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Isolation of a feline-derived feline panleukopenia virus with an A300P substitution in the VP2 protein and confrmation of its pathogenicity in dogs
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作者 Jiakang Li Jiajia Peng +9 位作者 Yue Zeng Ying Wang Luying Li Yiran Cao Longlong Cao QingXiu Chen Zijun Ye Dengyuan Zhou Shengbo Cao Qiuyan Li 《Animal Diseases》 CAS 2024年第3期173-185,共13页
Feline panleukopenia virus(FPV)is a single-stranded DNA virus that can infect cats and cause feline panleukopenia,which is a highly contagious and fatal disease in felines.The sequence of FPV is highly variable,and mu... Feline panleukopenia virus(FPV)is a single-stranded DNA virus that can infect cats and cause feline panleukopenia,which is a highly contagious and fatal disease in felines.The sequence of FPV is highly variable,and mutations in the amino acids of its capsid protein play crucial roles in altering viral virulence,immunogenicity,host selection,and other abilities.In this study,the epidemiology of FPV was studied using 746 gastrointestinal swab samples derived from cats that presented gastrointestinal symptoms specifcally,diarrhea or vomiting during the period spanning from 2018 to 2022.The overall prevalence of FPV-positive patients among these samples was determined to be 45.4%.Capsid(virion)protein 2(VP2)gene of each FPV-positive sample was sequenced and amplifed,yielding 65 VP2 sequences.Among them,six VP2 gene sequences were detected in the majority of the samples test positive for FPV,and these positive samples originated from a diverse range of geographical locations.These isolates were named FPV-6,FPV-10,FPV-15,FPV-251,FPV-271 and FPV-S2.Additionally,the substitution of Ala300Pro(A300P)in VP2 was detected for the frst time in feline-derived FPV(FPV-251).FPV-251 isolate,with this substitution in VP2 protein,exhibited stable proliferative capacity in Madin-Darby canine kidney(MDCK)cells and A72 cells.FPV-271 was selected as the FPV control isolate due to its single amino acid diference from VP2 protein of FPV-251 at position 300(FPV-271 has alanine,while FPV-251 has proline).After oral infection,both FPV-251 and FPV-271 isolates caused feline panleukopenia,which is characterized by clinical signs of enterocolitis.However,FPV-251 can infect dogs through the oral route and cause gastrointestinal(GI)symptoms with lesions in the intestine and mesenteric lymph nodes(MLNs)of infected dogs.This is the frst report on the presence of an A300P substitution in VP2 protein of feline-derived FPV.Additionally,FPV isolate with a substitution of A300P at VP2 protein demonstrated efcient replication capabilities in canine cell lines and the ability to infect dogs. 展开更多
