miR-1264对喉癌Hep2细胞增殖和迁移的影响 被引量：8

1

作者 侯素平 赵娟霞 +3 位作者 杨丽娟 王林娜 孙晓玲 谢海龙 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2018年第3期273-278,共6页

目的 miR-1264在喉癌中表达下调。文中旨在研究miR-1264对喉癌Hep2细胞生物学功能的影响及是否参与下调LCRG1基因的表达。方法 Real-time quantitative PCR检测miR-1264在人喉癌组织中的表达情况;将转染mimic/inhibitor NC Hep2细胞设... 目的 miR-1264在喉癌中表达下调。文中旨在研究miR-1264对喉癌Hep2细胞生物学功能的影响及是否参与下调LCRG1基因的表达。方法 Real-time quantitative PCR检测miR-1264在人喉癌组织中的表达情况;将转染mimic/inhibitor NC Hep2细胞设为对照组,将未转染Hep2细胞设为空白组,将转染miR-1264 mimic/inhibitor设为实验组。利用MTT、Transwell分别观察miR-1264对Hep2细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;luciferase实验验证miR-1264和LCRG1 3'UTR的结合;RT-PCR、Western blot分别检测miR-1264、LCRG1蛋白表达。结果与对照组和空白组相比,Hep2细胞瞬转miR-1264mimic后,活细胞数量明显增加,增殖能力显著增强(P<0.05);而瞬转miR-1264 inhibitor后,活细胞数量明显降低,增殖能力减弱(P<0.05)。与对照组[(80.80±1.07)个]及空白组[(73.60±1.44)个]迁移细胞数量相比,实验组[(97.00±1.41)个]明显增加(P<0.05),迁移能力亦显著增强(P<0.05);与对照组[(80.00±1.11)个]及空白组[(73.60±1.44)个]迁移细胞数量相比,miR-1264 inhibitor组[(71.40±1.21)个]明显降低(P<0.05),迁移能力亦减弱(P<0.05)。与对照组[(43.00±1.41)个]和空白组[(50.60±1.03)个]侵袭细胞数量相比,实验组[(57.00±1.00)个]明显增加(P<0.05),侵袭能力亦显著增强(P<0.05);与对照组[(61.20±1.50)个]和空白组[(50.60±1.03)个]侵袭细胞数量相比,实验组[(27.60±0.93)个]明显降低,侵袭能力受到显著抑制(P<0.05),利用RT-PCR验证瞬转成功后,进一步应用Western blot实验检测LCRG1蛋白表达结果,显示:实验组LCRG1蛋白表达较NC对照组和空白组均无明显差异(P>0.05)。结论 miR-1264在喉癌组织中高表达,miR-1264可能不参与LCRG1蛋白的表达下调,但能增强Hep2细胞的增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多

关键词 miR-1264 LCRG1 hep2细胞 喉癌

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单次、分次照射与^(125)I粒子低剂量率照射对人喉鳞癌Hep2细胞的抑制作用 被引量：2

2

作者 黄鹂 刘敬佳 +5 位作者 杜立法 曲昂 赵勇 王俊杰 张建国 张杰 《癌症进展》 2015年第1期69-73,共5页

目的探讨125I粒子持续低剂量率照射与分次照射、单次照射对人喉鳞癌细胞Hep2的抑制作用及其作用机制。方法实验分为无照射对照组(Ctrl组)、单次照射组(SDR组)、分次照射组(FDR组)和125I粒子持续低剂量率照射组(125I-CLDR组)四组。采用... 目的探讨125I粒子持续低剂量率照射与分次照射、单次照射对人喉鳞癌细胞Hep2的抑制作用及其作用机制。方法实验分为无照射对照组(Ctrl组)、单次照射组(SDR组)、分次照射组(FDR组)和125I粒子持续低剂量率照射组(125I-CLDR组)四组。采用细胞克隆形成实验法检测Hep2细胞在不同照射条件下细胞克隆的形成能力;用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期阻滞情况;用蛋白印迹法检测不同照射条件后Hep2细胞总γ-H2AX、Cyclin B1、Caspase3蛋白表达的变化。结果经2 Gy、4 Gy、6 Gy的剂量照射,125I-CLDR组Hep2细胞克隆形成率均低于SDR组和FDR组。经4 Gy的剂量照射后,125I-CLDR组Hep2细胞出现G2/M期阻滞,且阻滞效应较SDR组及FDR组的细胞强;125I-CLDR组Hep2细胞的凋亡比例明显高于SDR组及FDR组;三个照射组γ-H2AX、Cyclin B1、Caspase3、NF-κB、P21和Cdk1的表达水平上调,125I-CLDR组p-Cdc25c蛋白表达水平低于SDR组和FDR组。结论在本实验条件下,125I粒子持续低剂量率照射较单次照射、分次照射能够诱发更多Hep2细胞出现DNA损伤、引起持续的G2/M期阻滞、诱导细胞凋亡并抑制细胞的再增殖。 展开更多

