期刊文献+
共找到150篇文章
< 1 2 8 >
每页显示 20 50 100
ATM失活诱导GADD45α依赖的小脑颗粒神经元凋亡
1
作者 吴森斌 伍健伟 +5 位作者 马莹 赵凡一 曹东芳 梁建峰 胡坤华 袁忠民 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期758-767,共10页
【目的】探究共济失调毛细血管扩张突变(ATM)激酶失活诱导神经元凋亡的具体分子机制。【方法】体外成熟7 d的小脑颗粒神经元(CGNs)分别用含25 mmol/L KCl(25 K)培养基、5 mmol/L KCl(5 K)培养基和含ATM特异性抑制剂(Ku55933,10μmol/L;K... 【目的】探究共济失调毛细血管扩张突变(ATM)激酶失活诱导神经元凋亡的具体分子机制。【方法】体外成熟7 d的小脑颗粒神经元(CGNs)分别用含25 mmol/L KCl(25 K)培养基、5 mmol/L KCl(5 K)培养基和含ATM特异性抑制剂(Ku55933,10μmol/L;Ku60019,15μmol/L)的25 K培养基后进行免疫印迹检测ATM、Caspase3、Cleaved Caspase-3的蛋白表达水平或培养8 h后进行Hoechst染色分析。在C6细胞和CGNs中转染ATM和GADD45α特异性siRNA,q-PCR和免疫印迹验证其干扰效率。体外成熟5 d的CGNs通过磷酸钙转染ATM特异性siRNA和pCMV-EGFP 48 h后进行Hoechst染色和凋亡分析。体外成熟7 d的CGNs用含ATM特异性抑制剂的25 K培养基培养8 h后进行全转录组测序、差异表达基因鉴定和通路富集分析。体外成熟5 d的CGNs通过磷酸钙转染GADD45α特异性siRNA和pCMV-EGFP 48 h,用含15μmol/L Ku6的25 K培养基处理8 h或5 K培养基处理8 h后进行Hoechst染色和凋亡分析。【结果】与25 K组相比,5 K处理组和ATM特异性抑制剂处理组的CGNs ATM蛋白表达降低、Cleaved Caspase-3蛋白表达增加、细胞核固缩率增加。C6细胞和CGNs中转染ATM和GADD45α特异性siRNA后有效降低ATM和GADD45α的mRNA和蛋白的表达。与对照相比,CGNs转染ATM特异性siRNA后,细胞核固缩率升高。在Ku55933处理组中鉴定出835个基因表达上调,848个基因表达下调;在Ku60019处理组中鉴定出454个基因表达上调,314个基因表达下调;274个基因在Ku5处理组和Ku6处理组中共同上调,179个基因在Ku5处理组和Ku6处理组中共同下调,其中ATM下游靶标GADD45α表达上调;通路富集结果显示TNF信号通路、NF-κB信号通路和凋亡信号通路等被显著富集。与对照相比,抑制剂处理组和5K组GADD45α的mRNA和蛋白表达均升高。与对照相比,转染GADD45α特异性siRNA后用含15μmol/L Ku60019的25 K培养基处理8 h或5 K培养基处理后的CGNs细胞核固缩率降低。【结论】ATM活性降低诱导GADD45α依赖的神经元凋亡。 展开更多
关键词 神经元凋亡 共济失调毛细血管扩张突发 生长停滞和DNA损伤诱导蛋白45α 转录组测序
下载PDF
GADD45α对大鼠部分肝切除后肝脏再生的调控作用 被引量:2
2
作者 杨献光 朱琳 +2 位作者 赵卫明 和春翠 徐存拴 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期323-329,共7页
目的探讨生长阻滞和DNA损伤诱导基因GADD45α在大鼠部分肝切除(PH)后肝再生中的作用及其调节机制。方法将114只大鼠随机分为19组,2/3肝切除9组,手术对照9组,正常对照1组,制作大鼠部分肝切除模型,然后用大鼠基因组芯片Rat Genome 230 ... 目的探讨生长阻滞和DNA损伤诱导基因GADD45α在大鼠部分肝切除(PH)后肝再生中的作用及其调节机制。方法将114只大鼠随机分为19组,2/3肝切除9组,手术对照9组,正常对照1组,制作大鼠部分肝切除模型,然后用大鼠基因组芯片Rat Genome 230 2.0检测部分肝切除后再生肝的基因表达变化,采用实时定量PCR技术验证芯片检测结果。利用谱函数(Ep)分析基因表达变化预示的生理活动改变,进而通过Ingenuity Pathway Analysis(IPA)汇总GADD45α调控肝再生的信号通路并分析其可能的分子机制。结果 GADD45α在PH后2~6h、24h和36~72h均表达上调,GADD45α通过NF-κB、p38PRAK、p53、STAT3-p21、STAT3-Bcl-2、STAT3-c Myc等6条途径参与大鼠部分肝切除后的肝脏再生调控。谱函数分析发现,GADD45α调控的生理活动的变化情况基本与大鼠肝再生进程相符。结论 GADD45α在大鼠肝再生中可能通过上述信号通路调控细胞增殖、细胞周期和细胞存活等生理活动,进而调节肝脏的再生。 展开更多
