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Analysis of Wheat GBSS1 Promoter:Tissue Specificity and DNA Methylation
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作者 Pengfei WANG Fengshan REN Yongmei WANG 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2017年第1期5-10,共6页
The cis-regulatory elements of promoters regulate temporal and spatial expression of genes. DNA inethylation, histone methylation and histone acetylation are the main types of epigenetic modifications, which play impo... The cis-regulatory elements of promoters regulate temporal and spatial expression of genes. DNA inethylation, histone methylation and histone acetylation are the main types of epigenetic modifications, which play important roles in plant growth and development. DNA methylation could seilenco transposons, affect gene imprinting and gene expression. In this study, we found that granule bound starch synthase 1 (GBSSI) gene is expressed specifically in wheat endosperm rath- er than in the embryo. We also analyzed the cis-elements within this promoter region and found some seed-specific elements. In order to confirm the tissue specifici- ty, we cloned 4k bp sequences upstream of GBSS1 gene to link to vector with GUS and this construct was transferred to tobacco by Agrobacterium mediated transfor- marion. The results showed that wheat GBSS1 promoter mediated the seed-specific expression of GUS gene, hut not mediated expression in embryo. In addition, we found that GBSSI promoter is methylated in wheat embryo and de-methylated in wheat endosperm. Our study might provide the molecular basis for specific expres- sion of GBSSI gene. 展开更多
关键词 gbss1 cis-regulatory elements Tissue-specific promoter DNA methylation
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自身启动子调控下小麦Anti-gbssⅠ基因表达载体的构建及转基因植株的培养
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作者 苗红梅 化青报 +3 位作者 李利红 赵永英 易明林 郅玉宝 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期243-248,共6页