关键词 125^I粒子 低剂量率照射 hep2细胞 DNA损伤 细胞周期

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miR-9-5p下调FRMD6促喉癌Hep2细胞存活的机制研究 被引量：1

3

作者 程秀琴 谭元元 +1 位作者 艾力根·阿不都热依木 唐亮 《医学研究杂志》 2019年第8期63-69,共7页

目的探讨miR-9-5p通过下调FRMD6表达促进喉癌Hep2细胞存活的具体机制。方法通过实时荧光定量PCR检测miR-9-5p、FRMD6在人喉癌组织中的表达情况。Hep2细胞转染对照抑制剂作为对照组,实验组分别转染miR-9-5p抑制剂、FRMD6、miR-9-5p抑制剂... 目的探讨miR-9-5p通过下调FRMD6表达促进喉癌Hep2细胞存活的具体机制。方法通过实时荧光定量PCR检测miR-9-5p、FRMD6在人喉癌组织中的表达情况。Hep2细胞转染对照抑制剂作为对照组,实验组分别转染miR-9-5p抑制剂、FRMD6、miR-9-5p抑制剂+FRMD6,利用MTT、细胞克隆形成实验等观察miR-9-5p及FRMD6对Hep2细胞增殖活力的影响;caspase-3蛋白活性检测以评估miR-9-5p、FRMD6对Hep2细胞的凋亡情况。对照组转染阴性对照,实验组分别转染miR-9-5pmimics,Western blot法检测过表达细胞中FRMD6的表达;Luciferase实验验证miR-9-5p与FRMD63′-UTR的结合。对照组转染阴性对照/抑制剂,实验组分别转染miR-9-5p对照/抑制剂,RT-PCR、Western blot法分别检测转染细胞中miR-9-5p、FRMD6、YAP等表达情况。结果RT-PCR法检测结果显示,喉癌组织中miR-9-5p表达增加而FRMD6表达下降。MTT及细胞克隆形成实验结果显示,Hep2细胞分别瞬转miR-9-5p抑制剂或FRMD6过表达活细胞数量均明显减少,增殖能力显著下降(P<0.05),而两者共瞬转后,细胞增殖能力较单转染组显著降低(P<0.05);caspase-3蛋白活性:Hep2细胞分别瞬转miR-9-5p抑制剂或FRMD6细胞凋亡增加(P<0.05),而两者共瞬转后细胞凋亡较单转染组高(P<0.05)。Westernblot法检测结果显示,Hep2细胞过表达miR-9-5p后FRMD6表达减少;Luciferase实验结果显示,miR-9-5p与FRMD63′-UTR直接结合。RT-PCR及Westernblot法检测结果显示,miR-9-5p阴性组FRMD6转录及翻译显著降低,YAPmRNA及蛋白表达则显著上调(P<0.05);miR-9-5p抑制剂组FRMD6的表达升高,而YAP表达降低(P<0.05)。结论miR-9-5p通过抑制FRMD6基因表达,促进人喉癌组织及Hep2细胞增殖存活,抑制细胞凋亡,这个过程可能与Hippo-YAP通路受抑制有关。 展开更多

关键词 miR-9-5p FRMD6 人喉癌hep2细胞存活 Hippo/YAP

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miR-21对人喉鳞癌Hep2细胞增殖与凋亡的影响 被引量：2

4

作者 曲莉 《重庆医学》 CAS 北大核心 2016年第24期3411-3413,共3页

目的探讨miR-21对人喉鳞癌Hep2细胞增殖与凋亡的影响。方法脂质体LipofectamineTM2000将miR-21inhibitor和miR-21阴性对照(NC)转入Hela细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力,克隆实验及Hoechst染色分别检测细胞增殖与凋亡情况,Wester... 目的探讨miR-21对人喉鳞癌Hep2细胞增殖与凋亡的影响。方法脂质体LipofectamineTM2000将miR-21inhibitor和miR-21阴性对照(NC)转入Hela细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力,克隆实验及Hoechst染色分别检测细胞增殖与凋亡情况,Western blot检测人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)、程序化死亡蛋白4基因(PDCD4)、Bax、Bcl-2表达及蛋白激酶B(AKT)磷酸化水平。结果与miR-21NC比较,miR-21inhibitor能显著抑制细胞活力[(0.728±0.045)vs.(0.393±0.018),P<0.01],降低细胞克隆数目[(158.38±14.47)vs.(65.52±6.86),P<0.01],提高细胞凋亡率[(8.45±0.67)%vs.(40.23±3.46)%,P<0.01],并上调PTEN、PDCD4、Bax表达,下调Bcl-2表达及降低AKT磷酸化水平(P<0.01)。结论 miR-21inhibitor通过PTEN/AKT信号通路抑制人喉鳞癌Hep2细胞增殖和诱导凋亡,并调节细胞凋亡相关蛋白的表达。 展开更多