关键词 gadd45α 肝再生 基因芯片 信号通路 实时定量聚合酶链反应 大鼠
原文传递
p53、Gadd45α蛋白在皮肤鳞状细胞癌、基底细胞癌中的表达 被引量:3
3
作者 李小静 王震英 +6 位作者 刘毅 程芳 张磊 李阿梅 邵雪宝 桑红桂 孙建方 《中国麻风皮肤病杂志》 2011年第7期455-457,共3页
目的:检测p53和Gadd45α蛋白在皮肤鳞状细胞癌和基底细胞癌组织中的表达。方法:应用免疫组化法对30例皮肤鳞状细胞癌和25例基底细胞癌组织中的p53和Gadd45α蛋白表达进行检测。结果:p53蛋白在皮肤鳞状细胞癌和基底细胞癌组织中的表达阳... 目的:检测p53和Gadd45α蛋白在皮肤鳞状细胞癌和基底细胞癌组织中的表达。方法:应用免疫组化法对30例皮肤鳞状细胞癌和25例基底细胞癌组织中的p53和Gadd45α蛋白表达进行检测。结果:p53蛋白在皮肤鳞状细胞癌和基底细胞癌组织中的表达阳性率分别为56.67%、48%,与正常皮肤组织比较差异均有显著性(P=0.006;0.025);Gadd45α在皮肤鳞状细胞癌和基底细胞癌中表达分别为43.33%、52%,均高于正常皮肤组织的表达(P=0.031;0.010)。高分化皮肤鳞状细胞癌组阳性表达率为75%,高于中低分化组的22.22%(P=0.008)。结论:皮肤鳞状细胞癌和基底细胞癌组织中p53、Gadd45α异常表达可能参与了发病过程。 展开更多
关键词 鳞状细胞癌 基底细胞癌 P53 gadd45α
下载PDF
硒对大鼠心肌细胞TLR2、ICAM1、Gadd45α调控研究 被引量:1
4
作者 杨光 朱延河 +3 位作者 魏瑾 董新 朱参战 高登峰 《临床和实验医学杂志》 2014年第5期337-342,共6页
目的通过研究硒含量对大鼠心肌细胞Toll样受体2(TLR2)、细胞间黏附因子-1(ICAM1)、生长停滞与DNA损伤诱导蛋白45α(Gadd45α)基因调控作用,探讨硒对克山病的表观遗传可能的影响机制。方法通过建立不同硒含量饲喂SD大鼠动物模型、培养新... 目的通过研究硒含量对大鼠心肌细胞Toll样受体2(TLR2)、细胞间黏附因子-1(ICAM1)、生长停滞与DNA损伤诱导蛋白45α(Gadd45α)基因调控作用,探讨硒对克山病的表观遗传可能的影响机制。方法通过建立不同硒含量饲喂SD大鼠动物模型、培养新生代缺硒大鼠心肌细胞与正常大鼠及其心肌细胞比较,使用RT-PCR、免疫印迹分析等方式,研究硒含量对心肌细胞TLR2、ICAM1、Gadd45α的表观遗传调控及基因表达的调节机制。结果喂食缺硒(0.1 mg/kg)饲料大鼠比喂食充足硒饲料(2 mg/kg)大鼠的DNA甲基化水平更低,但TLR2、mRNA和蛋白水平更高(P<0.05);缺硒环境的心肌细胞(TLR2和ICAM1)启动子的甲基化水平显著降低,但TLR2和ICAM1 mRNA和蛋白水平更高;随着硒含量增加,Gadd45α表达、TLR2启动子甲基化水平和TLR2的表达水平逐渐降低。结论硒处理,可能是通过调控Gadd45α因子表达,抑制DNA去甲基化和炎症因子(TLR2、ICAM1)的表达,从而保护因炎症性细胞因子过度表达引起的大鼠心肌损伤。 展开更多
关键词 大鼠克山病缺硒心肌细胞TLR2 ICAM1 gadd45α
下载PDF
GADD45α参与维持基因组稳定性并发挥肿瘤抑制效应的多样性分子机制 被引量:3
5
作者 郝一 宋伦 审阅 《生物技术通讯》 CAS 2011年第2期264-268,共5页
哺乳动物细胞在遭受应激损伤因素刺激时会启动一系列信号传导通路,从而引发细胞周期阻滞、DNA修复或细胞凋亡等效应,这些机制的异常与肿瘤的发生发展密切相关。GADD45α作为生长阻滞及DNA损伤诱导基因编码家族的一员,参与维持基因组稳... 哺乳动物细胞在遭受应激损伤因素刺激时会启动一系列信号传导通路,从而引发细胞周期阻滞、DNA修复或细胞凋亡等效应,这些机制的异常与肿瘤的发生发展密切相关。GADD45α作为生长阻滞及DNA损伤诱导基因编码家族的一员,参与维持基因组稳定性、调控细胞周期行进、DNA损伤修复、细胞衰老及细胞凋亡等多种生物学过程,在肿瘤发生发展和肿瘤抑制反应中具有重要作用。我们简要综述了GADD45α参与维持基因组稳定性并发挥肿瘤抑制效应的分子机制。 展开更多
关键词 gadd45α 基因组稳定性 肿瘤
下载PDF
GADD45α在遗传毒性检测中的分子原理及研究进展
6
作者 靳溪 席超 +1 位作者 刘恺 刘进 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期989-996,共8页
