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一株拮抗香蕉枯萎病菌的细菌HN-1的鉴定和拮抗作用的测定 被引量:1
1
作者 沈林波 熊国如 +3 位作者 董丽莎 孔冉 郭婷 张树珍 《热带农业科学》 2012年第3期44-48,68,共6页
在香蕉枯萎病园区中,从土壤中分离获得一株细菌HN-1,并进行对峙培养、孢子萌发抑制测定。结果表明:HN-1对香蕉枯萎病菌的菌丝生长、孢子萌发具有良好的抑制效果。经形态特征、生理生化特征和16SrDNA序列测定和分析,将HN-1鉴定为短短芽... 在香蕉枯萎病园区中,从土壤中分离获得一株细菌HN-1,并进行对峙培养、孢子萌发抑制测定。结果表明:HN-1对香蕉枯萎病菌的菌丝生长、孢子萌发具有良好的抑制效果。经形态特征、生理生化特征和16SrDNA序列测定和分析,将HN-1鉴定为短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis)。与病原真菌对峙培养的结果表明,该菌株对供试的15种植物病原真菌均有很好的抑制作用。 展开更多
关键词 香蕉枯萎病 短短芽孢杆菌hn-1 拮抗作用
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CT抗原KM-HN-1 HLA-A*0201限制性表位预测及其与HLA-A*0201结合强度分析 被引量:2
2
作者 王昊亮 付晓岚 +3 位作者 姜曼 黎万玲 唐艳 吴玉章 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期593-596,共4页
目的通过对CT抗原(cancer-testis antigen)KM-HN-1进行HLA-A*0201限制性表位预测,并对候选表位肽与HLA-A*0201分子结合亲和力及复合物稳定性进行分析,为探索基于KM-HN-1的免疫治疗奠定基础。方法利用基于蛋白酶体剪切位点特异性... 目的通过对CT抗原(cancer-testis antigen)KM-HN-1进行HLA-A*0201限制性表位预测,并对候选表位肽与HLA-A*0201分子结合亲和力及复合物稳定性进行分析,为探索基于KM-HN-1的免疫治疗奠定基础。方法利用基于蛋白酶体剪切位点特异性的算法PAProc及基于肽MHC-I结合的算法BIMAS和SYFPEITHI对KM-HN-1进行HLA-A*0201限制性表位预测.合成KM-HN-1相关候选表位肽KM-HN-I321-329(KLLPFRETV),KM-HN-I303-211,(FLPTAPPNV),KM-HN-I629-637。(TLLQIIETV),KM-HN-I87-95(ILNKSIIEV),KM-HN-I538-596。(QMMEALDQL)及阳性对照肽HBVcAg18-27(FLPSDFFPSV);对这些合成肽与HIA-A*0201分子结合亲和力及其复合物稳定性根据文献报道的方法进行分析。结果KM-HN-I321-329(KLLPERETV)结合亲和力最低,KM-HN—I203-211(FLPTAPPNV)结合亲和力最高,其余3条肽结合亲和力介于2者之间;稳定性实验(DC50)结果显示:KM-HN-I538—546(QMMEALDQL)DC50小于2h,KM—HN-I321-329(KLLPERETV)的DC50介于2~4h之间,KM-HN-I87-95。(ILNKSIIEV)的DC50介于6~8h之间,KM-HN-I233-211(HLPTAPPNV)及KM-HN-I629—633(TLLQIIETV)的DC50均大于8h。结论基于蛋白酶体剪切位点特异性的算法及基于肽MHC-I结合的算法对KM-HN-1进行HLA-A*0201限制性表位预测,结合候选表位肽与HLA-A*0201分子结合的亲和力与复合物稳定性实验分析,为该抗原HLA-A*0201限制性表位的鉴定奠定了基础。 展开更多
关键词 CT抗原 KM-hn-1 表位预测 HLA-A*0201限制性 结合亲和力及稳定性
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HN-1修饰的阿霉素纳米颗粒对口腔鳞癌移植瘤靶向性的初步研究 被引量:4
3
作者 李志远 张连云 《天津医药》 CAS 2017年第10期1017-1021,共5页
目的初步研究HN-1修饰的阿霉素(DOX)纳米颗粒HPD的物理性质及其对口腔鳞癌(OSCC)移植瘤的靶向性。方法首先验证HN-1在细胞水平对OSCC的靶向性,然后应用改良的纳米沉淀法制备PD纳米颗粒,并在其表面修饰HN-1以制备具有特异靶向性的HPD纳... 目的初步研究HN-1修饰的阿霉素(DOX)纳米颗粒HPD的物理性质及其对口腔鳞癌(OSCC)移植瘤的靶向性。方法首先验证HN-1在细胞水平对OSCC的靶向性,然后应用改良的纳米沉淀法制备PD纳米颗粒,并在其表面修饰HN-1以制备具有特异靶向性的HPD纳米颗粒。将HPD纳米颗粒溶液分别用H2O、PBS和含10%血清的PBS稀释保存,并于第1、3、5、7天分别测量其粒径大小和分布。测定大鼠体内HPD纳米颗粒介导的DOX的血清浓度变化,研究其在大鼠体内的稳定性。构建裸鼠OSCC移植瘤模型,然后随机数字表法将其平均分为4组,每组2只,分别是生理盐水组(空白对照组),游离DOX组,PD和HPD纳米颗粒组,经尾静脉给予等体积的生理盐水、游离DOX、PD和HPD纳米颗粒溶液,其中给药各组DOX剂量均为8.0 mg/kg,给药后8 h和24 h处死各组小鼠,并取出其肿瘤组织和主要器官(心、肝、脾、肺和肾),通过小鼠各部位荧光强度分布,分析HPD纳米颗粒的靶向性及其组织分布。结果游离HN-1对OSCC细胞具有较强的靶向性;HN-1修饰的HPD纳米颗粒形貌规则,粒径均一,约150 nm大小;HPD纳米颗粒在体内外具有较好的稳定性,比PD纳米颗粒显示出更强的肿瘤靶向性和渗透性。结论由HN-1修饰的HPD纳米颗粒对OSCC移植瘤具有较好的靶向性,对于靶向治疗OSCC有应用前景。 展开更多
