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甘草甜素对喉癌Hep-2细胞侵袭和迁移的影响及机制研究 被引量:1
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作者 要兆旭 马海滨 +4 位作者 刘琳 赵倩 巩慧 孙凯丽 秦隆朝 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第5期604-609,共6页
目的:探究甘草甜素(Gly)对喉癌Hep-2细胞侵袭和迁移的影响及作用机制。方法:体外培养正常人喉黏膜上皮细胞和喉癌Hep-2细胞,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和蛋白印迹实验检测微小RNA-205-5p(miR-205-5p)、沉默信息调节因子2相关酶3(SIRT3)... 目的:探究甘草甜素(Gly)对喉癌Hep-2细胞侵袭和迁移的影响及作用机制。方法:体外培养正常人喉黏膜上皮细胞和喉癌Hep-2细胞,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和蛋白印迹实验检测微小RNA-205-5p(miR-205-5p)、沉默信息调节因子2相关酶3(SIRT3)mRNA和蛋白表达水平。将喉癌Hep-2细胞分为对照组、Gly低浓度组、Gly中浓度组、Gly高浓度组、Gly高浓度+空载质粒组、Gly高浓度+miR-205-5p抑制剂组。各组给予相应浓度的Gly干预或转染对应质粒培养48 h。Transwell实验和划痕实验分别检测各组Hep-2细胞侵袭和迁移能力。RT-qPCR法和蛋白印迹实验检测各组Hep-2细胞miR-205-5p、SIRT3 mRNA和蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验分析miR-205-5p与SIRT3的靶向关系。结果:与人喉黏膜上皮细胞比较,喉癌Hep-2细胞miR-205-5p水平降低,SIRT3 mRNA和蛋白水平升高(均P<0.05)。与对照组比较,Gly低、中、高浓度组穿膜细胞数和划痕愈合率、SIRT3 mRNA和蛋白水平依次降低,miR-205-5p水平依次升高(均P<0.05)。与Gly高浓度组和Gly高浓度+空载质粒组比较,Gly高浓度+miR-205-5p抑制剂组穿膜细胞数和划痕愈合率、SIRT3 mRNA和蛋白水平升高,miR-205-5p水平降低(均P<0.05)。miR-205-5p可靶向调控SIRT3表达。结论:Gly能够抑制Hep-2细胞侵袭和迁移,其机制可能与上调miR-205-5p表达,进而靶向下调SIRT3表达有关。 展开更多
关键词 喉癌 hep-2细胞 甘草甜素 微小RNA-205-5p 沉默信息调节因子2相关酶3 侵袭 迁移
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黄连素下调NRAV和PI3K/AKT通路减轻RSV感染致HEp-2细胞的损伤 被引量:1
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作者 崔玉娟 赵辉 +2 位作者 苏东霞 张莹 胡丹东 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期747-755,共9页
目的探讨长链非编码RNA NRAV(LncRNA NRAV)和PI3K/AKT通路在黄连素(berberine,BE)减轻RSV感染致HEp-2细胞损伤中的机制。方法将HEp-2细胞感染RSV,并用BE、PI3K激活剂740Y-P处理或过表达NRAV。qRT-PCR检测NRAV、RSV-F、NS2表达水平;CCK-... 目的探讨长链非编码RNA NRAV(LncRNA NRAV)和PI3K/AKT通路在黄连素(berberine,BE)减轻RSV感染致HEp-2细胞损伤中的机制。方法将HEp-2细胞感染RSV,并用BE、PI3K激活剂740Y-P处理或过表达NRAV。qRT-PCR检测NRAV、RSV-F、NS2表达水平;CCK-8实验检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞的凋亡率和线粒体膜电位;ATP检测试剂盒检测ATP水平;Western blot检测细胞PI3K、AKT、PINK1、Parkin、Beclin1、p62、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、BNIP3、NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达;MitoSOX染色检测细胞线粒体ROS(mtROS);ELISA检测细胞IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α分泌水平。结果过表达NARV细胞凋亡率、RSV活性增加,敲低后结果相反;BE能显著抑制NRAV和PI3K/AKT通路(P<0.05),改善线粒体功能、诱导线粒体自噬,提高细胞的活性、降低凋亡率(P<0.05),并降低NLRP3炎性小体活化水平和IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平(P<0.05)。过表达NRAV或740Y-P处理可逆转BE对RSV感染HEp-2细胞的改善作用。结论BE能够减轻RSV感染所致HEp-2细胞损伤,其机制可能与BE下调NRAV和PI3K/AKT通路,诱导线粒体自噬,进而减轻线粒体损伤和炎症反应有关。 展开更多
