期刊文献+
共找到71篇文章
< 1 2 4 >
每页显示 20 50 100
HSV1-TK自杀基因系统对小鼠肝癌细胞移植瘤的抑制效应
1
作者 吴映雅 杜标炎 +2 位作者 谭宇蕙 赵鹏 王慧峰 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第16期1959-1963,共5页
目的:构建表达单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV1-tk)的重组逆转录病毒,建立HSV1-tk/GCV肿瘤自杀基因治疗系统并检测其对小鼠肝癌细胞H22移植瘤的抑制效应.方法:构建携带HSV1-tk基因的逆转录病毒载体pLXSN-tk,用PolyFectTransfection试剂... 目的:构建表达单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV1-tk)的重组逆转录病毒,建立HSV1-tk/GCV肿瘤自杀基因治疗系统并检测其对小鼠肝癌细胞H22移植瘤的抑制效应.方法:构建携带HSV1-tk基因的逆转录病毒载体pLXSN-tk,用PolyFectTransfection试剂介导重组逆转录病毒转染入包装细胞系PT67,通过G418筛选建立稳定产病毒的细胞株,将该重组逆转录病毒感染小鼠肝癌细胞H22,以G418筛选的抗性克隆(命名为H22/tk);将H22/tk细胞与未经基因修饰的H22细胞按1:4混合接种小鼠皮下,联合应用GCV,观察其抑瘤作用(n=19).结果:经酶切鉴定和DNA序列测定,证明HSV1-tk基因成功定向插入到pLXSN逆转录病毒载体中;重组病毒DNA转染包装细胞PT67,获取病毒滴度为4×107cfu/L的重组逆转录病毒培养液;感染小鼠肝癌细胞H22后再筛选出G418抗性克隆株H22/tk.H22/tk细胞与H22细胞混合所致荷瘤鼠在GCV治疗前,各组间肿瘤体积无显著性差异;GCV治疗后,与对照组相比,GCV治疗组肿瘤的生长明显受到抑制,到第8,10,12,14d,致瘤模型对照组的肿瘤体积分别为356±205,635±382,963±580,1509±1105mm3,而GCV治疗组分别为231±155(VS对照组,t=-2.25,P=0.03),413±252(vs对照组,t=-2.14,P=0.04),592±420(vs对照组,t=-2.38,P=0.02),939±847mm3(vs对照组,t=-1.92,P=0.06),GCV治疗组的肿瘤生长抑制率分别为35.0%,35.0%,38.5%,37.8%.结论:成功获取表达HSV1-tk基因的逆转录病毒,已建立显示出体内抑瘤活性的自杀基因治疗系统,为进一步研究中医药对自杀基因抗肿瘤的增效作用奠定基础. 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 自杀基因系统 肝癌 小鼠肝癌细胞H22 抑制效应 hsv1-TK hsv1-TK/GCV 重组逆转录病毒感染 细胞移植瘤 hsv1-tk基因
下载PDF
HSV1-tk基因逆转录病毒载体构建、病毒包装及稳定细胞株建立 被引量:5
2
作者 房娜 徐文贵 +3 位作者 于津浦 魏枫 马庆杰 高凤彤 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期528-531,共4页
目的构建携带HSV1-tk基因的逆转录病毒载体pDON-AI-HSV1-tk,包装后产生携带相应基因的逆转录病毒并稳定感染T47D乳腺癌细胞。方法用PCR方法扩增HSV1-tk基因,利用基因重组技术构建逆转录病毒载体pDON-AI-HSV1-tk,经PCR及BamHI、SalI双酶... 目的构建携带HSV1-tk基因的逆转录病毒载体pDON-AI-HSV1-tk,包装后产生携带相应基因的逆转录病毒并稳定感染T47D乳腺癌细胞。