关键词 feline panleukopenia virus fpv DOGS VP2 gene characteristic Host range
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猫泛白细胞减少症病毒A91S变异株对猫的致病性及基因组特征研究
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作者 周宁 汤承 +2 位作者 许佳 岳华 陈曦 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2560-2568,共9页
猫泛白细胞减少症病毒(feline panleukopenia virus, FPV)是一种对猫危害严重的病原。近年来,一种VP2 91位氨基酸残基由A突变为S的FPV变异株(FPV A91S变异株)已经在国内广泛流行,但目前还未见该变异株对猫致病性的报道,本试验旨在探究FP... 猫泛白细胞减少症病毒(feline panleukopenia virus, FPV)是一种对猫危害严重的病原。近年来,一种VP2 91位氨基酸残基由A突变为S的FPV变异株(FPV A91S变异株)已经在国内广泛流行,但目前还未见该变异株对猫致病性的报道,本试验旨在探究FPV A91S变异株对猫的感染特性及其分子特征。利用F81细胞分离FPV A91S变异株,并研究其血凝特性、对猫的致病性及其基因组特征。成功分离到一株FPV A91S变异株,纯化后病毒滴度为10~(4.6 )TCID_(50)·mL^(-1);该毒株能在pH 6.0~6.5、4和37℃条件下有效凝集猪红细胞;分离株经口服成功感染幼猫,引起呕吐、腹泻、白细胞急剧降低、眼睑脓性分泌物等症状,并在5 d内导致猫死亡;大体和组织病理变化发现严重的肠道和肺出血。获得该毒株近乎全长的基因组序列,其VP2蛋白的关键位点氨基酸符合典型FPV特征。除了VP2 A91S的突变外,其NS1蛋白也有3个独特的氨基酸突变(D23N、I443V和H596Q),这些特征导致FPV A91S毒株在进化树中单独聚为一支,具有独特的遗传进化趋势。本研究首次探究了FPV A91S变异株的血凝性和对猫的致病性,为进一步了解FPV的生物学特性和遗传变异提供参考。 展开更多
关键词 猫泛白细胞减少症病毒 fpv VP2 A91 S变异体 血凝性 致病性 遗传进化
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辽宁沈阳株猫泛白细胞减少症病毒VP2基因扩增及生物信息学分析
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作者 刘琪 刘正伟 +4 位作者 梁琳 张利 郝春晖 李玥 赵福庆 《中国畜牧兽医》 CSCD 北大核心 2024年第1期23-32,共10页
【目的】通过生物信息学方法分析1株2022年辽宁沈阳地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus, FPV)LN3株VP2蛋白的分子特征。【方法】利用FPV胶体金试纸条对临床上表现呕吐、腹泻等症状的患病猫粪便进行检测,提取该病猫粪... 【目的】通过生物信息学方法分析1株2022年辽宁沈阳地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus, FPV)LN3株VP2蛋白的分子特征。【方法】利用FPV胶体金试纸条对临床上表现呕吐、腹泻等症状的患病猫粪便进行检测,提取该病猫粪便的病毒DNA进行FPV VP2基因PCR扩增及测序,使用Seqman软件对序列进行拼接。将所获序列与NCBI数据库中FPV和犬细小病毒(Canine parvovirus, CPV)的VP2基因进行相似性比对及遗传进化分析。使用生物信息学软件对该毒株VP2蛋白进行预测,包括理化性质、亲/疏水性、跨膜区、糖基化位点、亚细胞定位、二级结构、三级结构等。【结果】FPV LN3株VP2基因全长1 755 bp,编码584个氨基酸;与GenBank上登录的15株FPV同属一个大分支,相似性为98.9%~99.7%;与CPV处于不同分支上。生物信息学软件预测显示,FPV LN3株VP2蛋白为亲水性蛋白,无跨膜结构;含有7个潜在N-糖基化位点、86个O-糖基化位点和50个磷酸化位点;VP2蛋白在细胞质、细胞核、线粒体中的可能性分别为43.5%、34.8%和21.7%;VP2蛋白二级结构中无规则卷曲、α-螺旋、延伸链、β-转角分别占61.82%、8.90%、24.32%及4.97%,三级结构预测结果与其一致;VP2蛋白共有20个抗原表位。【结论】VP2是FPV遗传变异的关键基因,FPV LN3株VP2蛋白属于亲水性、非跨膜稳定蛋白,共存在20个抗原表位。试验结果为进一步研究FPV VP2蛋白功能及研发新型疫苗提供理论依据。 展开更多
关键词 猫泛白细胞减少症病毒 VP2基因 生物信息学 蛋白结构
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猫泛白细胞减少症病毒SH0918株的分离鉴定及遗传进化分析
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作者 林亮亮 吴赛 +10 位作者 汤傲星 刘春草 谈晓梅 程松 梁留存 滕耀鹏 朱世强 朱杰 李传锋 孟春春 刘光清 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第5期152-161,共10页
