目的研究泡型包虫病患者肝脏组织TGF-β1和Gadd45γ基因的表达及其在肝损伤中的作用,探讨其临床意义。方法采集23例AE患者肝脏手术标本,Trizol法提取RNA,反转录cDNA后采用实时荧光定量PCR检测TGF-β1、Gadd45γ、p53和p21基因的表达。...目的研究泡型包虫病患者肝脏组织TGF-β1和Gadd45γ基因的表达及其在肝损伤中的作用,探讨其临床意义。方法采集23例AE患者肝脏手术标本,Trizol法提取RNA,反转录cDNA后采用实时荧光定量PCR检测TGF-β1、Gadd45γ、p53和p21基因的表达。体外培养肝细胞HL-7702,用重组TGF-β1(1ng/ml)细胞因子或匀浆虫体蛋白(1mg/ml)刺激30min、1h、24h和48h,分别收集细胞,采用实时荧光定量PCR检测TGF-β1、Gadd45γ、p53和p21基因的表达。结果 AE患者病灶旁肝脏组织TGF-β1、p53和p21mRNA的相对表达量分别为1.93±1.34、1.29±0.62和1.50±1.10,与远端肝组织1.00±0.00比较差异有统计学意义(P<0.05);Gadd45γmRNA为1.24±0.96,与远端组织比较差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson法分析TGF-β1表达分别与Gadd45γ、p53和p21呈正相关(r值分别为0.5257、0.5287、0.4605,P<0.05)。用重组细胞因子TGF-β1(1ng/ml)或匀浆虫体蛋白(1mg/ml)刺激30min、1h、24h和48h,均能促进肝细胞HL-7702中TGF-β1、Gadd45γ、p53和p21基因的表达上调。结论在肝泡球蚴病晚期,炎症性细胞因子TGF-β1可能通过激活非经典型MAPK(Mitogen Activated Protein Kinase,JNK和p38)信号转导途径和细胞周期关键调控因子(Gadd45γ,p53,p21)调控肝脏细胞的生长抑制或凋亡,造成宿主肝脏的病理性损伤。展开更多
生长阻滞和DNA损伤诱生蛋白45(growth arrest and DNA damage inducible protein 45,Gadd45)基因家族属p53、BRCA1的下游基因,拥有Gadd45α、Gadd45β和Gadd45γ3个成员,其中Gadd45α可由多种损伤因素快速诱导产生,受p53和BRCA1的调节,...生长阻滞和DNA损伤诱生蛋白45(growth arrest and DNA damage inducible protein 45,Gadd45)基因家族属p53、BRCA1的下游基因,拥有Gadd45α、Gadd45β和Gadd45γ3个成员,其中Gadd45α可由多种损伤因素快速诱导产生,受p53和BRCA1的调节,在调控G2/M细胞周期监测点与维持基因组稳定性中起重要作用,从而抑制细胞转化和肿瘤的恶性进展。Gadd45β主要通过调控p53和JNK来抑制细胞生长及细胞凋亡的过程。Gadd45γ在基因损伤因子,如电离辐射、紫外线等诱导下而表达上调,受p53基因的调控,通过与MEKK4相互作用,在JNK和P38相关的凋亡途径中起作用,即通过细胞周期阻滞和细胞凋亡对细胞生长发挥负向调控,具有抑制细胞增殖和促进凋亡的作用。Gadd45基因不仅与细胞生存和凋亡有关,还参与细胞转化和肿瘤形成,但在不同的细胞状态下发挥不同甚至相反的作用。展开更多
生长阻滞和DNA损伤诱生蛋白45 （growth arrest and DNA damage inducible protein 45,Gadd45）基因在胚胎发育和性别决定中起重要作用.本研究通过RACE方法在半滑舌鳎（Cynoglossus semilaevis）中克隆得到了1个Gadd45g同源基因,命名为G...生长阻滞和DNA损伤诱生蛋白45 （growth arrest and DNA damage inducible protein 45,Gadd45）基因在胚胎发育和性别决定中起重要作用.本研究通过RACE方法在半滑舌鳎（Cynoglossus semilaevis）中克隆得到了1个Gadd45g同源基因,命名为Gadd45g3.该基因全长1 147 bp,编码155个氨基酸残基.氨基酸序列分析表明,半滑舌鳎Gadd45g3与其他鱼类Gadd45g-like的同源性为79％～88％,与硬骨鱼和高等脊椎动物的Gadd45g同源性为58％～67％.对多个物种的Gadd45g同源基因的CDS区进行Ka/Ks分析,发现Ka/Ks均小于0.3.FISH结果显示,半滑舌鳎Gadd45g3基因位于常染色体上.实时荧光定量PCR结果显示,Gadd45g3在雌雄成鱼的脑中都有很高的表达,说明其参与了神经发育;在成熟性腺中,Gadd45g3的表达具有精巢特异性,说明Gadd45g3是性别相关基因;而在不同发育时期的性腺中,Gadd45g3的表达量在孵化后20 d的雄性仔鱼中显著高于同龄雌鱼（P＜0.05）,但在孵化后95 d的雌雄仔鱼中均有高表达,说明在半滑舌鳎性别决定和性腺发育中起着重要作用.展开更多