方法用PCR方法扩增HSV1-tk基因,利用基因重组技术构建逆转录病毒载体pDON-AI-HSV1-tk,经PCR及BamHI、SalI双酶切鉴定后与gag-pol和env表达载体用脂质体法共同转染293T包装细胞,产生含有HSV1-tk基因的逆转录病毒并用其感染T47D细胞,经G418筛选获得稳定表达株,命名为tk/T47D。结果构建了携带HSV1-tk基因的逆转录病毒载体pDON-AI-HSV1-tk,并通过PCR及BamHI、SalI双酶切证实。包装产生的逆转录病毒提取病毒基因组后PCR扩增出目的基因HSV1-tk,并成功地建立稳定表达HSV1-tk基因的T47D细胞。结论成功的构建了含有HSV1-tk基因的逆转录病毒载体并包装出携带相应基因的逆转录病毒,建立稳定表达HSV1-tk基因的乳腺癌T47D细胞株。 展开更多
关键词 hsv1-tk基因 逆转录病毒 乳腺癌 基因重组
下载PDF
HSV1-tk基因的部分DNA序列分析 被引量:2
3
作者 刘彦文 钟女奇 +2 位作者 都同功 黄冰 陈系古 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期87-90,共4页
采用PCR技术从商品质粒pHSV10 6扩增出HSV1 tk基因 (112 8bp) ,PCR产物用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后定向克隆至真核表达载体pcDNA3,然后以重组质粒pcTK为模板 ,tk基因的 5′端引物为DNA测序引物进行部分DNA序列分析 .部分DNA序列分析证明PC... 采用PCR技术从商品质粒pHSV10 6扩增出HSV1 tk基因 (112 8bp) ,PCR产物用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后定向克隆至真核表达载体pcDNA3,然后以重组质粒pcTK为模板 ,tk基因的 5′端引物为DNA测序引物进行部分DNA序列分析 .部分DNA序列分析证明PCR产物为HSV1 tk基因正确无误 ,成功筛选到HSV1 tk基因的真核表达载体pcTK 。 展开更多
关键词 hsv1-TK 基因治疗 转基因动物 克隆 DNA序列分析
下载PDF
腺病毒为载体的HSV1-TK基因对肿瘤细胞系抑制作用的研究 被引量:2
4
作者 朱乃军 李秋香 +2 位作者 李冬田 孙文敏 佟惠春 《天津医药》 CAS 北大核心 2002年第2期98-101,共4页
目的:用E1区缺失的含HSV1-TK基因和CMV启动子的重组腺病毒AdE1CMVHSV1-TK(AdTK)前体药物GCV即AdTK/GCV系统,观察其在体外对PG49、H460、MCF-7、Hela4种建株肿瘤细胞系的抑制作用、旁杀伤效应和AdTK/GCV系统处理的肿瘤细胞培养上清液对... 目的:用E1区缺失的含HSV1-TK基因和CMV启动子的重组腺病毒AdE1CMVHSV1-TK(AdTK)前体药物GCV即AdTK/GCV系统,观察其在体外对PG49、H460、MCF-7、Hela4种建株肿瘤细胞系的抑制作用、旁杀伤效应和AdTK/GCV系统处理的肿瘤细胞培养上清液对肿瘤细胞的杀伤效应。方法;采用MTT法测定细胞生长抑制率,AdLacZ作为对照病毒。结果:细胞生长抑制率随重组病毒的浓度、前体药物的浓度及作用时间的增加而升高,而对照病毒则没有显示出对肿瘤细胞明显的抑制作用。旁杀伤效应显示,细胞抑制率随导入AdTK病毒的肿瘤细胞比例的增加而升高。另外肿瘤细胞呈现出上清液浓度依赖性抑制,其生长抑制率随上清液浓度的增加而升高。结论:AdTK/GCV系统对4种肿瘤细胞系有明显的抑制作用及旁杀伤效应。 展开更多
关键词 hsv1-TK基因 药物前体 肿瘤细胞 基因疗法 腺病毒 旁杀伤效应
下载PDF
HSV1-TK逆转录病毒载体构建及表达 被引量:3
5
作者 何祥梁 蒋小忠 +2 位作者 何雪花 郭先健 黄桂君 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第6期455-456,F004,共3页