关键词 黄连素 RSV LncRNA NRAV PI3K/AKT通路 线粒体损伤 hep-2细胞损伤
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迟缓爱德华氏菌对HEp-2细胞的侵袭特性 被引量:27
3
作者 马勋 欧阳志明 +2 位作者 陈怀青 陆承平 夏晓勤 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期336-340,共5页
用细胞裂解计数法及超薄切片电镜观察法分析了迟缓爱德华氏菌侵袭HEp—2细胞的基本特性。在15株来源各异的迟缓爱德华氏菌中,有6株细菌具有对HEp—2细胞的侵袭能力。细菌侵入细胞后,主要位于空泡内。侵入细胞内的迟缓爱德华氏菌不仅... 用细胞裂解计数法及超薄切片电镜观察法分析了迟缓爱德华氏菌侵袭HEp—2细胞的基本特性。在15株来源各异的迟缓爱德华氏菌中,有6株细菌具有对HEp—2细胞的侵袭能力。细菌侵入细胞后,主要位于空泡内。侵入细胞内的迟缓爱德华氏菌不仅可在细胞内增殖,而且可从细胞内释放出来。用细胞松弛素破坏微丝后可抑制其侵袭作用,而且表现出剂量依赖关系,而用秋水仙素破坏微管后不影响其侵袭力。这表明在迟缓爱德华氏菌对HEp—2细胞的侵袭过程中,细胞骨架中有微丝的参与,未发现微管的参与。 展开更多
关键词 迟缓爱德华氏菌 侵袭 增殖 细胞骨架 hep-2细胞
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miR-135a通过下调SOX2抑制喉癌Hep-2细胞的恶性生物学行为和增强对奥沙利铂的敏感性 被引量:8
4
作者 刘扬帆 屈中玉 +2 位作者 王文亷 孙星 蔡政 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期955-961,共7页
目的:探讨敲降miR-135a对人喉癌上皮Hep-2细胞的恶性生物学行为和奥沙利铂敏感性的影响。方法:收集2018年1月至2018年6月郑州大学附属南阳医院南阳市中心医院行喉癌切除术10例患者的喉癌组织和癌旁组织标本。采用qPCR检测喉癌组织和Hep-... 目的:探讨敲降miR-135a对人喉癌上皮Hep-2细胞的恶性生物学行为和奥沙利铂敏感性的影响。方法:收集2018年1月至2018年6月郑州大学附属南阳医院南阳市中心医院行喉癌切除术10例患者的喉癌组织和癌旁组织标本。采用qPCR检测喉癌组织和Hep-2细胞中miR-135a的表达水平。miR-135 inhibitor转染喉癌Hep-2细胞后,采用CCK-8检测Hep-2细胞活性,集落形成实验检测Hep-2细胞集落形成能力,Transwell实验检测Hep-2细胞的侵袭及迁移能力,WB实验检测Hep-2细胞中SOX2蛋白的表达水平。0.5、1.0、1.5、2.0μmol/L的奥沙利铂处理已转染miR-135 inhibitor的Hep-2细胞,CCK-8实验检测Hep-2细胞的增殖活性,Annexin-V-FITC/PI染色流式细胞术检测Hep-2细胞的凋亡率。采用miR-135a inhibitor质粒、对照pcDNA空载体(SOX2-Con)质粒、pcDNA-SOX2(SOX2-OE)质粒共转染Hep-2细胞,构建miR-135a inhibitor+SOX2-Con组和miR-135a inhibitor+SOX2-OE组,检测此2组细胞的增殖活性、集落形成能力、侵袭及迁移能力。结果:与癌旁组织比较,喉癌组织中miR-135a表达水平显著升高(P<0.01);与正常NHP细胞比较,miR-135a在Hep-2细胞中表达水平明显上调(P<0.01);转染miR-135a inhibitor导致Hep-2细胞中miR-135a表达水平明显降低(P<0.01)。敲降miR-135a明显降低Hep-2细胞的增殖活性、细胞集落数、迁移、侵袭和SOX2表达(均P<0.01);明显增强细胞对奥沙利铂敏感性(P<0.01);与miR-135a inhibitor+SOX2-Con组比较,miR-135a inhibitor+SOX2-OE组的Hep-2细胞的增殖活性、细胞集落数、迁移与侵袭能力均明显增加(均P<0.01);同时,用不同浓度的奥沙利铂处理此2组细胞,相对于miR-135a inhibitor+SOX2-Con组,miR-135a inhibitor+SOX2-OE组的Hep-2细胞存活率显著升高(P<0.01)。结论:敲降miR-135a可能通过下调转录因子SOX2的表达抑制Hep-2细胞的恶性生物学行为,并增强其对奥沙利铂的敏感性。 展开更多
关键词 喉癌 hep-2细胞 miR-135a SOX2 奥沙利铂
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藻蓝蛋白诱导喉癌HEP-2细胞凋亡的实验研究 被引量:9
5