文摘目的研究泡型包虫病患者肝脏组织TGF-β1和Gadd45γ基因的表达及其在肝损伤中的作用,探讨其临床意义。方法采集23例AE患者肝脏手术标本,Trizol法提取RNA,反转录cDNA后采用实时荧光定量PCR检测TGF-β1、Gadd45γ、p53和p21基因的表达。体外培养肝细胞HL-7702,用重组TGF-β1(1ng/ml)细胞因子或匀浆虫体蛋白(1mg/ml)刺激30min、1h、24h和48h,分别收集细胞,采用实时荧光定量PCR检测TGF-β1、Gadd45γ、p53和p21基因的表达。结果 AE患者病灶旁肝脏组织TGF-β1、p53和p21mRNA的相对表达量分别为1.93±1.34、1.29±0.62和1.50±1.10,与远端肝组织1.00±0.00比较差异有统计学意义(P<0.05);Gadd45γmRNA为1.24±0.96,与远端组织比较差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson法分析TGF-β1表达分别与Gadd45γ、p53和p21呈正相关(r值分别为0.5257、0.5287、0.4605,P<0.05)。用重组细胞因子TGF-β1(1ng/ml)或匀浆虫体蛋白(1mg/ml)刺激30min、1h、24h和48h,均能促进肝细胞HL-7702中TGF-β1、Gadd45γ、p53和p21基因的表达上调。结论在肝泡球蚴病晚期,炎症性细胞因子TGF-β1可能通过激活非经典型MAPK(Mitogen Activated Protein Kinase,JNK和p38)信号转导途径和细胞周期关键调控因子(Gadd45γ,p53,p21)调控肝脏细胞的生长抑制或凋亡,造成宿主肝脏的病理性损伤。
文摘生长阻滞和DNA损伤诱生蛋白45(growth arrest and DNA damage inducible protein 45,Gadd45)基因家族属p53、BRCA1的下游基因,拥有Gadd45α、Gadd45β和Gadd45γ3个成员,其中Gadd45α可由多种损伤因素快速诱导产生,受p53和BRCA1的调节,在调控G2/M细胞周期监测点与维持基因组稳定性中起重要作用,从而抑制细胞转化和肿瘤的恶性进展。Gadd45β主要通过调控p53和JNK来抑制细胞生长及细胞凋亡的过程。Gadd45γ在基因损伤因子,如电离辐射、紫外线等诱导下而表达上调,受p53基因的调控,通过与MEKK4相互作用,在JNK和P38相关的凋亡途径中起作用,即通过细胞周期阻滞和细胞凋亡对细胞生长发挥负向调控,具有抑制细胞增殖和促进凋亡的作用。Gadd45基因不仅与细胞生存和凋亡有关,还参与细胞转化和肿瘤形成,但在不同的细胞状态下发挥不同甚至相反的作用。
文摘生长阻滞和DNA损伤诱生蛋白45 （growth arrest and DNA damage inducible protein 45,Gadd45）基因在胚胎发育和性别决定中起重要作用.本研究通过RACE方法在半滑舌鳎（Cynoglossus semilaevis）中克隆得到了1个Gadd45g同源基因,命名为Gadd45g3.该基因全长1 147 bp,编码155个氨基酸残基.氨基酸序列分析表明,半滑舌鳎Gadd45g3与其他鱼类Gadd45g-like的同源性为79％～88％,与硬骨鱼和高等脊椎动物的Gadd45g同源性为58％～67％.对多个物种的Gadd45g同源基因的CDS区进行Ka/Ks分析,发现Ka/Ks均小于0.3.FISH结果显示,半滑舌鳎Gadd45g3基因位于常染色体上.实时荧光定量PCR结果显示,Gadd45g3在雌雄成鱼的脑中都有很高的表达,说明其参与了神经发育;在成熟性腺中,Gadd45g3的表达具有精巢特异性,说明Gadd45g3是性别相关基因;而在不同发育时期的性腺中,Gadd45g3的表达量在孵化后20 d的雄性仔鱼中显著高于同龄雌鱼（P＜0.05）,但在孵化后95 d的雌雄仔鱼中均有高表达,说明在半滑舌鳎性别决定和性腺发育中起着重要作用.