本文对2015—2022年收集的25份疑似猫瘟样本进行了PCR检测和病原分离,同时还根据测定的VP2基因序列,对本文分离的FPV流行毒株与国内外参考毒株的同源性以及遗传演化进行了分析。检测结果表明,在25份可疑样本中有6份FPV阳性样品。在对其... 本文对2015—2022年收集的25份疑似猫瘟样本进行了PCR检测和病原分离,同时还根据测定的VP2基因序列,对本文分离的FPV流行毒株与国内外参考毒株的同源性以及遗传演化进行了分析。检测结果表明,在25份可疑样本中有6份FPV阳性样品。在对其VP2基因进行测序鉴定以后,我们重点对1株在F81细胞中增殖滴度较高的FPV(SH0918株)进行了分离和鉴定,并详细研究了该毒株的生物学特性。研究结果表明,SH0918株可以在F81中良好增殖,并产生特异性致病变效应,其TCID_(50)为10^(-5.11)/0.1mL;IFA的检测结果进一步证明在感染细胞中存在FPV的特异性蛋白表达;电镜检测结果表明,纯化的细胞培养物中存在典型的FPV病毒粒子;血凝试验结果表明,FPV能够凝集猪红细胞,血凝效价为1∶32。测定的FPV SH0918株的全基因组长5124 bp;序列比对分析结果显示,本文分离的毒株与参考毒株之间的核苷酸序列同源性为98.4%~100%;进化树结果表明:本研究中的FPV分离毒株基本属于同一分支,其中SH0918株与国内分离株JN-FPV-96、TZ-FPV-112的亲缘关系较近,但与欧洲分离株以及疫苗株亲缘关系较远。本研究内容一方面丰富了我国FPV的流行病学资料,另一方面对新型猫瘟疫苗的研发也具有一定的参考价值。 展开更多
关键词 猫细小病毒 分离鉴定 生物学特性 VP2基因 遗传进化分析
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北京部分地区猫泛白细胞减少症病毒、疱疹病毒和杯状病毒流行病学调查分析
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作者 张美华 张中华 +5 位作者 鲁锋 朱方超 赵俊鑫 苏煜智 武峥 石文达 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第8期138-141,共4页
为了解北京地区猫泛白细胞减少症病毒(FPV)、疱疹病毒(FHV)和杯状病毒(FCV)的流行情况,并统计分析年龄和疫苗免疫与FPV、FHV和FCV阳性率的相关性,本调查于2021年1月—2023年6月收集北京地区多家宠物医院疑似感染FPV(313份)、FHV(1869份)... 为了解北京地区猫泛白细胞减少症病毒(FPV)、疱疹病毒(FHV)和杯状病毒(FCV)的流行情况,并统计分析年龄和疫苗免疫与FPV、FHV和FCV阳性率的相关性,本调查于2021年1月—2023年6月收集北京地区多家宠物医院疑似感染FPV(313份)、FHV(1869份)或FCV(1638份)和体检动物样本,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)进行检测,并对结果进行统计分析。结果显示,FPV、FHV和FCV阳性率分别为57.51%、39.43%和42.31%;0~6月龄猫FPV阳性率显著高于>1~9岁和>9岁猫(P<0.05),说明0~6月龄猫更易感染FPV;0~6月龄猫FHV阳性率显著高于>6~12月龄、>1~9岁和>9岁猫(P<0.05),说明0~6月龄猫更易感染FHV;0~6月龄和>6~12月龄猫FCV阳性率显著高于>1~9岁和>9岁猫(P<0.05),说明0~12月龄猫更易感染FCV;免疫猫FPV、FHV和FCV阳性率极显著低于未免疫猫(P<0.01),说明疫苗免疫与FPV、FHV和FCV阳性率呈强相关性,进一步表明疫苗免疫可有效降低FPV、FHV和FCV阳性率。因此,建议在0~6月龄及时进行猫三联疫苗免疫,可有效降低猫感染FPV、FHV和FCV的风险,更有利于宠物健康。 展开更多
关键词 猫泛白细胞减少症病毒(fpv) 猫疱疹病毒(FHV) 猫杯状病毒(FCV) 流行病学调查
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猫泛白细胞减少症病毒YX01株的分离鉴定及致病性分析
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作者 马建伟 付展鸿 +8 位作者 钟林翰 韩言言 王以欣 姜晓霞 孙晓波 王美 宋厚辉 徐义刚 李园 《动物医学进展》 北大核心 2024年第9期12-19,共8页
用F81细胞从疑似感染猫泛白细胞减少症病毒(FPV)猫的组织样本中分离出1株FPV毒株,命名为FPV YX01株,通过电镜观察、血凝试验以及化学试剂(20%乙醚和0.1 mol/L HCl)处理,分析了FPV YX01株的生物学特性;基于VP2基因序列,分析了FPV YX01株... 用F81细胞从疑似感染猫泛白细胞减少症病毒(FPV)猫的组织样本中分离出1株FPV毒株,命名为FPV YX01株,通过电镜观察、血凝试验以及化学试剂(20%乙醚和0.1 mol/L HCl)处理,分析了FPV YX01株的生物学特性;基于VP2基因序列,分析了FPV YX01株的遗传进化,通过动物回归试验评价了该分离毒株的致病力。结果显示,FPV YX01毒株感染F81细胞后,细胞出现萎缩拉丝、脱落、生长缓慢等典型病变;电镜观察可见FPV YX01病毒粒子呈圆形,表面无囊膜结构,直径约25 nm,可被FPV特异性抗体识别;遗传进化分析发现,YX01毒株VP2蛋白中决定FPV血凝活性和毒力的关键氨基酸位点未发生突变,且YX01毒株与意大利EU498695毒株高度同源;动物回归试验显示,感染YX01毒株可引起猫出现食欲减退、腹泻、体温双相热、肠胀气、肝脏出血以及白细胞数量急剧减少等猫泛白细胞减少症的典型临床症状,同时病理切片可见肝脏和肠组织出血、炎性细胞浸润等现象。研究结果分离到1株具有较强致病力的FPV毒株YX01株,为FPV调查、检测、试剂研发及抗体制备提供了物质基础。 展开更多
关键词 猫泛白细胞减少症病毒 分离鉴定 生物学特性 致病性
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猫泛白细胞减少症病毒分离鉴定及VP2基因的遗传变异分析