利用反义技术,构建了含有gbssⅠ启动子和自身反义基因序列的表达载体pRgbss,通过基因枪法在小麦中转化和PCR检测,共得到阳性转基因植株3株.
关键词 小麦 淀粉 gbss启动子 gbss反义基因 转化
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农杆菌介导法将大麦胚乳特异型启动子启动的小麦GBSSⅠ基因转化玉米自交系 被引量:3
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作者 周融希 吴颖 +5 位作者 邹宏达 苏胜忠 李世鹏 单晓辉 刘宏魁 原亚萍 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期30-34,共5页
本研究将从大麦中克隆到的大麦胚乳特异型启动子HorD和小麦中克隆到的小麦颗粒结合型淀粉合成酶基因GBSSⅠ(Granule-bound starch synthaseⅠ,GBSSⅠ)通过中间载体pGM-T-HorD和pGM-T-GBSSⅠ,定向连接到表达载体pCAMBIA3301上,构建了植... 本研究将从大麦中克隆到的大麦胚乳特异型启动子HorD和小麦中克隆到的小麦颗粒结合型淀粉合成酶基因GBSSⅠ(Granule-bound starch synthaseⅠ,GBSSⅠ)通过中间载体pGM-T-HorD和pGM-T-GBSSⅠ,定向连接到表达载体pCAMBIA3301上,构建了植物表达载体pHorD-GBSSⅠ并转入农杆菌EHA105,通过农杆菌介导法转化玉米自交系Y423体细胞胚胎,获得抗性愈伤组织,并得到了再生植株,经PCR分子检测,共有35株呈阳性,阳性率为15%。我们认为本研究可能为进一步改良玉米淀粉品质提供一条分子育种的途径。 展开更多
关键词 玉米(Zea maysL.) 颗粒结合型淀粉合成酶(gbss) 大麦胚乳特异型启动子(HorD) 农杆菌介导遗传转化
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香蕉叶片颗粒结合性淀粉合成酶Ⅰ和可溶性淀粉合成酶Ⅲ基因的克隆与序列分析 被引量:9
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作者 匡云波 赖钟雄 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2012年第1期70-78,共9页
以香蕉栽培品种"天宝蕉"(Musa spp.cv.Tianbao)的叶片为材料,采用同源克隆法结合RT-PCR和RACE法,首次从香蕉中获得颗粒结合性淀粉合成酶Ⅰ(Granule-Bound Starch SynthaseⅠ,GBSSⅠ)基因的cDNA全长片段和可溶性淀粉合成酶Ⅲ(S... 以香蕉栽培品种"天宝蕉"(Musa spp.cv.Tianbao)的叶片为材料,采用同源克隆法结合RT-PCR和RACE法,首次从香蕉中获得颗粒结合性淀粉合成酶Ⅰ(Granule-Bound Starch SynthaseⅠ,GBSSⅠ)基因的cDNA全长片段和可溶性淀粉合成酶Ⅲ(Soluble Starch SynthaseⅢ,SSⅢ)基因的ORF,并分别对其核酸序列及其推导的氨基酸序列进行了生物信息学分析。香蕉叶片GBSSⅠ基因全长2 277 bp,编码616个氨基酸;SSⅢ基因ORF长3 009 bp,编码1 054个氨基酸。GBSSⅠ和SSⅢ的克隆为从分子生物学水平上研究香蕉叶片中参与淀粉合成的关键酶的表达与调控奠定重要基础。 展开更多
关键词 香蕉 gbss SSⅢ 基因克隆
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胰岛素样生长因子-Ⅰ对软骨细胞凋亡的抑制 被引量:16
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作者 李建华 黄建荣 +2 位作者 张雅洁 许继德 樊雪萍 《中国临床康复》 CSCD 2003年第23期3160-3161,T002,共3页
