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新型肝癌相关性抗原HCA519及其变异体HCA90的基因克隆和表达
被引量：
4
1
作者
王歈
韩克军
+1 位作者
屈伟
陈慰峰
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期46-52,共7页
通过利用肝癌病人体内血清中所含的对肿瘤抗原产生的特异性抗体筛选肝癌组织cDNA表达文库的方法 (SEREX) ,筛选得到了可以诱导肝癌病人抗体免疫应答的两个新抗原HCA5 19基因(GenBankAF14 6 731)及其变异体HCA90基因 (GenBankAF 2 872 6 ...
通过利用肝癌病人体内血清中所含的对肿瘤抗原产生的特异性抗体筛选肝癌组织cDNA表达文库的方法 (SEREX) ,筛选得到了可以诱导肝癌病人抗体免疫应答的两个新抗原HCA5 19基因(GenBankAF14 6 731)及其变异体HCA90基因 (GenBankAF 2 872 6 5 ) .它们定位于染色体 2 0q11 2 ,HCA5 19含 18个外显子 ,HCA90含 19个外显子 .其中HCA90所特有的外显子序列长 10 8bp ,属Alu重复序列片段 ,插入于HCA5 19外显子 10和 11之间 ,原为HCA5 19内含子序列 .该插入片段位于HCA5 19开放阅读框架之内 ,不改变HCA5 19的读码框 ,使HCA5 19编码的 74 7个氨基酸增长至HCA90的 783个氨基酸 .通过Northern杂交和RT PCR分析发现 ,HCA5 19和HCA90基因分别在 9 9例和 6 9例肝癌组织中高表达 ,RT PCR显示 ,它们在正常肝组织和其它正常组织中有极低水平转录本表达 .而这种低表达转录本在Northern杂交中不能被检测到 .HCA5 19蛋白被首次发现在肿瘤病人中能够诱导机体的抗体免疫应答 ,为一个新的肿瘤相关性抗原分子 .其变异体HCA90抗原基因为首次发现的新基因 .其功能可能与细胞的恶性增殖相关 。
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关键词
肝细胞癌
hca519
HCA90
SEREX
基因克隆
基因表达
下载PDF
职称材料
肿瘤相关抗原基因HCA519在昆虫细胞中的表达和纯化
被引量：
4
2
作者
王歈
李燕
陈慰峰
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第1期50-54,共5页
为进行肿瘤细胞免疫应答的研究及制备肿瘤诊断用抗体 ,利用昆虫细胞表达系统表达了肿瘤相关性抗原HCA5 19的重组蛋白 ,并进行了纯化 .所表达的重组蛋白分子量约 10 0kD ,含 75 5个氨基酸残基 ,在HCA5 19cDNA3′端接入FLAG序列 ,则在重...