作者 应俊 潘若望 +5 位作者 王茂峰 陈吉顺 刘倩 张洪勤 包其郁 李佩珍 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1189-1196,共8页
目的:探讨藻蓝蛋白对人喉癌HEP-2细胞凋亡的影响,并初步探讨其机制。方法:不同浓度藻蓝蛋白处理HEP-2细胞,分别以MTT、倒置显微镜、扫描电镜、透射电镜、流式细胞术检测藻蓝蛋白对HEP-2细胞活力及凋亡的影响;DCFH-DA标记的流式细胞术检... 目的:探讨藻蓝蛋白对人喉癌HEP-2细胞凋亡的影响,并初步探讨其机制。方法:不同浓度藻蓝蛋白处理HEP-2细胞,分别以MTT、倒置显微镜、扫描电镜、透射电镜、流式细胞术检测藻蓝蛋白对HEP-2细胞活力及凋亡的影响;DCFH-DA标记的流式细胞术检测细胞内的活性氧水平;分光光度法检测细胞内caspase-3、-8、-9的活性;RT-PCR、Western blot检测细胞凋亡相关基因的表达。结果:MTT结果显示藻蓝蛋白能够抑制喉癌HEP-2的细胞活力,且呈时间和剂量依赖性;倒置显微镜、电镜、流式细胞术的一系列定性化和定量化实验证实藻蓝蛋白可显著诱导HEP-2细胞的凋亡;藻蓝蛋白处理后细胞内ROS水平升高,caspase-3、-8、-9被激活;RT-PCR结果表明,藻蓝蛋白作用后Bax、Fas、P53、caspase-3和caspase-9表达显著上调(P<0.05),Bcl-2表达显著下调(P<0.05);Western blot结果和RT-PCR结果一致。结论:藻蓝蛋白能够诱导HEP-2细胞的凋亡,其机制可能与细胞内ROS水平升高,上调Bax、Fas和P53 mRNA,下调Bcl-2 mRNA的表达,从而促进凋亡信号的转导最终导致细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 藻蓝蛋白 喉癌 hep-2细胞 细胞凋亡
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松乳菇多糖对人喉癌Hep-2细胞肿瘤相关基因转录的影响 被引量:8
6
作者 刘影 丁祥 +3 位作者 刘露 闫香慧 钱叶 侯怡铃 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期174-178,共5页
运用基因芯片技术分析松乳菇多糖对人喉癌Hep-2细胞肿瘤相关基因表达的影响及分子机制。结果表明,经松乳菇多糖600μg/m L处理48 h后,在人喉癌Hep-2细胞中发现相关肿瘤差异基因共68个,其中人喉癌Hep-2细胞肿瘤相关基因下调倍数大于100... 运用基因芯片技术分析松乳菇多糖对人喉癌Hep-2细胞肿瘤相关基因表达的影响及分子机制。结果表明,经松乳菇多糖600μg/m L处理48 h后,在人喉癌Hep-2细胞中发现相关肿瘤差异基因共68个,其中人喉癌Hep-2细胞肿瘤相关基因下调倍数大于100倍的基因共8个,下调50~100倍的基因共14个,同时按基因转录水平将这些基因进行了分类。运用KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)通路分析技术分析相关基因通路,结果显示松乳菇多糖主要抑制人喉癌Hep-2细胞中的MAPK信号转导通路和PI3K-AKT信号转导通路。在松乳菇多糖的刺激作用下,人喉癌Hep-2细胞的凋亡是多种基因共同作用的综合结果。用筛选出的基因进一步研究肿瘤凋亡的分子机制,对寻找潜在的抗肿瘤作用靶点具有重要生物学意义。 展开更多
关键词 松乳菇多糖 人喉癌hep-2细胞 基因芯片 凋亡
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金纳米花介导的近红外热疗对人喉癌Hep-2细胞增殖的抑制作用 被引量:5
7
作者 宋文植 姜雅萍 +3 位作者 纪小会 赵丽丽 尹万忠 杨文胜 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1886-1888,共3页
各向异性的金纳米粒子由于其表面等离子共振吸收峰可红移至近红外光区而具有特殊的近红外光热转换性能[1].研究结果表明,纳米棒等各向异性金纳米粒子可将入射的近红外光能转换成热能,从而有效杀伤肿瘤细胞[2].与手术、放化疗等常规治疗... 各向异性的金纳米粒子由于其表面等离子共振吸收峰可红移至近红外光区而具有特殊的近红外光热转换性能[1].研究结果表明,纳米棒等各向异性金纳米粒子可将入射的近红外光能转换成热能,从而有效杀伤肿瘤细胞[2].与手术、放化疗等常规治疗相比,金纳米粒子介导的近红外(NIR)热疗具有非侵入及无耐药性等优点,在肿瘤热疗和载药等领域具有广泛应用前景[3,4].传统的各向异性金纳米粒子的制备过程中需引入对生物体有毒的表面活性剂作配体[5,6],限制了其在生物医学领域的应用. 展开更多
关键词 金纳米花 柠檬酸钠 近红外热疗 人喉癌hep-2细胞 热消融
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下调FoxM1表达对人喉癌Hep-2细胞顺铂敏感性的影响 被引量:7
8
作者 魏蕾 江黎珠 +2 位作者 于超 文韬宇 陈鸿雁 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第16期1603-1608,共6页
