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ChIP-seq技术在全基因组范围内分析膜性肾病患者组蛋白H3K9三甲基化状态的改变 被引量：1
1
作者 眭维国 何慧燕 +3 位作者 晏强 崔甄甄 张若菡 戴勇 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第32期50-56,共7页
目的膜性肾病以基底膜(GBM)弥漫性增厚以及上皮下免疫复合物沉积为特征,其发病机制目前仍不明了。H3K9三甲基化在早些年就已经发现了,但其与其他表观遗传修饰间的微妙关系以及在人类疾病中潜在的意义仍不清楚。该实验选择组蛋白H3K9三... 目的膜性肾病以基底膜(GBM)弥漫性增厚以及上皮下免疫复合物沉积为特征,其发病机制目前仍不明了。H3K9三甲基化在早些年就已经发现了,但其与其他表观遗传修饰间的微妙关系以及在人类疾病中潜在的意义仍不清楚。该实验选择组蛋白H3K9三甲基化作为靶标,探讨H3K9三甲基化与膜性肾病发病机制的关系。方法实验采用染色质免疫沉淀-高通量测序(ChIP-seq)分析膜性肾病患者外周血单个核细胞(PBMCs)的组蛋白H3K9三甲基化状态的改变。结果与健康对照组相比,膜性肾病H3K9me3有108个差异表达基因,其中75个上调,33个表达下调。挑选5个差异最大的基因,DGCR6、SNX16、CNTN4、BIRC3和BIRC2进行讨论。结论研究结果表明膜性肾病患者的H3K9三甲基化状态有很大的变化,这些变化或许可以进一步揭示膜性肾病的发病机制,并提供潜在的治疗靶点。 展开更多
关键词 ChIP seq h3k9三甲基化 膜性肾病
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H3K4和H3K9三甲基化在猪体外成熟卵母细胞和克隆胚胎中的表达分析
2
作者 沈开元 代小丽 +3 位作者 杨婷 佘春 石德顺 李湘萍 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期1-6,共6页
该研究主要运用单细胞免疫荧光技术分析猪卵母细胞和克隆胚胎发育过程中,H3K4和H3K9三甲基化(H3K4me3,H3K9me3)的表达情况.收集体外成熟0h,6h,12h,24h,30h,36h,42h的猪卵母细胞;同时通过体细胞核移植操作获得一细胞、四细胞、桑葚胚和... 该研究主要运用单细胞免疫荧光技术分析猪卵母细胞和克隆胚胎发育过程中,H3K4和H3K9三甲基化(H3K4me3,H3K9me3)的表达情况.收集体外成熟0h,6h,12h,24h,30h,36h,42h的猪卵母细胞;同时通过体细胞核移植操作获得一细胞、四细胞、桑葚胚和囊胚期克隆胚胎,经过免疫荧光染色,在激光共聚焦显微镜下观察H3K4me3和H3K9me3修饰在卵母细胞和胚胎中的变化情况.免疫荧光结果显示,在不同减数分裂阶段的猪卵母细胞内均能观察到H3K4me3的表达,并且呈现出逐渐下降的趋势;在生发泡期(GV),生发泡晚期(L-GV)和生发泡破裂(GVBD)阶段的卵母细胞中能发现明显的H3K9me3表达,随着减数分裂的进行,H3K9me3表达消失,在第一次减数分裂中期前阶段(Pre-MI)到第二次减数分裂中期(MⅡ)阶段卵母细胞中未发现H3K9me3荧光信号.H3K4me3和H3K9me3在不同发育阶段的猪克隆胚胎中都有表达,其中H3K4me3在不同阶段胚胎中荧光信号强度相近,H3K9me3在四细胞胚胎中荧光强度降低,在桑葚胚和囊胚中荧光强度出现升高的趋势.以上结果说明,H3K4me3参与调控猪卵母细胞体外成熟的整个过程,H3K4me3和H3K9me3在猪体细胞核移植胚胎早期发育过程中可能具有调控作用. 展开更多
关键词 h3k4三甲基化 h3k9三甲基化 猪 卵母细胞 体细胞核移植胚胎