关键词 口腔肿瘤 鳞状细胞 纳米粒子 hn-1 阿霉素 口腔鳞癌
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短小芽孢杆菌HN-10抗菌肽P-1对粉红单端孢细胞膜结构和活性氧代谢的影响 被引量:2
4
作者 武淑娟 贠建民 +5 位作者 王睿 何奎 毛永强 赵风云 张紊玮 艾对元 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第23期83-90,共8页
粉红单端孢(Trichothecium roseum)是多种植物及采后果蔬重要的病原菌,该文探讨了短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)HN-10抗菌肽P-1对粉红单端孢细胞膜结构以及活性氧(reactive oxygen species,ROS)代谢的影响。通过平板培养(牛津杯法)和... 粉红单端孢(Trichothecium roseum)是多种植物及采后果蔬重要的病原菌,该文探讨了短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)HN-10抗菌肽P-1对粉红单端孢细胞膜结构以及活性氧(reactive oxygen species,ROS)代谢的影响。通过平板培养(牛津杯法)和液体培养体系考察了B.pumilus HN-10抗菌肽P-1对粉红单端孢菌体生长的抑制作用;采用碘化丙啶染色和透射电镜技术,动态观察了抗菌肽P-1对液态培养12 h的内粉红单端孢细胞壁、膜结构的影响;通过液态培养试验体系,分析了抗菌肽P-1对膜通透性的影响,并基于膜脂过氧化反应研究了抗菌肽P-1对粉红单端孢ROS及其代谢产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)的影响。结果表明,固态、液态培养的粉红单端孢菌体生长受到明显抑制,随着抗菌肽P-1处理时间的延长,粉红单端孢孢子数逐渐增多,抗菌肽P-1对粉红单端孢孢子壁、膜造成了局部损伤,并出现缺口,导致细胞质大量流出,孢子变形。抗菌肽P-1处理使得菌体麦角甾醇的含量减少,第7天时,比对照组低35%。同时,抗菌肽P-1处理显著增大了N-苯基-1-萘胺的摄取率、相对电导率,第7天时,分别比对照组高24%、35%。此外,抗菌肽P-1处理使胞内·O_(2)^(1)含量显著增高(P<0.05),引起了细胞抗氧化超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、过氧化物酶系统平衡的破坏,加剧了脂质过氧化和蛋白羰基化程度,MDA含量增加,最终抑制了菌体的生长。 展开更多
关键词 短小芽孢杆菌hn-10抗菌肽P-1 粉红单端孢 细胞膜 活性氧
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窄冠白杨优良无性系“HN-1”快繁技术体系建立
5
作者 王宇攀 张静 +1 位作者 韩佩尧 王进茂 《河北林果研究》 2017年第2期111-117,共7页
以窄冠白杨优良无性系"HN-1"的幼嫩茎段为外植体,探索了丛生芽增殖、生根及移栽适宜条件,建立起组织快繁技术体系,研究结果表明:MS培养基可作为HN-1丛生芽增殖的基本培养基,细胞分裂素6-BA浓度为0.3mg/L时对丛生芽增殖的作用... 以窄冠白杨优良无性系"HN-1"的幼嫩茎段为外植体,探索了丛生芽增殖、生根及移栽适宜条件,建立起组织快繁技术体系,研究结果表明:MS培养基可作为HN-1丛生芽增殖的基本培养基,细胞分裂素6-BA浓度为0.3mg/L时对丛生芽增殖的作用显著;适宜的增殖培养基为MS+6-BA 0.3mg/L+NAA 0.1mg/L+IBA 0.1mg/L+IAA 0.15mg/L;适宜的生根培养基为1/2MS+NAA 0.1mg/L+IBA 1.0mg/L;培养条件采用正常光照生根效果最好,生根率达71.1%;适宜的移栽基质为草炭、黄土、细沙容积比1∶1∶1,移栽苗成活率达93.8%。 展开更多
关键词 窄冠白杨“hn-1 组培快繁 增殖 生根 移栽
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Identification of A Strain HN-1 against Banana Wilt Disease and Determination of Its Antagonism
6
作者 Shen Linbo Xiong Guoru +3 位作者 Dong Lisha Kong Ran Guo Ting Zhang Shuzhen 《Plant Diseases and Pests》 CAS 2013年第4期12-16,共5页