目的:探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)对软骨细胞增殖及白细胞介素-1(IL-1)诱导软骨细胞凋亡的影响,揭示其抗损伤作用机制,为关节软骨损伤治疗提供理论依据。方法:分离培养人胚胎关节软骨细胞,采用四氮甲基唑蓝(MTT)法测定不同含量软... 目的:探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)对软骨细胞增殖及白细胞介素-1(IL-1)诱导软骨细胞凋亡的影响,揭示其抗损伤作用机制,为关节软骨损伤治疗提供理论依据。方法:分离培养人胚胎关节软骨细胞,采用四氮甲基唑蓝(MTT)法测定不同含量软骨细胞增殖活性的变化,利用光镜、电镜、DNA电泳及流式细胞仪测定作为凋亡检测指标。结果:IGF-Ⅰ呈剂量依赖式促软骨细胞增殖,当IGF-Ⅰ含量达50μg/L时,促软骨细胞增殖作用达最大值。IL-1组光镜、电镜下可见典型的细胞凋亡形态学改变,琼脂糖凝胶电泳示特征性的DNA梯状条带,IGF-Ⅰ处理组未见明显凋亡征象。流式细胞仪检测发现,IGF-Ⅰ处理后软骨细胞凋亡率显著降低。结论:IGF-Ⅰ能促进软骨细胞增殖,对IL-1诱导的软骨细胞凋亡具有保护作用。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子- 软骨细胞 抑制 细胞凋亡 脱噬作用 关节软骨损伤
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全反式视黄酸对人α1(Ⅰ)前胶原启动子活性的作用 被引量:5
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作者 伍严安 高春芳 +2 位作者 万伟东 王皓 孔宪涛 《世界华人消化杂志》 CAS 2001年第1期47-49,共3页
目的探讨全反式视黄酸(t-RA)对人αl前胶原(COLIAI)启动子的调控作用,以及胰岛素样生长因子1(IGF-1)与胰岛素对这一调控作用的影响。方法构建含人COL1A1启动子序列248342bp片段与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因的重组体pCOLH2.5。用Fu... 目的探讨全反式视黄酸(t-RA)对人αl前胶原(COLIAI)启动子的调控作用,以及胰岛素样生长因子1(IGF-1)与胰岛素对这一调控作用的影响。方法构建含人COL1A1启动子序列248342bp片段与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因的重组体pCOLH2.5。用Fugene转染试剂瞬时转染至人皮肤成纤维细胞,加入-RA或(和)IGF-1及胰岛素,测定CAT活性。结果 2μmol·L^1与10μmol·L^1-RA使pCOLH2.5的活性降至对照的79%±7%与29%+6%。ICF-1与胰岛素能促进pCOLH2.5的活性。1-RA能降低ICF-1与胰岛素的这一促进作用。结论 1-RA能下调人COL1A1启动子的活性,而ICF-1与胰岛素能上调该启动子的活性。1-RA能降低IGF-1胰岛素的这上调作用。 展开更多
关键词 胶原 遗传学 维甲酸 药理学 胰岛素样生长因子 胰岛素
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补肾益气活血方对宫内发育迟缓胎鼠肝脏IGF-Ⅰ表达的影响 被引量:5
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作者 王琪 黄光英 +2 位作者 袁永辉 李臣鸿 熊丽萍 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期212-215,共4页
目的 观察补肾益气活血方对宫内发育迟缓 (intrauterine growth retardation,IU GR)胎鼠肝脏胰岛素样生长因子 - 1(insulin like growth factor- ,IGF- )基因在转录和翻译水平上的影响 ,探讨其防治 IU GR的作用机制。方法 采用被动... 目的 观察补肾益气活血方对宫内发育迟缓 (intrauterine growth retardation,IU GR)胎鼠肝脏胰岛素样生长因子 - 1(insulin like growth factor- ,IGF- )基因在转录和翻译水平上的影响 ,探讨其防治 IU GR的作用机制。方法 采用被动吸烟法复制胎鼠 IU GR模型 ,分为正常对照组、 IU GR组、 IUGR精氨酸治疗组 (精氨酸组 )、 IU GR补肾益气活血方治疗组 (中药组 )。采用 Northern blot和免疫组织化学的方法分别检测胎鼠肝脏 IGF- m RNA和蛋白的表达。结果  IUGR组 IGF- m RNA及蛋白表达水平与对照组比较明显下调 (P<0 .0 1) ,而精氨酸组和中药组两者表达水平较 IUGR组有所增加 ,其中 ,中药组 IGF- 的表达强度高于精氨酸组 (P<0 .0 5 ) ,接近正常组 (P>0 .0 5 )。结论补肾益气活血方可能通过直接 (或间接 )促进 IGF- 的合成和分泌 ,或者防止某些致病因素对 IGF- 基因表达细胞信息传导途径的阻断而起到防治 展开更多