目的 构建含TK基因逆转录病毒载体并检测其在转染细胞中的表达,为肺癌基因治疗积累实验资料。方法从 PHSV106质粒中切下约2.4kb TK基因片段,插入逆转录病毒载体PLXSN多克隆位点,酶切筛选正、反向连接质粒。正... 目的 构建含TK基因逆转录病毒载体并检测其在转染细胞中的表达,为肺癌基因治疗积累实验资料。方法从 PHSV106质粒中切下约2.4kb TK基因片段,插入逆转录病毒载体PLXSN多克隆位点,酶切筛选正、反向连接质粒。正 向连接子电穿孔法转化肺癌细胞A549,用PCR、细胞原位杂交法分别检测TK基因整合和表达。结果 经酶切鉴定得到 正向连接子,电穿孔法转导A549细胞,经G418筛选出了转基因细胞,TK基因已整合在转染细胞中并阳性表达。结论 成功构建了含TK基因逆转录病毒载体,转导该载体的肺癌细胞可表达TK基因。 展开更多
关键词 逆转录病毒科 胸苷激酶 疱疹病毒1型 基因转染 hsv1-TK 肺癌
下载PDF
HSV1-tk 报告基因真核表达载体的构建及其在人肺腺癌 AGZY 细胞中的表达 被引量:1
6
作者 栾厦 付鹏 +4 位作者 金钟男 田国梅 姜廷军 曹学良 赵长久 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2014年第2期97-101,共5页
目的:构建含有HSV1-tk( Herpes simplex virus type 1 thymidine kinase, HSV1-tk)基因的真核表达载体,并检测其在人肺腺癌AGZY细胞系中的表达。方法应用PCR反应从质粒pHSV106质粒中扩增HSV1-tk基因后与pMD18-T载体连接,构建重组... 目的:构建含有HSV1-tk( Herpes simplex virus type 1 thymidine kinase, HSV1-tk)基因的真核表达载体,并检测其在人肺腺癌AGZY细胞系中的表达。方法应用PCR反应从质粒pHSV106质粒中扩增HSV1-tk基因后与pMD18-T载体连接,构建重组质粒pHSV1-tk/18T。将测序正确的重组质粒插入plRES2-EGFP 载体内,通过LipofectamineTM 2000将表达载体转染人肺腺癌AGZY细胞。结果酶切鉴定结果表明扩增的HSV1-tk基因序列正确;用荧光显微镜观察HSV1-tk基因的转入和表达;RT-PCR和Western blot结果显示在AGZY细胞中HSV1-tk基因在转录水平和蛋白水平均可以正确表达。MTT结果显示转染后AGZY细胞与未转染细胞在细胞增殖能力方面无明显差别。结论成功构建HSV1-tk报告基因的真核表达载体,在人肺腺癌AGZY细胞中能有效表达。 展开更多
关键词 hsv1-TK 真核表达载体 报告基因显像 肺腺癌AGZY细胞
下载PDF
HSV1-tk基因重组逆转录病毒载体的构建与表达 被引量:1
7
作者 李爱华 刘天承 田竟生 《首都医科大学学报》 CAS 1999年第2期83-85,共3页
通过DNA重组技术,将HSV1tk基因片段重组到含有HSV1tk启动子的pN2A型逆转录病毒载体中。选取正向克隆的逆转录病毒重组DNA,以磷酸钙法转染ψ2,PA317包装细胞后,经G418筛选,抗性克隆细胞上清能... 通过DNA重组技术,将HSV1tk基因片段重组到含有HSV1tk启动子的pN2A型逆转录病毒载体中。选取正向克隆的逆转录病毒重组DNA,以磷酸钙法转染ψ2,PA317包装细胞后,经G418筛选,抗性克隆细胞上清能成功地感染NIH3T3,细胞系测定平均滴度为6.2×105CFU/mL,最高可达1.5×106CFU/mL。 展开更多
关键词 hsv1-tk基因 逆转录病毒载体 基因转移 基因重组
下载PDF
Tat蛋白转导结构域介导HSV1-TK导入肝癌细胞及其效应
8
作者 曹利民 王炜煜 +7 位作者 赵晓蓉 叶庆 雷萍 刘静 代维 朱荫昌 司进 沈关心 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2006年第3期162-166,共5页