[Objective] The paper was to identify strain HN-1 against banana wilt disease and to determine its antagonism. [Method] The strain HN-1 was ob- tained from the soil in fields heavily infected by Fusarium oxysporum f. ... [Objective] The paper was to identify strain HN-1 against banana wilt disease and to determine its antagonism. [Method] The strain HN-1 was ob- tained from the soil in fields heavily infected by Fusarium oxysporum f. sp. cubense (FOC). Antagonism of the strain against F. oxysporum was tested via dual-cul- ture and inhibition test on spore germination. [Result] HN-1 effectively inhibited mycelial growth and spore germination of F. oxysporum, Strain HN-1 was identi- fied as BrevibaciUus brevis according to its characteristics in morphology, physiology and biochemistry and its 16S rDNA sequence. The strain showed high inhibition effect on 15 species of fungal pathogens in the dual-culture trials with fungal pathogens. [ Conclusion] The study provides theoretical basis for application of strain HN-1 in agricultural fields. 展开更多
关键词 Banana wilt disease BrevibaciUus brevis hn-1 ANTAGONISM
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Tumor specifically internalizing peptide ‘HN-1’: Targeting the putative receptor retinoblastoma-regulated discoidin domain receptor 1 involved in metastasis
7
作者 Frank-Un Hong Miguel Castro Klaus Linse 《World Journal of Clinical Oncology》 CAS 2022年第5期323-338,共16页
BACKGROUND Less than 0.5%of intravenously injected drugs reach tumors,contributing to side effects.To limit damage to healthy cells,various delivery vectors have been formulated;yet,previously developed vectors suffer... BACKGROUND Less than 0.5%of intravenously injected drugs reach tumors,contributing to side effects.To limit damage to healthy cells,various delivery vectors have been formulated;yet,previously developed vectors suffer from poor penetration into solid tumors.This issue was resolved by the discovery of HN-1 peptide isolated via biopanning a phage-display library.HN-1 targets human head and neck squamous cell carcinoma(HNSCC)(breast,thyroid;potentially lung,cervix,uterine,colon cancer),translocates across the cell membrane,and efficiently infiltrates solid tumors.HN-1 peptide has been conjugated to various anticancer drugs and imaging agents though the identity of its receptor remained enigmatic.AIM To decipher the clues that pointed to retinoblastoma(Rb)-regulated discoidindomain receptor 1 as the putative receptor for HN-1 is described.METHODS HN-1 peptide was synthesized and purified using reverse-phase highperformance liquid chromatography and gel electrophoresis.The predicted mass was confirmed by mass spectroscopy.To image the 3-dimensional