关键词 MIR-21 人喉鳞癌hep2细胞 细胞增殖 细胞凋亡

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miR-126对人喉鳞癌Hep2细胞迁移侵袭能力的影响

5

作者 沙海滨 尹丽娥 +1 位作者 马荣峰 徐佳鸿 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第21期4841-4844,共4页

目的探讨miR-126对人喉鳞癌Hep2细胞迁移侵袭能力的影响。方法采用脂质体Lipofectamine TM 3000将miR-126 mimics和miR-126 NC转入Hep2细胞中,Realtime-PCR检测miR-126表达,MTT法检测细胞活力,tanswell实验检测细胞迁移及侵袭能力,West... 目的探讨miR-126对人喉鳞癌Hep2细胞迁移侵袭能力的影响。方法采用脂质体Lipofectamine TM 3000将miR-126 mimics和miR-126 NC转入Hep2细胞中,Realtime-PCR检测miR-126表达,MTT法检测细胞活力,tanswell实验检测细胞迁移及侵袭能力,Western印迹检测细胞中基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、锌指转录因子(Snail)、锌指结合蛋白(ZEB)1蛋白表达及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路的激活情况。结果miR-126 mimics组miR-126表达量高于miR-126 NC组,细胞活力低于miR-126 NC组,细胞迁移数目少于miR-126 NC组,细胞侵袭数目少于miR-126 NC组,MMP2、MMP9、Snail、ZEB1、PI3K及p-AKT蛋白表达量均低于miR-126 NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-126过表达能显著的抑制Hep2喉鳞癌细胞迁移侵袭能力,其机制可能与阻断PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多

关键词 喉鳞癌 MIR-126 hep2细胞 迁移 侵袭

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miR-122a抑制人喉癌细胞株Hep2细胞增殖的研究 被引量：5

6

作者 陈云华 于亚峰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期352-355,共4页

目的:研究miR-122a对人喉癌细胞株Hep2细胞增殖、细胞周期以及相关蛋白表达量的影响。方法:人喉癌细胞株Hep2细胞分别转染miR-122a寡聚核苷酸(A组)和miR-122a inhibitor(阻遏物)(B组),同时设立阻遏物阴性对照(inhibitor negative contro... 目的:研究miR-122a对人喉癌细胞株Hep2细胞增殖、细胞周期以及相关蛋白表达量的影响。方法:人喉癌细胞株Hep2细胞分别转染miR-122a寡聚核苷酸(A组)和miR-122a inhibitor(阻遏物)(B组),同时设立阻遏物阴性对照(inhibitor negative control,miR-NC inhibitor)(C组)和空白对照(D组)。用RT-PCR、MTT法、流式细胞仪和Western blot技术评价各组细胞增殖和细胞周期的生物学特征。结果:转染miR-122a寡聚核苷酸后,Hep2细胞中miR-122a表达显著增加。同D组相比,A组细胞增殖水平明显受到抑制,miR-122a寡聚核苷酸能够有效诱导Hep-2细胞周期阻滞在G1/G0期,A组细胞分裂周期蛋白42表达水平明显下调,细胞周期调控因子蛋白CDK4及细胞周期素D1蛋白表达水平明显降低。结论:miR-122a寡聚核苷酸能够显著抑制喉癌细胞Hep2的增殖,miR-122a是潜在的人喉癌细胞基因治疗的候选靶点。 展开更多

关键词 喉肿瘤 miR-122a 细胞周期 hep2细胞

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姜黄素抑制喉癌Hep2细胞系增殖的Rho/ROCK机制研究 被引量：4

7

作者 闫茂生 尹航 +3 位作者 李先明 吴冬 杨东 徐钢 《临床和实验医学杂志》 2015年第14期1149-1152,共4页

目的分析姜黄素抑制喉癌Hep2细胞系增殖的相关机制及Rho/ROCK的参与作用。方法喉癌Hep2细胞随机分为4组:对照组、Y27632组、姜黄素低剂量组和高剂量组。姜黄素低剂量和高剂量组分别给予姜黄素(5μmol/L和50μmol/L)孵育,Y27632组在给予... 目的分析姜黄素抑制喉癌Hep2细胞系增殖的相关机制及Rho/ROCK的参与作用。方法喉癌Hep2细胞随机分为4组:对照组、Y27632组、姜黄素低剂量组和高剂量组。姜黄素低剂量和高剂量组分别给予姜黄素(5μmol/L和50μmol/L)孵育,Y27632组在给予姜黄素孵育(10μmol/L)时给予Y27632(10μmol/L)。分析各组细胞活力情况,Western Blotting法分析各组细胞中细胞凋亡蛋白Bax、Bcl2、P53以及Caspase3/9及ROCK通路调控蛋白的表达变化。结果姜黄素可以明显抑制喉癌Hep2细胞的增殖,高剂量的姜黄素抑制率最高,同时,姜黄素高剂量可以显著增强Hep2细胞的Rho A、ROCK1/2及细胞凋亡相关蛋白的表达(P<0.01),效果明显优于姜黄素低剂量组,Y27632可以明显恢复异常表达的上述蛋白。结论姜黄素通过激活ROCK信号通路和细胞凋亡蛋白上调表达抑制喉癌Hep2细胞的增殖,发挥肿瘤抑制的作用。 展开更多