关键词 宫内发育迟缓 补肾益气活血中药 肝脏胰岛素样生长因子-1 作用机制 信息传导途径
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补肾活血方与PRP对Ⅰ型胶原活性和表达的影响 被引量:2
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作者 李玲慧 李凯明 +5 位作者 杨少锋 朱立国 王尚全 展嘉文 陈明 张清 《海南医学院学报》 CAS 2019年第22期1681-1685,1692,共6页
目的:观察补肾活血方与富血小板血浆(PRP)对共培养体系中Ⅰ型胶原活性和表达的影响。方法:取腰椎间盘退变行髓核摘除手术患者的皮下脂肪组织及退变髓核组织,运用多次酶消化法原代分离、培养,建立ADSCs/NPCs共培养体系。纳入腰椎间盘退... 目的:观察补肾活血方与富血小板血浆(PRP)对共培养体系中Ⅰ型胶原活性和表达的影响。方法:取腰椎间盘退变行髓核摘除手术患者的皮下脂肪组织及退变髓核组织,运用多次酶消化法原代分离、培养,建立ADSCs/NPCs共培养体系。纳入腰椎间盘退变患者,连续服用补肾活血方2周,分别于初次服药前和末次服药后1 h抽取静脉血各50 mL,采用二次离心法制备富血小板血浆,以不同血浆干预培养。实验共分为5组:富血小板血浆组(PRP)、贫血小板血浆组(PPP)、含药富血小板血浆组(M-PRP)和含药贫血小板血浆组(M-PPP)、胎牛血清组(FBS)。倒置显微镜下观察各组细胞的形态变化;采用细胞免疫荧光法检测Ⅰ型胶原活性变化;干预培养2周后采用RT-PCR法检测细胞COL1A1基因表达水平。结果:本研究发现经过补肾活血方和PRP分组干预后的结果显示,与其余组别相比,M-PRP组及PRP组细胞轮廓更为清晰、折光度更好,两组之间无明显差异。细胞免疫荧光染色结果显示,PRP组和M-PRP组细胞数量较多,但单个细胞的染色强度明显低于FBS组。RT-PCR结果显示,PPP组、PRP组、M-PRP组和M-PPP组COL1A1 mRNA表达均显著下调(P<0.05)。结论:补肾活血方联合富血小板血浆组可在一定程度上降低Ⅰ型胶原活性,抑制其表达功能。 展开更多
关键词 补肾活血方 富血小板血浆 型胶原 活性 表达
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apoAⅠ启动子-93 bp~-63 bp片段及-75 bp位点突变对基因转录调控作用的研究
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作者 程爱娟 毛用敏 +1 位作者 崔让庄 魏民新 《天津医药》 CAS 北大核心 2006年第9期593-595,共3页
目的:研究载脂蛋白AⅠ(apoAⅠ)启动子区域-93bp~-63bp对基因转录活性的影响,探讨-75bp位点G→A置换在基因转录中的作用。方法:在人类基因组数据库中截取并下载apoAⅠ基因启动子序列,对照基因图谱人工合成apoAⅠ启动子区域-93bp~-63bp... 目的:研究载脂蛋白AⅠ(apoAⅠ)启动子区域-93bp~-63bp对基因转录活性的影响,探讨-75bp位点G→A置换在基因转录中的作用。方法:在人类基因组数据库中截取并下载apoAⅠ基因启动子序列,对照基因图谱人工合成apoAⅠ启动子区域-93bp~-63bp片段,-75bp位点分别为突变型(A)或野生型(G),进行生物素标记。培养HepG2细胞,提取核蛋白混合物。将核蛋白与标记好的两条DNA链结合,进行电泳迁移率(EMSA)实验,观察两者结合情况。结果:apoAⅠ启动子-93bp~-63bp区域可与某种特异性核蛋白转录因子结合。-75bp位点为G等位基因的探针与含A的探针相比,核蛋白的结合明显增多。同时,竞争抑制实验表明,含G的探针与核蛋白的亲和力高于含A的探针。结论:apoAⅠ基因启动子-93bp~-63bp区域通过与核蛋白转录因子的结合参与基因调控,-75bp位点G→A置换降低与转录因子的亲和力,降低apoAI转录活性从而影响基因表达。 展开更多