为进行肿瘤细胞免疫应答的研究及制备肿瘤诊断用抗体 ,利用昆虫细胞表达系统表达了肿瘤相关性抗原HCA5 19的重组蛋白 ,并进行了纯化 .所表达的重组蛋白分子量约 10 0kD ,含 75 5个氨基酸残基 ,在HCA5 19cDNA3′端接入FLAG序列 ,则在重组蛋白C端接入 1个 8肽的FLAG尾 .利用其特异性抗体可以有效地纯化重组蛋白 .该FLAGTAG不影响整个重组蛋白的免疫反应性 .纯化的重组蛋白与天然蛋白具有相同或相似的免疫反应性 .它可与识别天然蛋白的血清抗体发生同样的阳性反应 .HCA5 19的足量提供 ,可以免疫动物 ,制备抗体 ;可作为抗原 ,分析其诱导肿瘤病人CTL的特异应答 。
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关键词
hca519
肿瘤相关性抗原
重组蛋白
免疫反应性
昆虫细胞
表达
纯化
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职称材料
题名
新型肝癌相关性抗原HCA519及其变异体HCA90的基因克隆和表达
被引量：
4
1
作者
王歈
韩克军
屈伟
陈慰峰
机构
北京大学医学部免疫学系
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期46-52,共7页
基金
国家"973"基金资助项目 (No .G19990 5 3 90 4)
国家自然科学基金资助项目 (3 0 0 0 0 15 2 )~~
文摘
通过利用肝癌病人体内血清中所含的对肿瘤抗原产生的特异性抗体筛选肝癌组织cDNA表达文库的方法 (SEREX) ,筛选得到了可以诱导肝癌病人抗体免疫应答的两个新抗原HCA5 19基因(GenBankAF14 6 731)及其变异体HCA90基因 (GenBankAF 2 872 6 5 ) .它们定位于染色体 2 0q11 2 ,HCA5 19含 18个外显子 ,HCA90含 19个外显子 .其中HCA90所特有的外显子序列长 10 8bp ,属Alu重复序列片段 ,插入于HCA5 19外显子 10和 11之间 ,原为HCA5 19内含子序列 .该插入片段位于HCA5 19开放阅读框架之内 ,不改变HCA5 19的读码框 ,使HCA5 19编码的 74 7个氨基酸增长至HCA90的 783个氨基酸 .通过Northern杂交和RT PCR分析发现 ,HCA5 19和HCA90基因分别在 9 9例和 6 9例肝癌组织中高表达 ,RT PCR显示 ,它们在正常肝组织和其它正常组织中有极低水平转录本表达 .而这种低表达转录本在Northern杂交中不能被检测到 .HCA5 19蛋白被首次发现在肿瘤病人中能够诱导机体的抗体免疫应答 ,为一个新的肿瘤相关性抗原分子 .其变异体HCA90抗原基因为首次发现的新基因 .其功能可能与细胞的恶性增殖相关 。
关键词
肝细胞癌
hca519
HCA90
SEREX
基因克隆
基因表达
Keywords
hepatocellular carcinoma
hca519
HCA90
SEREX
gene cloning and expression
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
肿瘤相关抗原基因HCA519在昆虫细胞中的表达和纯化
被引量：
4
2
作者
王歈
李燕
陈慰峰
机构
北京大学医学部免疫学系
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第1期50-54,共5页
基金
国家"973"基金资助项目 (No .G19990 5 390 4)
国家自然科学基金资助项目 ( 30 0 0 0 15 2 )
文摘
为进行肿瘤细胞免疫应答的研究及制备肿瘤诊断用抗体 ,利用昆虫细胞表达系统表达了肿瘤相关性抗原HCA5 19的重组蛋白 ,并进行了纯化 .所表达的重组蛋白分子量约 10 0kD ,含 75 5个氨基酸残基 ,在HCA5 19cDNA3′端接入FLAG序列 ,则在重组蛋白C端接入 1个 8肽的FLAG尾 .利用其特异性抗体可以有效地纯化重组蛋白 .该FLAGTAG不影响整个重组蛋白的免疫反应性 .纯化的重组蛋白与天然蛋白具有相同或相似的免疫反应性 .它可与识别天然蛋白的血清抗体发生同样的阳性反应 .HCA5 19的足量提供 ,可以免疫动物 ,制备抗体 ;可作为抗原 ,分析其诱导肿瘤病人CTL的特异应答 。
关键词
hca519
肿瘤相关性抗原
重组蛋白
免疫反应性
昆虫细胞
表达
纯化
Keywords
hca519
,tumor related antigen,recombinant protein,immunoreactivity,insect cells
分类号
R730.3 [医药卫生—肿瘤]
R394.8 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
新型肝癌相关性抗原HCA519及其变异体HCA90的基因克隆和表达
王歈
韩克军
屈伟
陈慰峰
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003
4
下载PDF
职称材料
2
肿瘤相关抗原基因HCA519在昆虫细胞中的表达和纯化
王歈
李燕
陈慰峰
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002
4
下载PDF
职称材料
已选择
0
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