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作者 张启龙 李振河 +9 位作者 程敏姮 栗云鹏 高晓龙 傅彩霞 王林 高敏 余琦 周德刚 张玮 李志军 《动物医学进展》 北大核心 2024年第8期28-34,共7页
为分析北京地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)的流行毒株及其VP2基因遗传变异情况,对FPV胶体金试纸条检测结果为阳性的病死猫组织进行病毒分离,通过细胞病变、荧光定量PCR、间接免疫荧光和全基因组测序等试验,... 为分析北京地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)的流行毒株及其VP2基因遗传变异情况,对FPV胶体金试纸条检测结果为阳性的病死猫组织进行病毒分离,通过细胞病变、荧光定量PCR、间接免疫荧光和全基因组测序等试验,分离鉴定到1株FPV,命名为FPVBJ-CP/2022株。对决定病毒宿主范围和抗原性的VP2基因系统进化树分析表明,分离株与FPVJF-3株、FPVBeijing-01/2018聚为一支,与FPV疫苗株、CPV群亲缘关系较远。VP2蛋白主要功能位点分析结果显示,VP2蛋白中决定病毒抗原性和宿主嗜性的10个关键位点氨基酸均未发生突变,但该分离株的VP2蛋白序列与GenBank其他FPV毒株的VP2蛋白相比,91位氨基酸由丙氨酸(A)突变为丝氨酸(S),505位氨基酸由天冬酰胺(N)突变为天冬氨酸(D),该突变是否对FPVBJ-CP/2022株VP2蛋白的功能和生物学特性造成改变,有待于进一步研究。论文通过对毒株的遗传变异分析,为更好地预防和控制FPV感染提供了研究基础。 展开更多
关键词 猫泛白细胞减少症病毒 分离 鉴定 VP2基因 遗传进化分析
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Analysis of Genetic Variation of VP2 Gene in 6 FPV Strainsin China 被引量:2
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作者 Jianxin Wen Zhiqiang Wang Jianwei Ren 《Advances in Microbiology》 2021年第4期191-198,共8页
In order to understand the variation of FPV strains in the Jinan area, Shandong Province, China, the VP2 gene of 6 FPV strains was sequenced, and the analysis of the genetic relationship, evolution and main functional... In order to understand the variation of FPV strains in the Jinan area, Shandong Province, China, the VP2 gene of 6 FPV strains was sequenced, and the analysis of the genetic relationship, evolution and main functional site variation was carried out. It was found that FPV-XY2, FPV-XY3 and FPV-XY6 were the same strain with 100% homology, and also close to FPV-XY1, and the homology between FPV-XY4 and FPV-XY5 was close. The homology between the reference strain and the test strain was over 99.3%. According to the evolutionary analysis, the genetic relationship among FPV-XY1, FPV-XY2, FPV-XY3, FPV-XY6 was close, and the genetic relationship between FPV-XY4 and FPV-XY5 was close, and the result was similar to the homologous result. Compared with the VP2 amino acid sequence of the standard strain FPV-CU4, the VP2 protein of all the test strains changed from I to t on the 101st Amino acid, this may be the cause of immune failure in these 6 cases;the change of a to s in the 91st amino acid position of FPV-XY1, FPV-XY2, FPV-XY3, FPV-XY6 may be the cause of enhanced virulence of FPV. This study provides a reference for exploring the epidemic law of FP in the Jinan area, the standard of FP treatment plan and the research and development of FPV subunit vaccine. 展开更多
关键词 feline panleukopenia feline panleukopenia virus VP2 Gene EVOLUTIONARY
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猫细小病毒洛阳分离株VP2蛋白原核表达及多克隆抗体制备 被引量:2