目的探讨下调Fox M1表达对人喉癌Hep-2细胞顺铂敏感性的影响及其可能机制。方法分别选用Fox M1 siRNA以及Fox M1特异性抑制剂(硫链丝菌肽)下调Hep-2细胞Fox M1表达。实时定量PCR、Western blot检测siRNA或硫链丝菌肽处理细胞后Fox M1 m... 目的探讨下调Fox M1表达对人喉癌Hep-2细胞顺铂敏感性的影响及其可能机制。方法分别选用Fox M1 siRNA以及Fox M1特异性抑制剂(硫链丝菌肽)下调Hep-2细胞Fox M1表达。实时定量PCR、Western blot检测siRNA或硫链丝菌肽处理细胞后Fox M1 mRNA、蛋白表达量;MTT法检测下调Fox M1表达后Hep-2细胞的顺铂敏感性;流式细胞术检测下调Fox M1表达后顺铂诱导的凋亡率变化;实时定量PCR、Western blot检测顺铂作用于Fox M1下调组及对照组细胞,其Fox M1 mRNA、蛋白及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达变化。结果 siRNA及硫链丝菌肽均能下调Fox M1表达(P<0.05);两种方式均能降低顺铂作用下细胞存活率以及IC50[NC组顺铂IC50=(2.609±0.102)μg/m L,干扰组IC50=(0.771±0.058)μg/m L,P<0.05;对照组顺铂IC50=(2.142±0.198)μg/m L,抑制剂组IC50=(0.773±0.063)μg/m L,P<0.05],siRNA法处理后NC组、干扰组、NC+顺铂组、干扰+顺铂组凋亡率依次为(4.197±0.273)%、(12.553±0.183)%、(37.465±4.305)%、(82.373±7.214)%,干扰+顺铂组凋亡率显著升高(P<0.05);抑制剂处理后对照组、抑制剂组、顺铂组、抑制剂+顺铂组凋亡率依次为(2.343±0.194)%、(10.127±0.479)%、(35.075±1.995)%、(62.843±1.824)%,抑制剂+顺铂组凋亡率显著升高(P<0.05);下调Fox M1表达,凋亡抑制蛋白Bcl-2下调,促凋亡蛋白Bax表达上调(P<0.05)。结论下调Fox M1表达可提高Hep-2细胞对顺铂的敏感性,其机制可能与凋亡相关蛋白Bcl-2下调、Bax上调相关。 展开更多
关键词 FOXM1 硫链丝菌肽 hep-2细胞 顺铂 化疗敏感性 细胞凋亡
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雷帕霉素与顺铂对Hep-2细胞的联合作用 被引量:4
9
作者 雷文斌 贾涛 +2 位作者 苏振忠 文卫平 祝小林 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1838-1841,1845,共5页
目的探讨联合应用顺铂和mTOR抑制剂雷帕霉素对喉癌Hep-2细胞的作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测雷帕霉素和顺铂单独或联合应用对喉癌Hep-2细胞的抑制率,计算IC50值,探讨联合用药的效果;采用流式细胞术和Hoechst33258免疫荧光检... 目的探讨联合应用顺铂和mTOR抑制剂雷帕霉素对喉癌Hep-2细胞的作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测雷帕霉素和顺铂单独或联合应用对喉癌Hep-2细胞的抑制率,计算IC50值,探讨联合用药的效果;采用流式细胞术和Hoechst33258免疫荧光检测药物单独或联合使用对喉癌Hep-2细胞凋亡的影响。结果雷帕霉素的IC50值为11.03nmol/L,顺铂的IC50值为8.81μmol/L。雷帕霉素可以拮抗Hep-2细胞增殖,使细胞停滞在G1期。联合使用雷帕霉素和顺铂进行化疗的协同治疗指数q>1.15(金氏公式),显示具有协同治疗作用;流式细胞术和免疫荧光检测显示联合使用雷帕霉素和顺铂可以明显增强对Hep-2细胞的凋亡水平。结论联合应用雷帕霉素和顺铂可以明显提高对喉癌Hep-2细胞的杀伤效果,二者具有明显的协同作用。 展开更多
关键词 雷帕霉素 AKT/MTOR 顺铂 hep-2细胞 细胞凋亡
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超抗原活化淋巴细胞对喉癌Hep-2细胞系的抑制作用 被引量:6
10
作者 吉晓滨 臧林泉 +1 位作者 谢景华 胡枫 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1897-1899,共3页
目的观察超抗原活化淋巴细胞后对喉癌细胞的抑制作用。方法金黄色葡萄球菌肠毒素A与人淋巴细胞混合培养24h,激活淋巴细胞,再加入人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞混合培养72h,通过MTT法观察喉癌细胞的抑制情况。结果①实验组金黄色葡萄球菌肠毒... 目的观察超抗原活化淋巴细胞后对喉癌细胞的抑制作用。方法金黄色葡萄球菌肠毒素A与人淋巴细胞混合培养24h,激活淋巴细胞,再加入人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞混合培养72h,通过MTT法观察喉癌细胞的抑制情况。结果①实验组金黄色葡萄球菌肠毒素A激活淋巴细胞后对人喉鳞癌Hep-2细胞的生长有明显的抑制作用,抑制率是42.68%,高于对照组4.82%(P<0.01)。②抑制作用呈现时间的依赖性。③金黄色葡萄球菌肠毒素A在不同浓度时对喉癌细胞的生长均有抑制作用,特别在浓度是1μg/ml、72h培养时抑制率最高,达82.83%。结论超抗原活化淋巴细胞后明显抑制喉癌细胞的生长。 展开更多