关键词 载脂蛋白A- 基因 转录 遗传 启动区(遗传学)
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猪精浆蛋白基因PSP-Ⅰ和PSP-Ⅱ启动子序列克隆及生物信息学分析
10
作者 周辉云 李庆平 +3 位作者 吴晗 何庆玲 宋成义 陈国宏 《生物信息学》 2011年第1期50-53,59,共5页
分别用PCR方法扩增了1.7kbp和1.6kbp的猪PSP-Ⅰ和PSP-Ⅱ基因的启动子,并进行TA克隆,测序鉴定,测序结果用DNAstar程序与Genebank中的相应序列进行对比分析,结果显示与已发表序列的同源性分别为99.8%和96.3%。利用生物信息学的方法对克隆... 分别用PCR方法扩增了1.7kbp和1.6kbp的猪PSP-Ⅰ和PSP-Ⅱ基因的启动子,并进行TA克隆,测序鉴定,测序结果用DNAstar程序与Genebank中的相应序列进行对比分析,结果显示与已发表序列的同源性分别为99.8%和96.3%。利用生物信息学的方法对克隆的1.7kbp和1.6kbp的猪PSP-Ⅰ和PSP-Ⅱ基因的启动子区进行了预测分析。PSP-Ⅰ和PSP-Ⅱ基因序列对比(mVista)分析发现,启动子0→-1000bp的保守性较高,其中0→-200bp核心启动子部分的序列同源性达到了100%,而-1000bp上游序列的保守性则较低。启动子的位置预测(Promoter Scan)结果显示,转录起始点上游200bp的区域为两基因的核心启动子位置。启动子区转录因子结合位点预测(TFSEARCH)发现,转录起始位点上游的1000bp区域内含有大量的顺式调控元件,并且得到了一系列潜在的转录因子结合位点。 展开更多
关键词 生物信息学 PSP- PSP-Ⅱ 启动子
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雌激素对载脂蛋白AⅠ基因启动子不同区域转录活性的影响
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作者 崔丽 毛用敏 +2 位作者 赵莉莉 程爱娟 崔让庄 《天津医药》 CAS 北大核心 2011年第10期896-898,共3页
目的:探讨雌激素对载脂蛋白(Apo)AⅠ基因启动子不同区域转录调节活性的影响。方法:利用含荧光素酶报告基因的表达载体pGL2构建携带ApoAⅠ基因启动子不同区域片段的重组质粒和同时携带ApoCⅢ/AⅣ基因片段的重组质粒。阳离子脂质体法将重... 目的:探讨雌激素对载脂蛋白(Apo)AⅠ基因启动子不同区域转录调节活性的影响。方法:利用含荧光素酶报告基因的表达载体pGL2构建携带ApoAⅠ基因启动子不同区域片段的重组质粒和同时携带ApoCⅢ/AⅣ基因片段的重组质粒。阳离子脂质体法将重组质粒与pRL-null内参质粒共转染HepG2细胞,加入10μmol/L雌激素刺激24h检测细胞荧光素酶报告基因的荧光强度,以反映ApoAⅠ的转录水平。结果:pGL2/-256AⅠ,pGL2/-2500AⅠ,pGL2/-256AⅠCⅢAⅣ及pGL2/-2500AⅠCⅢAⅣ转染后雌激素组荧光素酶相对活性明显高于对照组(P<0.05);而pGL2/-41AⅠ及pGL2/-41AⅠCⅢAⅣ质粒转染后雌激素组与对照组荧光素酶活性差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ApoAⅠ启动子-256^-41区域可能包含与雌激素作用相关的反应元件,受雌激素刺激后转录活性增强。 展开更多
关键词 载脂蛋白A- 启动区(遗传学)调节元件 转录雌二醇质粒转染细胞系 肿瘤
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烧伤Ⅰ号药膏临床疗效观察 被引量:1
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作者 王玲 《河南中医学院学报》 2005年第6期60-60,共1页
关键词 烧伤号膏 活血止痛 收敛消肿
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通过同源重组在聚球藻7002中表达小鼠金属硫蛋白-Ⅰ的初步研究 被引量:7
