精氨酸甲基转移酶(PRMT)7通过IGF-1信号通路调控人骨髓间充质干细胞成脂分化的研究

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作者 郭倩 卿佳 +7 位作者 陆大壮 王叙 李扬 张慧 张应飞 刘云松 周永胜 张萍 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1406-1417,共12页

目的本研究旨在明确精氨酸甲基转移酶(PRMT)7在人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)成脂分化过程中的变化以及是否调控hBMSCs成脂分化,进而探索相应的调控机制。方法通过定量反转录PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测hBMSCs成脂分化过... 目的本研究旨在明确精氨酸甲基转移酶(PRMT)7在人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)成脂分化过程中的变化以及是否调控hBMSCs成脂分化,进而探索相应的调控机制。方法通过定量反转录PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测hBMSCs成脂分化过程中PRMT7的变化;通过qRT-PCR和Western blot实验证明PRMT7稳定敲低细胞系构建成功。进行油红O染色和定量分析,以及qRT-PCR和Western blot实验检测PRMT7稳定敲低细胞系成脂分化水平的变化;通过裸鼠体内异位成脂实验,油红O染色检测PRMT7稳定敲低细胞系体内异位成脂的效果;通过qRT-PCR和Western blot证明PRMT7稳定过表达细胞系构建成功。进行油红O染色和定量分析以及qRT-PCR和Western blot实验检测PRMT7稳定过表达细胞系成脂分化水平的变化;通过q RT-PCR和Western blot实验检测敲低PRMT7和过表达PRMT7的细胞中IGF-1表达水平的变化。在PRMT7稳定敲低细胞系中转染siIGF-1并通过qRT-PCR和Western blot检测IGF-1的表达水平验证敲低效率。通过油红O染色和定量分析,qRT-PCR实验检测转染siIGF-1的敲低组hBMSCs成脂分化水平的变化。结果本文发现:在hBMSCs成脂过程中,PRMT7表达水平明显降低(P<0.01);敲低PRMT7后hBMSCs的成脂分化能力增强(P<0.001);敲低PRMT7后hBMSCs的体内异位成脂分化能力增强;过表达PRMT7后hBMSCs的成脂分化能力减弱(P<0.01);PRMT7敲低后IGF-1表达水平增加(P<0.0001);PRMT7过表达后IGF-1表达水平降低(P<0.0001);转染siIGF-1后,各细胞系IGF-1表达水平明显降低(P<0.001);敲低组转染siIGF-1后成脂分化能力明显降低(P<0.01)。结论本研究通过细胞水平和裸鼠皮下移植实验发现PRMT7显著抑制hBMSCs成脂分化,机制研究发现PRMT7对hBMSCs成脂分化的调控作用依赖IGF-1信号通路。上述研究表明,PRMT7可能是治疗相关疾病的潜在分子靶点,为PRMT7和hBMSCs应用于相关疾病治疗提供了新思路。 展开更多

关键词 精氨酸甲基转移酶7 成脂分化 骨髓间充质干细胞 igf-1信号通路

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二苯乙烯苷调控胰岛素/IGF-1信号通路延缓大鼠睾丸间质细胞衰老的作用机制 被引量：4

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作者 李少华 姜丽萍 +3 位作者 牛佳瑶 王乐 牛嗣云 齐峰 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2021年第3期297-303,共7页