关键词 喉肿瘤 hep-2细胞 超抗原
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siRNA抑制cortactin基因表达对Hep-2细胞增殖和侵袭的影响 被引量:4
11
作者 谭桂煌 曾龙武 +2 位作者 侯素平 张庆丽 谢海龙 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期332-337,共6页
背景与目的:皮层肌动蛋白(cortactin)是一种微丝肌动蛋白结合蛋白,其主要参与细胞骨架系统的调控,细胞外信号转导以及细胞黏附等过程,研究表明cortactin与肿瘤的侵袭和转移有关。因此,本研究旨在探讨siRNA(small interfering RNA)抑制co... 背景与目的:皮层肌动蛋白(cortactin)是一种微丝肌动蛋白结合蛋白,其主要参与细胞骨架系统的调控,细胞外信号转导以及细胞黏附等过程,研究表明cortactin与肿瘤的侵袭和转移有关。因此,本研究旨在探讨siRNA(small interfering RNA)抑制cortactin基因表达对喉癌Hep-2细胞增殖和侵袭的影响。方法:构建含有cortactin基因的siRNA表达载体,转染Hep-2细胞,同时以转染空载体和空白细胞组作为对照(3组细胞分别命名为pSilencer3.1-cortactin-siRNA/Hep-2、pSilencer3.1/Hep-2和Hep-2),G418筛选稳定转染的细胞;Western blot检测siRNA对cortactin蛋白表达的影响;MTT和平皿克隆形成实验检测细胞增殖能力;Transwell法检测细胞迁移侵袭能力。结果:成功构建获得cortactin缺陷型稳定转染细胞系pSilencer3.1-cortactin-siRNA/Hep-2;与Hep-2细胞比较,pSilencer3.1-cortactin-siRNA/Hep-2组细胞中cortactin含量为11.22%(P<0.01),增殖被抑制,克隆形成率降低为21.47%(P<0.01),迁移、侵袭能力显著降低(P<0.01)。结论:cortactin表达下调能抑制喉癌Hep-2细胞的增殖和侵袭。 展开更多
关键词 hep-2细胞 SIRNA CORTACTIN 增殖 侵袭
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抗肿瘤药物与TRAIL联用对喉癌HEP-2细胞株增殖、凋亡的影响 被引量:4
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作者 余晓燕 叶琳 +2 位作者 沈娜 张潜英 陈鸿雁 《重庆医学》 CAS CSCD 2008年第20期2268-2269,共2页
目的探讨化疗药物顺铂(DDP)、5氟尿嘧啶(5-Fu)单独及与TRAIL联合对HEP-2细胞株增殖、凋亡的影响。方法MTT法检测其增殖抑制作用,FCM法检测细胞凋亡率。结果TRAIL与5-Fu、DDP联合作用于HEP-2细胞株时,其抑制率、凋亡率高于单独作用时的... 目的探讨化疗药物顺铂(DDP)、5氟尿嘧啶(5-Fu)单独及与TRAIL联合对HEP-2细胞株增殖、凋亡的影响。方法MTT法检测其增殖抑制作用,FCM法检测细胞凋亡率。结果TRAIL与5-Fu、DDP联合作用于HEP-2细胞株时,其抑制率、凋亡率高于单独作用时的抑制率和凋亡率。结论TRAIL与5-Fu、DDP联合作用有协同抑制HEP-2细胞株增殖、诱导HEP-2细胞株凋亡的作用。 展开更多
关键词 TRAIL DDP 5-FU hep-2细胞 喉癌
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5-氟尿嘧啶联合热疗体外诱导Hep-2细胞凋亡及细胞周期阻滞 被引量:3
13
作者 蔡郁 蔡敏 +2 位作者 王文华 张步勇 徐艳萍 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第23期5113-5114,共2页
目的探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)联合热疗对人喉癌细胞株Hep-2细胞增殖抑制率、细胞凋亡率及细胞周期进程的影响。方法应用噻唑蓝(MTT)染色法检测不同条件下Hep-2细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期进程的变化及凋亡率。结果单纯热疗组... 目的探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)联合热疗对人喉癌细胞株Hep-2细胞增殖抑制率、细胞凋亡率及细胞周期进程的影响。方法应用噻唑蓝(MTT)染色法检测不同条件下Hep-2细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期进程的变化及凋亡率。结果单纯热疗组、单纯5-FU组及联合组对Hep-2细胞的增殖抑制率分别为13.7%、22.3%和46.5%,与对照组相比差异显著(P<0.01)。流式细胞仪结果显示,G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,细胞凋亡率升高,组间比较差异显著。结论 5-FU联合热疗能显著提高Hep-2细胞的增殖抑制率,抑制Hep-2细胞G1期向S期转化进程,诱导Hep-2细胞凋亡。 展开更多