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作者 王文婕 茹鹏辉 +5 位作者 郁川 杜付熙 陈松彪 尚珂 张春杰 程相朝 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1511-1521,共11页
【目的】研究旨在对猫细小病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)洛阳分离株VP2蛋白进行原核表达和鼠源多克隆抗体制备。【方法】根据已公布的FPV VP 2基因序列(GenBank登录号:EU018143.1)设计1对特异性引物,以洛阳地区7例疑似FPV感染... 【目的】研究旨在对猫细小病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)洛阳分离株VP2蛋白进行原核表达和鼠源多克隆抗体制备。【方法】根据已公布的FPV VP 2基因序列(GenBank登录号:EU018143.1)设计1对特异性引物,以洛阳地区7例疑似FPV感染猫粪便为样本提取DNA,对VP 2基因进行PCR鉴定及测序,利用Mega 11.0软件对VP 2基因进行遗传进化分析;应用在线软件预测分离株VP2蛋白结构特征并找出优势抗原表位,克隆VP2优势抗原(sVP2)并连接pET-32a(+)载体,构建pET-32a-sVP2重组质粒,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞后进行诱导表达,对重组蛋白表达条件进行优化,并使用SDS-PAGE与Western blotting方法进行鉴定;将pET-32a-sVP2用镍柱亲和层析蛋白纯化后免疫BABL/c小鼠,制备多克隆抗体,采用ELISA法检测抗体效价。【结果】分离得到1株FPV,命名为LY-1。遗传进化分析发现,该毒株属于FPV-G2亚群,与北京株(GenBank登录号:MT270581)亲缘关系最近。生物信息学分析显示,VP2属于稳定膜内蛋白,无信号肽与跨膜区,在N-端具有丰富的B细胞抗原表位(1―800 bp,sVP2)。试验成功构建pET-32a-sVP2重组质粒并表达,SDS-PAGE显示重组蛋白分子质量约50 ku,主要以包涵体形式存在,在30℃、1 mmol/L IPTG诱导6 h蛋白表达量最佳;Western blotting结果表明,重组蛋白能与鼠抗His单克隆抗体发生特异性反应;ELISA结果表明,该重组蛋白抗体效价为1∶128000,能够较好地识别免疫原sVP2和原核表达VP2蛋白并发生特异性反应。【结论】本试验克隆获得FPV sVP2片段,并制备多克隆抗体,为进一步研究VP2在FPV复制和致病过程中的作用及建立诊断FPV方法提供参考。 展开更多
关键词 猫细小病毒(fpv) 洛阳分离株 VP 2基因 原核表达 多克隆抗体
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F81细胞无血清悬浮驯化后培养猫泛白细胞减少症病毒的研究 被引量:2
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作者 张久鑫 邵宝顺 +6 位作者 朱辉 贾浩苒 梁琳 汤新明 崔尚金 梁瑞英 王龙涛 《动物医学进展》 北大核心 2023年第1期48-53,共6页
为解决国内猫泛白细胞减少症生物制品短缺的问题,筛选出适用于猫泛白细胞减少症病毒增殖的猫肾细胞系(F81),通过对贴壁F81进行降血清悬浮驯化培养,得到了无血清全悬浮培养F81细胞系。研究建立的F81细胞系在初始传代细胞密度为1×10^... 为解决国内猫泛白细胞减少症生物制品短缺的问题,筛选出适用于猫泛白细胞减少症病毒增殖的猫肾细胞系(F81),通过对贴壁F81进行降血清悬浮驯化培养,得到了无血清全悬浮培养F81细胞系。研究建立的F81细胞系在初始传代细胞密度为1×10^(6)cells/mL时,培养48 h后细胞密度可达到7.02×10^(6)cells/mL。对培养猫泛白细胞减少症病毒工艺进行摸索,确定最佳接毒工艺为同步接毒法,初始接毒细胞密度为1×10^(6)cells/mL、MOI为3.5×10^(-2),培养72 h后收毒,病毒滴度可达到10^(7.25)TCID_(50)/0.1 mL。该方法使用同源细胞系且未添加动物血清,为猫泛白细胞减少症生物制品生产降低了下游生产纯化难度,同时降低了生产成本,可显著提高产品核心竞争力。研究结果可为其他猫用生物制品相关研究提供参考。 展开更多
关键词 F81细胞 细胞驯化 无血清悬浮培养 猫泛白细胞减少症病毒
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猫泛白细胞减少症病毒YB-1株的分离鉴定及其与疫苗株的差异性分析 被引量:2
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作者 胡春意 薛皓文 +5 位作者 谢佳良 宋彦昊 祝昆儒 马浩原 付兢锋 高旭 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期649-653,共5页
为了解我国吉林省猫泛白细胞减少症病毒(FPV)VP2基因的特征及其与疫苗株的差异,本研究采集吉林省疑似患有猫泛白细胞减少症的猫肛门拭子样品,经PCR检测后将FPV阳性样品接种F81细胞,连续盲传至出现显著细胞病变(CPE),经电镜观察可见直径... 为了解我国吉林省猫泛白细胞减少症病毒(FPV)VP2基因的特征及其与疫苗株的差异,本研究采集吉林省疑似患有猫泛白细胞减少症的猫肛门拭子样品,经PCR检测后将FPV阳性样品接种F81细胞,连续盲传至出现显著细胞病变(CPE),经电镜观察可见直径约20 nm~24 nm的病毒粒子,与FPV形态一致,表明分离出一株FPV,命名为YB-1。经PCR扩增FPV YB-1株VP2全长基因,测序后比对分析并构建进化树,结果显示,该病毒株的VP2蛋白氨基酸序列与GenBank中选取的其他参考株的同源性为96.8%~99.8%;分离株与来自匈牙利的病毒株(933/07,EU360958)处于同一进化分支,与两个疫苗株(EU498681、EU498680)的遗传距离较远。进一步比对该分离株与GenBank中FPV疫苗株的VP2氨基酸序列差异性,发现存在3个氨基酸位点的突变:A^(91)S、I^(232)V、L^(562)V,其中有2个位点A^(91)S、I^(232)V正位于抗原位点结构位置,推测是该病毒株在本地区自然环境、动物宿主内环境中自然选择下逐渐出现的变异,这可能是疫苗造成免疫失败的原因之一。本研究在国内首次对FPV分离株与商品化疫苗株之间的基因差异进行了分析,丰富了国内FPV的资料,为后续FPV疫苗的研发以及风险防控提供了数据支持。 展开更多