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CD-1小鼠海马H3K9三甲基化水平的年龄化改变及其与认知功能改变的相关性研究 被引量：2
3
作者 吴子幸 曹磊 +1 位作者 王芳 陈贵海 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 2018年第1期45-49,共5页
探讨年龄对CD-1小鼠海马组蛋白H3K9三甲基化(H3K9me3)含量的影响及其与空间学习记忆能力改变的相关性。结果发现,18月和12月龄鼠在放射状水迷宫中学习期和记忆期的潜伏期、错误数均高于6月龄鼠(P_s<0.05);18月龄鼠学习期及记忆期的... 探讨年龄对CD-1小鼠海马组蛋白H3K9三甲基化(H3K9me3)含量的影响及其与空间学习记忆能力改变的相关性。结果发现,18月和12月龄鼠在放射状水迷宫中学习期和记忆期的潜伏期、错误数均高于6月龄鼠(P_s<0.05);18月龄鼠学习期及记忆期的错误数还高于12月龄鼠(P_s<0.05)。18月龄鼠海马DG和CA1区H3K9me3水平高于12月龄鼠(P_s<0.05),12月龄鼠也高于6月龄鼠(P_s<0.05)。DG和CA1区H3K9me3相对含量与学习期的潜伏期和错误数以及记忆期错误数呈正相关(P_s<0.05),而CA3区H3K9me3相对含量与学习期和记忆期的错误数、潜伏期之间无明显相关性(P_s>0.05)。以上结果提示,CD-1小鼠年龄相关空间学习记忆损害可能与海马组蛋白H3K9me3升高有关。 展开更多
关键词 小鼠 衰老 h3k9三甲基化 学习记忆
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小鼠生发泡期卵母细胞成熟过程中转录沉默机制的探讨 被引量：2
4
作者 夏梦 刘明兮 +3 位作者 周涛 何辉 万茹 霍然 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期956-961,共6页
目的:探讨小鼠生发泡卵母细胞成熟过程中发生大规模转录沉默的机制。方法:选用4～6周龄ICR雌性小鼠,分离生发泡(germinal vesicle,GV)期卵母细胞,运用RNA聚合酶Ⅱ抗体(anti-RNA PolⅡCTD,clone 4H8)及其羧基末端结构域(CTD)基团第2位丝... 目的:探讨小鼠生发泡卵母细胞成熟过程中发生大规模转录沉默的机制。方法:选用4～6周龄ICR雌性小鼠,分离生发泡(germinal vesicle,GV)期卵母细胞,运用RNA聚合酶Ⅱ抗体(anti-RNA PolⅡCTD,clone 4H8)及其羧基末端结构域(CTD)基团第2位丝氨酸磷酸化的抗体(anti-RNA PolⅡCTD Ser2-P,clone H5)、组蛋白H3K4/H3K9三甲基化的抗体(anti-H3K4me3、anti-H3K9me3)进行免疫荧光染色。观察伴随GV期小鼠卵母细胞染色质构型由非包围核仁(non-surround nucleolus,NSN)型转变为包围核仁(surround nucleolus,SN)型的过程,这两对标记物的表达及分布变化。结果:在NSN型的GV期卵母细胞中,RNA PolⅡCTD Ser2-P于核浆中呈特征性斑块状分布,同时H3K4me3在核浆中也显示强阳性信号;但在SN型卵母细胞中,RNA PolⅡCTD Ser2-P失去特征性分布,转变为核浆中弥漫性分布,H3K4me3的核浆中阳性信号也消失。结论:RNA聚合酶Ⅱ的活性降低及组蛋白修饰状态的改变在小鼠GV期卵母细胞成熟过程的大规模转录沉默中发挥了重要作用。 展开更多
关键词 生发泡卵母细胞 转录沉默 RNA聚合酶Ⅱ 组蛋白h3k4/k9三甲基化
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