(FIP)难以治愈,死亡率高,虽然目前学术界对于FIP已取得了不少的研究进展,但却始终没有有效的、全面的诊断和治疗方法,针对FIPV感染的药物发展缓慢。详细介绍了FIP的发生... 猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)是猫冠状病毒家族的成员,猫传染性腹膜炎(FIP)难以治愈,死亡率高,虽然目前学术界对于FIP已取得了不少的研究进展,但却始终没有有效的、全面的诊断和治疗方法,针对FIPV感染的药物发展缓慢。详细介绍了FIP的发生机制、相关治疗方案以及相关治疗药物对FIP治疗的有效性和差异性。 展开更多
关键词 猫传染性腹膜炎 猫传染性腹膜炎病毒 治疗方案 治疗药物
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miR-137通过调控血红素铁输出蛋白FLVCR、BCRP对大鼠I/R损伤的保护作用
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作者 袁莉 邓秋媚 +3 位作者 向军军 陈炜 胡跃强 姚春 《西部医学》 2023年第6期787-792,共6页
目的探讨大鼠脑缺血/再灌注(I/R)后血红素铁输出蛋白猫白血病病毒C亚组受体(FLVCR)、乳腺癌抗性蛋白(BCRP)的表达变化及miR-137对其表达的调控作用。方法选取SD大鼠60只,随机分为假手术(SO)组、模型(MCAO/R)组、miR-137模拟物(Mimic)组... 目的探讨大鼠脑缺血/再灌注(I/R)后血红素铁输出蛋白猫白血病病毒C亚组受体(FLVCR)、乳腺癌抗性蛋白(BCRP)的表达变化及miR-137对其表达的调控作用。方法选取SD大鼠60只,随机分为假手术(SO)组、模型(MCAO/R)组、miR-137模拟物(Mimic)组、miR-137模拟对照(Mimic对照)组、miR-137抑制物(Inhibitor)组、miR-137抑制对照(Inhibitor对照)组,每组10只。采用线栓法制作大鼠脑缺血再灌注(MCAO/R)模型,分别于再灌注后12、24 h取材。通过qRT-PCR测定大鼠脑组织FLVCR、BCRP及miR-137的mRNA表达,免疫组化检测FLVCR、BCRP蛋白的表达水平。结果MCAO/R组大鼠神经功能缺损评分显著升高(P<0.01),Mimic组评分显著下降(P<0.01),Inhibitor组评分显著升高(P<0.05)。MCAO/R组miR-137 mRNA表达水平显著降低(P<0.05),与Mimic对照组同时间比较,Mimic组miR-137 mRNA表达水平显著升高(P<0.01),且24 h升高更显著(P<0.05);与Inhibitor对照组同时间比较,Inhibitor组miR-137 mRNA表达水平显著降低(P<0.05),且24 h降低更显著(P<0.05)。与SO组比较,MCAO/R组FLVCR mRNA及蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);与Mimic对照组比较,Mimic组FLVCR mRNA及蛋白表达水平在12 h显著升高(P<0.05),24 h最高(P<0.05);与Inhibitor对照组比较,Inhibitor组FLVCR mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.01),在24 h降低更明显(P<0.05)。与SO组比较,MCAO/R组BCRP mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与Mimic对照组比较,Mimic组BCRP mRNA及蛋白表达水平在12 h显著升高(P<0.01),24 h最高(P<0.05);与Inhibitor对照组比较,Inhibitor组BCRP mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论miR-137过表达可能促进FLVCR和BCRP的表达以保护大鼠脑缺血再灌注损伤。 展开更多
关键词 miR-137 脑缺血/再灌注 猫白血病病毒C亚组受体 乳腺癌抗性蛋白
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猫传染性腹膜炎病毒N蛋白原核表达及多克隆抗体制备
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作者 赵飞宇 杨丹 +3 位作者 赵鹏宇 李梓健 李璐 孙东波 《黑龙江八一农垦大学学报》 2023年第1期46-52,共7页
为制备猫传染性腹膜炎病毒N蛋白特异性多克隆抗体,研究根据HLJ/HRB/2016/11毒株N基因序列设计引物,通过PCR进行基因扩增,并将目的基因在Bam HⅠ、HindⅢ酶切位点克隆至pET32a(+)原核表达载体上,将其转化到BL21(DE3)感受态细胞,经终浓度... 为制备猫传染性腹膜炎病毒N蛋白特异性多克隆抗体,研究根据HLJ/HRB/2016/11毒株N基因序列设计引物,通过PCR进行基因扩增,并将目的基因在Bam HⅠ、HindⅢ酶切位点克隆至pET32a(+)原核表达载体上,将其转化到BL21(DE3)感受态细胞,经终浓度为1 mmol·L^(-1)的IPTG在16℃诱导16 h后,SDS-PAGE检测表达产物,结果显示,在约69 kda处出现目的条带,且该蛋白主要以可溶形式表达。将重组N蛋白经Ni柱纯化后,按每只BALB/c小鼠免疫50μg,三免后7 d采血分离血清,经间接ELSA检测结果显示,获得的N蛋白可被特异性识别且效价可达到1∶12800。研究制备的猫传染性腹膜炎病毒N蛋白及其多克隆抗体为后续猫传染性腹膜炎的疫苗提供基础。 展开更多
关键词 猫传染性腹膜炎病毒 衣壳蛋白 原核表达 多克隆抗体
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猫细小病毒LZ-01株的分离鉴定及其VP2基因克隆和序列分析
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作者 祁国军 委慧玲 +3 位作者 宋晨 李天昊 薛惠文 魏衍全 《动物医学进展》 北大核心 2023年第3期54-57,共4页