关键词 hep-2细胞 5-氟尿嘧啶 热疗 细胞周期 凋亡
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lncRNA HOTAIR靶向miR-126激活RhoA/ROCK通路促进喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭与EMT 被引量:6
14
作者 李登辉 蔡润茁 +1 位作者 朱丽明 陈冬 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第3期365-370,共6页
目的:探讨长链非编码RNA-Hox转录反义RNA(long non-coding RNA Hox antisense intergenic RNA,lncRNA HOTAIR)对喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭及其上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及机制。方法:利用实时荧光定量P... 目的:探讨长链非编码RNA-Hox转录反义RNA(long non-coding RNA Hox antisense intergenic RNA,lncRNA HOTAIR)对喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭及其上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及机制。方法:利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测喉癌组织、癌旁组织和Hep-2细胞中lncRNA HOTAIR、微小RNA-126(microRNA-126,miR-126)的表达量;下调lncRNA HOTAIR表达,分别通过细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)、细胞侵袭实验和蛋白质印迹法(Western blot)检测Hep-2细胞增殖、侵袭和EMT能力。利用miRcode分析HOTAIR的靶基因,通过双荧光素酶报告基因实验分析lncRNA HOTAIR和miR-126之间的关系。同时上调lncRNA HOTAIR和miR-126的表达,检测lncRNA HOTAIR通过miR-126对Hep-2细胞增殖、侵袭和EMT的影响。下调miR-126表达后,Western blot检测RhoA、ROCK蛋白的表达量。Y-27632作用细胞后,检测下调miR-126对Hep-2细胞增殖、侵袭和EMT的影响。结果:在Hep-2细胞和喉癌组织中lncRNA HOTAIR的表达明显上调(P<0.01),miR-126表达明显下调(P<0.01)。下调lncRNA HOTAIR表达后,抑制了Hep-2细胞增殖、侵袭和EMT;lncRNA HOTAIR与miR-126具有靶向和负调控关系;下调miR-126表达后,激活了Hep-2细胞内RhoA/ROCK通路,并且促进了Hep-2细胞增殖、侵袭和EMT。结论:上调lncRNA HOTAIR通过靶向miR-126激活RhoA/ROCK通路促进喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭与EMT。 展开更多
关键词 lncRNA HOTAIR MIR-126 RhoA/ROCK通路 hep-2细胞 增殖 侵袭 EMT
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氯丙嗪协同紫杉醇对Hep-2细胞的增殖抑制作用 被引量:3
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作者 冯青杰 徐艳萍 +1 位作者 辛丁 傅仲鹰 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期124-126,共3页