GADD45α作为细胞生长阻滞和DNA损伤诱导基因家族成员,参与细胞周期阻滞、细胞凋亡和细胞衰老等调控,在多种因素诱导的细胞应激及DNA损伤应答调控网络中发挥重要生物学功能。多种转录因子和蛋白参与GADD45α基因的转录调控。GADD45α蛋... GADD45α作为细胞生长阻滞和DNA损伤诱导基因家族成员,参与细胞周期阻滞、细胞凋亡和细胞衰老等调控,在多种因素诱导的细胞应激及DNA损伤应答调控网络中发挥重要生物学功能。多种转录因子和蛋白参与GADD45α基因的转录调控。GADD45α蛋白通过与其他蛋白相互作用在基因组稳定性相关的细胞应答调控中发挥作用。基于GADD45α的细胞调控特性构建的遗传毒性检测系统被应用于外源化合物的体外遗传毒性评价,为遗传毒性评价研究提供了新的思路。本文就GADD45α在遗传毒性检测应用中的分子原理和研究进展进行综述。 展开更多
关键词 gadd45α DNA损伤 细胞周期 遗传毒性检测
下载PDF
人食管癌EC9706细胞中Gadd45α基因的表达
7
作者 王珍珍 刘冬梅 +1 位作者 王刚 李国文 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2010年第5期844-845,共2页
关键词 gadd45α基因 食管癌 EC9706细胞
下载PDF
5-氮杂胞苷通过p53/Gadd45α信号途径影响小鼠神经干细胞的增殖 被引量:2
8
作者 刘娜 王虹 包金风 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期592-598,共7页
目的:通过研究DNA甲基化抑制剂5-氮杂胞苷(5-Azacytidine,5-Aza)对小鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的影响,进一步阐明DNA甲基化模式的变化对神经发生的影响及机制。方法:采用无血清悬浮培养方法分离培养新生小鼠脑NSCs,通过MTT... 目的:通过研究DNA甲基化抑制剂5-氮杂胞苷(5-Azacytidine,5-Aza)对小鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的影响,进一步阐明DNA甲基化模式的变化对神经发生的影响及机制。方法:采用无血清悬浮培养方法分离培养新生小鼠脑NSCs,通过MTT法检测5-Aza对NSCs增殖的影响;应用流式细胞仪检测5-Aza对NSCs细胞周期和凋亡的影响;并用RT-PCR、Western Blot法检测给予5-Aza对NSCs细胞p53和Gadd45αmRNA水平和蛋白表达的影响。结果:MTT法测定结果显示:与对照组相比,5-Aza能够明显抑制NSCs的增殖;流式细胞仪测定结果显示,5-Aza组NSCs在G0/G1期细胞数量较对照组明显减少(P<0.01),而S期、G2/M期细胞数量则明显增多(P<0.01),表明5-Aza可引起细胞周期在G2/M期停滞;且5-Aza组NSCs的凋亡率与对照组相比明显增加(P<0.01)。RT-PCR结果显示:5-Aza组NSCs中p53和Gadd45αmRNA水平较对照组明显增高(P<0.05);Western Blot结果也显示:与对照组相比,5-Aza组NSCs中p53和Gadd45α蛋白表达量明显增加(P<0.05)。结论:5-Aza可能通过影响NSCs细胞周期和诱导凋亡抑制小鼠NSCs增殖;5-Aza阻滞NSCs细胞周期的作用机制可能与p53/Gadd45α信号途径相关。 展开更多
关键词 5-AZA 神经干细胞 增殖 p53/gadd45α信号途径 细胞培养 小鼠
原文传递
Gadd45α与肿瘤关系的研究进展 被引量:4
9
作者 韩敏辉 冯英明 《现代肿瘤医学》 CAS 2010年第2期418-421,共4页
生长抑制及DNA损伤诱导基因45 alpha(Gadd45α)是p53的下游靶基因,当面对各种环境应激时表达上调,例如电离辐射、紫外线照射、烷化剂等。Gadd45α的表达受多个水平的调节。Gadd45α在调节细胞周期监测点、细胞凋亡、DNA修复、维护中心... 生长抑制及DNA损伤诱导基因45 alpha(Gadd45α)是p53的下游靶基因,当面对各种环境应激时表达上调,例如电离辐射、紫外线照射、烷化剂等。Gadd45α的表达受多个水平的调节。Gadd45α在调节细胞周期监测点、细胞凋亡、DNA修复、维护中心体的稳定等方面扮演重要角色。它与多种肿瘤的发生发展密切相关。Gadd45α在大部分肿瘤细胞中的表达是降低的,但是在恶性胶质瘤和胰腺导管癌中表达却上调。基于Gadd45α在肿瘤研究中的作用,将来可能会是一个抗肿瘤的分子靶点。 展开更多
关键词 gadd45α 细胞周期监测点 细胞凋亡 中心体 肿瘤
下载PDF
Gadd45α、NF-κB在胃癌中表达情况及其相关性研究 被引量:3
10
作者 冯水土 陈毅德 +2 位作者 陈玉强 高应勤 范鑫 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第8期33-37,共5页