structure of HN-1 peptide,PyMOL was used.Molecular modeling was also performed with PEP-FOLD3 software via RPBS bioinformatics web portal(INSERM,France).The immunohistochemistry results of discoidin domain receptor 1(DDR1)protein were obtained from the publicly accessible database in the Human Protein Atlas portal,which contained the images of immunohistochemically labeled human cancers and the corresponding normal tissues.RESULTS The clues that led to DDR1 involved in metastasis as the putative receptor mediating HN-1 endocytosis are the following:(1)HN-1 is internalized in phosphate-buffered saline and its uptake is competitively inhibited;(2)HN-1(TSPLNIHNGQKL)exhibits similarity with a stretch of amino acids in alpha5 beta3 integrin(KLLITIHDRKEF).Aside from two identical residues(Ile-His)in the middle,the overall distribution of polar and nonpolar residues throughout the sequences is nearly identical.As HN-1 sequence lacks the Arg-Gly-Asp motif recognized by integrins,HN-1 may interact with an"integrin-like"molecule.The tertiary structure of both peptides showed similarity at the 3-dimensional level;(3)HN-1 is internalized by attached cells but not by suspended cells.As culture plates are typically coated with collagen,collagen-binding receptor(expressed by adherent but not suspended cells)may represent the receptor for HN-1;(4)DDR1 is highly expressed in head and neck cancer(or breast cancer)targeted by HN-1;(5)Upon activation by collagen,DDR1 becomes internalized and compartmentalized in endosomes consistent with the determination of’energy-dependent clathrin-mediated endocytosis’as the HN-1 entry route and the identification of HN-1 entrapped vesicles as endosomes;and(6)DDR1 is essential for the development of mammary glands consistent with the common embryonic lineage rationale used to identify breast cancer as an additional target of HN-1.In summary,collagenactivated tyrosine kinase receptor DDR1 overexpressed in HNSCC assumes a critical role in metastasis.Further studies are warranted to assess HN-1 peptide’s interaction with DDR1 and the therapeutic potential of treating metastatic cancer.Additionally,advances in delivery(conformation,endocytic mechanism,repertoire of targeted cancers of HN-1 peptide),tracking(HN-1 conjugated imaging agents),and activity(HN-1 conjugated therapeutic agents)are described.CONCLUSION The discovery of DDR1 as HN-1 peptide’s putative receptor represents a significant advance as it enables identification of metastatic cancers or clinical application of previously developed therapeutics to block metastasis. 展开更多