关键词 喉癌 hep2细胞系 姜黄素 增殖 细胞凋亡 ROCK信号通路 机制

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凋亡蛋白对Hep2细胞影响的研究

8

作者 国泰 杨谦 +2 位作者 高洪雷 孙?晗 王笑梅 《哈尔滨工业大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1066-1067,1073,共3页

从鸡贫血病毒(CAV———ch icken anem ia virus)总DNA中克隆凋亡蛋白(Apoptin)基因片段,并与pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO载体构建融合载体,转化E.coli.DH5α,筛选氨苄抗性阳性克隆并鉴定.以该融合载体转染Hep2细胞后,在倒置荧光显微镜下观察... 从鸡贫血病毒(CAV———ch icken anem ia virus)总DNA中克隆凋亡蛋白(Apoptin)基因片段,并与pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO载体构建融合载体,转化E.coli.DH5α,筛选氨苄抗性阳性克隆并鉴定.以该融合载体转染Hep2细胞后,在倒置荧光显微镜下观察到绿色荧光标记,同时观察到细胞核形态学呈凋亡特征变化,表明凋亡蛋白可以诱导Hep2细胞系发生凋亡. 展开更多

关键词 凋亡蛋白 细胞凋亡 hep2传代细胞

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猫棒束孢对IR-Hep G2细胞氧化应激的改善作用及机制

9

作者 陈静静 陈丽霞 +2 位作者 赵莉莉 杨永明 杨喜花 《西部医学》 2023年第2期172-175,181,共5页

目的探讨猫棒束孢(IF)对胰岛素抵抗Hep G2(IR-HepG2)细胞氧化应激的保护作用及其机制。方法MTT法测定不同浓度IF和胰岛素对Hep G2细胞增殖的影响,用含10-8 mol·L^(-1)胰岛素的高糖DMEM培养基诱导Hep G2细胞48 h,建立Hep G2细胞胰... 目的探讨猫棒束孢(IF)对胰岛素抵抗Hep G2(IR-HepG2)细胞氧化应激的保护作用及其机制。方法MTT法测定不同浓度IF和胰岛素对Hep G2细胞增殖的影响,用含10-8 mol·L^(-1)胰岛素的高糖DMEM培养基诱导Hep G2细胞48 h,建立Hep G2细胞胰岛素抵抗模型。采用试剂盒测定葡萄糖消耗量、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、胰岛素受体底物1(IRS-1)、磷脂酰肌醇-3-羟基酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)的含量。结果在IF浓度为5μg·mL^(-1)和10μg·mL^(-1)对细胞生长无显著促进作用,故浓度选用于5μg·mL^(-1)和10μg·mL^(-1);胰岛素处理48 h后只有10-8 mol·L^(-1)剂量组对照细胞生长无显著抑制作用,故选用胰岛素浓度为10-8 mol·L^(-1),培养48 h建立胰岛素抵抗模型。与正常组比较,模型组IR-Hep G2细胞葡萄糖消耗量显著下降(P<0.01);与模型组比较,各浓度猫棒束孢干预后的IR-Hep G2细胞的葡萄糖消耗量显著上升(P<0.01)。与正常组比较,模型组Hep G2细胞的SOD含量显著下降(P<0.01),MDA含量显著上升(P<0.01),IRS-1、PI3K、Akt的含量显著下降(P<0.05)。经IF处理后SOD含量显著提高(P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.01),IRS-1、PI3K、Akt的含量显著升高(P<0.01、P<0.05、P<0.01)。结论IF能够改善胰岛素抵抗Hep G2细胞模型的糖代谢和氧化应激水平,并通过调控IRS-1/PI3K/Akt信号通路起到改善胰岛素抵抗的作用。 展开更多

关键词 猫棒束孢 胰岛素抵抗 hep G2细胞 氧化应激 胰岛素信号通路

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壁虎醇提物诱导人喉癌细胞Hep2凋亡的实验研究 被引量：5

10

作者 崔朝初 王建刚 +3 位作者 段冷昕 钱昕 王彩娥 徐新丽 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期551-554,共4页

本文研究了壁虎乙醇提取物(GEE)诱导Hep2细胞凋亡的作用。采用噻唑蓝比色法(MTT)检测了GEE对Hep2细胞增殖的抑制作用,发现GEE可呈剂量-时间依赖性的抑制Hep2细胞的增殖,GEE作用24、48、72 h后其IC50值分别为336.858、237.949、188.991μ... 本文研究了壁虎乙醇提取物(GEE)诱导Hep2细胞凋亡的作用。采用噻唑蓝比色法(MTT)检测了GEE对Hep2细胞增殖的抑制作用,发现GEE可呈剂量-时间依赖性的抑制Hep2细胞的增殖,GEE作用24、48、72 h后其IC50值分别为336.858、237.949、188.991μg/mL。Hoechst 33258荧光染色后在显微镜下可观察到Hep2细胞发生了典型凋亡的形态学变化;利用Western blot法证实在Hep2细胞中GEE可诱导caspase-3和抑制VEGF蛋白的表达。这些结果表明GEE可能是通过上调Caspase-3和下调VEGF蛋白的表达诱导Hep2细胞的凋亡。 展开更多