目的:探讨HIV-1编码的反式激活蛋白Tat与HSV1-TK融合表达对肝癌细胞的杀伤效果。方法:合成编码HIV-Tat47-57(Tat 11)的2条寡核苷酸单链,两端分别引入BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两个酶切位点,退火形成寡核苷酸双链,15%非变性聚丙烯酰胺凝... 目的:探讨HIV-1编码的反式激活蛋白Tat与HSV1-TK融合表达对肝癌细胞的杀伤效果。方法:合成编码HIV-Tat47-57(Tat 11)的2条寡核苷酸单链,两端分别引入BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两个酶切位点,退火形成寡核苷酸双链,15%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳判断退火效果;以r-pAs16Dr为模板,通过PCR扩增HSV1-TK基因,定向克隆至原核表达载体pET-32中。将含pET-32c-Tat 11-TK的BL21菌通过IPTG诱导表达,表达产物用Ni^(2+)螯合柱亲和纯化,免疫组化分析重组蛋白Tat 11-TK的膜结合特性,蛋白印迹技术分析该融合蛋白的穿膜能力,检测和分析TK/GCV、Tat 11-TK/GCV对肝癌细胞株HepG2的杀伤作用。结果:表达产物SDS-PAGE在相对分子质量60700左右显示条带,符合Tat 11-TK与表达标签融合蛋白的理论值,并证明以包涵体的形式表达;通过Ni^(2+)螯合柱亲和纯化获得的Tat 11-TK重组融合蛋白,经免疫组化证实能结合到肝癌细胞表面,蛋白印迹结果说明Tat 11-TK能有效穿过细胞膜进入HepG2细胞内,同时应用低浓度前药更昔洛韦(GCV,150 μmol/L)能有效抑制HepG2细胞生长。结论:Tat 11-TK在原核系统获得高效表达,具有较强的穿膜能力和前药酶活性。 展开更多
关键词 HIV-1 TAT hsv1-TK 蛋白转导 肝癌 基因治疗
下载PDF
^(18)F-FHBG PET裸鼠移植瘤的HSV1-tk基因显像
9
作者 王全师 李洪生 +3 位作者 唐刚华 理东丽 王巧愚 吴湖炳 《核技术》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期379-382,共4页
制备了18F-FHBG基因探针,构建表达HSV1-tk报告基因的逆转录病毒表达载体pLXSN-tk,并建立人肝癌BEL-7402裸鼠双侧腋窝稍靠背侧皮下移植瘤模型。右侧移植瘤为实验组,左侧移植瘤为对照组,将逆转录病毒转染实验组移植瘤细胞。经裸鼠尾静脉注... 制备了18F-FHBG基因探针,构建表达HSV1-tk报告基因的逆转录病毒表达载体pLXSN-tk,并建立人肝癌BEL-7402裸鼠双侧腋窝稍靠背侧皮下移植瘤模型。右侧移植瘤为实验组,左侧移植瘤为对照组,将逆转录病毒转染实验组移植瘤细胞。经裸鼠尾静脉注射18F-FHBG后,于10、30、50、70、90、110、130、150、170、190、210min进行PET显像。结果显示:18F-FHBG未校正放化产率为4%-10%,经放射性HPLC分析测定放化纯度>95%。对照组移植瘤放射性分布未见明显增高;实验组移植瘤于注射18F-FHBG后50-210min,PET显像见到灰阶可分辨放射性浓聚,150min前摄取值逐渐升高,150min达到高峰(摄取值为19.772kBq·mL-1),150min后摄取值快速降低。实验组移植瘤的摄取值明显高于对照组移植瘤,两组移植瘤摄取值比值达4.99。表明18F-FHBGPET报告基因显像系统可用于监测HSV1-tk基因活体内靶细胞内的表达。 展开更多
关键词 裸鼠 移植瘤 体层摄影术 发射型计算机 hsv1-TK 18F-FHBG
下载PDF
替莫唑胺联合HSV1-tk/GCV系统治疗人脑胶质瘤细胞的实验
10