目的:观察盐酸氯丙嗪与紫杉醇联合应用对人喉癌细胞株(Hep-2细胞)的增殖抑制作用及其对细胞周期各时相的影响。方法:对数生长期Hep-2细胞分为单纯紫杉醇组(3.0、6.0和12.0mg·L-1)、氯丙嗪4.0mg·L-1)加紫杉醇(12.0mg·L-1... 目的:观察盐酸氯丙嗪与紫杉醇联合应用对人喉癌细胞株(Hep-2细胞)的增殖抑制作用及其对细胞周期各时相的影响。方法:对数生长期Hep-2细胞分为单纯紫杉醇组(3.0、6.0和12.0mg·L-1)、氯丙嗪4.0mg·L-1)加紫杉醇(12.0mg·L-1)联合组和空白对照组(100mL培养液),应用MTT比色法和流式细胞术检测各组Hep-2细胞的增殖抑制率,流式细胞仪分析单独及联合用药后Hep-2细胞的周期进程及凋亡率。结果:3.0、6.0和12.0mg·L-1单纯紫杉醇组Hep-2细胞增殖抑制率分别为14.0%、23.9%和36.7%,随紫杉醇浓度增加细胞增殖抑制率升高,三组间及组间两两比较差异均具有显著性(P<0.05);联合组Hep-2细胞增殖抑制率为46.3%,明显高于相同剂量单纯紫杉醇组(P<0.05);单纯紫杉醇组随其用药浓度的增加G1期细胞减少,S期和G2期细胞增多,与空白对照组比较凋亡率升高(P<0.05)。结论:在一定浓度下,盐酸氯丙嗪能够增强紫杉醇诱导Hep-2细胞增殖抑制率及细胞周期进程各时相变化和凋亡率,氯丙嗪与紫杉醇联合应用具有明显的协同效应。 展开更多
关键词 氯丙嗪 紫杉醇 hep-2细胞 细胞周期 细胞凋亡
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中药HB对喉癌Hep-2细胞的抑制作用及其机制研究 被引量:6
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作者 李厚伟 张妍 +3 位作者 许超千 孙建平 何树庄 杨宝峰 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2001年第4期261-262,共2页
目的 研究蜈蚣提取物HB对喉癌Hep 2细胞生长的抑制作用及其作用机制。方法 MTT法观察不同浓度的HB对Hep 2细胞的生长抑制情况 ;采用激光扫描共聚焦技术分析HB作用Hep 2细胞 48h后细胞内钙、DNA含量的变化情况。结果 Hep 2细胞用 10 ... 目的 研究蜈蚣提取物HB对喉癌Hep 2细胞生长的抑制作用及其作用机制。方法 MTT法观察不同浓度的HB对Hep 2细胞的生长抑制情况 ;采用激光扫描共聚焦技术分析HB作用Hep 2细胞 48h后细胞内钙、DNA含量的变化情况。结果 Hep 2细胞用 10 μg/ml、10 0 μg/ml的HB处理 72h后 ,细胞存活率显著降低 ;用 10 μg/ml和2 0 μg/ml的HB处理Hep 2细胞 48h后 ,细胞内钙含量显著升高 (P <0 .0 0 1) ,DNA含量显著降低 (P <0 .0 0 1)。 结论 中药HB在体外对Hep 2细胞的生长有明显地抑制作用 ,机制与降低细胞内DNA含量 。 展开更多
关键词 蜈蚣提取物 激光扫描聚焦显微镜 DNA 细胞内钙 喉癌 hep-2细胞 中医药治疗
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中华猕猴桃根氯仿部分抑制喉癌HEP-2细胞增殖作用的研究 被引量:3
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作者 谷佳 李京 +5 位作者 杨晓丹 尚紫薇 魏宏权 姜学钧 韩涛 郭星 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第11期2835-2838,共4页
目的:探讨中华猕猴桃根氯仿提取部分(Actinidiachinensis planch extracted by chloroform,EC-ACP)对喉癌HEP-2的增殖抑制及诱导凋亡的作用,并探讨可能的机制。方法:运用CCK-8法检测EC-ACP对喉癌HEP-2的抑制作用及IC50值;流式细胞术检测... 目的:探讨中华猕猴桃根氯仿提取部分(Actinidiachinensis planch extracted by chloroform,EC-ACP)对喉癌HEP-2的增殖抑制及诱导凋亡的作用,并探讨可能的机制。方法:运用CCK-8法检测EC-ACP对喉癌HEP-2的抑制作用及IC50值;流式细胞术检测EC-ACP对喉癌HEP-2的凋亡率及周期的影响;Western blot法检测EC-ACP对喉癌HEP-2细胞蛋白表达的影响。结果:24、48、36 h后不同浓度的EC-ACP作用于HEP-2细胞均能明显的抑制细胞增殖(P<0.05),且存在时间-浓度依赖性。Annexin V-FITC/PI双染法结果提示EC-ACP作用于喉癌HEP-2细胞48 h后,随着浓度的增加,凋亡率逐渐增加。PI染色结果提示EC-ACP将HEP-2细胞周期阻滞于G1期。Western-blot结果显示随着加药浓度的增加,周期相关蛋白P53表达逐渐增大,周期相关蛋白Cyclin D1表达减少。结论:中华猕猴桃根氯仿提取部分可以抑制HEP-2细胞的增值,其发生可能与其促进p53,抑制cyclin D1基因表达有关。 展开更多
关键词 中华猕猴桃根 hep-2细胞 周期 凋亡
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携EGFP的STAT3载体构建、表达及其对HEP-2细胞的增殖抑制作用 被引量:3
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作者 郭慧 杜波 +1 位作者 李晓明 路秀英 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第3期18-20,共3页