关键词 壁虎乙醇提取物 hep2细胞 凋亡 CASPASE 3 VEGF

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内皮素系统在喉癌细胞HEP2的表达 被引量：2

11

作者 徐定远 李泽卿 +4 位作者 吴波 薛飞 季俊峰 周蓓洁 王秋萍 《医学研究生学报》 CAS 2010年第1期21-24,共4页

目的内皮素(endothelin,ET)系统在多种恶性肿瘤中均有表达且对恶性肿瘤的演进具有重要调控作用,文中对喉癌细胞HEP2是否存在ET系统进行探讨。方法应用RT-PCR和免疫组化方法分别检测HEP2细胞ET系统的基因和蛋白表达,ELISA法对HEP2细胞ET... 目的内皮素(endothelin,ET)系统在多种恶性肿瘤中均有表达且对恶性肿瘤的演进具有重要调控作用,文中对喉癌细胞HEP2是否存在ET系统进行探讨。方法应用RT-PCR和免疫组化方法分别检测HEP2细胞ET系统的基因和蛋白表达,ELISA法对HEP2细胞ET1分泌情况进行检测。结果HEP2细胞存在ET系统基因及蛋白表达,同时能主动分泌ET1。结论人喉癌细胞存在ET系统的表达,ET1可能是促进喉癌病理发展的重要生物因子。 展开更多

关键词 内皮素1 内皮素受体 内皮素系统 hep2细胞

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miR-155对喉鳞状细胞癌Hep2细胞增殖影响及机制 被引量：2

12

作者 王轶 周玉琳 覃泽平 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1070-1074,共5页

目的探讨miR-155对喉鳞状细胞癌Hep2细胞增殖影响及具体机制。方法采用miR-155 NC和miR-155 inhibitor转染Hep2细胞,realtime-PCR法检测转染效果,细胞计数盒-8(CCK-8)法检测不同转染时间(12、24、36、48、60、72 h)细胞活力,流式细胞术... 目的探讨miR-155对喉鳞状细胞癌Hep2细胞增殖影响及具体机制。方法采用miR-155 NC和miR-155 inhibitor转染Hep2细胞,realtime-PCR法检测转染效果,细胞计数盒-8(CCK-8)法检测不同转染时间(12、24、36、48、60、72 h)细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期;Western blot检测Hep2细胞中细胞周期蛋白A1(cyclin A1)、cyclin D1、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/叉形头转录因子(Foxo3a)信号通路相关蛋白表达量。结果 miR-155 inhibitor组中miR-155表达量(0.34±0.03)明显低于miR-155 NC组(1.25±0.10),且转染24、36、48、60、72 h后,miR-155 inhibitor组Hep2细胞活力明显低于miR-155 NC组;与miR-155 NC组比较,miR-155 inhibitor组Hep2细胞凋亡率明显提高,细胞周期阻滞于G1期,cyclin A1、cyclin D1、PI3K、p-AKT表达下调,Foxo3a表达上调,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论 miR-155表达下调可降低Hep2细胞活力、增加细胞凋亡率,其机制可能与miR-155调控PI3K/AKT/Foxo3a信号通路有关。 展开更多

关键词 MIR-155 喉鳞状细胞癌 hep2细胞 增殖 凋亡

原文传递

siRNA干扰沉默S100A4基因表达对喉癌Hep2细胞周期和侵袭的影响 被引量：1

13

作者 刘佳 符爽 +1 位作者 史晓宇 富伟能 《解剖科学进展》 CAS 2014年第3期207-210,共4页

目的应用RNA干扰技术下调喉癌Hep2细胞中S100A4基因的表达,探讨其对Hep2细胞周期和细胞侵袭力的影响。方法脂质体法转染S100A4siRNA至Hep2细胞。Real-time PCR和Western blot验证S100A4基因mRNA和蛋白水平的表达,流式细胞术和transwell... 目的应用RNA干扰技术下调喉癌Hep2细胞中S100A4基因的表达,探讨其对Hep2细胞周期和细胞侵袭力的影响。方法脂质体法转染S100A4siRNA至Hep2细胞。Real-time PCR和Western blot验证S100A4基因mRNA和蛋白水平的表达,流式细胞术和transwell实验分别检测下调S100A4表达对Hep2细胞周期和侵袭能力的影响。结果 S100A4 mRNA和蛋白表达水平明显降低,细胞增殖指数显著降低,并且处于G1期细胞数明显增多,细胞侵袭能力显著降低。结论 S100A4siRNA转染喉癌Hep2细胞能有效下调S100A4基因的表达,从而影响Hep2的细胞周期和抑制细胞的侵袭能力。 展开更多