作者 章龙珍 赵丽 +2 位作者 刘美艳 刘桂红 辛勇 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1335-1338,共4页
目的探讨替莫唑胺联合HSV1-tk/GCV自杀基因系统对人胶质瘤细胞的体外杀伤作用及其作用机制。方法用携带tk基因的重组逆转录病毒转染人胶质瘤细胞系U251细胞,并筛选、鉴定。转染与未转染tk基因的U251细胞按1∶9混合。实验分3组:对照组、... 目的探讨替莫唑胺联合HSV1-tk/GCV自杀基因系统对人胶质瘤细胞的体外杀伤作用及其作用机制。方法用携带tk基因的重组逆转录病毒转染人胶质瘤细胞系U251细胞,并筛选、鉴定。转染与未转染tk基因的U251细胞按1∶9混合。实验分3组:对照组、GCV组、GCV+TMZ组。GCV组以5种不同浓度(2、5、10、20、40μM)作用于混合细胞;GCV+TMZ组在上述基础上各加入TMZ50μM;对照组细胞不做任何处理。各组细胞培养72h后,MTT法检测各组细胞的活力,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期分布的变化。结果 (1)U251/tk细胞的活力随GCV组浓度的增加逐渐减弱,呈现良好的剂量效应关系;(2)GCV组、TMZ+GCV组的IC50分别为17.3μM、8.1μM(两组相差2.14倍);(3)GCV+TMZ组的总体抑制率显著高于GCV组(P<0.01)。GCV+TMZ组生存曲线明显左移;(4)流式细胞仪检测显示两组的凋亡率均明显增加(P<0.01);细胞多被阻滞于G2~M期。结论 HSV1-tk/GCV自杀基因系统有一定的肿瘤杀伤效应及旁观者效应;替莫唑胺与HSV1-tk/GCV自杀基因系统两者之间有明显的协同作用;其作用机制可能通过改变细胞周期的分布及促凋亡增加GCV的旁观效应。 展开更多
关键词 替莫唑胺 hsv1-TK/GCV 胶质瘤
下载PDF
单纯疱疹1型病毒(HSV1)IgG抗体ELISA试剂的研制 被引量:2
11
作者 邓文 李震 《中华腹部疾病杂志》 2005年第8期563-565,共3页
目的 建立快速、敏感、特异性强、重复性好的抗单纯疱疹1型病毒(HSV1)IgG检测方法。方法 制备纯化抗原和抗体,对间接ELISA法检测人单纯疱疹1型病毒(HSV1)IaG抗体方法进行优化改良,并对随机选择的331份临床孕妇血清标本进行检测,用德... 目的 建立快速、敏感、特异性强、重复性好的抗单纯疱疹1型病毒(HSV1)IgG检测方法。方法 制备纯化抗原和抗体,对间接ELISA法检测人单纯疱疹1型病毒(HSV1)IaG抗体方法进行优化改良,并对随机选择的331份临床孕妇血清标本进行检测,用德国DIMA HSV1-IgG ELISA试剂与本试剂同时比较。结果 自制试剂盒的敏感性、特异性和诊断指数分别为92.9%,92、2%和185.1%,与德国试剂的符合率为92.3%。结论 本试剂的质量与国外商品试剂相似,具有较好的特异性和敏感性,可广泛应用于临床优生优育检测。 展开更多
关键词 hsv1 IGG ELISA
下载PDF
含HSV1-TK基因重组腺病毒的构建及对小鼠肺癌的抑制作用
12
作者 朱乃军 李秋香 +2 位作者 李冬田 孙文敏 佟惠春 《实用肿瘤杂志》 CAS 北大核心 2002年第4期242-245,共4页
目的 观察含单纯疱疹病毒 1型胸苷激酶 (HSV1- TK)基因和 CMV启动子的重组腺病毒Ad E1 CMVHSV1- TK(Ad TK)对 L795小鼠肺癌细胞和 T739近交纯系小鼠肺癌的抑制作用。方法 采用同源重组的方法在人胚肾 2 93细胞中构建重组腺病毒 Ad TK ... 目的 观察含单纯疱疹病毒 1型胸苷激酶 (HSV1- TK)基因和 CMV启动子的重组腺病毒Ad E1 CMVHSV1- TK(Ad TK)对 L795小鼠肺癌细胞和 T739近交纯系小鼠肺癌的抑制作用。