关键词 hn-1 peptide Solid tumor Targeted drug delivery Discoidin domain receptor 1 Tyrosine kinase METASTASIS
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HN-1型缓冲器应用研究
8
作者 毛从强 宿方宗 《铁道车辆》 2019年第7期11-12,I0001,共3页
介绍了HN-1型缓冲器的结构,并对不同吸能模式缓冲器的性能特点、可靠性和缓冲效果进行了比较。
关键词 hn-1型缓冲器 结构 性能 可靠性
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贝莱斯芽孢杆菌HN-1突变体文库的构建及Arp基因的鉴定
9
作者 王雨 沈钰莹 +3 位作者 方渝凯 缪卫国 刘文波 靳鹏飞 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2023年第8期2626-2634,共9页
贝莱斯芽孢杆菌HN-1是一株对香蕉枯萎病4号生理小种尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense race 4)具有良好抑制活性的生防芽孢杆菌。本研究旨在构建生防菌HN-1的突变体库,在突变体库的基础上深入研究生防芽孢杆菌的抑菌机理,针... 贝莱斯芽孢杆菌HN-1是一株对香蕉枯萎病4号生理小种尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense race 4)具有良好抑制活性的生防芽孢杆菌。本研究旨在构建生防菌HN-1的突变体库,在突变体库的基础上深入研究生防芽孢杆菌的抑菌机理,针对香蕉枯萎病的生物防治夯实理论基础。将携带转座子TnYLB-1的温敏型质粒载体pMarA质粒利用化学法转化进入贝莱斯芽孢杆菌HN-1中,通过50℃高温诱导后构建了由1 800个HN-1突变体组成的贝莱斯芽孢杆菌HN-1突变体文库,质粒消除率达99.7%。通过平板抑菌法筛选得到一株对尖孢镰刀菌Foc4的抑制活性降低的突变体,利用反向PCR技术确定插入破坏的基因与贝莱斯芽孢杆菌模式菌株FZB42 arsenic resistance protein (RBAM-550730)基因同源性为99%,在系统进化树中与贝莱斯芽孢杆菌模式菌株FZB42中的该基因属于同一分支。通过筛选鉴定HN-1突变体文库中抑菌活性丧失突变体发现HN-1中Arp基因与生防芽孢杆菌HN-1抑制尖孢镰刀菌的活性有密切的关系。 展开更多
关键词 贝莱斯草芽孢杆菌hn-1 尖孢镰刀菌 pMarA质粒 突变体库 Arp基因
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HN-1造纸湿强剂的特性及其应用技术
10
作者 韩梅君 《上海造纸》 1997年第1期12-16,共5页
HN-1造纸湿强剂系聚胺酰胺环氧氯丙烷树脂(简称PPE树脂)的改良型产品,为水溶性阳离子型热固性树脂,是造纸用优良湿强剂。HN-1自投产以来,已在多家纸厂和纸种中应用,证明其湿强效果明显,性能稳定,并能改善纸张的其他物理性能,受到用户好... HN-1造纸湿强剂系聚胺酰胺环氧氯丙烷树脂(简称PPE树脂)的改良型产品,为水溶性阳离子型热固性树脂,是造纸用优良湿强剂。HN-1自投产以来,已在多家纸厂和纸种中应用,证明其湿强效果明显,性能稳定,并能改善纸张的其他物理性能,受到用户好评。 一、HN-1特点 1.增湿强效果明显 HN-1分子链上带有含强阳电荷的基因,能与带负电荷的纤维或填料强烈吸附。 展开更多
关键词 造纸助剂 湿强剂 hn-1 特性 应用
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HN-1造纸湿强剂应用技术概述
11
作者 韩梅君 《上海造纸》 2000年第3期38-41,共4页
由本公司开发和生产的HN-1造纸湿强剂系聚胺酰胺环氧氯丙烷树脂(简称PPE、树脂)的改良型产品,为水溶性阳离子型的热固性树脂,是造纸用优良湿强剂。本产品自投产以来,已在多家纸厂和纸种中应用,证明其湿强效果明显,性能稳定,并能... 由本公司开发和生产的HN-1造纸湿强剂系聚胺酰胺环氧氯丙烷树脂(简称PPE、树脂)的改良型产品,为水溶性阳离子型的热固性树脂,是造纸用优良湿强剂。本产品自投产以来,已在多家纸厂和纸种中应用,证明其湿强效果明显,性能稳定,并能改善纸张的其他物理性能,受到用户好评。 展开更多
关键词 hn-1造纸湿强剂 聚胺酰胺环氧氯丙烷树脂 热固性树脂 伸缩率 AKD
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鹅Ⅰ型禽副粘病毒GPMV/QY97-1株HN基因的克隆和序列分析 被引量:6
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作者 陈金顶 廖明 辛朝安 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期355-359,共5页
