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人I型干扰素受体亚基稳定表达真核细胞的筛选及鉴定 被引量：1
1
作者 余治健 李多云 +6 位作者 刘宝兰 刘晓军 邓名贵 杨唯枝 郑金鑫 陈重 邓启文 《深圳中西医结合杂志》 2015年第1期4-6,共3页
目的:筛选及鉴定人I型干扰素受体亚基(IFNAR1)稳定表达真核细胞。方法:体外扩增IFNAR1基因片段,将双酶切后扩增片段和pc DNA3.1(+)连接构建重组质粒pc DNA3.1-IFNAR1,转化BL21感受态细菌培养,提取重组质粒行琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定。... 目的:筛选及鉴定人I型干扰素受体亚基(IFNAR1)稳定表达真核细胞。方法:体外扩增IFNAR1基因片段,将双酶切后扩增片段和pc DNA3.1(+)连接构建重组质粒pc DNA3.1-IFNAR1,转化BL21感受态细菌培养,提取重组质粒行琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定。重组质粒pc DNA3.1-IFNAR1转染肝癌细胞系Hep G2,新霉素筛选挑取阳性克隆细胞,蛋白质印迹试验(Western blotting)分析阳性细胞IFNAR1表达水平。结果:经双酶切和测序验证pc DNA3.1-IFNAR1重组质粒构建成功。pc DNA3.1-IFNAR1转染Hep G2经新霉素筛选后获得稳定表达细胞系,蛋白质印迹试验(Western blotting)证实这些细胞具有较好蛋白表达水平。结论:体外成功构建不同IFNAR1稳定表达水平的Hep G2细胞。 展开更多
关键词 人i型干扰素受体亚基 IFNAR1基因 重组质粒 稳定表达 真核细胞
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慢性丙肝患者的I型干扰素受体对干扰素治疗的应答
2
《传染病网络动态》 2004年第4期9-9,共1页
关键词 慢性丙肝 i型干扰素受体 干扰素 治疗 病毒学应答
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猪Ⅰ型干扰素受体Ⅱ胞外域基因的克隆表达及其多克隆抗体制备 被引量：1
3
作者 杨青原 张军杰 +3 位作者 秦运杰 王冬梅 夏平安 崔保安 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期420-424,共5页
为了克隆表达猪Ⅰ型干扰素受体Ⅱ胞外域(IFN2EC)基因,试验采用RT-PCR技术从健康仔猪肺巨噬细胞中扩增出猪Ⅰ型干扰素受体Ⅱ胞外域基因的cDNA序列,将其亚克隆到原核表达载体pET-32a中,并将阳性重组质粒转化BL21(DE3)菌株,IFN2EC重组蛋白... 为了克隆表达猪Ⅰ型干扰素受体Ⅱ胞外域(IFN2EC)基因,试验采用RT-PCR技术从健康仔猪肺巨噬细胞中扩增出猪Ⅰ型干扰素受体Ⅱ胞外域基因的cDNA序列,将其亚克隆到原核表达载体pET-32a中,并将阳性重组质粒转化BL21(DE3)菌株,IFN2EC重组蛋白得到高效表达.将融合蛋白IFNR2EC免疫BALB/C小鼠,获得鼠抗IFN2EC融合蛋白多克隆抗体,将得到的融合蛋白多克隆抗体采用间接ELISA和Western-blotting试验方法检测.本研究成功构建重组表达质粒pET-IFNR2EC,ELISA测定多克隆抗体的效价为1∶12800,Western-blotting试验结果表明,制备的鼠抗IFNR2EC融合蛋白多克隆抗体可以与融合蛋白进行特异性结合,从而证明融合蛋白具有很好的免疫原性. 展开更多
关键词 猪i型干扰素受体II 胞外域 克隆 原核表达
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人I型干扰素受体亚基表达对IFN-α抑制HBV复制水平的影响
4
作者 李多云 邓名贵 +7 位作者 郑金鑫 刘晓军 杨唯枝 王红燕 陈重 邓启文 邓向斌 余治健 《中国热带医学》 CAS 2015年第9期1044-1046,共3页
目的探讨人I型干扰素受体亚基(IFNAR1)不同表达水平对IFN-α抑制HBV复制的影响。方法扩增在前期构建的IFNAR1不同表达水平稳定Hep G2细胞(R1/H1、R1/H2、R1/H3株和对照细胞PS1、PGFP细胞),分别以瞬时转染HBV表达质粒pUC19-1.24HBV和对... 目的探讨人I型干扰素受体亚基(IFNAR1)不同表达水平对IFN-α抑制HBV复制的影响。方法扩增在前期构建的IFNAR1不同表达水平稳定Hep G2细胞(R1/H1、R1/H2、R1/H3株和对照细胞PS1、PGFP细胞),分别以瞬时转染HBV表达质粒pUC19-1.24HBV和对照质粒,培养24h后加入IFN-α,48h后收集细胞采用Southern blot检测HBVD-NA,荧光定量PCR检测细胞和上清HBVDNA水平。结果 Southern blot检测提示IFN-α干预后HBV复制水平在R1/H1和R1/H2细胞及R1/H3株中IFN-α抑制细胞内核壳颗粒HBVDNA活性显著高于PS1和PGFP细胞;荧光定量PCR结果提示R1/H3细胞中细胞和上清HBVDNA水平较R1/H1、R1/H2细胞系无显著下降。结论 IFNAR1蛋白表达水平不同可能导致IFN-α抑制HBV复制效应的差异。 展开更多