方法 采用同源重组的方法在人胚肾 2 93细胞中构建重组腺病毒 Ad TK ,用 PCR方法鉴定 ;TCID50 (5 0 %组织细胞感染量 )方法滴定病毒 ;将荷瘤小鼠分为 DMEM对照组 ,Ad L ac Z对照组 ,Ad TK实验一组 ,Ad TK实验二组 ;连续观察各组小鼠肿瘤的生长速度以及存活期。结果  PCR证实了 TK基因的导入 ;动物实验结果显示实验组小鼠瘤体的生长速度低于对照组 ,且生存期长于对照组 ,均有统计学差异。肿瘤组织病理切片显示对照组肿瘤组织比实验组生长旺盛。结论 可在人胚肾 2 93细胞中同源重组构建重组腺病毒 Ad TK,且能达到治疗有效滴度 ;Ad TK/ GCV系统对小鼠肺癌具有明显的治疗效果。 展开更多
关键词 hsv1-TK基因重组腺病毒 构建 肺癌 抑制作用
下载PDF
HSV1-TK基因原核表达载体的构建及表达检测
13
作者 王丽群 孟祥晨 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期92-97,共6页
探讨自杀基因HSV1-TK原核表达情况,为进一步将细菌载体应用于肿瘤基因治疗奠定基础。首先以质粒pHSV-106为模板,通过PCR获得HSV1-TK基因克隆并将其与原核表达载体pGEX-6P-1连接,重组质粒经鉴定后将其转化到E.coli BL21,观察其蛋白表达... 探讨自杀基因HSV1-TK原核表达情况,为进一步将细菌载体应用于肿瘤基因治疗奠定基础。首先以质粒pHSV-106为模板,通过PCR获得HSV1-TK基因克隆并将其与原核表达载体pGEX-6P-1连接,重组质粒经鉴定后将其转化到E.coli BL21,观察其蛋白表达情况。结果表明,TK基因全长1 128 bp,与理论值相符。经测序发现插入到载体pGEX-6P-1上的DNA片段与TK基因的同源性为100%;SDS-PAGE可明显看出大小为41 ku的TK酶表达,并随时间的延长表达量不断增加。试验证明来源于单纯疱疹病毒的胸苷激酶能够实现原核表达,这一结果是应用细菌载体携带自杀基因TK治疗肿瘤的前提。 展开更多
关键词 hsv1-TK基因 原核表达 基因治疗 肿瘤
下载PDF
单纯疱疹1型病毒(HSV1)IgM抗体ELISA试剂盒的研制
14
作者 邓文 江敏 《泰山医学院学报》 CAS 2005年第2期123-125,共3页
目的建立快速、敏感、特异性好的抗单纯疱疹1型病毒(HSV1)IgM的检测方法。方法制备纯化抗原及单抗,对间接ELISA法检测人单纯疱疹1型病毒(HSV1)IgM抗体方法进行了优化改良,并对随机选择的331份临床孕妇血清标本进行了检测,用德国DIMAHSV1... 目的建立快速、敏感、特异性好的抗单纯疱疹1型病毒(HSV1)IgM的检测方法。方法制备纯化抗原及单抗,对间接ELISA法检测人单纯疱疹1型病毒(HSV1)IgM抗体方法进行了优化改良,并对随机选择的331份临床孕妇血清标本进行了检测,用德国DIMAHSV1-IgMELISA试剂与本试剂同时比较。结果本试剂盒的敏感性、特异性和诊断指数分别为82·1%,93·5%和175·6%,与德国试剂的符合率为92·1%。结论本试剂的质量与国外商品试剂相似,具有较好的特异性和敏感性,可广泛应用于临床优生优育检测。 展开更多
关键词 hsv1 IGM ELISA 检测方法
下载PDF
HSV1-TK报告基因显像
15
作者 王辉 《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第12期1292-1295,共4页
基因治疗中转泵的治疗基因在体内的定位、分布、持续时间和体内的表达缺乏有效的检测手段,是困扰基因治疗的一个难题。近年来,HSV1-TK报告基因显像已进行了广泛而又深入的研究,结果显示它可解决目前存在的这些问题。当前,报告基因显像... 基因治疗中转泵的治疗基因在体内的定位、分布、持续时间和体内的表达缺乏有效的检测手段,是困扰基因治疗的一个难题。近年来,HSV1-TK报告基因显像已进行了广泛而又深入的研究,结果显示它可解决目前存在的这些问题。当前,报告基因显像的焦点是选择何种报告基因探针进行基因显像。 展开更多