在华南地区进行鹅病病因的调查过程中,从患病鹅群中分离到一株对鹅和鸡都有致病力的病毒,初步判定该病毒属于Ⅰ型禽副粘病毒,命名为GPMV/QY97-1株。以GPMV/QY97-1毒株的基因组RNA为模板,通过RT-PCR方法,扩增出血凝素-神经氨酸酶(HN)基因... 在华南地区进行鹅病病因的调查过程中,从患病鹅群中分离到一株对鹅和鸡都有致病力的病毒,初步判定该病毒属于Ⅰ型禽副粘病毒,命名为GPMV/QY97-1株。以GPMV/QY97-1毒株的基因组RNA为模板,通过RT-PCR方法,扩增出血凝素-神经氨酸酶(HN)基因3′端和5′端的cDNA片段,分别将其克隆至pGEM-TEasy载体中,对其进行序列测定。序列分析表明,HN基因的cDNA全长为2024nt,编码571个氨基酸。序列中含有13个半胱氨酸残基和6个潜在的糖基化位点,其HN基因及编码蛋白结构与新城疫病毒株相符。将GPMV/QY97-1株HN基因序列和推导的氨基酸序列与新城疫病毒株的HN基因相应序列做比较后发现,它们的核苷酸序列同源性分别在89 6%~83 6%,氨基酸序列同源性在93 3%~87 9%。在同源性比较的基础上,进一步绘制了Ⅰ型禽副粘病毒株HN基因的系统发育树。这对于Ⅰ型禽副粘病毒毒力基因的功能分析和该病的分子流行病学调查有着重要意义。 展开更多
关键词 I型禽副粘病毒 HN基因 序列测定 系统发育树
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麻鸡新城疫病毒SX-1株F和HN基因在真核细胞中共表达研究 被引量:7
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作者 李红丽 詹丽娥 +3 位作者 张伟业 唐娟 陆冰洋 王彩先 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2011年第3期47-50,共4页
以山西省农业科学院畜牧兽医研究所预防兽医研究室克隆的pG-F和pG-HN质粒为模板,PCR扩增麻鸡新城疫病毒SX-1株F基因和HN基因,并以由15个柔性氨基酸构成的柔性短肽作为Linker将F及HN基因片段体外连接,插入pCI-neo真核表达载体,构建麻鸡... 以山西省农业科学院畜牧兽医研究所预防兽医研究室克隆的pG-F和pG-HN质粒为模板,PCR扩增麻鸡新城疫病毒SX-1株F基因和HN基因,并以由15个柔性氨基酸构成的柔性短肽作为Linker将F及HN基因片段体外连接,插入pCI-neo真核表达载体,构建麻鸡新城疫病毒SX-1株F基因和HN基因共表达载体pCI-F-HN,并在Vero细胞中转染表达,进行间接免疫荧光检测。结果显示,麻鸡新城疫病毒SX-1株F-HN组合基因在Vero细胞中得到较高水平的表达,在荧光显微镜下能够观察到较强的荧光,说明F-HN组合蛋白具有良好的反应原性。为下一步研究高效亚单位基因工程苗奠定基础。 展开更多
关键词 麻鸡新城疫病毒 SX-1 F-HN基因 共表达
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恶性疟原虫FCC-1/HN株pcDNA3-EBA175/HRPⅡ重组质粒直接注射小鼠骨骼肌的体内表达
14
作者 吕芳丽 余新炳 +3 位作者 陈海峰 方建民 罗树红 方政 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2000年第3期161-164,共4页
为观察恶性疟原虫 FCC- 1/ HN株 pc DNA3- EBA175 / HRP 重组质粒经肌肉途径接种后在宿主体内的表达。BAL B/ c小鼠分为 3组 ,1组 (实验组 )经后腿股四头肌注射重组质粒 pc DNA3- EBA175 / HRP 10 0 μg;2组 (实验对照组 )注射空白质粒 ... 为观察恶性疟原虫 FCC- 1/ HN株 pc DNA3- EBA175 / HRP 重组质粒经肌肉途径接种后在宿主体内的表达。BAL B/ c小鼠分为 3组 ,1组 (实验组 )经后腿股四头肌注射重组质粒 pc DNA3- EBA175 / HRP 10 0 μg;2组 (实验对照组 )注射空白质粒 pc DNA3 10 0 μg;3组 (正常对照组 )注射 PBS(p H7.4) 10 0 μl。每隔 2 0 d加强注射 ,于第 1次接种后 2 0 d和第 2次接种后 10 d取小鼠双侧股四头肌免疫组化染色 ,于第 3次接种后 40 d取小鼠各组织作聚合酶链反应 (PCR)检测目的基因。结果显示 ,(1) 1组经重组质粒免疫小鼠血清、恶性疟原虫抗原免疫小鼠血清、恶性疟原虫人工合成九肽 HRP 单克隆抗体及抗恶性疟原虫全虫抗原单克隆抗体作用 ,免疫组化染色后 ,在注射部位肌肉组织的肌膜、肌间隙处见到褐色分泌颗粒 ;1组未注射侧肌肉组织、2组及 3组均未见褐色颗粒。 (2 )采用PCR从 1组肌肉、心脏、肝脏、肺脏和肾脏组织扩增出目的基因 EBA175和 HRP ,2组及 3组相应组织均未扩增出目的基因片段。本研究为疟疾多基因 展开更多
关键词 恶性疟原虫FCC-1/HN株 pcDNA3-EBA175/HRPⅡ
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HN─1在铜版原纸中的应用试验
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作者 邢德乐 王传运 《造纸化学品》 CAS 1997年第1期30-31,共2页
关键词 铜版原纸 hn-1 造纸助剂 应用
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番鸭源禽1型副黏病毒HN基因主要抗原结构域和V基因融合表达载体的构建
