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芒柄花黄素调控miR-182/FOXO3轴对子宫内膜癌细胞迁移及侵袭的影响 被引量：1
1
作者 梁殿迅 郭哲 +2 位作者 朱军义 许静 付小玲 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2023年第1期50-57,共8页
目的探讨芒柄花黄素(FM)对子宫内膜癌细胞迁移及侵袭的影响,以及其作用机制。方法用0、12.5、25.0、50.0、100、200μmol/L FM处理人子宫内膜癌细胞株Ishikawa细胞48 h,流式细胞术检测细胞凋亡率;取生长状态良好的Ishikawa细胞,分别用2... 目的探讨芒柄花黄素(FM)对子宫内膜癌细胞迁移及侵袭的影响,以及其作用机制。方法用0、12.5、25.0、50.0、100、200μmol/L FM处理人子宫内膜癌细胞株Ishikawa细胞48 h,流式细胞术检测细胞凋亡率;取生长状态良好的Ishikawa细胞,分别用25.0、50.0、100μmol/L FM处理,并命名为FM-L组、FM-M组、FM-H组,另取未处理的Ishikawa细胞作为对照组;利用细胞转染技术对处于对数生长期的Ishikawa细胞进行转染,分为miR-182 mimics组、miR-NC组、miR-182 inhibitor组、miR-NC inhibitor组、pcDNA-FOXO3组、pcDNA组,将miR-NC、miR-182 mimics转染Ishikawa细胞后再用100μmol/L FM处理,记为FM+miR-NC组、FM+miR-182 mimics组;Transwell测定细胞迁移及侵袭;Western Blot检测细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、叉头转录因子O亚型3(FOXO3)蛋白表达;RT-PCR检测细胞中miR-182表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-182与FOXO3的靶向关系。结果与0μmol/L FM相比,12.5μmol/L、25.0μmol/L、50.0μmol/L、100μmol/L、200μmol/L FM均可促进Ishikawa细胞凋亡,且25.0μmol/L、50.0μmol/L、100μmol/L FM对Ishikawa细胞凋亡的促进作用最显著;与对照组比较,FM-L组、FM-M组和FM-H组的Ishikawa细胞迁移及侵袭数目、MMP-2及MMP-9蛋白和miR-182表达水平显著降低,FOXO3蛋白表达水平显著升高(P<0.05),且FM浓度越高,对应的变化趋势越明显;miR-182可靶向负调控FOXO3的表达;抑制miR-182表达或上调FOXO3表达均可抑制Ishikawa细胞迁移及侵袭数目和MMP-2、MMP-9蛋白表达(P<0.05);miR-182过表达逆转了FM(100μmol/L)对Ishikawa细胞迁移及侵袭的作用。结论FM可通过抑制miR-182并上调FOXO3的表达来抑制Ishikawa细胞的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 芒柄花黄素 miR-182 叉头转录因子O亚型3 细胞迁移 细胞侵袭
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miR-29b-3p靶向FoxO3基因改善非酒精性脂肪肝预后的初步研究 被引量：1
2
作者 杨仁国 罗婷婷 贺微微 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1005-1011,共7页
目的:探讨miR-29b-3p靶向叉头转录因子O亚型3(forkhead box class O3,FoxO3)对非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的作用。方法:人肝细胞HL-7702(L02)通过miR-29b-3p抑制剂或NC抑制剂或pcDNA-FoxO3转染,经棕榈酸(... 目的:探讨miR-29b-3p靶向叉头转录因子O亚型3(forkhead box class O3,FoxO3)对非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的作用。方法:人肝细胞HL-7702(L02)通过miR-29b-3p抑制剂或NC抑制剂或pcDNA-FoxO3转染,经棕榈酸(palmitic acid,PA)处理后,采用油红O染色测定脂质积累;全自动生化分析仪检测甘油三酯(triglycerides,TG)、胆固醇(total cholesterol,TC)含量;ELISA检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;采用RT-qPCR检测FoxO3、miR-29b-3p mRNA表达;Western blot检测FoxO3蛋白表达;双荧光素酶实验验证miR-29b-3p靶向FoxO3。