关键词 hsv1-TK 报告基因显像 肿瘤 基因探针
下载PDF
不同浓度载HSV1-TK基因的超声靶向微泡造影剂对HIFU治疗后裸鼠肝癌的影响 被引量:7
16
作者 李红阳 周世骥 +5 位作者 刘长安 李生伟 龚建平 丁雄 谭晶 刘作金 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期31-34,37,共5页
目的研究高强度聚焦超声(HIFU)治疗裸鼠肝癌后,观察不同浓度载HSV1-TK基因超声靶向微泡造影剂对裸鼠残留肝癌组织中TK基因表达的影响。方法建立裸鼠肝癌模型40只,随即分成4组,每组10只,使用JC200型HIFU治疗仪对裸鼠消融80%后,经裸鼠尾... 目的研究高强度聚焦超声(HIFU)治疗裸鼠肝癌后,观察不同浓度载HSV1-TK基因超声靶向微泡造影剂对裸鼠残留肝癌组织中TK基因表达的影响。方法建立裸鼠肝癌模型40只,随即分成4组,每组10只,使用JC200型HIFU治疗仪对裸鼠消融80%后,经裸鼠尾静脉注入不同浓度载基因微泡,然后用超声辐照,Real time PCR检测TK mRNA表达情况,免疫组化及Western blot检测TK蛋白的表达情况,绘制抑瘤曲线。结果免疫组化及Real time PCR及Western blot及抑瘤率均显示与A组相比,B、C、D组有统计学意义(P<0.05),而C、D组比较无统计学意义(P>0.05)。结论当携基因微泡浓度≤0.6μg/μL时,TK mRNA和蛋白的表达、抑瘤率与微泡呈浓度依赖,而当携基因微泡浓度>0.6μg/μL时,基因的表达及抑瘤率与微泡浓度无相关性,故携基因的微泡浓度为0.6μg/μL时TK基因表达最强。 展开更多
关键词 超声微泡 浓度 hsv1-TK 肝癌
下载PDF
HSV1—tk/GCV系统对前列腺癌基因治疗的实验研究
17
作者 薛竹 刘羿男 《友谊医学》 2001年第3期171-176,共6页
目的:前列腺癌是男性最常见的恶性肿瘤之一。临床常用的治疗方案包括雄激素去势治疗、放射治疗等能取得近期效果。但对于雄激素非依赖性前列腺癌和雄激素非依赖性骨转移癌,至今尚无行之有效的临床治疗方案,本研究采用逆转录病毒载体... 目的:前列腺癌是男性最常见的恶性肿瘤之一。临床常用的治疗方案包括雄激素去势治疗、放射治疗等能取得近期效果。但对于雄激素非依赖性前列腺癌和雄激素非依赖性骨转移癌,至今尚无行之有效的临床治疗方案,本研究采用逆转录病毒载体介导单弛疱疹病毒Ⅰ型胸苷激酶(Herpes Simplex Virus Type ⅠThymidine Kinase,HSV1-tk)结合环氧鸟苷(Ganciclovir,GV),就三种前列腺癌细胞系(C4、C4-2、PC3)进行体外基因治疗观察,以便为进行体内实验和临床应用提供有意义的实验依据。方法:将逆转录病毒载体pN2A与HSV1-tk基因重组,转染包装细胞系PA317,经G418筛选,选择高病毒滴度的生产细胞系(Virus producer cells,VPC)PCR、RT-PCR检测VPC内HSV1-tk基因整合和表达。VPC与三种癌细胞胺1:1,1:2,1:4,1:8的比例混合培养,以硫基罗丹B(Sulforhodamine B,SRB)法测定GCV治疗后第1、3、5、7天的细胞对雄激素非依赖性前列腺癌及骨转移性前列腺癌均有杀伤效应,其中以1:1的剂量和第五天效果最佳;镜下没有发现凋亡小体;其与其他两种癌细胞相比较,HSV1-tk/GCV系统对PC3的治疗效果最好,具有统计学差异。结论:HSV1-tk/GCV系统三对种体外培养的前列腺癌细胞均有杀伤作用,其杀伤机制是通过细胞毒作用。VPC与肿瘤细胞混合培养,以1:1并给予GCV后第五天疗效最佳。本研究对雄激素非依赖性前列腺癌及骨转移性前列腺癌提出了一个新的治疗方案。 展开更多
关键词 hsv1-TK 前列腺癌 实验研究 雄激素非依赖 骨转移 基因治疗
下载PDF
HSV1系列智能型低压真空断路器
18