关键词 猫泛白细胞减少症病毒 分离鉴定 序列分析 疫苗
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猫泛白细胞减少症病毒研究进展 被引量:1
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作者 刘昱欣 李卓宸 +2 位作者 吕爽 吕文雪 赵传芳 《特产研究》 2023年第5期147-153,共7页
猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPLV),又称为猫瘟病毒、猫细小病毒(Feline parvovirus,FPV)或猫传染性肠炎病毒,具有很强的传播性,变异快,分布广,会导致猫科和部分其他科的动物突然发病并且精神沉郁、体温上升、出... 猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPLV),又称为猫瘟病毒、猫细小病毒(Feline parvovirus,FPV)或猫传染性肠炎病毒,具有很强的传播性,变异快,分布广,会导致猫科和部分其他科的动物突然发病并且精神沉郁、体温上升、出血性肠炎、腹泻、呕吐、白细胞显著减少等。各年龄的猫都能感染猫细小病毒,其中幼龄猫最为易感。猫瘟可以发生在各个季节,其中秋冬季节更常见。该病会造成猫养殖行业的严重经济损失。近年来,由于猫细小病毒导致严重疫情的相关报道越来越多,猫细小病毒也越发引起大家的关注。本文从病原学特征、流行病学、临床特征、病理特征、临床检测方法、治疗和预防等方面对FPV进行了综述,以期为猫泛白细胞减少症病毒疫苗的研制提供理论基础。 展开更多
关键词 猫泛白细胞减少症病毒 病原学 流行病学 检测
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猫泛白细胞减少症病毒、猫杯状病毒和猫疱疹病毒1型三重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用 被引量:1
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作者 陈林文 冀伟 +5 位作者 曹龙龙 王莹 李秋燕 曹胜波 陈清秀 周登元 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1141-1147,1198,共8页
为建立一种能够快速检测猫泛白细胞减少症病毒(FPV)、猫杯状病毒(FCV)和猫疱疹病毒1型(FHV-1)的三重荧光定量RT-PCR方法,本研究根据FPV VP2基因、FCV ORF2基因和FHV-1 TK基因分别设计引物与探针,采用上述引物经PCR分别扩增上述3种病原... 为建立一种能够快速检测猫泛白细胞减少症病毒(FPV)、猫杯状病毒(FCV)和猫疱疹病毒1型(FHV-1)的三重荧光定量RT-PCR方法,本研究根据FPV VP2基因、FCV ORF2基因和FHV-1 TK基因分别设计引物与探针,采用上述引物经PCR分别扩增上述3种病原的目的基因并克隆至pMD18-T载体中,构建重组质粒标准品pMD18-T-FPV、pMD18-T-FCV和pMD18-T-FHV-1,并均经PCR和测序鉴定。将3种重组质粒标准品稀释到同一浓度1×10^(8)拷贝/μL,按体积比1∶1∶1混合后作为模板,采用方阵法优化各反应条件后,建立了检测上述病原的三重TaqMan荧光定量RT-PCR方法。以FPV、FCV、FHV-1、猫博卡病毒、猫冠状病毒、猫支原体、猫白血病病毒、猫星状病毒的基因组为模板采用本研究建立的方法检测,评估该方法的特异性,结果显示,该方法仅能检测到FPV、FCV、FHV-1,而其他病原的检测结果均为阴性。选取1×10^(0)拷贝/μL~1×10^(6)拷贝/μL的混合质粒标准品和10^(-0.5) TCID_(50)/mL~10^(5.5) TCID_(50)/mL的混合病毒液分别作为模板,采用本研究建立的方法检测,评估该方法检测重组质粒和病毒的敏感性,结果显示,该方法对重组质粒标准品pMD18-T-FPV、pMD18-T-FCV和pMD18-T-FHV-1的检测限均为1.0×10^(1)拷贝/μL,对3种病毒的检测限均约为10^(0.5) TCID_(50)/mL;以1×10^(7)拷贝/μL、1×10^(5)拷贝/μL、1×10^(3)拷贝/μL质粒标准品混合物作为模板分别进行组内和组间的重复性试验,结果显示,组内和组间重复性试验的变异系数(CV)均低于3%。利用建立的该三重荧光定量RT-PCR和常规PCR对81份临床样品(77份猫的眼、鼻、咽、肛混合拭子样品和4份组织病料样品)分别检测,结果显示三重荧光定量RT-PCR检测出47份FPV、13份FCV和13份FHV-1阳性样品,而常规PCR分别检测出39份FPV、9份FCV和6份FHV-1阳性样品,该三重荧光定量RT-PCR与FPV、FCV、FHV-1常规PCR的总符合率分别为90.12%、95.06%、92.59%。本研究建立的三重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,为FPV、FCV、FHV-1临床样品的快速鉴别检测提供了有力技术支持。 展开更多
关键词 猫泛白细胞减少症病毒 猫杯状病毒 猫疱疹病毒1型 三重荧光定量RT-PCR