采用自由基损伤的方法建立大鼠睾丸间质细胞衰老模型,用流式细胞术检测各组细胞周期的变化;应用RT-qPCR、免疫荧光和Western blot技术检测睾丸间质细胞胰岛素/IGF-1信号传导通路关键基因的表达水平.结果显示:与正常组相比,衰老组β-半... 采用自由基损伤的方法建立大鼠睾丸间质细胞衰老模型,用流式细胞术检测各组细胞周期的变化;应用RT-qPCR、免疫荧光和Western blot技术检测睾丸间质细胞胰岛素/IGF-1信号传导通路关键基因的表达水平.结果显示:与正常组相比,衰老组β-半乳糖苷酶阳性细胞率可达60%以上(P<0.05),G1期所占比重明显增加,S期所占比重明显减少(P<0.05).胰岛素/IGF-1信号传导通路关键基因表达变化:IRS1、IGF-1、IRS2、INSR在衰老组的表达水平明显低于正常组(P<0.05),IGFBP3在衰老组的mRNA表达水平明显高于正常组(P<0.05),二苯乙烯苷可逆转上述现象,上调IGF-1、INSR、IRS1、IRS2表达,下调IGFBP3的mRNA表达.结果表明二苯乙烯苷通过调控胰岛素/IGF-1信号传导通路延缓睾丸间质细胞衰老. 展开更多

关键词 二苯乙烯苷 睾丸间质细胞 延缓衰老 胰岛素/igf-1信号传导通路 大鼠

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玻璃化冷冻卵巢原位移植技术介导胰岛素/IGF-1信号通路易感糖代谢紊乱风险的实验研究

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作者 周雪 王贺颖 王红燕 《中华生殖与避孕杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期394-400,共7页

目的初探玻璃化冷冻后卵巢原位移植技术对其子代小鼠糖代谢水平的影响和机制。方法建立卵巢玻璃化冷冻后原位移植出生子代小鼠模型,实验分为新鲜卵巢原位移植出生子代(新鲜组)和玻璃化冷冻卵巢原位移植出生子代(玻璃化冷冻组),另设自然... 目的初探玻璃化冷冻后卵巢原位移植技术对其子代小鼠糖代谢水平的影响和机制。方法建立卵巢玻璃化冷冻后原位移植出生子代小鼠模型,实验分为新鲜卵巢原位移植出生子代(新鲜组)和玻璃化冷冻卵巢原位移植出生子代(玻璃化冷冻组),另设自然交配出生子代为对照组,每组16只小鼠,检测子代小鼠出生到6月龄时各阶段体质量及6月龄成年子代鼠的空腹血糖、空腹胰岛素、糖耐量水平;取材6月龄子代小鼠肝脏组织,qRT-PCR检测生长因子受体结合蛋白10(growth factor receptor-bound protein 10,Grb10)mRNA的表达;Western blotting检测Grb10、磷酸化蛋白激酶B(phosphate-protein kinase B,p-AKT)和磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(phosphate-mitogen-activated protein kinase,p-MAPK)蛋白的表达。结果玻璃化冷冻组2周龄和3周龄子代小鼠的体质量均低于对照组(P=0.007,P<0.001),差异均具有统计学意义;新鲜组4月、5月龄子代小鼠的体质量均低于对照组(P=0.023,P=0.013),差异均具有统计学意义。6月龄子代鼠新鲜组和玻璃化冷冻组小鼠空腹血糖均较对照组升高(P<0.001,P=0.002),差异均具有统计学意义;玻璃化冷冻组小鼠空腹胰岛素水平较对照组升高,差异具有统计学意义(P=0.017),但玻璃化冷冻组与新鲜组之间差异均无统计学意义(均P>0.05)。葡萄糖注射后30 min时,新鲜组子代小鼠血糖水平显著高于玻璃化冷冻组(P<0.001),120 min时,新鲜组和玻璃化冷冻组子代小鼠血糖水平显著高于对照组(P=0.034,P=0.018),差异均具有统计学意义。新鲜组和玻璃化冷冻组子代肝脏内Grb10 mRNA和蛋白的表达显著高于对照组(均P<0.001),差异均具有统计学意义;玻璃化冷冻组和新鲜组子代肝脏内p-AKT(均P=0.024)和p-MAPK(P=0.019,P=0.002)蛋白的表达较对照组显著性降低,差异均具有统计学意义,玻璃化冷冻组与新鲜组之间差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论卵巢玻璃化冷冻后原位移植技术影响子代小鼠生长和糖代谢,通过子代成年小鼠肝脏内印记基因Grb10过表达,抑制肝脏内胰岛素/胰岛素样生长因子-1信号通路,降低细胞利用葡萄糖水平,使成年子代小鼠出现糖代谢紊乱的现象。 展开更多