目的构建携EGFP的信号转导与转录激活因子(STAT)3 mRNA的小RNA干扰(siRNA)表达载体,并检测STAT3表达及其对HEP-2细胞增殖的抑制作用。方法合成用于产生针对STAT3的小发卡状RNA(shRNA)寡核苷酸,克隆到PGPU6/EGFP/Neo载体中,BbsⅠ和BamH... 目的构建携EGFP的信号转导与转录激活因子(STAT)3 mRNA的小RNA干扰(siRNA)表达载体,并检测STAT3表达及其对HEP-2细胞增殖的抑制作用。方法合成用于产生针对STAT3的小发卡状RNA(shRNA)寡核苷酸,克隆到PGPU6/EGFP/Neo载体中,BbsⅠ和BamHⅠ双酶切及测序鉴定重组体,并转染HEP-2细胞。流式细胞仪、RT-PCR、免疫印迹、MTT法检测HEP-2细胞中STAT3的表达及该细胞的增殖情况。结果成功构建STAT3-siRNA表达载体,转染HEP-2后可显著抑制细胞STAT3 mRNA及蛋白的表达,细胞增殖活性显著降低(P<0.05)。结论用pGPU6/EGFP/Neo载体,针对不同靶位点构建的STAT3-siRNA表达载体可有效抑制喉癌细胞增殖及其STAT3的表达。 展开更多
关键词 RNA干扰 转录激活因子3 喉肿瘤 hep-2细胞
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苦马豆素诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡研究 被引量:4
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作者 李莎 张思楠 +1 位作者 杨军 伍春莲 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1384-1389,1383,共7页
苦马豆素具有广泛的抗肿瘤作用和免疫调节作用。本研究对苦马豆素诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡的作用及其机制进行研究。通过不同浓度的苦马豆素处理Hep-2细胞24 h后,采用MTT法检测细胞活性;荧光显微镜观察细胞形态;Annexin V-FITC/PI双标... 苦马豆素具有广泛的抗肿瘤作用和免疫调节作用。本研究对苦马豆素诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡的作用及其机制进行研究。通过不同浓度的苦马豆素处理Hep-2细胞24 h后,采用MTT法检测细胞活性;荧光显微镜观察细胞形态;Annexin V-FITC/PI双标记检测细胞凋亡;JC-1检测线粒体膜电位;实时荧光定量PCR和Western blot分别检测Bax和XIAP基因mRNA和蛋白质表达水平。在一定浓度范围内,苦马豆素抑制Hep-2细胞增殖,且呈剂量依赖性;荧光显微镜下细胞发生形态改变,并呈现典型的凋亡细胞特征;磷脂酰丝氨酸外翻加剧;线粒体膜电位逐渐下降;Bax的mRNA和蛋白质表达水平上升,XIAP的mRNA和蛋白质表达水平下降。苦马豆素通过调节细胞内Bax和XIAP的表达,并经线粒体信号途径诱导Hep-2细胞凋亡。 展开更多
关键词 苦马豆素 hep-2细胞 细胞凋亡 线粒体途径
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内皮素拮抗剂抑制人源性喉癌Hep-2细胞VEGF-C体外表达的定量分析 被引量:3
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作者 林雁 尹芳 +5 位作者 袁莹 邹剑 刘锋 周鹏 刘世喜 张京晶 《昆明理工大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2013年第4期71-74,共4页
通过影响人源性喉癌Hep-2细胞中血管内皮生长因子C(VEGF—C)表达,探讨内皮素拮抗剂(BQ-123)与喉癌淋巴转移的机制,为临床及基础研究提供相应的实验依据.体外培养人源性喉癌Hep-2细胞,运用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养液... 通过影响人源性喉癌Hep-2细胞中血管内皮生长因子C(VEGF—C)表达,探讨内皮素拮抗剂(BQ-123)与喉癌淋巴转移的机制,为临床及基础研究提供相应的实验依据.体外培养人源性喉癌Hep-2细胞,运用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养液中VEGF—C的含量;利用M1-r比色法,测定不同浓度的内皮素拮抗剂对人源性喉癌Hep-2细胞增殖的影响.实验中发现当浓度分别为20.0~150.0μg/mLBQ-123作用48h,对人源性喉癌Hep-2细胞增殖有显著抑制作用(P〈0.05);浓度分别为50.O~150.0μg/mLBQ-123对人源性喉癌Hep-2细胞VEGF—c蛋白分泌量有明显抑制活性作用(P〈0.05).BQ-123可以有效抑制人源性喉癌Hep-2细胞中VEGF—C体内的表达. 展开更多
关键词 内皮素拮抗剂 人源性喉癌hep-2细胞 VEGF-C 酶联免疫吸附测定法 MTT比色法
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