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猫科动物猫泛白细胞减少症血清抗体调查 被引量:12
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作者 杨松涛 周明 +6 位作者 王铁成 王立刚 王淑君 刘丹 黄耕 王玮 夏咸柱 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期101-104,共4页
Feline panleukopenia virus (FPV),belonging to the genus Parvovirus within the family Parvoviridae, infects and causes disease in carnivore species throughout the world. However, few epidemiological studies of this vir... Feline panleukopenia virus (FPV),belonging to the genus Parvovirus within the family Parvoviridae, infects and causes disease in carnivore species throughout the world. However, few epidemiological studies of this virus have been done in wildlife in China. The aims of this study were to determine the infection rate of FPV in captive tigers, lions and domestic cats. Serum samples were obtained from 207 tigers and 4 lions between 2002 and 2006 in different wildlife zoos of China,and 23 domestic cats, and further tested for antibodies against FPV by serum neutralization(SN) assay and hemagglutination-inhibition (HI) assay, whose results are consistent. A seropositive rate of 53.1% was found in tigers,25% in lions and 26% in cats. These results indicated that most of the felines had been infected with feline panleukopenia virus, and the virus may cause disease in carnivore species in China. 展开更多
关键词 猫泛白细胞减少症 SN HI 抗体调查 fpv 猫科动物
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虎源猫泛白细胞减少症病毒的分离鉴定 被引量:24
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作者 杨松涛 王立刚 +9 位作者 戈锐 刘丹 邹啸环 王玮 王铁成 周明 冯娜 黄耕 华育平 夏咸柱 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期170-174,共5页
利用细胞培养方法从中国某虎园送检的腹泻虎肠内容物中分离出1株细小病毒(TPV/HT-69),经系统的形态学、理化学、血清学试验、人工感染试验、PCR扩增和VP2基因序列分析,符合猫泛白细胞减少症病毒特征,证明该毒株为猫泛白细胞减少症病毒... 利用细胞培养方法从中国某虎园送检的腹泻虎肠内容物中分离出1株细小病毒(TPV/HT-69),经系统的形态学、理化学、血清学试验、人工感染试验、PCR扩增和VP2基因序列分析,符合猫泛白细胞减少症病毒特征,证明该毒株为猫泛白细胞减少症病毒强毒。 展开更多
关键词 猫泛白细胞减少症病毒 分离鉴定
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同时检测猫细小病毒、杯状病毒、疱疹病毒1型多重PCR方法的建立 被引量:14
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作者 王翀 刘大飞 +6 位作者 刘春国 柴洪亮 张洪英 程景 吕健 华育平 曲连东 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期31-33,共3页
为建立检测多种猫科病毒的多重PCR方法,本研究参照GenBank中登录的猫细小病毒(FPV)的NS基因序列、猫杯状病毒(FCV)的ORF2基因序列以及猫疱疹病毒(FHV-I)的TK基因序列设计合成3对引物,通过对反应体系及条件的优化,建立了可以同时扩增FPV(... 为建立检测多种猫科病毒的多重PCR方法,本研究参照GenBank中登录的猫细小病毒(FPV)的NS基因序列、猫杯状病毒(FCV)的ORF2基因序列以及猫疱疹病毒(FHV-I)的TK基因序列设计合成3对引物,通过对反应体系及条件的优化,建立了可以同时扩增FPV(392 bp)、FCV(922 bp)和FHV-I(290 bp)的多重PCR方法。该检测方法结果表明:在同一PCR反应体系中可以同时检测出以上3种病毒,FPV、FCV和FHV的最低检出限分别为101.5TCID50、101.9TCID50和101.2TCID50。以该方法对黑龙江省各地区收集的120份血清进行检测,其中FPV、FCV和FHV-I的阳性率分别为5%(6/120)、2.5%(3/120)和4.1%(5/120),证明该方法可以用于3种病毒的检测,具有良好的特异性和敏感性。 展开更多