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作者 周杰 罗娜 +3 位作者 宁叶 施定基 俞梅敏 茹炳根 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第1期149-153,共5页
用PCR方法从海洋单细胞蓝藻聚球藻 70 0 2 (Synechococcussp .PCC 70 0 2 )基因组DNA中扩增得到藻蓝蛋白β亚基基因 (cpcβ)的上游序列 (Pcpcβ) ,及编码谷氨酰胺合成酶的 glnA基因片段 .以Pcpcβ作为启动子、以glnA基因片段作为整合平... 用PCR方法从海洋单细胞蓝藻聚球藻 70 0 2 (Synechococcussp .PCC 70 0 2 )基因组DNA中扩增得到藻蓝蛋白β亚基基因 (cpcβ)的上游序列 (Pcpcβ) ,及编码谷氨酰胺合成酶的 glnA基因片段 .以Pcpcβ作为启动子、以glnA基因片段作为整合平台 ,构建含有小鼠金属硫蛋白 Ⅰ (mMT Ⅰ )cDNA的同源整合表达载体 pKGC MT .通过自然转化法将整合表达载体导入聚球藻 70 0 2中 ,经氨苄青霉素筛选 ,得到遗传性状稳定的转基因藻 .PCR检测证明mMT Ⅰ基因已整合到蓝藻基因组DNA上 ;蛋白质印迹表明mMT Ⅰ已在蓝藻中表达 ;ELISA结果显示mMT Ⅰ在蓝藻中的表达量约为 80 0 μg/ g . 展开更多
关键词 小鼠 金属硫蛋白- 启动子Pcpcβ glnA整合平台 聚球藻7002 同源重组 表达
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棘孢木霉木聚糖酶Ⅰ基因和启动子克隆与分析
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作者 庞漫宇 郭丽琼 +1 位作者 项凡 林俊芳 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期15-18,共4页
目的:克隆及分析棘孢木霉木聚糖酶Ⅰ结构基因和上游调控区,以获得内源启动子。方法:根据木霉属木聚糖酶Ⅰ结构基因及上游调控区的保守性,以棘孢木霉基因组DNA为模板,进行简并PCR扩增。产物纯化并克隆至T载体,经酶切鉴定后进行序列分析... 目的:克隆及分析棘孢木霉木聚糖酶Ⅰ结构基因和上游调控区,以获得内源启动子。方法:根据木霉属木聚糖酶Ⅰ结构基因及上游调控区的保守性,以棘孢木霉基因组DNA为模板,进行简并PCR扩增。产物纯化并克隆至T载体,经酶切鉴定后进行序列分析。结果:扩增获得1.2 kb的片段,酶切鉴定及序列分析表明,该片段长1 265 bp,由753 bp的木聚糖酶Ⅰ结构基因和512 bp的上游调控区组成。结构基因编码230个氨基酸,具有糖基水解酶第11家族的典型保守区域。上游调控区具备核心启动子和转录起始点,有CAAT-Box、TATA-Box等启动子特征元件,分析其还有CreⅠ、XlnR、Ace1、AreA等多个转录因子结合位点。结论:克隆的512 bp上游调控区是典型的丝状真菌基因启动子,可作为内源启动子用于构建棘孢木霉高效外源基因表达系统。 展开更多
关键词 棘孢木霉 木聚糖酶 基因克隆 启动子
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DBP及E4BP4对拓扑异构酶Ⅰ的转录调节作用 被引量:1
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作者 杨芳 张佳星 +1 位作者 任欣 周卫东 《山西医科大学学报》 CAS 2012年第6期420-423,共4页
目的探讨DBP(D site of albumin promoter(albumin D-box)binding protein)及E4BP4(腺病毒E4启动子结合蛋白-4)是否参与拓扑异构酶Ⅰ(TOPOⅠ)的调节作用。方法运用荧光素酶转录活性测定DBP和E4BP4对mTopoⅠ的转录活性,凝胶阻滞分析检测... 目的探讨DBP(D site of albumin promoter(albumin D-box)binding protein)及E4BP4(腺病毒E4启动子结合蛋白-4)是否参与拓扑异构酶Ⅰ(TOPOⅠ)的调节作用。方法运用荧光素酶转录活性测定DBP和E4BP4对mTopoⅠ的转录活性,凝胶阻滞分析检测DBP及E4BP4蛋白和TopoⅠ核酸相互作用。结果荧光素酶转录活性测定实验显示DBP及E4BP4均能促进TopoⅠ基因的转录活性;凝胶阻滞分析实验直接证实DBP及E4BP4与TOPOⅠ启动子区域D-box活性区域结合发挥活性作用。结论 DBP及E4BP4参与调节拓扑异构酶Ⅰ的表达。 展开更多