关键词 S100A4 喉癌hep2细胞 细胞周期 侵袭

原文传递

Hep2-exo负载树突细胞诱导抗喉癌免疫效应的机制

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作者 张琼宇 李培 +2 位作者 葵旭 胡晓军 孙远东 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2017年第8期1827-1830,共4页

目的探讨人喉癌细胞Hep2细胞来源外泌体(Hep2-exo)负载树突细胞(DC)后体外刺激细胞毒T细胞对Hep2细胞的杀伤作用。方法利用蔗糖密度梯度超速离心法从Hep2细胞培养上清液中分离Hep2-exo。透射电子显微镜鉴定Hep2-exo形态,Western印迹分析... 目的探讨人喉癌细胞Hep2细胞来源外泌体(Hep2-exo)负载树突细胞(DC)后体外刺激细胞毒T细胞对Hep2细胞的杀伤作用。方法利用蔗糖密度梯度超速离心法从Hep2细胞培养上清液中分离Hep2-exo。透射电子显微镜鉴定Hep2-exo形态,Western印迹分析Hep2-exo表面CD9分子表达。分离培养喉癌患者外周血单个核细胞诱导的DC,流式细胞术鉴定细胞表型。用MTT法检测负载Hep2-exo的DC刺激T淋巴细胞增殖情况及细胞毒T细胞对Hep2细胞的杀伤作用。结果透射电镜下见Hep2-exo呈典型的杯状,大小相对均一,平均直径30~100 nm。Hep2-exo表面有CD9CD63分子表达。单个核细胞DC有CD1a分子表达说明诱导成功,边缘有绒毛样突起,呈典型的PC形态。负载Hep2-exo的DC刺激T细胞增殖能力及T细胞对靶细胞的杀伤效应明显强于未负载Hep2-exo的DC(P<0.05)。结论负载Hep2-exo的DC能促进T细胞增殖,可体外诱导细胞毒T细胞应答抑制喉癌细胞生长。 展开更多

关键词 喉癌 外泌体 hep2细胞裂解物 树突细胞 T细胞

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血小板衍生生长因子-BB对喉癌Hep2细胞增殖侵袭的影响及其可能分子机制

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作者 高尚 董频 +1 位作者 李大伟 沈斌 《山东大学耳鼻喉眼学报》 CAS 2011年第1期20-23,共4页

目的研究不同浓度血小板衍生因子-BB(PDGF-BB)对喉癌Hep2细胞增殖侵袭的影响及黏着斑激酶(FAK)、磷酸化黏着斑激酶397(FAKpY397)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)蛋白表达的变化。方法不同浓度(0 ng/mL、1 ng/mL、20 ng... 目的研究不同浓度血小板衍生因子-BB(PDGF-BB)对喉癌Hep2细胞增殖侵袭的影响及黏着斑激酶(FAK)、磷酸化黏着斑激酶397(FAKpY397)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)蛋白表达的变化。方法不同浓度(0 ng/mL、1 ng/mL、20 ng/mL、100 ng/mL)PDGF-BB诱导人喉癌Hep2细胞株,westernblot方法检测FAK、FAKpY397、MMP2、MMP9表达变化,MTT法检测细胞增殖,侵袭实验检测诱导后细胞侵袭能力的变化。结果 MTT示诱导后Hep2细胞增殖,在20 ng/mL浓度时达到最高,为(0.488±0.133),与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。侵袭细胞数在各组均有增加,在20 ng/mL组达高峰为(22.75±1.42),较对照组差异有统计学意义(P<0.05),FAK、FAKpY397、MMP9、MMP2在20 ng/mL浓度时表达上调。结论 PDGF-BB上调Hep2细胞中FAK、FAKpY397、MMP9及MMP2表达,促进Hep2细胞增殖侵袭能力增强。 展开更多

关键词 黏着斑激酶 血小板衍生生长因子 增殖 侵袭 hep2细胞

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微小RNA-155对喉鳞状细胞癌Hep2细胞侵袭能力影响的实验研究

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作者 秦江波 王也煜 +2 位作者 常玮 李军 陈志飞 《中华解剖与临床杂志》 2019年第1期76-81,共6页