关键词 猫细小病毒 猫杯状病毒 猫疱疹病毒 多重PCR
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桂林老虎猫瘟热病毒的分离鉴定 被引量:10
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作者 邱薇 夏咸柱 +7 位作者 范泉水 何洪彬 黄耕 余春 乔军 武银莲 范秀军 王春华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第4期249-251,共3页
我们在作猫细小病毒分子流行病学调查过程中 ,从桂林送检的老虎粪便中分离出 1株虎细小病毒 ,并对其进行了系统鉴定 ,经形态学、理化学、血清学交叉中和试验、动物感染试验与分子生物学鉴定 ,证明为一株猫瘟热病毒 (猫泛白细胞减少症病... 我们在作猫细小病毒分子流行病学调查过程中 ,从桂林送检的老虎粪便中分离出 1株虎细小病毒 ,并对其进行了系统鉴定 ,经形态学、理化学、血清学交叉中和试验、动物感染试验与分子生物学鉴定 ,证明为一株猫瘟热病毒 (猫泛白细胞减少症病毒 )的强毒。 展开更多
关键词 老虎 猫瘟热病毒 分离 鉴定
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猫鼻气管炎病毒、杯状病毒、泛白细胞减少症病毒的分离及其形态学观察 被引量:6
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作者 李六金 李成 +6 位作者 姜焕宏 吴钟灵 胡淑贤 师长宏 张志培 李学忠 刘晓荣 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期341-345,共5页
根据病毒的理化特性 ,从猫三联活疫苗中分离出猫鼻气管炎、猫杯状和猫泛白细胞减少症病毒 ;筛选出每种病毒敏感的细胞 ,并将该 3种病毒分别在其中传代与扩增 ;通过电镜观察此 3种病毒的形态学特征及其在宿主细胞内增殖部位、分布情况等 ... 根据病毒的理化特性 ,从猫三联活疫苗中分离出猫鼻气管炎、猫杯状和猫泛白细胞减少症病毒 ;筛选出每种病毒敏感的细胞 ,并将该 3种病毒分别在其中传代与扩增 ;通过电镜观察此 3种病毒的形态学特征及其在宿主细胞内增殖部位、分布情况等 ,并以此对猫 3种病毒进行了初步鉴定。 展开更多
关键词 猫鼻气管炎病毒 猫杯状病毒 猫泛白细胞减少症病毒 电镜技术 病毒形态学
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一株猫泛白细胞减少症病毒的分离鉴定及其VP2和NS1基因的变异分析 被引量:9
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作者 刘琪 史利军 +5 位作者 梁琳 张玲玲 袁维峰 梁瑞英 李金祥 崔尚金 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1106-1112,共7页
为分析当前猫泛白细胞减少症病毒(FPLV)基因组遗传变异情况,对FPLV胶体金试纸条检测结果为阳性的猫粪进行病毒分离,通过血凝、分子生物学等试验对分离株进行鉴定。结果表明:病毒在CRFK细胞上盲传5代后产生明显细胞病变,电镜观察病毒粒... 为分析当前猫泛白细胞减少症病毒(FPLV)基因组遗传变异情况,对FPLV胶体金试纸条检测结果为阳性的猫粪进行病毒分离,通过血凝、分子生物学等试验对分离株进行鉴定。结果表明:病毒在CRFK细胞上盲传5代后产生明显细胞病变,电镜观察病毒粒子直径约25 nm,分离病毒的血凝效价为1∶256,将分离株命名为FPLV BJ04。基因组扩增结果显示,FPLV BJ04基因组大小为5 118 bp。决定病毒宿主范围和抗原性的VP2蛋白系统进化树分析表明,FPLV BJ04株与2017年意大利分离株KX434462株位于同一分支;分离株的VP2、NS1基因与GenBank收录的FPLV VP2、NS1基因相似性分别为99.1%~99.5%和99.0%~99.5%。动物回归试验中攻毒组猫出现临床症状和病理变化。本研究对分离的FPLV北京流行株的VP2和NS1基因进行遗传变异分析,可为更好地预防和控制FPLV提供基础。 展开更多
关键词 猫泛白细胞减少症病毒 病毒分离鉴定 序列分析
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虎源猫泛白细胞减少症病毒VP1、Vp2和NS1基因的克隆与序列分析 被引量:6
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作者 于亚丽 华育平 +3 位作者 曾祥伟 田丽红 夏咸柱 刘丹 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期83-85,共3页
根据Genbank上发表的猫泛白细胞减少症基因序列数据,设计了3对引物,并采用PCR方法对从东北虎粪便中分离出的FPV-HLJ的结构蛋白VP1、VP2和非结构蛋白NS1基因进行了扩增,将各片段克隆至pMD18-T载体,经PCR鉴定后进行了序列测定和分析... 根据Genbank上发表的猫泛白细胞减少症基因序列数据,设计了3对引物,并采用PCR方法对从东北虎粪便中分离出的FPV-HLJ的结构蛋白VP1、VP2和非结构蛋白NS1基因进行了扩增,将各片段克隆至pMD18-T载体,经PCR鉴定后进行了序列测定和分析。结果显示:FPV-HU与GenBank上公布的FPV、CPV和MEV毒株相比,核苷酸序列同源率VP1为98.8%-99.8%,VP2为98.1%-99.4%,NS1为98.6%-99.7%。VP1氨基酸同源率为97.6%-99.2%,VP2、NS1氨基酸同源率与其核苷酸同源率相同。并且VP1、VP2和NS1上分别有4、3和9处氨基酸发生变异。 展开更多
关键词 猫泛白细胞减少症病毒 VP1 VP2 NS1 基因 克隆 序列分析
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