结果:与对照组比较,PA组TG(2.05±0.22)mmol/L、TC(7.80±1.23)mmol/L、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)(149.67±8.96)%、白介素(interleukin,IL)-6(157.00±18.33)%、IL-8(177.33±24.58)%、miR-29b-3p(161.00±13.00)%、MDA(0.456±0.028)nmol/mL及油红O染成红色的脂滴数量明显升高,SOD(12.91±0.53)ng/mL、GSH-Px(0.515±0.038)ng/mL含量及FoxO3(65.93±4.56)%表达明显降低;miR-29b-3p靶向FoxO3;与PA组比较,PA+miR-29b-3p inhibitor组、PA+miR-29b-3p inhibitor+pcDNA-FoxO3组可明显降低TG、TC、TNF-α、IL-6、IL-8、miR-29b-3p、MDA含量及油红O染成红色的脂滴数量,明显升高SOD、GSH-Px含量。结论:miR-29b-3p靶向FoxO3可减轻PA诱导的L02细胞脂质积累和炎症。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝病 miR-29b-3p 叉头转录因子O亚型3 脂质蓄积
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FOXO3和IL-2在干眼患者结膜上皮细胞及泪液中表达及意义 被引量：1
3
作者 徐艳 唐晓蕾 +1 位作者 韩双羽 刘雪莲 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2022年第9期1446-1450,共5页
目的:探究叉头框蛋白O3(FOXO3)、白细胞介素-2(IL-2)在干眼(DE)患者结膜上皮细胞及泪液中的表达及意义。方法:前瞻性研究。选择2019-03/2021-03收治的DE患者106例,另选同期85位健康体检者为对照。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测结... 目的:探究叉头框蛋白O3(FOXO3)、白细胞介素-2(IL-2)在干眼(DE)患者结膜上皮细胞及泪液中的表达及意义。方法:前瞻性研究。选择2019-03/2021-03收治的DE患者106例,另选同期85位健康体检者为对照。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测结膜上皮细胞及泪液中FOXO3水平;酶联免疫吸附(ELISA)法检测样本中IL-2水平;分析DE患者治疗前后的泪膜破裂时间(BUT)、泪液分泌试验(SⅠt)、角膜荧光素染色(CFS)等眼表临床指标变化;Pearson相关性分析DE患者结膜上皮细胞、泪液中FOXO3和IL-2水平的相关性以及二者与临床指标的关系。结果:与对照组相比,DE组患者结膜上皮细胞及泪液中FOXO3水平均明显降低,IL-2水平均明显升高(均P<0.01)。与治疗前相比,DE患者治疗后结膜上皮细胞及泪液中FOXO3水平明显上调,IL-2水平明显下调(均P<0.01)。Pearson相关性分析结果显示,结膜上皮细胞、泪液中FOXO3和IL-2水平均呈显著负相关(r=-0.531、-0.469,均P<0.01)。DE患者治疗后BUT、SⅠt指标较治疗前上升,CFS指标下降(均P<0.01)。DE患者结膜上皮细胞FOXO3水平与BUT、SⅠt均呈正相关(r=0.431、0.457,均P<0.01),与CFS呈负相(r=-0.469,P<0.01),IL-2水平与BUT、SⅠt均呈负相关(r=-0.416、-0.447,均P<0.01),与CFS呈正相关(r=0.424,P<0.01);泪液FOXO3与BUT、SⅠt呈正相关(r=0.421、0.443,均P<0.01),与CFS呈负相关(r=-0.474,P<0.01),IL-2与BUT、SⅠt呈负相关(r=-0.408、-0.429,均P<0.01),与CFS呈正相关(r=0.419,P<0.01)。结论:DE患者结膜上皮细胞及泪液中FOXO3水平降低,IL-2水平升高,二者与患者眼表指标存在密切的联系,有望成为DE临床监测和预后评估的实验室辅助指标。 展开更多
关键词 叉头框蛋白o3(FOXo3) 白细胞介素-2(IL-2) 干眼 结膜上皮细胞 泪液
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