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作者 傅光华 程龙飞 +3 位作者 施少华 陈红梅 彭春香 黄瑜 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期84-87,101,共5页
为构建番鸭源禽1型副黏病毒HN主要抗原结构域(HNd)和V基因融合表达载体,经PCR及融合PCR分别从重组质粒pMDHN和pMDP中扩增HN基因主要结构域和V基因cDNA。将HNd经KpnⅠ和BamHⅠ双酶切、V基因用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后,分别定向插入真核载体... 为构建番鸭源禽1型副黏病毒HN主要抗原结构域(HNd)和V基因融合表达载体,经PCR及融合PCR分别从重组质粒pMDHN和pMDP中扩增HN基因主要结构域和V基因cDNA。将HNd经KpnⅠ和BamHⅠ双酶切、V基因用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后,分别定向插入真核载体pcDNA3的多克隆位点相应的酶切位点中,对2个单表达质粒pcDNAHNd和pcDNAV进行酶切和测序鉴定。利用融合PCR技术扩增出HNd-V基因,定向克隆至pcDNA3的EcoRⅠ和XhoⅠ酶切酶切位点之间,转化感受态细胞后,经PCR反应初筛后,对阳性克隆进行酶切分析及测序鉴定。对单表达重组质粒进行酶切分析及测序鉴定,结果表明:HNd和V基因已被正确定向克隆至真核表达载体pcDNA3,成功构建了2个基因的单表达质粒pcDNAHNd和pcDNAV;对融合重组质粒酶切分析和测序鉴定表明,HNd-V融合基因正确克隆进真核表达质粒pcDNA3中,成功构建了融合表达载体pcDNAHNd-V。 展开更多
关键词 番鸭源 1型副黏病毒 HN基因主要结构域 V基因 融合表达载体
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木犀草素通过抑制URAT1与调节Nrf2/HO-1通路改善尿酸诱导的肾脏损伤 被引量:1
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作者 严采馨 田锦鸿 +2 位作者 李璐 庞建新 吴婷 《生命科学研究》 CAS CSCD 2022年第2期103-110,共8页
为了探讨木犀草素改善尿酸性肾病(hyperuricemic nephropathy,HN)的可能机制,通过14C尿酸摄取实验测定木犀草素对尿酸转运体1(uric acid transporter 1,URAT1)尿酸转运活性的影响;采用MTT法评价木犀草素对高尿酸诱导的小鼠肾小管上皮细... 为了探讨木犀草素改善尿酸性肾病(hyperuricemic nephropathy,HN)的可能机制,通过14C尿酸摄取实验测定木犀草素对尿酸转运体1(uric acid transporter 1,URAT1)尿酸转运活性的影响;采用MTT法评价木犀草素对高尿酸诱导的小鼠肾小管上皮细胞损伤的保护作用;采用氧嗪酸钾联合腺嘌呤制备小鼠HN模型,测定血清尿酸、肌酐(creatinine,CR)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)与谷胱甘肽(glutathione,GSH)的水平;借助H&E染色与Masson染色分别观察小鼠肾组织的病理学变化与纤维化情况;通过qRT-PCR检测肾脏URAT1、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、E-cadherin、核因子E2-相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)和血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)的mRNA表达水平;通过蛋白质免疫印迹法检测肾脏URAT1、Nrf2和HO-1的蛋白质表达水平。^(14)C尿酸摄取实验结果显示,木犀草素能剂量依赖性地抑制URAT1转运14C尿酸,其IC50值为23.42μmol/L;MTT实验结果显示,木犀草素能明显改善高尿酸诱导的细胞损伤;体内实验中,与模型组相比,木犀草素能降低模型小鼠血清尿酸、CR、BUN水平,下调肾脏URAT1的mRNA与蛋白质表达水平,并通过影响TGF-β、α-SMA、E-cadherin改善肾脏纤维化,通过上调Nrf2/HO-1通路降低肾脏氧化应激水平。总之,木犀草素可通过抑制URAT1降低血清尿酸,并通过Nrf2/HO-1通路依赖的抗氧化应激反应显著改善肾损伤和纤维化。 展开更多
关键词 木犀草素 尿酸性肾病(HN) 尿酸转运体1(URAT1) 肾脏保护 氧化应激
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纳米HNS、TATB及LLM-105的RAW264.7巨噬细胞毒性及其机制 被引量:1
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作者 唐灿 黄兵 +2 位作者 刘柳 范美坤 周阳 《含能材料》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第8期792-797,共6页