目的探讨微小RNA(miRNA)-155对喉鳞状细胞癌(LSCC)Hep2细胞侵袭能力的影响及其机制。方法培养LSCCHep2细胞,分为miRNA-155组、miRNA-155 NC组,分别转染miRNA-155抑制剂(miRNA-155inhibitor)及miRNA-155阴性对照(miRNA-155 NC)O收集两组... 目的探讨微小RNA(miRNA)-155对喉鳞状细胞癌(LSCC)Hep2细胞侵袭能力的影响及其机制。方法培养LSCCHep2细胞,分为miRNA-155组、miRNA-155 NC组,分别转染miRNA-155抑制剂(miRNA-155inhibitor)及miRNA-155阴性对照(miRNA-155 NC)O收集两组转染48h的LSCCHep2细胞,采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测miRNA-155的表达,CCK-8法检测细胞活力,Transwell小室检测细胞侵袭能力.Westernblot检测细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、钙黏蛋白(E-eadherin)、波形蛋白(virnentin)、磷脂酰肌醇-3-轻激酶(PI3K)蛋白、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT的表达变化?结果转染后的LSCCHep2细胞中,miRNA-155组中miRNA-155相对表达量0.44±0.04、光密度(0D)值0.38±0.04、细胞侵袭数目(39.4±4.3)个,均明显低于miRNA-155 NC组的1.52±0.15,0.68±0.07J157.8±12.6)个,差异均有统计学意义(t=34.082,18.229、43.531,P值均<0.01)。miRNA-155组Hep2细胞PI3K/AKT信号通路中MMP-2、MMP-9、vimentin、PI3K、AKT、p-AKT蛋白相对表达量分别为0.38+0.03,0.25±0.02,0.29±0.02、0.28±0.03,0.99±0.05,0.24±0.02,均低于miRNA-155 NC组的1.78±0.15J.56±0.16、1.34±0.12J.04±0.09J.17±0.08,0.83±0.08;而E-cadherin表达量为1.13±0.10,高于miRNA-155 NC组的0.31±0.02:两组比较,差异均有统计学意义0=29.345,46.745,59.436,34.217J5.936,30.129,44.621,P值均<0.01)。结论下调LSCCHep2细胞中miRNA-155的表达,可降低Hep2细胞的活力和侵袭能力,其机制可能与调控P13K/AKT信号通路相关蛋白的表达有关。 展开更多

关键词 喉肿瘤 hep2细胞 微小核糖核酸 侵袭能力

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神经生长因子受体p75表达影响喉癌Hep2细胞系增殖的初步研究

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作者 申宇鹏 李晓明 +2 位作者 徐成志 耿江桥 陶振峰 《中国煤炭工业医学杂志》 2017年第12期1464-1470,共7页

目的初步探索神经生长因子低亲和力受体(p75 neurotrophin receptor,p75^(NTR))在喉癌Hep2细胞系的表达情况并研究其相关生物学功能。方法应用免疫细胞化学及免疫荧光染色法,检测p75^(NTR)在喉癌Hep2细胞系中的表达;应用RNAi法下调p75^(... 目的初步探索神经生长因子低亲和力受体(p75 neurotrophin receptor,p75^(NTR))在喉癌Hep2细胞系的表达情况并研究其相关生物学功能。方法应用免疫细胞化学及免疫荧光染色法,检测p75^(NTR)在喉癌Hep2细胞系中的表达;应用RNAi法下调p75^(NTR)表达,通过Real-Time-PCR及Western blot方法验证基因干扰有效,MTT法观察下调p75^(NTR)蛋白水平对喉癌Hep2细胞存活及增殖的影响。结果喉癌Hep2细胞系内小部分肿瘤细胞显示p75^(NTR)免疫染色强阳性,多数呈强阳性显色的细胞处于旺盛的分裂增殖状态。通过Real-Time-PCR及Western blot方法均证实预先设计的小干扰RNA(siRNA)可以有效下调p75^(NTR)蛋白的表达,转染siRNA抑制p75^(NTR)表达能够抑制喉癌Hep2细胞系的增殖。结论p75^(NTR)高表达于喉癌Hep2细胞系中具有较强增殖活力的细胞。p75^(NTR)表达对支持和促进喉癌细胞增殖具有重要作用,p75^(NTR)受体信号途径激活与喉癌细胞存活及增殖密切相关,其能否成为肿瘤治疗的靶点有待进一步深入研究。 展开更多

关键词 神经生长因子受体 喉鳞状细胞癌 hep2细胞系 免疫细胞化学 RNAI

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神经生长因子受体p75^(NTR)在喉癌Hep2细胞系中的表达

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作者 申宇鹏 李晓明 +1 位作者 靳海峰 路秀英 《医学信息》 2018年第15期47-50,54,共5页

目的初步探索神经生长因子受体在喉癌Hep2细胞系的表达情况并研究相关的细胞生物学特性。方法应用免疫细胞化学及免疫荧光染色法,检测p75^(NTR)在喉癌Hep2细胞系中的表达;应用流式细胞仪检测人喉癌Hep2细胞系中呈p75^(NTR)高表达及CD13... 目的初步探索神经生长因子受体在喉癌Hep2细胞系的表达情况并研究相关的细胞生物学特性。方法应用免疫细胞化学及免疫荧光染色法,检测p75^(NTR)在喉癌Hep2细胞系中的表达;应用流式细胞仪检测人喉癌Hep2细胞系中呈p75^(NTR)高表达及CD133高表达细胞的分布比例情况。结果喉癌Hep2细胞系内小部分肿瘤细胞显示免疫染色强阳性,p75^(NTR)强阳性显色的细胞部分处于旺盛的增殖分裂状态;大部分呈CD133强阳性的Hep2细胞也呈p75^(NTR)强阳性。结论 p75^(NTR)高表达于喉癌Hep2细胞系中具有较强增殖活力的细胞,p75^(NTR)信号通路对支持或促进喉癌细胞增殖具有潜在作用。p75^(NTR)高表达的喉癌Hep2细胞与肿瘤干细胞之间的关系密切,有待进一步深入研究。 展开更多