关键词 拓扑异构酶 DBP 腺病毒E4启动子结合蛋白-4
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玉米种子特异启动子GBSSⅠ的克隆及其功能分析
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作者 张国珍 范杰英 +4 位作者 韦正乙 坚伟宁 左朋 郑大浩 邢少辰 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期531-538,共8页
玉米子粒被认为是生产外源蛋白的理想载体,而利用种子(胚乳)特异性启动子是提高外源蛋白表达水平最简单的途径。从玉米基因组中克隆获得长为999 bp的GBSSⅠ基因启动子pGBSSⅠ,该序列不但含有CAAT-box等启动子基本元件,而且还包含光响应... 玉米子粒被认为是生产外源蛋白的理想载体,而利用种子(胚乳)特异性启动子是提高外源蛋白表达水平最简单的途径。从玉米基因组中克隆获得长为999 bp的GBSSⅠ基因启动子pGBSSⅠ,该序列不但含有CAAT-box等启动子基本元件,而且还包含光响应、激素调控、胁迫诱导和发育等多个顺式调控元件。利用该启动子构建植物表达载体pCBG-Gus,并经农杆菌介导法转化玉米幼胚,通过筛选和分化获得抗性植株。经Bar蛋白基因金标免疫试纸条和PCR检测确认获得转基因阳性玉米植株。对转基因玉米不同组织中Gus和内源GBSSⅠ的转录情况进行实时定量PCR分析和Gus组织化学染色分析,结果表明:2个基因的表达水平并不一致。在转录水平上,除了叶片(包括叶鞘)之外,其他被检组织中的Gus的表达均低于GBSSⅠ;在蛋白表达水平上,除了茎和根之外,其他组织中均可检测到程度不同的Gus活性表达,其中成熟种子(包括胚和胚乳)中Gus蛋白积累的水平最高。综上,玉米子粒特异启动子pGBSSⅠ是一个具有潜在应用价值的启动子,将为提升玉米胚乳中外源蛋白的表达量提供理论依据。 展开更多
关键词 玉米 gbss启动子 转录活性 农杆菌介导法 GUS染色
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CMV与SP双启动子增强外源基因在小鼠骨骼肌中的表达效率 被引量:9
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作者 章倩倩 刘松财 +2 位作者 戴建威 任晓慧 张永亮 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期554-559,共6页
构建分别含有CMV、肌肉特异启动子SP及双启动子CMV-SP的真核报告基因EGFP表达载体(pCMV-EGFP、pSP-EGFP及pCMV-SP-EGFP)和生长激素释放因子(GRF)表达载体(pCMV-GRF、pSP-GRF和pCMV-SP-GRF).将3种EGFP表达质粒分别注射至小鼠骨骼肌.注射... 构建分别含有CMV、肌肉特异启动子SP及双启动子CMV-SP的真核报告基因EGFP表达载体(pCMV-EGFP、pSP-EGFP及pCMV-SP-EGFP)和生长激素释放因子(GRF)表达载体(pCMV-GRF、pSP-GRF和pCMV-SP-GRF).将3种EGFP表达质粒分别注射至小鼠骨骼肌.注射后1周、2周、3周以及4周时,分别提取肌肉组织RNA,应用半定量RT-PCR检测报告基因(EGFP)的表达量,发现pCMV-SP-EGFP组EGFP表达量显著高于pCMV-EGFP组和pSP-EGFP组(P<0.01);经荧光检测得到了较强的荧光信号.将3种GRF表达质粒分别注射至小鼠骨骼肌,在注射后每隔10d记录小鼠累积增重,采血并用RIA法测定血清胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)浓度,结果pCMV-SP-GRF组累积增重、IGF-I浓度分别高于生理盐水组、pCMV-GRF组和pSP-GRF组(P<0.05).结果表明:CMV与SP两种启动子组合,在小鼠骨骼肌内使外源基因表达效率提高.本研究为提高外源基因在肌肉组织的表达提供了新的途径. 展开更多
关键词 CMV启动子 SP启动子 双启动子 EGFP GRF IGF-
