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抗心肌肥大多肽GCIP表达载体的构建 被引量:6
1
作者 周见至 李晓辉 +2 位作者 张海港 唐渊 王晓芹 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期298-300,共3页
目的 化学合成DNA片段后利用基因工程技术 ,克隆入含有T7启动子的原核表达质粒。方法 采用分二段化学合成G蛋白竞争性抑制肽 (G proteincompetedinhibitionofpeptide ,GCIP)基因的方法 ,酶切后先定向克隆到pEGFP N1质粒中 ,再用XhoⅠ... 目的 化学合成DNA片段后利用基因工程技术 ,克隆入含有T7启动子的原核表达质粒。方法 采用分二段化学合成G蛋白竞争性抑制肽 (G proteincompetedinhibitionofpeptide ,GCIP)基因的方法 ,酶切后先定向克隆到pEGFP N1质粒中 ,再用XhoⅠ和SmaⅠ切下含完整基因的片段 ,插入XhoⅠ和SmaⅠ处理的pIVEX2 3 MCS质粒 ,构建能在EcoliBL2 1(DE3 )pLysE和RTS5 0 0系统中表达的质粒。经转化DH5α大肠杆菌 ,筛选出阳性转化子 ,并用酶切及测序鉴定。结果通过基因工程技术 ,构建了pIVEX2 3MCS GCIP表达质粒 ,经测序鉴定结果与设计的完全相符。 展开更多
关键词 gcip基因 重组 pIVEX2.3-MCS PEGFP-N1
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Gq蛋白竟争性抑制肽GCIP-27质粒载体的构建及表达 被引量:1
2
作者 周见至 李晓辉 +1 位作者 吴雪晖 张海港 《重庆医学》 CAS CSCD 2007年第21期2172-2173,共2页
目的化学合成寡核苷酸片段克隆入pIVEX2.3质粒中,构建GCIP-27的原核表达载体并进行原核表达。方法化学合成GCIP-27的全基因序列,定向克隆到pIVEX2.3质粒中构建含有T7启动子的pIVEX2.3-GCIP27原核表达载体并酶切及测序鉴定;pIVEX2.3-GCI... 目的化学合成寡核苷酸片段克隆入pIVEX2.3质粒中,构建GCIP-27的原核表达载体并进行原核表达。方法化学合成GCIP-27的全基因序列,定向克隆到pIVEX2.3质粒中构建含有T7启动子的pIVEX2.3-GCIP27原核表达载体并酶切及测序鉴定;pIVEX2.3-GCIP27质粒转染E coli BL21(DE3)pLysE细菌,用IPTG诱导GCIP-27多肽的表达。结果成功构建了pIVEX2.3-GCIP27表达质粒,经测序鉴定结果与设计的完全相符;成功用BL21细菌表达了GCIP-27多肽,GCIP-27占细菌总蛋白的4.96%。结论本实验构建并表达了GCIP-27的重组质粒,为GCIP-27的大量原核表达奠定了基础。 展开更多
关键词 gcip-27 心肌肥大 pIVEX2.3 表达
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克隆、表达GCIP基因及其抗心肌肥大作用的初步研究
3
作者 周见至 李晓辉 《中国药理通讯》 2003年第2期66-66,共1页
关键词 心肌肥大 Gq蛋白竞争性抑制肽 gcip 基因工程 蛋白质工程 MAPK
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G蛋白抑制肽GCIP-27对小鼠心肌肥大的影响 被引量:3
4
作者 卢小岚 杨华 +3 位作者 邓翔 刘雅 李晓辉 张海港 《中国药房》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期793-795,共3页
目的:探讨G蛋白抑制肽GCIP-27对去甲肾上腺素诱导的小鼠心肌肥大的作用。方法:50只小鼠随机分为对照组、模型组和GCIP-27组,分别给予生理盐水、去甲肾上腺素和GCIP-27低、中、高剂量(10、30、100μg·kg-1)连续15d。之后称量小鼠体... 目的:探讨G蛋白抑制肽GCIP-27对去甲肾上腺素诱导的小鼠心肌肥大的作用。方法:50只小鼠随机分为对照组、模型组和GCIP-27组,分别给予生理盐水、去甲肾上腺素和GCIP-27低、中、高剂量(10、30、100μg·kg-1)连续15d。之后称量小鼠体质量、心脏重、左心室重,计算心脏指数和左心室指数。采用免疫组化法测定心肌组织的原癌基因c-Fos和细胞外信号调节激酶p-ERK1/2表达。结果:与对照组比较,模型组可明显诱导小鼠产生心肌肥大。与模型组比较,GCIP-27各剂量组能明显降低心脏指数和左心室指数,减少心肌组织中c-Fos和p-ERK1/2的表达量(P<0.05或P<0.01)。结论:GCIP-27可抑制小鼠发生心肌肥大,其机制可能与抑制c-Fos和p-ERK1/2表达有关。 展开更多
关键词 G蛋白抑制 gcip-27 小鼠 心肌肥大
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同位素标记示踪法测定小鼠G蛋白抑制肽GCIP-27血药浓度 被引量:2
5
作者 王秀琴 李晓辉 +1 位作者 张海港 杨丹莉 《中国药房》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期266-268,共3页