目的通过分析Gadd45α、NF-κB在不同幽门螺杆菌(HP)感染状态胃癌中的差异表达来探讨两者表达的相关性及其对胃癌发生的意义。方法随机选取本院70例胃癌石蜡标本及56例相应癌旁正常组织标本来检测Gadd45α、NF-κB蛋白的表达情况;分析Ga... 目的通过分析Gadd45α、NF-κB在不同幽门螺杆菌(HP)感染状态胃癌中的差异表达来探讨两者表达的相关性及其对胃癌发生的意义。方法随机选取本院70例胃癌石蜡标本及56例相应癌旁正常组织标本来检测Gadd45α、NF-κB蛋白的表达情况;分析Gadd45α蛋白与NF-κB在胃癌中表达的相关性。结果 NF-κB在HP+胃癌、HP-胃癌、HP+癌旁组织中的阳性表达率分别为82.5%、53.33%和26.32%,Gadd45α蛋白在HP+胃癌、HP-胃癌、HP+癌旁组织中的阳性表达率分别为77.5%、46.67%和34.21%,经过χ2检验比较阳性表达的差异有统计学意义(P<0.05)。Gadd45α与NF-κB在胃癌中表达呈正相关(P<0.05)。结论 NF-κB、Gadd45α蛋白在胃癌组织中高表达,且Gadd45α与NF-κB蛋白两者在胃癌中的表达呈正相关。 展开更多
关键词 胃癌 gadd45α NF-ΚB 幽门螺杆菌 表达
下载PDF
Gadd45α在不同幽门螺杆菌感染状态胃癌中的差异表达及临床意义 被引量:2
11
作者 冯水土 陈毅德 +2 位作者 陈玉强 林雨标 郑文慧 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2016年第5期353-358,共6页
目的:通过分析Gadd45α在幽门螺杆菌(HP)阳性和阴性胃癌组织中的差异表达来探讨其对胃癌发生的意义,为胃癌的临床诊断和治疗提供理论依据。方法:采用免疫组化方法对选取的70例不同HP感染状态的胃癌及56例癌旁正常组织的石蜡标本中Gadd4... 目的:通过分析Gadd45α在幽门螺杆菌(HP)阳性和阴性胃癌组织中的差异表达来探讨其对胃癌发生的意义,为胃癌的临床诊断和治疗提供理论依据。方法:采用免疫组化方法对选取的70例不同HP感染状态的胃癌及56例癌旁正常组织的石蜡标本中Gadd45α蛋白的表达情况进行检测,分析Gadd45α蛋白的阳性表达与胃癌各项临床病理指标的关系;并分别采用Western blot、反转录PCR(RT-PCR)方法检测选取的8对胃癌活体标本中Gadd45α蛋白及m RNA的表达情况。结果:免疫组化检测结果显示,Gadd45α+-+蛋白在HP胃癌、HP胃癌和HP癌旁组织中的表达率分别是77.5%、46.67%和34.21%,其差异有统计学意义(P<0.05);Gadd45α蛋白在胃癌组织中表达阳性率为64.29%(45/70),与肿瘤大小相关。胃癌组织中Gadd45α蛋白的表达与HP感染状态呈正相关(r=s+0.318),经Spearman秩相关分析提示有统计学意义(P<0.05)。Western blot和RT-PCR法检测结果显示,在HP胃癌组织活体标本中+Gadd45α的蛋白和m RNA表达水平大多高于相应的非癌组织。结论:Gadd45α蛋白在胃癌(尤其HP胃癌)中高表达,其表达水平与胃+癌(尤其HP胃癌)的发生、发展关系密切,对其表达水平的检测有益于胃癌的早期诊断及其预后的早期预测。在胃癌组织中,+Gadd45α蛋白与HP的表达具有正相关性,提示两者在胃癌的发生、发展过程中有一定的相互作用,通过对HP胃癌患者的抗HP治疗可能影响患者的预后。 展开更多
关键词 胃癌 gadd45α 幽门螺杆菌 免疫组织化学
下载PDF
GADD45α在膀胱癌组织和细胞中的表达及作用机制 被引量:1
12
作者 袁刚军 韩娜 +8 位作者 鲜鹏 袁方 李俊 张海燕 唐显力 戴君勇 宋彦平 李元 刘南 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第2期206-210,共5页
目的:检测GADD45α基因在膀胱癌中的表达情况及作用机制。方法:分别使用免疫组化、荧光定量PCR和Western blot实验检测GADD45α基因在膀胱癌组织中的表达情况;用慢病毒包装质粒上调膀胱癌细胞中GADD45α的表达后,流式细胞仪分析膀胱癌... 目的:检测GADD45α基因在膀胱癌中的表达情况及作用机制。方法:分别使用免疫组化、荧光定量PCR和Western blot实验检测GADD45α基因在膀胱癌组织中的表达情况;用慢病毒包装质粒上调膀胱癌细胞中GADD45α的表达后,流式细胞仪分析膀胱癌细胞周期比例分布情况和用Western blot实验检测细胞周期蛋白激酶水平变化情况。结果:膀胱癌组织中GADD45α的表达水平较癌旁正常组织的表达降低;上调膀胱癌细胞中GADD45α的表达后,与control细胞相比,高表达GADD45α细胞的克隆大小和数目皆明显下降(86±12.3 vs 134±13.5,P<0.05);升高GADD45α表达后,膀胱癌细胞G_(2)期比例升高至56.54%,而G_(1)期比例则由82.87%下降至40.8%,S期比例由17.13%下降至2.66%,膀胱癌细胞周期被阻滞在G_(2)/M期,伴随细胞周期蛋白激酶cdc2/cyclinB1的表达下降。结论:GADD45α在膀胱癌中表达下降,GADD45α通过抑制cdc2/cyclinB1的表达活性以阻滞膀胱癌细胞周期在G_(2)/M期,抑制膀胱癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 gadd45α 膀胱癌 P53 细胞周期