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螺旋藻在对虾育苗中的应用 被引量:8
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作者 顾天青 张慧苗 +1 位作者 张金星 张富胜 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 1989年第3期48-51,共4页
在对虾育苗中,幼体饵料的选择对幼体的发育和提高成活率是至关重要的。 溞状Ⅰ期—Ⅲ期,幼体以食植物性饵料为主,有的地方,以扁藻和三角褐指藻等单细胞藻类为主;另一些地方,则选用豆浆或豆浆加蛋黄的人工代用饵料。豆浆的营养价值虽比较... 在对虾育苗中,幼体饵料的选择对幼体的发育和提高成活率是至关重要的。 溞状Ⅰ期—Ⅲ期,幼体以食植物性饵料为主,有的地方,以扁藻和三角褐指藻等单细胞藻类为主;另一些地方,则选用豆浆或豆浆加蛋黄的人工代用饵料。豆浆的营养价值虽比较高,但不及单胞藻类,它易污染水质,不具有单胞藻类所含的活性物质,且影响对虾幼体的发育。 展开更多
关键词 螺旋藻 对虾 育苗 海水养殖
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胰岛素的促生长作用 被引量:22
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作者 史民 冯佑民 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第3期215-219,共5页
除了经典的代谢调节作用之外 ,胰岛素还具有重要的促生长作用 :在体外胰岛素能够刺激众多细胞的增殖与分化 ,一些实验证明胰岛素在体内可能也是一种重要的生长调节因子 .胰岛素的促生长作用通过细胞表面的胰岛素受体介导 ,但在较高的胰... 除了经典的代谢调节作用之外 ,胰岛素还具有重要的促生长作用 :在体外胰岛素能够刺激众多细胞的增殖与分化 ,一些实验证明胰岛素在体内可能也是一种重要的生长调节因子 .胰岛素的促生长作用通过细胞表面的胰岛素受体介导 ,但在较高的胰岛素浓度下也可以通过类胰岛素生长因子Ⅰ(IGF Ⅰ )受体进行 ,在不同细胞体系中可能会有所不同 .受体后的信号转导经过了一系列磷酸化和去磷酸化等途径 ,其中有胰岛素受体底物 1 (IRS 1 )、Shc蛋白、Ras蛋白以及磷酸肌醇 3激酶 (PI3 K)等的参与 .在胰岛素的分子表面很可能存在一些区域或位点 ,对其促生长作用有着更大的贡献 。 展开更多
关键词 胰岛素 促生长作用 胰岛素受体 受体
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复黄生肌愈创油膏减少皮肤创面瘢痕形成的作用机理研究 被引量:18
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作者 张士云 唐汉钧 +3 位作者 崔全起 王林扬 章学林 张金福 《上海中医药大学学报》 CAS 2001年第2期52-55,共4页
为探讨以祛瘀补虚生肌法组方的外用复黄生肌愈创油膏 (简称复黄膏 ,主要由大黄、蛋黄油、血竭、珍珠粉等组成 )减少皮肤创面瘢痕形成的作用机理 ,造成背面皮肤局部创伤大鼠模型 ,分别采用放射免疫法、免疫组化法和RT -PCR法动态观测其... 为探讨以祛瘀补虚生肌法组方的外用复黄生肌愈创油膏 (简称复黄膏 ,主要由大黄、蛋黄油、血竭、珍珠粉等组成 )减少皮肤创面瘢痕形成的作用机理 ,造成背面皮肤局部创伤大鼠模型 ,分别采用放射免疫法、免疫组化法和RT -PCR法动态观测其对大鼠创面渗液中透明质酸 (HA)含量、创面组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量以及创面修复组织中TGF -β1 mRNA表达水平的影响 ,并与白玉膏 (中医传统生肌法 )和凡士林 (临床常规用药 )作比较。结果显示 :复黄膏可明显提高HA含量 (并维持一个较高水平 )和Ⅲ /Ⅰ型胶原比例 ,对TGF -β1 mRNA表达有良好的调控作用 ,功效优于白玉膏和凡士林。 展开更多
关键词 复黄生肌愈创油膏 慢性皮肤溃疡 创面渗液 创伤修复 透明质酸 HA 胶原 TGF-Β1MRNA
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