关键词 人i型干扰素受体亚基 IFNAR1基因 重组质粒 稳定表达细胞
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Ⅰ型干扰素受体(Ifnar)基因敲除小鼠的繁育及基因型鉴定 被引量：1
5
作者 陈亚坤 孙婧 +5 位作者 蒋亚君 王昕昉 刘晓宇 戴连攀 卢选成 李晓燕 《实验动物科学》 2019年第4期35-38,43,共5页
目的对Ifnar基因敲除小鼠繁育及鉴定方法进行分析,为多种病毒研究提供理想的动物模型。方法将引进的纯合Ifnar基因敲除小鼠,以1雄2雌的合笼方式进行饲养繁殖,从仔鼠中提取鼠尾基因组DNA,PCR法扩增目的基因片段,琼脂糖凝胶电泳进行基因... 目的对Ifnar基因敲除小鼠繁育及鉴定方法进行分析,为多种病毒研究提供理想的动物模型。方法将引进的纯合Ifnar基因敲除小鼠,以1雄2雌的合笼方式进行饲养繁殖,从仔鼠中提取鼠尾基因组DNA,PCR法扩增目的基因片段,琼脂糖凝胶电泳进行基因型结果判定。结果Ifnar基因敲除小鼠繁育成功,获得了一批基因敲除鼠,使用PCR方法成功鉴定出Ifnar基因敲除纯合子小鼠。 展开更多
关键词 i型干扰素受体 基因敲除 小鼠 繁育 基因型鉴定
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影响聚乙二醇干扰素α-2b治疗慢性乙型肝炎患者疗效的多因素分析 被引量：11
6
作者 白一春 邓霁红 梅小平 《实用肝脏病杂志》 CAS 2019年第4期490-493,共4页
目的探讨应用α-干扰素治疗的慢性乙型肝炎(CHB)患者血清干扰素-γ诱导蛋白-10(IP-10)、I型干扰素受体(IFNAR)和辅助性T细胞17(Th-17)水平变化及其对治疗应答的影响。方法2015年6月~2017年12月我科收治的105例CHB患者,采用聚乙二醇化干... 目的探讨应用α-干扰素治疗的慢性乙型肝炎(CHB)患者血清干扰素-γ诱导蛋白-10(IP-10)、I型干扰素受体(IFNAR)和辅助性T细胞17(Th-17)水平变化及其对治疗应答的影响。方法2015年6月~2017年12月我科收治的105例CHB患者,采用聚乙二醇化干扰素α-2b治疗48周。采用RT-PCR法检测血清HBVDNA载量,采用双抗体夹心法检测血清干扰素-γ诱导蛋白-10(IP-10),采用RT-PCR法测定外周血单个核细胞α/β干扰素受体(IFNAR-α、IFNAR-β)、辅助性T细胞17(IL-17A)和IL-17F。采用多因素Logistic回归分析影响聚乙二醇化干扰素α-2b治疗CHB患者应答的影响因素。结果在治疗结束时,在105例CHB患者中获得完全应答56例(53.3%),未获得完全应答49例;单因素分析显示获得完全应答与未获得完全应答患者血小板、白蛋白、总胆红素、凝血酶原时间、IFNAR-α和IFNAR-β差异无统计学意义(P>0.05),应答组基线白细胞计数、血清丙氨酸氨基转移酶、HBVDNA、HBsAg、IP-10、IL-17A和、IL-17F水平分别为(5.6±1.7)×10^9/L、(108.6±9.5)U/L、(5.4±0.8)lgcopies/ml、(4.6±0.9)lgIU/ml、(324.5±86.9)pg/ml、(3.2±0.6)平均荧光强度(MFI)、(3.1±0.5)MFI,与未应答组的(6.4±1.9)×10^9/L、(82.5±10.0)U/L、(6.1±0.9)lgcopies/ml、(5.8±1.1)lgIU/ml、(381.4±79.6)pg/ml、(3.8±0.7)MFI、(3.6±0.7)MFI比,差异显著(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,血清HBVDNA、HBsAg、IP-10、IL-17A和IL-17F水平是影响α-干扰素治疗CHB患者应答的因素(P<0.05)。结论除常识性认识到的血清HBVDNA和HBsAg水平外,本研究发现检测血清IP-10和Th-17水平有助于对CHB患者在α-干扰素治疗后应答反应的预测,或许能为临床做出治疗决定有裨益。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 Α-干扰素 干扰素-γ诱导蛋白-10 i型干扰素受体 辅助性T细胞17 疗效预测
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Medlmmune和Medarex达成抗体交易
7
作者 张燕 《国外药讯》 2005年第6期29-29,共1页
美国Medlmmune公司和Medarex公司说他们已经结成联盟，开发靶向α-干扰素(interferon-alpha)和Ⅰ型干扰素受体1的抗体产品。
关键词 Medlmmune公司 Medarex公司 抗体产品 Α-干扰素 i型干扰素受体1
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