下载PDF
眼镜蛇毒因子耗竭补体对大鼠Thy-1肾炎凋亡病变及其Gadd45α基因表达的影响 被引量:1
13
作者 冯雪凤 邱文 +2 位作者 高玲娟 张艳 王迎伟 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期144-148,165,共6页
目的:研究眼镜蛇毒因子(CVF)耗竭体内补体对Thy-1肾炎大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)凋亡病变及其生长阻滞和DNA损伤诱生蛋白45α(Gadd45α)基因表达的影响。方法:利用抗胸腺细胞抗血清(ATS)复制大鼠Thy-1肾炎(Thy-1 N)模型。大鼠随机分为正... 目的:研究眼镜蛇毒因子(CVF)耗竭体内补体对Thy-1肾炎大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)凋亡病变及其生长阻滞和DNA损伤诱生蛋白45α(Gadd45α)基因表达的影响。方法:利用抗胸腺细胞抗血清(ATS)复制大鼠Thy-1肾炎(Thy-1 N)模型。大鼠随机分为正常对照组、Thy-1 N组和CVF+Thy-1 N组。取各组大鼠血清检测补体CH50活性。另取各组大鼠肾皮质,行电镜和TUNEL染色检查判断其肾组织细胞凋亡的病理变化;用RT-PCR和real-time PCR检测大鼠肾组织凋亡相关基因,即Gadd45α mRNA丰度;用Western blotting检测Gadd45α蛋白表达水平。结果:CVF+Thy-1 N组补体CH50活性明显下降,与Thy-1 N组和正常对照组相比差异明显(P<0.01)。电镜和TUNEL染色观察到Thy-1 N组大鼠GMCs有凋亡病变,而CVF+Thy-1 N组凋亡病变则显著减轻。Thy-1 N组大鼠肾皮质Gadd45α mRNA 40min开始上调,3h达到峰值,而用CVF处理的Thy-1 N大鼠,Gadd45α mRNA丰度则明显低于Thy-1N组(P<0.01);Thy-1 N组Gadd45α蛋白水平3h时显著增多,而CVF+Thy-1 N Gadd45α蛋白水平明显低于Thy-1 N组(P<0.01)。结论:CVF耗竭补体可显著减轻大鼠Thy-1肾炎凋亡病变并抑制Gadd45α基因的表达。 展开更多
关键词 眼睛蛇毒因子 补体 THY-1肾炎 肾小球系膜细胞 gadd45a基因 凋亡
下载PDF
紫外线对人肝癌HepG2细胞中Gadd45α/γ表达的影响
14
作者 邵燕 朱娜 孙路虹 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期135-137,共3页
目的探讨人肝癌HepG2细胞经紫外线照射后Gadd45α和Gadd45γ表达的改变。方法体外培养的HepG2细胞,经紫外线照射(254nm,10J/m2)1、2、4h后收获细胞,采用RT-PCR半定量法检测Gadd45α和Gadd45γmRNA的表达水平,west-ern blot检测其蛋白水... 目的探讨人肝癌HepG2细胞经紫外线照射后Gadd45α和Gadd45γ表达的改变。方法体外培养的HepG2细胞,经紫外线照射(254nm,10J/m2)1、2、4h后收获细胞,采用RT-PCR半定量法检测Gadd45α和Gadd45γmRNA的表达水平,west-ern blot检测其蛋白水平的改变。结果经紫外线照射后,Gadd45α和Gadd45γmRNA表达峰值分别出现在4h和1h,Gadd45α/γ蛋白在照射后1h达高峰。结论紫外线诱导了HepG2细胞中Gadd45α和Gadd45γ的表达升高。 展开更多
关键词 紫外线 gadd45α gadd45γ
下载PDF
慢病毒载体上调GADD45α增强伊马替尼耐药株K562IR细胞的药物敏感性
15
作者 刘雪妮 王超 +1 位作者 程艳红 杨鹏 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第12期1920-1924,共5页