关键词 玻璃化冷冻 卵巢组织 生长因子受体结合蛋白10 胰岛素/igf-1信号通路

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基于IGF-1/PI3K/Akt信号通路探讨象皮生肌膏对压力性损伤大鼠模型的影响及机制研究 被引量：2

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作者 郭李梦 彭露 +2 位作者 高子琪 刘彬 廖若夷 《湖南中医药大学学报》 CAS 2023年第9期1547-1552,共6页

目的通过动物实验观察并基于类胰岛素一号生长因子(insulin-like growth factors-1,IGF-1)/磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路探讨象皮生肌膏对压力性损伤大鼠模型的影响。方法... 目的通过动物实验观察并基于类胰岛素一号生长因子(insulin-like growth factors-1,IGF-1)/磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路探讨象皮生肌膏对压力性损伤大鼠模型的影响。方法将40只SD大鼠(SPF级,雌雄各半)复制压力性损伤大鼠模型,造模成功后随机均分为模型组(生理盐水纱布外敷)、阳性对照组(三乙醇胺乳膏外用)、象皮生肌组(象皮生肌膏外用)、联合给药组(三乙醇胺乳膏与象皮生肌膏联合外用)。另取10只健康SD大鼠作为空白组,仅同部位置入磁性装置,不予施加压力。实验过程中,每天记录各组大鼠愈合情况。实验结束时,HE染色法观察创面病理性损伤情况,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平,Western blot法及RT-PCR法检测创面组织中PI3K、Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、IGF-1蛋白及mRNA的表达情况。结果与空白组比较,模型组大鼠创面面积明显增大(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组、象皮生肌组、联合给药组大鼠的创面面积均减小(P<0.05);与阳性对照组及象皮生肌组比较,联合给药组创面面积缩小(P<0.05)。HE染色结果显示,空白组大鼠创面病理结构较完整,组织细胞排列较规则且病理致密,未见明显组织坏死碎片、水肿及炎性浸润;模型组可见明显的肌肉纤维坏死碎片,空泡变性,纤维肿大、横断;阳性对照组、象皮生肌组、联合给药组可见不同程度的病理缓解。与空白组比较,模型组大鼠血清炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显升高(P<0.05),PI3K、Akt、mTOR、IGF-1蛋白及mRNA表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组、象皮生肌组、联合给药组大鼠血清炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著降低(P<0.05),PI3K、Akt、mTOR、IGF-1蛋白及mRNA表达显著升高(P<0.05);与阳性对照组及象皮生肌组比较,联合给药组血清炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平以及PI3K、Akt、mTOR、IGF-1蛋白及mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。结论象皮生肌膏可改善压力性损伤大鼠模型创面病理情况,可能与象皮生肌膏上调IGF-1/PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达,抑制炎性因子表达相关。 展开更多

关键词 压力性损伤 象皮生肌膏 igf-1/PI3K/Akt信号通路 血清炎性因子 机制研究

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IGF-1R-Stat3信号通路通过激活中期因子表达促进肝癌细胞活力、迁移和侵袭 被引量：5

5

作者 陈埏芳 冯淑芬 +3 位作者 施颖 钟绿 李观宏 汤绍辉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1207-1214,共8页