纳米炸药具有独特的性能优势而受到了广泛关注,但是对该类材料毒性认识的缺乏会限制其工业化应用。探讨了三种典型纳米级炸药,即六硝基茋(HNS)、三氨基三硝基苯(TATB)和2,6-二氨基-3,5-二硝基吡嗪-1-氧化物(LLM-105)的细胞毒性及其可能... 纳米炸药具有独特的性能优势而受到了广泛关注,但是对该类材料毒性认识的缺乏会限制其工业化应用。探讨了三种典型纳米级炸药,即六硝基茋(HNS)、三氨基三硝基苯(TATB)和2,6-二氨基-3,5-二硝基吡嗪-1-氧化物(LLM-105)的细胞毒性及其可能机制。以小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞为受试物进行染毒实验,采用CCK-8比色法检测细胞活性,同时对乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)的含量进行分析以判断细胞死亡机制。结果表明,三种纳米级炸药都可以导致RAW264.7细胞活性显著下降,并呈现剂量相关性;其对RAW264.7细胞的半抑制浓度(IC50)分别为49.3,211.3,6.6μg·mL^-1。随染毒剂量升高,细胞出现皱缩、触角增多或伸长、圆化等不规则形态变化;上清液中LDH的活性也呈上升趋势。另外还发现TATB与LLM-105染毒组细胞内SOD活力降低,LLM-105染毒组细胞内MDA含量升高。结果表明,纳米级HNS、TATB、LLM-105对RAW264.7细胞具有显著毒性作用;而破坏细胞膜完整性、引发氧化应激,是细胞死亡的重要原因。 展开更多
关键词 六硝基茋(HNS) 三氨基三硝基苯(TATB) 2 6-二氨基-3 5-二硝基吡嗪-1-氧化物(LLM-105) RAW264.7细胞 细胞毒性
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NA-1株鹅源副粘病毒M、F和HN蛋白基因的真核表达
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作者 马爱霞 袁洁 +3 位作者 丁壮 宣华 宋子运 徐明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期90-92,98,共4页
目的获得鹅源副粘病毒(GPMV)NA-1株M、F和HN基因真核表达蛋白。方法将NA-1株GPMV经SPF鸡胚增殖、纯化,提取病毒基因组RNA。参考GenBank登录的NA-1株GPMV基因组序列,设计3对特异性引物,利用RT-PCR法,分别扩增M、F和HN基因开放阅读框(ORF)... 目的获得鹅源副粘病毒(GPMV)NA-1株M、F和HN基因真核表达蛋白。方法将NA-1株GPMV经SPF鸡胚增殖、纯化,提取病毒基因组RNA。参考GenBank登录的NA-1株GPMV基因组序列,设计3对特异性引物,利用RT-PCR法,分别扩增M、F和HN基因开放阅读框(ORF),将目的基因克隆至pMD18-T-Simple载体,并进行酶切和序列测定。将目的片段克隆至pCI-neo表达载体,酶切鉴定正确的重组质粒,分别命名为pCI-M、pCI-F和pCI-HN。将重组表达质粒分别转染Vero细胞,用间接免疫荧光试验鉴定目的蛋白的表达。结果RT-PCR法分别扩增出M、F和HN基因,大小与预期一致。克隆载体及表达载体酶切及测序鉴定正确;重组真核表达质粒转染Vero细胞后,荧光显微镜下可见特异性荧光。结论利用pCI-neo真核表达载体在Vero细胞中成功表达了NA-1株GPMV M、F和HN基因,为下一步研究该病毒的出芽机制以及各结构蛋白的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 鹅源副粘病毒 NA-1 M基因 F基因 HN基因 真核表达
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猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒河南分离株ORF3-7基因克隆与序列分析 被引量:11
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作者 尹彦涛 夏平安 +5 位作者 崔保安 王建举 党占国 柴春霞 陈红英 李新生 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期496-500,共5页
参照GenBank中公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株ATCC VR2332的ORF3~7基因序列,利用Pri mer软件分别设计合成了针对PRRSV ORF3、ORF4、ORF5、ORF6和ORF7基因的特异性引物,利用RT-PCR从河南分离株Hn-1/06株分别扩增得到了大... 参照GenBank中公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株ATCC VR2332的ORF3~7基因序列,利用Pri mer软件分别设计合成了针对PRRSV ORF3、ORF4、ORF5、ORF6和ORF7基因的特异性引物,利用RT-PCR从河南分离株Hn-1/06株分别扩增得到了大小约964、675、718、566和501 bp的片段,并将扩增的片段插入PGEM-T-easy载体进行测序。利用DNAStar软件进行序列分析表明,河南分离株Hn-1/06株属于美洲型,同时将Hn-1/06株ORF3~7基因的核苷酸序列和推导氨基酸序列与ATCC VR2332、LV、Resp、CH-1a、BJ-4、S1、CC-1、HB-1、JX0612、HUB1等分离株进行了同源性分析。 展开更多
关键词 PRRSV 河南分离株hn-1/06株 ORF3-7基因 克隆与序列分析
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