目的探讨通过慢病毒载体上调GADD45α基因对伊马替尼(IM)耐药株K562IR细胞的增殖、迁移及凋亡的影响。方法培养K562细胞及伊马替尼耐药细胞K562IR,采用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)和Western blot法检测K562和K562IR细胞中GADD45αmRN... 目的探讨通过慢病毒载体上调GADD45α基因对伊马替尼(IM)耐药株K562IR细胞的增殖、迁移及凋亡的影响。方法培养K562细胞及伊马替尼耐药细胞K562IR,采用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)和Western blot法检测K562和K562IR细胞中GADD45αmRNA和蛋白的表达水平;采用过表达GADD45α的慢病毒载体及对照载体转染于K562IR细胞中,分别为Lv-GADD45α和Lv-NC,通过Western blot检测上调后各组细胞GADD45α蛋白表达水平,并进一步用CCK-8法、Tanswell法和Annexin V-FITC/PI双染法检测转染后细胞增殖、迁移和凋亡的变化。结果K562IR细胞中的GADD45α蛋白和mRNA表达水平低于K562细胞,GADD45α基因转染后,Lv-GADD45α组细胞中的GADD45α蛋白表达水平高于Lv-NC组。Lv-GADD45α组细胞在伊马替尼处理后,IC_(50)值低于Lv-NC组,凋亡率高于Lv-NC组,同时细胞迁移能力也下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过上调伊马替尼耐药株K562IR细胞中GADD45α基因,可以增强慢性髓系白血病细胞K562IR对于伊马替尼的敏感性,抑制白血病细胞的增殖、促进其凋亡。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 K562 gadd45α 伊马替尼 耐药性
下载PDF
辐射敏感基因Pig-a、Gadd45α和Hprt作为潜在生物剂量计的实验研究 被引量:1
16
作者 杨学琴 毛鑫玉 +2 位作者 陈钰婷 李悦兰 张文 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2020年第3期46-53,共8页
为了提高对辐射遗传损伤效应的检测能力,同时建立一种快速简便的生物剂量估算方法,选择Piga、Gadd45α及Hprt 3个基因,运用其mRNA表达水平的变化,筛选可能作为电离辐射生物剂量计的辐射敏感基因。采用RT-qPCR检验非放射从业健康人群(对... 为了提高对辐射遗传损伤效应的检测能力,同时建立一种快速简便的生物剂量估算方法,选择Piga、Gadd45α及Hprt 3个基因,运用其mRNA表达水平的变化,筛选可能作为电离辐射生物剂量计的辐射敏感基因。采用RT-qPCR检验非放射从业健康人群(对照组)和放射从业人员(暴露组)外周血中目的基因的相对表达量,分析辐射敏感基因本底表达量的平均值、波动范围和变异系数;应用不同剂量(0 Gy、0.10 Gy、0.25 Gy、0.50 Gy、1.00 Gy、2.00 Gy、5.00 Gy)的X射线照射健康成年人外周血,6 h后用RTqPCR检验目的基因的相对表达量,二项式曲线回归分析存在的剂量–效应关系。结果表明:Pig-a、Gadd45α基因在对照组中本底水平差异较小;Hprt基因本底水平差异较大,变异系数大于20%;Hprt基因在对照组中表达量高于暴露组;Gadd45α基因与Pig-a基因在对照组中的表达量低于暴露组,两组比较有统计学意义(p<0.05)。Gadd45α、Pig-a基因表达量的本底水平与照射剂量存在剂量–效应关系,提示Pig-a基因与Gadd45α基因表达量的变化可能作为电离辐射生物剂量计应用。 展开更多
关键词 辐射敏感基因 生物剂量计 gadd45α 基因 HPRT 基因 Pig-a基因
下载PDF
青蒿琥酯通过调控GADD45A、NACC1的表达抑制肝癌细胞的作用
17
作者 沈冠彤 董金垚 +8 位作者 冯璟 秦楠 杜根来 朱飞 连科 刘新宇 李清靓 张迅玮 师如意 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1089-1097,共9页
目的阐明青蒿琥酯(artesunate,ART)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)病理进程中对肿瘤细胞的作用及潜在的机制。方法用含不同浓度ART的培养基处理两种HCC细胞系MHCC-97H、HCC-LM3,以0 mg·L-1 ART处理的细胞作为对照组,对... 目的阐明青蒿琥酯(artesunate,ART)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)病理进程中对肿瘤细胞的作用及潜在的机制。方法用含不同浓度ART的培养基处理两种HCC细胞系MHCC-97H、HCC-LM3,以0 mg·L-1 ART处理的细胞作为对照组,对比ART对HCC的作用。采用MTT和克隆形成实验测定ART对HCC细胞生长能力的影响;划痕实验和Transwell实验分别检测ART对HCC细胞迁移和侵袭能力的影响;流式细胞术验证ART对HCC细胞凋亡和细胞周期变化的影响;通过转录组测序分析以及qRT-PCR验证关键基因的表达情况探究ART在HCC细胞中的可能作用机制。