关键词 神经生长因子受体 喉癌 hep2细胞系 免疫细胞化学

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miR-340-5p对喉癌Hep2细胞增殖的影响及其内在分子机制研究 被引量：4

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作者 卡衣赛尔·卡哈尔 阿布拉江·托合提 +2 位作者 唐亮 哈斯叶提·外里 古丽波斯坦·买买提艾力 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS 北大核心 2020年第2期140-145,共6页

目的:研究miR-340-5p对喉癌Hep2细胞增殖的影响并探究其内在分子机制,为喉癌的诊断和治疗筛选潜在的生物标志物及靶点。方法:利用qRT-PCR对喉癌患者癌组织、癌旁组织、喉癌细胞株Hep2和正常支气管HBE细胞株中miR-340-5p表达进行定量分析... 目的:研究miR-340-5p对喉癌Hep2细胞增殖的影响并探究其内在分子机制,为喉癌的诊断和治疗筛选潜在的生物标志物及靶点。方法:利用qRT-PCR对喉癌患者癌组织、癌旁组织、喉癌细胞株Hep2和正常支气管HBE细胞株中miR-340-5p表达进行定量分析;通过构建双荧光素酶报告载体验证STAT3是否为miR-340-5p潜在靶基因;利用脂质体转染miR-340-5p mimics/inhibitor于Hep2细胞中并通过qRT-PCR进行验证;分别利用CCK-8法、Annexin V/PI法对转染后的细胞进行细胞增殖、凋亡分析;利用Western Blot检测转染后STAT3及Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达量。结果:qRT-PCR结果表明喉癌组织及Hep2细胞中miR-340-5p水平显著低于癌旁组织及HBE细胞,且过表达或抑制miR-340-5p后其表达量分别显著提高或降低;荧光素酶活性表明miR-340-5p直接与靶基因STAT33’-UTR相互作用,负调控其表达;细胞增殖、凋亡分析表明上调miR-340-5p可显著抑制Hep2细胞体外增殖并诱导其凋亡,反之亦然;Western Blot结果表明过表达miR-340-5p后Hep2细胞内STAT3及β-catenin、c-Myc、TCF-4、CyclinD1和ROCK1蛋白水平较对照组显著降低,反之亦然。结论:miR-340-5p在喉癌组织及Hep2细胞中异常低表达,其通过靶向STAT3基因负调控Wnt/β-catenin信号通路抑制喉癌病程,因此可作为喉癌诊断、治疗潜在生物学靶标。 展开更多

关键词 miR-340-5p 喉肿瘤 hep2细胞 细胞增殖 STAT3

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靶向人喉癌HEP2细胞Trop2基因的siRNA构建及鉴定 被引量：1

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作者 陈小玲 费兵 +1 位作者 李贤斌 吴昊 《山东大学耳鼻喉眼学报》 CAS 2015年第3期51-53,58,共4页

目的构建能高效干扰Trop2基因的si RNA,转染人喉癌HEP2细胞,并初步鉴定其干扰效果。方法以人Trop2基因为靶基因,设计合成3条针对不同作用位点的si RNA干扰序列,用脂质体法将各小干扰序列瞬时转染人喉癌HEP2细胞,同时设立阴性对照、空白... 目的构建能高效干扰Trop2基因的si RNA,转染人喉癌HEP2细胞,并初步鉴定其干扰效果。方法以人Trop2基因为靶基因,设计合成3条针对不同作用位点的si RNA干扰序列,用脂质体法将各小干扰序列瞬时转染人喉癌HEP2细胞,同时设立阴性对照、空白对照,分别命名为W组(未转染组)、NC组(阴性对照组)、T1组(S1序列组)、T2组(S2序列组)及T3组(S3序列组),每组各5例。荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达,计算转染效率。转染24 h后,收集稳定后细胞,采用实时荧光定量PCR法检测各干扰序列对Trop2基因表达的抑制效果。结果荧光显微镜下观察,见HEP2细胞表达绿色荧光蛋白,证实si RNA已转入细胞,转染率达90%。RT-PCR法结果显示,与未转染组、阴性对照组相比,转染si RNA的人喉癌HEP2细胞中Trop2表达均受到抑制,与T2、T3组相比,T1组对Trop2 m RNA的抑制作用最明显,差异有统计学意义(0.470±0.063 vs 0.749±0.024,0.824±0.027,P<0.05)。结论成功构建并筛选出了能高效、特异沉默人喉癌HEP2细胞Trop2基因的si RNA序列,为进一步研究Trop2基因在喉癌中的作用机制及其基因治疗奠定了基础。 展开更多

关键词 喉肿瘤 hep2细胞 Trop2 RNA干扰

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