目的:考察小鼠静脉注射G蛋白抑制肽GCIP-27后药动学情况。方法:125I-GCIP采用氯甘脲法标记,血浆中GCIP的浓度采用同位素示踪法结合三氯醋酸(TCA)沉淀法或低分子量SDS-PAGE电泳法测定。结果:GCIP-27在小鼠体内按一级动力学代谢,并呈三室... 目的:考察小鼠静脉注射G蛋白抑制肽GCIP-27后药动学情况。方法:125I-GCIP采用氯甘脲法标记,血浆中GCIP的浓度采用同位素示踪法结合三氯醋酸(TCA)沉淀法或低分子量SDS-PAGE电泳法测定。结果:GCIP-27在小鼠体内按一级动力学代谢,并呈三室开放模型;静脉注射125I-GCIP90μg.kg-1后,电泳法和酸沉法测得t1/2α、t1/2β、t1/2γ分别为0.009、0.245、2.054h和0.025、0.306、2.323h;tmax均为0.0333h,平均血浆清除率分别为0.295、0.322L.h-1.kg-1,表观分布容积分别为0.559、1.29L.kg-1,体内平均滞留时间分别为2.353、2.515h。结论:GCIP-27在小鼠体内血药浓度下降快,分布快,自中央室迅速向周边室分布;消除、代谢缓慢。本研究结果可为GCIP-27的剂型设计和药效学研究提供重要依据。 展开更多
关键词 gcip-27 小鼠 同位素标记示踪法 TCA沉淀法 低分子量SDS PAGE 血药浓度
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G蛋白抑制肽GCIP-27对大鼠慢性心力衰竭的影响 被引量:1
6
作者 卢小岚 杨华 +4 位作者 徐亚莉 刘雅 王妍 李晓辉 张海港 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期126-130,共5页
目的探讨G蛋白抑制肽GCIP-27对多柔比星(Dox)诱导的大鼠慢性心力衰竭的作用。方法 48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、氯沙坦组、GCIP-27组,分别给予生理盐水、Dox、Dox+氯沙坦、Dox+GCIP-27(10、30、90μg·kg^(-1),ip,bid)。给予... 目的探讨G蛋白抑制肽GCIP-27对多柔比星(Dox)诱导的大鼠慢性心力衰竭的作用。方法 48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、氯沙坦组、GCIP-27组,分别给予生理盐水、Dox、Dox+氯沙坦、Dox+GCIP-27(10、30、90μg·kg^(-1),ip,bid)。给予Dox复制模型后,再继续喂养大鼠,于d71,经胸高频彩超诊断仪测定大鼠心功能;称量大鼠体重、心脏质量、左心室质量,计算心脏质量指数和左心室质量指数;HE染色后观察大鼠心肌组织病理形态学改变。结果 Dox可明显诱导大鼠发生慢性心力衰竭;氯沙坦6mg·kg^(-1)、GCIP-27(30、90μg·kg^(-1),bid)能明显抑制大鼠左心室重构,提高心脏的射血分数和短轴缩短率,降低心脏质量指数和左心室质量指数,减少心肌组织的损伤。结论 GCIP-27能抑制慢性心力衰竭大鼠的左心室重构,改善心脏功能。 展开更多
关键词 肽类 GTP结合蛋白质类 心力衰竭 多柔比星 gcip-27
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G蛋白抑制性多肽-27药动学测定方法的建立 被引量:1
7
作者 王秀琴 李晓辉 +1 位作者 张海港 杨丹莉 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期692-695,共4页
目的建立测定小鼠血浆中G蛋白抑制性多肽-27(GCIP-27)浓度的放射性核素(125I)示踪测定法。方法125I-GCIP采用Iodogen法标记,血浆中GCIP的浓度采用同位素示踪法结合三氯醋酸(TCA)沉淀法或低相对分子质量SDS-PAGE电泳法测定,并比较其测定... 目的建立测定小鼠血浆中G蛋白抑制性多肽-27(GCIP-27)浓度的放射性核素(125I)示踪测定法。方法125I-GCIP采用Iodogen法标记,血浆中GCIP的浓度采用同位素示踪法结合三氯醋酸(TCA)沉淀法或低相对分子质量SDS-PAGE电泳法测定,并比较其测定结果。结果TCA沉淀法和电泳法同时对照测定60份GCIP血浆样品,结果呈良好的相关性,r=0.9554。2种方法最低检测浓度均为2.0μg.L-1,日内、日间RSD均小于10%,血浆在3.75~480μg.L-1内均呈良好的相关性,相关系数分别为r=0.9977和0.9964,血浆中GCIP的平均回收率分别为(92.72±4.55)%和(91.77±5.21)%。结论同位素示踪法与沉淀法或电泳法结合,方法稳定、可靠、灵敏度较高,两法相辅相成,适于GCIP-27血药浓度测定。 展开更多
关键词 G蛋白抑制性多肽-27 同位素标记示踪法 TCA沉淀法 低分子量蛋白电泳法
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同位素标记示踪法测定G蛋白竞争性抑制肽-27在动物体内的分布与排泄
8
作者 王秀琴 李晓辉 +1 位作者 张海港 杨丹莉 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期256-259,共4页
目的:利用同位素标记示踪法研究G蛋白竞争性抑制肽(GCIP)-27在动物体内的分布和排泄。方法:125I-GCIP采用Iodogen法标记,按组织器官直接测定法和TCA沉淀法进行体内分布实验,以每毫克组织器官的125I-GCIP放射性计数表示GCIP在小鼠体内的... 目的:利用同位素标记示踪法研究G蛋白竞争性抑制肽(GCIP)-27在动物体内的分布和排泄。方法:125I-GCIP采用Iodogen法标记,按组织器官直接测定法和TCA沉淀法进行体内分布实验,以每毫克组织器官的125I-GCIP放射性计数表示GCIP在小鼠体内的分布;以不同时间段大鼠胆汁、尿、粪及小鼠的尿、粪放射性总排泄量占给药量放射性的百分比表示其在体内的排泄。结果:GCIP-27在小鼠体内分布广泛,其中肾、血管、胃、肺、心、小肠等组织分布较高,肌肉、脂肪等组织相对较低,脑最低。大鼠72h粪、尿、胆汁原形药物排泄量分别为给药量的26.13%,0.95%和4.12%。小鼠72h粪、尿原形药物排泄量分别为给药量的27.92%,0.84%。结论:GCIP-27在小鼠体内广泛分布,主要经尿液排泄,肾为主要排泄器官。 展开更多