为了解猫细小病毒(FPV)在甘肃兰州地区的流行情况,将胶体金试纸条检测FPV阳性的粪便样品接种F81细胞,进行病毒分离鉴定,以FPV阳性病料基因组DNA为模板,对分离的FPV进行VP2基因的克隆和测序,并与国内外参考株进行同源性比较及遗传进化分... 为了解猫细小病毒(FPV)在甘肃兰州地区的流行情况,将胶体金试纸条检测FPV阳性的粪便样品接种F81细胞,进行病毒分离鉴定,以FPV阳性病料基因组DNA为模板,对分离的FPV进行VP2基因的克隆和测序,并与国内外参考株进行同源性比较及遗传进化分析。结果显示,分离得到1株FPV,命名为FPV/LZ-01,其接种F81细胞可引起特异性的细胞病变,从出现细胞病变的F81细胞中提取病毒基因组DNA,用鉴定通用引物进行PCR鉴定,扩增出约为392 bp特异性基因条带;间接免疫荧光试验表明,FPV/LZ-01分离株接种到F81细胞48 h后可观察到特异性绿色荧光;序列比对结果显示,FPV/LZ-01分离株的VP2基因序列与22株国内外参考毒株的核苷酸同源性为99.2%~99.9%;进化树分析显示,FPV/LZ-01分离株与Beijing-01株(MK266797.1)亲缘关系最近,处于同一分支,与其他参考株遗传距离相对较远。研究结果丰富了我国FPV的流行病学资料,为进一步研发FPV疫苗提供了候选毒株。 展开更多
关键词 猫细小病毒 病毒分离 VP2基因
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38例猫泛白细胞减少症的临床病例分析
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作者 武娴 尹磊 +1 位作者 易灵琳 吴海港 《现代畜牧兽医》 2023年第5期60-63,共4页
研究旨在了解猫泛白细胞减少症的临床病例情况,以2021年上海市松江区3家动物医院收治的38例患有猫泛白细胞减少症病例为研究对象,进行回顾性调查研究,从患病季节、患病动物的性别、品种、年龄、免疫情况等基本信息和临床症状等方面分析... 研究旨在了解猫泛白细胞减少症的临床病例情况,以2021年上海市松江区3家动物医院收治的38例患有猫泛白细胞减少症病例为研究对象,进行回顾性调查研究,从患病季节、患病动物的性别、品种、年龄、免疫情况等基本信息和临床症状等方面分析各因素对猫泛白细胞减少症的影响。结果显示:冬季猫泛白细胞减少症的发病率最高,为42.11%;各品种中英国短毛猫发病率最高,为31.58%,其次是布偶猫和中华田园猫。38例猫泛白细胞减少症病例中,2月龄的猫发病率最高,为34.21%;从未注射疫苗和首次免疫的发病率较高,均超过30%。临床检查时患猫可能会出现精神不振、食欲减退、发热、呕吐及腹泻等症状。38例病例中出现发热症状的14例,占36.84%;无发热情况的病例24例,占63.16%。研究表明,冬季为猫泛白细胞减少症的多发季节,英国短毛猫、布偶猫和中华田园猫患病率较高,幼龄猫和未接种疫苗的猫感染率较高,临床症状比较多样。 展开更多
关键词 猫泛白细胞减少症 回顾性调查研究 基本信息 临床症状
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1例猫传染性鼻气管炎的诊断与治疗
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作者 魏莲清 郭忠奎 +3 位作者 刑晓 赵晓雪 张凯丽 葛文霞 《现代畜牧兽医》 2023年第4期52-54,共3页
猫传染性鼻气管炎是一种由猫疱疹病毒引起的具有高度传染性的猫上呼吸道疾病。猫疱疹病毒主要在猫呼吸道的淋巴细胞和上皮细胞中复制,猫一旦感染将终生携带。猫传染性鼻气管炎临床主要特征表现为结膜炎、上呼吸道感染和流产,以上呼吸道... 猫传染性鼻气管炎是一种由猫疱疹病毒引起的具有高度传染性的猫上呼吸道疾病。猫疱疹病毒主要在猫呼吸道的淋巴细胞和上皮细胞中复制,猫一旦感染将终生携带。猫传染性鼻气管炎临床主要特征表现为结膜炎、上呼吸道感染和流产,以上呼吸道疾病的症状为主。猫疱疹病毒对幼猫危害严重,死亡率可达50%。文章就一例猫传染性鼻气管炎的诊断和治疗以及诊疗体会展开论述,以期为建立科学严谨的防治措施提供参考。 展开更多
关键词 猫疱疹病毒 猫传染性鼻气管炎 结膜炎 上呼吸道感染
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HIV动物模型在毒品滥用研究中的应用
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作者 王婵 杨根梦 +5 位作者 刘柳 王浩伟 苗霖 李怡 李娟 曾晓锋 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期653-659,共7页
目前,毒品滥用及人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染的共病问题备受关注。毒品滥用是HIV传播的促发因素之一,其同样可加重HIV感染者中枢神经系统的病毒载量水平和加速HIV相关神经认知障碍(HIV-associated neurocog... 目前,毒品滥用及人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染的共病问题备受关注。毒品滥用是HIV传播的促发因素之一,其同样可加重HIV感染者中枢神经系统的病毒载量水平和加速HIV相关神经认知障碍(HIV-associated neurocognitive disorders,HAND)的疾病进展速度。本文着重介绍了目前常用的HIV感染相关动物模型,如非人灵长类动物、啮齿类动物及猫科动物,分析了其局限性和优势性,并对HIV感染相关动物模型在毒品滥用研究中的应用进行了综述。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒 毒品滥用 非人灵长类动物模型 HIV感染相关啮齿类动物模型 FIV/家猫动物模型
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