目的:探讨胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)-信号转导及转录激活蛋白3(Stat3)信号通路和中期因子(midkine)在肝细胞癌中的作用以及IGF-1R-Stat3信号通路与midkine表达之间的关系。方法:(1)采用RTqPCR检测人肝癌细胞株Huh7和Hep3B、人正常... 目的:探讨胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)-信号转导及转录激活蛋白3(Stat3)信号通路和中期因子(midkine)在肝细胞癌中的作用以及IGF-1R-Stat3信号通路与midkine表达之间的关系。方法:(1)采用RTqPCR检测人肝癌细胞株Huh7和Hep3B、人正常肝细胞株HL-7702、人肝细胞癌组织(n=32)、配对的癌旁组织(n=32)及正常成人肝组织(n=13)中IGF-1R、Stat3和midkine的mRNA表达水平,并应用Pearson相关分析评估肝细胞癌组织中三者表达水平之间的关系。(2)以Huh7细胞作为空白对照,在瞬时上调IGF-1R表达、稳定敲减IGF-1R表达及稳定敲减IGF-1R表达+瞬时上调Stat3表达的Huh7细胞中,采用RT-qPCR及Western blot检测Stat3和midkine mRNA表达水平及Stat3、磷酸化Stat3和midkine蛋白水平;以Huh7细胞作为空白对照,在瞬时上调或瞬时敲减Stat3表达的Huh7细胞中,采用RT-qPCR及Western blot分别检测midkine mRNA和蛋白表达水平。(3)采用MTT法和Transwell实验检测IGF-1R-Stat3信号通路和midkine表达变化对Huh7细胞活力、迁移和侵袭的影响。结果:分别与正常肝细胞和癌旁组织/正常肝组织相比,肝癌细胞株和肝细胞癌组织中IGF-1R、Stat3和midkine的mRNA表达水平显著升高(P<0.01);肝细胞癌组织中Stat3和midkine的mRNA表达水平均与IGF-1R的mRNA表达水平呈正相关(r=0.716和r=0.681,P<0.01),midkine mRNA表达水平与Stat3 mRNA表达水平也呈正相关(r=0.657,P<0.01)。在Huh7细胞中,IGF-1R通过上调Stat3表达并增加其磷酸化水平而促进midkine表达(P<0.01);而且IGF-1R通过激活Stat3、上调midkine表达而增强细胞活力、迁移能力和侵袭能力(P<0.01)。结论:IGF-1R-Stat3信号通路通过激活midkine表达增强肝癌细胞活力,促进细胞迁移和侵袭。 展开更多

关键词 肝细胞癌 igf-1R-Stat3信号通路 中期因子

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甜菜碱通过IGF-1R/β-catenin信号通路介导对2型糖尿病大鼠骨流失的保护作用 被引量：3

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作者 贾歆 刘强 +3 位作者 杨建彬 王彦玲 刘砚星 刘经尧 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期86-90,共5页

目的探讨甜菜碱(betaine,TCJ)对2型糖尿病大鼠骨量流失的影响,并探讨可能的机制。方法30只大鼠被随机分为对照组(CON)、模型组(MOD)及甜菜碱组(TCJ),每组10只,其中对MOD组和TCJ组建立2型糖尿病模型。随后TCJ组大鼠每天接受50 mg/kg甜菜... 目的探讨甜菜碱(betaine,TCJ)对2型糖尿病大鼠骨量流失的影响,并探讨可能的机制。方法30只大鼠被随机分为对照组(CON)、模型组(MOD)及甜菜碱组(TCJ),每组10只,其中对MOD组和TCJ组建立2型糖尿病模型。随后TCJ组大鼠每天接受50 mg/kg甜菜碱治疗12周,待治疗结束后通过Micro-CT检测、HE染色切片以及蛋白质印迹检测。结果治疗12周后,与MOD组相比,三点弯曲试验、Micro-CT和HE染色切片结果显示TCJ组的大鼠骨小梁数量、骨强度和骨密度得到明显改善(P<0.05)。TCJ组大鼠最大载荷和弹性模量、骨密度(bone mineral density,BMD)、TV/BV、Tb.N、Tb.Th和Tb.Sp较MOD组明显改善(P<0.05)。和MOD组比较,TCJ组β-catenin表达水平明显上调,而p-IGF-1R、p-GSK-3β、p-β-catenin、IGF-1R和GSK-3β表达水平显著下调,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论甜菜碱通过IGF-1R/β-catenin信号通路介导对2型糖尿病大鼠骨流失起到保护作用。 展开更多