结果与对照组相比,ART处理后的肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭能力明显降低(P<0.01),而细胞凋亡率明显上升,且G_(2)/M期细胞比例明显增高,提示肿瘤细胞被阻滞于该期。使用RNA测序数据进行转录组学分析,确定生长停滞与DNA损伤诱导蛋白45A(growth arrest and DNA damage inducible alpha,GADD45A)是ART的潜在作用靶点,并且提示,ART可通过上调GADD45A的表达进而诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞。此外,生信分析结果提示,GADD45A与其上游转录因子伏隔核相关蛋白1(nucleus accumbens associated 1,NACC1)有蛋白互作现象,并且经ART处理后,GADD45A与NACC1的mRNA水平和蛋白水平均发生明显变化。结论ART可能通过影响GADD45A及其潜在上游NACC1基因的表达抑制HCC的发生发展。通过探究ART作用于HCC的功能影响及发生机制,为临床治疗肝癌提供新药物、新方向和新思路。 展开更多
关键词 青蒿琥酯 肝细胞癌 抗癌作用机制 gadd45A NACC1 细胞凋亡 G_(2)/M
下载PDF
异丙酚通过miR-133a-3p/FTL轴调控GADD45A/JNK通路影响胃癌细胞增殖、迁移及凋亡 被引量:1
18
作者 韦玲 杨凯 +1 位作者 刘焕 程栋 《川北医学院学报》 CAS 2023年第8期1019-1025,共7页
目的:探讨异丙酚是否通过miR-133a-3p/FTL轴调控GADD45A/JNK通路影响胃癌细胞的增殖、迁移及凋亡。方法:将胃癌MKN-28细胞系分为磷酸盐缓冲液(PBS)组、异丙酚组、miR-NC组、miR-133a-3p mimics组、anti-miR-NC组、anti-miR-133a-3p组、s... 目的:探讨异丙酚是否通过miR-133a-3p/FTL轴调控GADD45A/JNK通路影响胃癌细胞的增殖、迁移及凋亡。方法:将胃癌MKN-28细胞系分为磷酸盐缓冲液(PBS)组、异丙酚组、miR-NC组、miR-133a-3p mimics组、anti-miR-NC组、anti-miR-133a-3p组、si-NC组、si-FTL组、异丙酚+anti-miR-NC+si-NC组、PBS+anti-miR-NC+si-NC组、异丙酚+anti-miR-133a-3p+si-NC组、异丙酚+anti-miR-133a-3p+si-FTL组。应用RT-qPCR检测miR-133a-3p和铁蛋白轻链(FTL)mRNA的表达水平;应用MTT法与克隆形成实验测细胞增殖;应用流式细胞术、蛋白质印迹法分别检测细胞凋亡及蛋白表达水平;应用双荧光素酶报告实验检测miR-133a-3p与FTL的靶向关系;应用划痕实验与Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭。结果:与PBS组比较,异丙酚组细胞活性、划痕愈合率、细胞克隆形成数、迁移、侵袭细胞数均减少(P<0.05);细胞凋亡率、p53、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、miR-133a-3p、GADD45A及p-JNK蛋白表达水平均升高(P<0.05),FTL表达水平降低(P<0.05)。双荧光素酶实验结果显示,miR-133a-3p靶向调控FTL。敲低FTL或过表达miR-133a-3p后,细胞凋亡率升高,细胞活性、划痕愈合率、细胞克隆形成数、迁移和侵袭细胞数降低;细胞中GADD45A、p-JNK、p53、Bax表达水平升高(P<0.05)。敲低FTL逆转了使用异丙酚及抑制miR-133a-3p表达对GADD45A/JNK信号通路以及MKN-28细胞恶性生物学行为的影响。结论:异丙酚可能通过miR-133a-3p/FTL轴调控GADD45A/JNK通路继而抑制胃癌细胞增殖、迁移,并促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 异丙酚 miR-133a-3p FTL gadd45A/JNK通路 胃癌 增殖 迁移 凋亡
下载PDF
氟氯氰菊酯通过GADD45B介导JNK/p38MAPK通路对大鼠肾脏损伤的影响 被引量:1
19
作者 孙祎平 李晓玉 +5 位作者 谢永鑫 赵吉 孙健 王瑞 宋亚男 杨惠芳 《宁夏医科大学学报》 2023年第3期230-235,257,共7页