作者 张忠利 《电气技术》 2007年第2期43-45,共3页
本文介绍了新型低压真空断路器的用途、结构特点及性能指标,由于真空断路器可用于常规的配电系统,还可用于煤矿、化工、石油、冶金等具有爆炸性气体和产品工作条件十分恶劣的特殊场合,因此真空断路器必将在低压配电领域里得到广泛的应用。
关键词 低压真空断路器 性能指标 抽屉座 场合 煤矿 矿山 hsv1 断路器本体
下载PDF
siRNA干扰HSV1 gD糖蛋白基因的研究 被引量:5
19
作者 朱钦昌 任哲 +8 位作者 张春龙 张美英 廖红娟 刘秋英 张佩琢 李久香 胡巢凤 王华东 王一飞 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期22-27,共6页
以HSV1 gD糖蛋白基因为靶点,设计合成5对siRNA,并构建pEGFP-N1-gD融合表达质粒,脂质体法共转染Vero细胞,利用绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的特征,流式细胞仪筛选特异沉默gD表达的siRNA。然后有效siRNA转染Vero细胞并感染HSV1,通过空斑减... 以HSV1 gD糖蛋白基因为靶点,设计合成5对siRNA,并构建pEGFP-N1-gD融合表达质粒,脂质体法共转染Vero细胞,利用绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的特征,流式细胞仪筛选特异沉默gD表达的siRNA。然后有效siRNA转染Vero细胞并感染HSV1,通过空斑减数实验,Real-time PCR和子代病毒滴度评价其对HSV-1感染的作用。结果显示siRNA能有效抑制gD-EGFP融合蛋白和感染细胞内gD糖蛋白的表达,但对HSV-1的感染性无明显抑制作用,故选择gD作为siRNA抗病毒靶点还需进一步的论证。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒1型 糖蛋白D RNA干扰 抗病毒
下载PDF
绿色荧光蛋白示踪的HSV1-tk/GCV系统重组慢病毒载体的构建及活性检测 被引量:3
20
作者 黄暨生 张广献 +3 位作者 谭宇蕙 易华 罗惠 杜标炎 《广州中医药大学学报》 CAS 2016年第3期384-388,共5页
【目的】构建绿色荧光蛋白(GFP)示踪的单纯疱疹病毒1型胸苷激酶基因(HSV1-tk)的重组慢病毒载体,并检测该系统对人皮肤黑色素瘤细胞株A375的感染活性。【方法】构建含有HSV1-tk、GFP融合基因的重组慢病毒表达载体p LV-tk-GFP,并使用限制... 【目的】构建绿色荧光蛋白(GFP)示踪的单纯疱疹病毒1型胸苷激酶基因(HSV1-tk)的重组慢病毒载体,并检测该系统对人皮肤黑色素瘤细胞株A375的感染活性。【方法】构建含有HSV1-tk、GFP融合基因的重组慢病毒表达载体p LV-tk-GFP,并使用限制性内切酶消化进行鉴定及序列测定;用该重组质粒与辅助质粒共转染包装细胞HEK293T,获得重组活病毒并感染A375,以嘌呤霉素筛选稳定表达细胞株;使用荧光显微镜观察GFP基因的表达,更昔洛韦(GCV)杀伤实验验证tk-GFP基因的活性。【结果】重组质粒p LV-tk-GFP经限制性酶切鉴定和DNA序列测定分析显示,tk基因已连接到载体正确位置,序列无突变;包装病毒并感染细胞后,荧光显微镜下观察显示tk-GFP基因在A375中表达;筛选得到稳定表达细胞株A375/tk-GFP,GCV能显著杀伤A375/tk-GFP细胞,表明tk基因活性正常。【结论】成功构建了重组p LV-tk-GFP慢病毒载体,该载体能包装产生活病毒且在感染的人黑色素瘤细胞株A375中tk-GFP具有生物活性。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒1型胸苷激酶基因 自杀基因系统 慢病毒 黑色素瘤
原文传递
上一页 1 2 4 下一页 到第
使用帮助 返回顶部