关键词 甜菜碱 骨量流失 igf-1R/β-catenin信号通路 骨密度 骨强度

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芹菜素对人肺癌H1975细胞增殖、凋亡、转移及IGF-1R/Akt信号通路的影响 被引量：3

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作者 黄茂 王星钧 孔一名 《中国药师》 CAS 2020年第12期2384-2389,共6页

目的:探讨芹菜素对人肺癌H1975细胞增殖、凋亡和转移及胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响。方法:设H1975细胞组、氟尿嘧啶组(100μg·ml-1)、芹菜素低(100μg·ml-1)、高(200μg·ml-1)剂量组,... 目的:探讨芹菜素对人肺癌H1975细胞增殖、凋亡和转移及胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响。方法:设H1975细胞组、氟尿嘧啶组(100μg·ml-1)、芹菜素低(100μg·ml-1)、高(200μg·ml-1)剂量组,以上各组每孔设6个平行样,培养72h。MTT法、结晶紫染色测定细胞增殖、克隆形成数目,Transwell细胞培养室评估细胞迁移,流式细胞仪测定凋亡水平,实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法及蛋白免疫印迹(WEST-BLOT)法检测IGF-1R、Akt基因和蛋白表达水平。结果:与H1975细胞组比较,氟尿嘧啶组、芹菜素低、高剂量组的光密度(OD)值、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜数、IGF-1R、Akt mRNA和蛋白降低,凋亡率升高(P<0.05)。与氟尿嘧啶组比较,芹菜素低剂量组的光密度(OD)值、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜数、IGF-1R、Akt mRNA和蛋白升高,凋亡率降低(P<0.05);芹菜素高剂量组OD值、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜数、IGF-1R、Akt mRNA和蛋白降低,凋亡率升高(P<0.05)。与芹菜素低剂量组比较,芹菜素高剂量组的OD值、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜数、IGF-1R、Akt mRNA和蛋白降低,凋亡率升高(P<0.05)。结论:芹菜素能明显抑制人肺癌H1975细胞增殖、凋亡和转移;其机制与芹菜素抑制IGF-1R、Akt mRNA和蛋白的表达,进而抑制了IGF-1R/Akt信号通路的激活有关。 展开更多

关键词 芹菜素 肺癌H1975细胞 增殖 转移 igf-1R/Akt信号通路

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冲击波对大鼠骨骼肌钝挫伤修复及IGF-1/PI3K/AKT信号通路的影响 被引量：4

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作者 吕欣 曹宇 周达岸 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期953-958,987,共7页

目的:探讨冲击波对大鼠骨骼肌钝挫伤的修复作用及IGF-1/PI3K/AKT信号通路的影响,为探索冲击波对骨骼肌损伤修复的作用机制提供依据。方法:随机数字表法将21只雄性成年SD大鼠分为正常组、模型组和治疗组,后两组利用自制重物打击装置造模... 目的:探讨冲击波对大鼠骨骼肌钝挫伤的修复作用及IGF-1/PI3K/AKT信号通路的影响,为探索冲击波对骨骼肌损伤修复的作用机制提供依据。方法:随机数字表法将21只雄性成年SD大鼠分为正常组、模型组和治疗组,后两组利用自制重物打击装置造模。采用作用参数为0.14 mJ/mm2、10 Hz的冲击波于造模后24 h作用于治疗组大鼠,每次冲击500次,间隔3天第2次治疗,第2次治疗结束后即刻对各组大鼠进行腓肠肌取材。采用HE染色观察肌纤维排列情况,免疫组化及Western blotting检测肌肉生长抑制素(Myostatin)、成肌分化抗原(Myod1)、肌细胞生成素(Myogenin)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKTs473)的蛋白表达。结果:(1)HE染色可见:模型组较正常组肌细胞排列间隙增大,肌卫星细胞迁移至损伤处,出现少量单核或多核肌小管;治疗组细胞排列较规则,可见较多新生单核或多核肌管。(2)免疫组化结果显示:与正常组比较,模型组和治疗组Myostatin阳性表达均增多,治疗组阳性表达明显少于模型组(P<0.05),散在分布于细胞质之中。(3)Western blotting结果显示:与正常组相比,模型组Myod1的蛋白表达量增加,但不具有统计学意义(P>0.05),模型组和治疗组的Myogenin、PI3K、IGF-1、AKT、p-AKTs473均较正常组明显增加(P<0.05);与模型组相比,治疗组Myogenin蛋白表达量增加(P<0.05),Myod1、IGF-1、P-AKTs473蛋白表达量均增加(P<0.01),Myostatin蛋白表达量下降(P<0.05);PI3K和AKT蛋白表达量有所增加,但无统计学意义(P>0.05)。结论:冲击波治疗可促进骨骼肌钝挫伤修复,并且其正向调控作用与IGF-1/PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多