关键词 G蛋白竞争性抑制肽 同位素标记示踪法 三氯醋酸沉淀法
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The role of optical coherence tomography in neuro-ophthalmology
9
作者 John J.Chen Fiona Costello 《Annals of Eye Science》 2018年第1期228-245,共18页
Optical coherence tomography(OCT)is an ocular imaging technique that can complement the neuro-ophthalmic assessment,and inform our understanding regarding functional consequences of neuroaxonal injury in the afferent ... Optical coherence tomography(OCT)is an ocular imaging technique that can complement the neuro-ophthalmic assessment,and inform our understanding regarding functional consequences of neuroaxonal injury in the afferent visual pathway.Indeed,OCT has emerged as a surrogate end-point in the diagnosis and follow up of several demyelinating syndromes of the central nervous system(CNS),including optic neuritis(ON)associated with:multiple sclerosis(MS),neuromyelitis optica spectrum disorder(NMOSD),and anti-myelin oligodendrocyte glycoprotein(MOG)antibodies.Recent advancements in enhanced depth imaging(EDI)OCT have distinguished this technique as a new gold standard in the diagnosis of optic disc drusen(ODD).Moreover,OCT may enhance our ability to distinguish cases of papilledema from pseudopapilledema caused by ODD.In the setting of idiopathic intracranial hypertension(IIH),OCT has shown benefit in tracking responses to treatment,with respect to reduced retinal nerve fiber layer(RNFL)measures and morphological changes in the angling of Bruch’s membrane.Longitudinal follow up of OCT measured ganglion cell-inner plexiform layer thickness may be of particular value in managing IIH patients who have secondary optic atrophy.Causes of compressive optic neuropathies may be readily diagnosed with OCT,even in the absence of overt visual field defects.Furthermore,OCT values may offer some prognostic value in predicting post-operative outcomes in these patients.Finally,OCT can be indispensable in differentiating optic neuropathies from retinal diseases in patients presenting with vision loss,and an unrevealing fundus examination.In this review,our over-arching goal is to highlight the potential role of OCT,as an ancillary investigation,in the diagnosis and management of various optic nerve disorders. 展开更多
关键词 Optical coherence tomography(OCT) retinal nerve fiber layer(RNFL) ganglion cell-inner plexiform layer(gcip)thickness optic neuritis(ON) optic disc drusen(ODD)
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