目的观察急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患者骨髓CD+34细胞Hes1基因表达、数量、增殖的变化,并探讨其机制。方法收集8例初治T-ALL患者及4例正常供者(健康对照)骨髓样本,real time PCR检测Hes1基因的表达,密度梯度离心法获取单个核细胞,流...目的观察急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患者骨髓CD+34细胞Hes1基因表达、数量、增殖的变化,并探讨其机制。方法收集8例初治T-ALL患者及4例正常供者(健康对照)骨髓样本,real time PCR检测Hes1基因的表达,密度梯度离心法获取单个核细胞,流式细胞术检测CD+34细胞比例及其细胞周期,免疫磁珠法分选CD+34细胞,体外集落形成实验(CFC)检测其增殖能力。构建Hes1基因过表达逆转录病毒载体,感染正常供者骨髓CD+34细胞后,流式细胞术分析其细胞周期的改变,CFC检测其增殖的改变。结果 T-ALL患者、健康对照CD+34细胞Hes1基因表达分别为3.3±0.8、1,两者比较,P<0.05;CD+34细胞比例分别为0.02%±0.003%、0.06%±0.005%,两者比较,P<0.05;CD+34细胞处于S期的细胞比例分别为16.2%±0.98%、28.0%±1.12%,两者比较,P<0.05;G0期比例分别为19.0%±0.9%、9.0%±0.5%,两者比较,P<0.05;且患者来源CD+34细胞的体外集落形成减少。提高正常CD+34细胞中Hes1基因的表达后,细胞增殖减少,进入静止期。结论 T-ALL患者CD+34细胞比例下降,进入静止期,体外扩增能力下降,这可能与Hes1基因的表达上调有关。展开更多
目的 :探讨发状分裂相关增强子1(hairy and enhancer of split 1,Hes1)基因表达对食管腺癌OE33细胞增殖、侵袭及迁移的影响。方法 :应用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测人食管黏膜上皮HEEC细胞、食管鳞癌TE-1和食管腺癌OE33细胞中Hes...目的 :探讨发状分裂相关增强子1(hairy and enhancer of split 1,Hes1)基因表达对食管腺癌OE33细胞增殖、侵袭及迁移的影响。方法 :应用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测人食管黏膜上皮HEEC细胞、食管鳞癌TE-1和食管腺癌OE33细胞中Hes1基因的表达水平。将特异性针对Hes1基因的sh RNA重组慢病毒感染食管腺癌OE33细胞,然后应用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测Hes1基因的沉默效率,并通过CCK-8、划痕愈合实验以及Transwell迁移和侵袭实验分别检测Hes1基因沉默对OE33细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果 :与HEEC和TE-1细胞相比,OE33细胞中Hes1 m RNA和蛋白的表达水平明显较高(P值均<0.01)。Hes1-sh RNA重组慢病毒感染OE33细胞后,Hes1 m RNA和蛋白表达水平均明显下调(P值均<0.01),并且细胞的增殖、迁移及侵袭能力均明显降低(P值均<0.01)。结论 :沉默Hes1基因的表达能一定程度上抑制OE33细胞的增殖、迁移及侵袭,提示Hes1可能是一个潜在的食管腺癌治疗靶点。展开更多
文摘目的观察急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患者骨髓CD+34细胞Hes1基因表达、数量、增殖的变化,并探讨其机制。方法收集8例初治T-ALL患者及4例正常供者(健康对照)骨髓样本,real time PCR检测Hes1基因的表达,密度梯度离心法获取单个核细胞,流式细胞术检测CD+34细胞比例及其细胞周期,免疫磁珠法分选CD+34细胞,体外集落形成实验(CFC)检测其增殖能力。构建Hes1基因过表达逆转录病毒载体,感染正常供者骨髓CD+34细胞后,流式细胞术分析其细胞周期的改变,CFC检测其增殖的改变。结果 T-ALL患者、健康对照CD+34细胞Hes1基因表达分别为3.3±0.8、1,两者比较,P<0.05;CD+34细胞比例分别为0.02%±0.003%、0.06%±0.005%,两者比较,P<0.05;CD+34细胞处于S期的细胞比例分别为16.2%±0.98%、28.0%±1.12%,两者比较,P<0.05;G0期比例分别为19.0%±0.9%、9.0%±0.5%,两者比较,P<0.05;且患者来源CD+34细胞的体外集落形成减少。提高正常CD+34细胞中Hes1基因的表达后,细胞增殖减少,进入静止期。结论 T-ALL患者CD+34细胞比例下降,进入静止期,体外扩增能力下降,这可能与Hes1基因的表达上调有关。
文摘目的 :探讨发状分裂相关增强子1(hairy and enhancer of split 1,Hes1)基因表达对食管腺癌OE33细胞增殖、侵袭及迁移的影响。方法 :应用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测人食管黏膜上皮HEEC细胞、食管鳞癌TE-1和食管腺癌OE33细胞中Hes1基因的表达水平。将特异性针对Hes1基因的sh RNA重组慢病毒感染食管腺癌OE33细胞,然后应用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测Hes1基因的沉默效率,并通过CCK-8、划痕愈合实验以及Transwell迁移和侵袭实验分别检测Hes1基因沉默对OE33细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果 :与HEEC和TE-1细胞相比,OE33细胞中Hes1 m RNA和蛋白的表达水平明显较高(P值均<0.01)。Hes1-sh RNA重组慢病毒感染OE33细胞后,Hes1 m RNA和蛋白表达水平均明显下调(P值均<0.01),并且细胞的增殖、迁移及侵袭能力均明显降低(P值均<0.01)。结论 :沉默Hes1基因的表达能一定程度上抑制OE33细胞的增殖、迁移及侵袭,提示Hes1可能是一个潜在的食管腺癌治疗靶点。