关键词 骨骼肌钝挫伤 冲击波治疗 igf-1/PI3K/AKT信号通路

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基于IGF-1R/PI3K/AKT的益气固表丸对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠的影响及作用机制研究

9

作者 徐丹 荆晶 +4 位作者 李争 王晶 姜敏 王益德 张艳丽 《世界中医药》 CAS 2023年第1期81-86,共6页

目的:益气固表丸对慢性阻塞性肺疾病(COPD)有明显的治疗作用,但具体作用机制尚不清楚。本研究旨在探讨益气固表丸对脂多糖(LPS)联合烟雾暴露构建慢性阻塞性肺病模型大鼠的治疗作用机制。方法:通过大鼠气管内灌注LPS和吸入香烟烟雾构建... 目的:益气固表丸对慢性阻塞性肺疾病(COPD)有明显的治疗作用,但具体作用机制尚不清楚。本研究旨在探讨益气固表丸对脂多糖(LPS)联合烟雾暴露构建慢性阻塞性肺病模型大鼠的治疗作用机制。方法:通过大鼠气管内灌注LPS和吸入香烟烟雾构建慢性阻塞性肺病模型,同时给予模型大鼠低、中、高剂量益气固表丸治疗14 d。观察呼吸参数及肺组织病理变化。采用酶联免疫吸附试验测定支气管肺泡灌洗液(BALF)及血清胰岛素样生长因子1型受体(IGF-1R)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-10水平。采用蛋白质印迹法检测大鼠肺组织样品中胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)/PI3K/AKT信号通路组分的磷酸化状态。结果:与对照组和低剂量益气组比较,大剂量益气固表丸治疗可显著改善COPD大鼠呼吸参数,减轻肺损伤和炎症,降低BALF和血清炎症介质水平。此外,高剂量益气固表丸干预的COPD大鼠肺组织标本中磷酸化IGF-1R、p-PI3K、p-AKT、p-GSK3、p-mTOR蛋白水平显著降低。结论:益气固表丸对COPD有明显的治疗作用,可能与靶向IGF-1R/PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多

关键词 益气固表丸 脂多糖 慢性阻塞性肺疾病 igf-1R/PI3K/AKT信号通路 作用机制 胰岛素样生长因子1受体 白细胞介素-1β 白细胞介素-10

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基于IGF-1/PI3K/AKT/mTOR信号通路的归脾汤对化疗肌少症的调节作用探讨

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作者 宋予馨 王艺 +4 位作者 马贤德 许欣竹 王建光 张月宇 雷萍 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期2337-2343,共7页