目的 探讨氟氯氰菊酯暴露通过影响生长停滞和DNA损伤诱导β(GADD45B)水平并介导JNK/p38MAPK通路对大鼠肾脏损伤的影响。方法 将40只SPF级Wistar雄性大鼠按随机数表法分为4组,即对照组、氟氯氰菊酯低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组10... 目的 探讨氟氯氰菊酯暴露通过影响生长停滞和DNA损伤诱导β(GADD45B)水平并介导JNK/p38MAPK通路对大鼠肾脏损伤的影响。方法 将40只SPF级Wistar雄性大鼠按随机数表法分为4组,即对照组、氟氯氰菊酯低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组10只。隔天灌胃连续染毒28 d,取肾脏组织称量后计算脏器系数。HE染色光镜下观察大鼠肾脏组织病理形态变化;透射电镜观察肾脏细胞超微结构变化;应用试剂盒检测肾脏组织中氧化损伤指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量变化;应用Western blot、qPCR检测GADD45B、p38MAPK、p-p38MAPK、JNK、p-JNK mRNA及蛋白表达水平变化。结果 与对照组相比,氟氯氰菊酯染毒大鼠体质量增长、肾脏质量和脏器系数的差异均无统计学意义(P均>0.05);HE染色结果显示:与对照组相比,随着氟氯氰菊酯染毒剂量的增加,肾小管肿胀越发明显,肾小管上皮细胞大量脱落,肾小球萎缩。透射电镜结果显示:与对照组相比,随着氟氯氰菊酯染毒剂量的增加,基底膜逐渐增厚,线粒体和内质网出现不同程度损伤。与对照组比较,低、中、高剂量组MDA含量均升高(P均<0.05)、SOD活力均降低(P均<0.05)。与对照组相比,氟氯氰菊酯低、中、高剂量组中GADD45B的mRNA表达水平均升高(P均<0.05);JNK和p38MAPK的mRNA表达水平均降低(P均<0.05)。Western blot结果显示,与对照组比较,氟氯氰菊酯低、中、高剂量组中GADD45B、p-JNK、p-p38的蛋白表达水平均升高(P均<0.05);JNK和p38的蛋白表达水平均降低(P均<0.05)。结论 在氟氯氰菊酯致大鼠肾脏损伤中,GADD45B可通过激活JNK/p38MAPK通路诱导大鼠肾脏损伤。 展开更多
关键词 gadd45B 氟氯氰菊酯 肾脏 JNK/p38MAPK通路
下载PDF
GADD45A通过端粒替代延长途径调控骨肉瘤细胞增殖
20
作者 韩鑫宇 李婷芳 王峰 《天津医科大学学报》 2023年第3期265-271,共7页
目的:探讨GADD45A对骨肉瘤细胞的增殖和端粒调控功能。方法:应用siRNA和shRNA处理骨肉瘤细胞U2OS,观察骨肉瘤细胞增殖、端粒功能和端粒延长替代途径的变化。qPCR检测GADD45A敲低后mRNA水平。CCK-8实验和克隆形成实验检测骨肉瘤细胞增殖... 目的:探讨GADD45A对骨肉瘤细胞的增殖和端粒调控功能。方法:应用siRNA和shRNA处理骨肉瘤细胞U2OS,观察骨肉瘤细胞增殖、端粒功能和端粒延长替代途径的变化。qPCR检测GADD45A敲低后mRNA水平。CCK-8实验和克隆形成实验检测骨肉瘤细胞增殖情况。细胞中期分裂相-荧光原位杂交实验检测端粒功能变化。免疫荧光-荧光原位杂交实验和C-circle实验检测端粒损伤情况和端粒延长替代途径相关表型。结果:qPCR结果表明,siRNA敲低GADD45A后mRNA水平降低(t=25.96,P<0.0001);shGADD45A-1和shGADD45A-2 GADD45A的mRNA水平降低(t=21.12、18.37,均P<0.0001)。对应的CCK-8(t=5.051、6.192、3.775、14.86、22.93、3.013、14.61、20.93,均P<0.05)和克隆形成实验(t=46.68、23.73、24.98,均P<0.0001)结果表明,敲低GADD45A抑制了骨肉瘤细胞增殖。细胞中期分裂相-荧光原位杂交实验结果显示,GADD45A缺失会加重端粒多信号(t=24.04、7.243、27.93,均P<0.01)和端粒信号缺失现象(t=8.222、16.61、6.781,均P<0.01)。免疫荧光-荧光原位杂交实验结果表明,siRNA敲低GADD45A后H2AX组蛋白变体和早幼粒细胞白血病体与端粒的共定位增加(t=19.16、10.65,均P<0.0001);shGADD45A-1、shGADD45A-2也证实了H2AX组蛋白变体和早幼粒细胞白血病体与端粒共定位的比例升高(t=14.71、24.03、16.69、18.10,均P<0.0001)。C-circle实验结果表明,siRNA敲低GADD45A以及shGADD45A-1和shGADD45A-2两细胞系中染色体外端粒DNA环C-circle水平升高(t=41.27、14.06、4.539,均P<0.05)。结论:GADD45A调控端粒延长替代途径、保护端粒功能并促进骨肉瘤细胞增殖。 展开更多
关键词 gadd45A 骨肉瘤 端粒 端粒替代延长途径
下载PDF
上一页 1 2 8 下一页 到第
使用帮助 返回顶部