目的探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导的肌少症的发生机制是否与胰岛素样生长因子-1(IGF-1)/磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路有关,并用归脾汤进行调节。方法选取40只SPF级雄性SD大鼠随机分为空... 目的探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导的肌少症的发生机制是否与胰岛素样生长因子-1(IGF-1)/磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路有关,并用归脾汤进行调节。方法选取40只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组(28mg/kg 5-FU)、归脾汤低剂量组(28mg/kg 5-FU+0.5g/ml归脾汤)、中剂量组(28mg/kg 5-FU+1g/ml归脾汤)、高剂量组(28mg/kg 5-FU+2g/ml归脾汤),每组8只,造模的同时归脾汤组灌胃不同剂量归脾汤,连续干预14天。末次给药后,大鼠禁水禁食,次日处死大鼠,取腓肠肌等以待检测,期间记录各组大鼠体重、抓力等生理状况。苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠腓肠肌组织病理改变;免疫组织化学法(IHC)检测腓肠肌组织中肌萎缩相关蛋白Fbxo32及Trim63蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测腓肠肌组织内胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)的含量;实时荧光定量PCR(RT-PCR)测定腓肠肌组织中IGF-1、IGF-1R的mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测腓肠肌组织中p-PI3K、PI3K、p-AKT、AKT、p-mTOR、mTOR的蛋白表达水平。结果与空白组相比,模型组大鼠体质量、抓力均明显下降(P<0.01);肌细胞间隙增大、细胞核紊乱出现核内移,并可见炎性细胞浸润;IGF-1、IGF-1R蛋白及mRNA表达水平升高(P<0.01);Fbxo32、Trim63蛋白表达明显升高(P<0.01);p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR蛋白表达水平的比值显著降低(P<0.01)。与模型组相比,归脾汤低、中、高剂量大鼠体质量、抓力上升(P<0.05,P<0.01);腓肠肌内IGF-1、IGF-1R蛋白及mRNA表达水平升高(P<0.05,P<0.01);Fbxo32、Trim63蛋白表达显著下降(P<0.05,P<0.01);p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR蛋白表达水平的比值显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论归脾汤对5-FU诱导的肌少症模型大鼠具有明显改善作用,可能与激活IGF-1/PI3K/AKT/mTOR信号通路,上调IGF-1、IGF-1R、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR蛋白表达有关。 展开更多

关键词 化疗 肌少症 骨骼肌 归脾汤 igf-1/PI3K/AKT/mTOR信号通路

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跑台训练联合中药松弛膏外敷对废用性肌萎缩大鼠骨骼肌细胞凋亡及IGF-1/PI3K/Akt信号通路的影响

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作者 阿斯古丽·图尔荪 束娇娇 +4 位作者 努尔比亚·克其克 夏热帕·阿不都拉 杨芮琦 哈丽米热·阿卜杜吉力力 帕丽达·买买提 《中华物理医学与康复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期692-698,共7页

目的观察跑台训练联合中药松弛膏外敷对废用性肌萎缩(DMA)大鼠骨骼肌细胞凋亡及胰岛素样生长因子-1(IGF-1)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响。方法选取8周龄雄性Wistar大鼠46只, 取8只大鼠纳入健康对照组(健康组),... 目的观察跑台训练联合中药松弛膏外敷对废用性肌萎缩(DMA)大鼠骨骼肌细胞凋亡及胰岛素样生长因子-1(IGF-1)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响。方法选取8周龄雄性Wistar大鼠46只, 取8只大鼠纳入健康对照组(健康组), 余38只大鼠则制成左后肢废用性肌萎缩模型。于造模3周后采用随机数字表法将制模成功的32只大鼠分为模型对照组(模型组)、跑台训练组(跑台组)、中药松弛膏组(中药组)及跑台训练联合中药松弛膏组(联合组), 每组8只大鼠。跑台组大鼠给予跑台训练, 中药组大鼠则于患肢局部涂抹中药松弛膏, 联合组大鼠给予跑台训练及中药松弛膏患肢局部涂抹。于6周干预结束后采用原位末端标记法(TUNEL)检测各组大鼠骨骼肌细胞凋亡情况;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠骨骼肌中IGF-1、磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化Akt(p-Akt)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)等因子表达水平。结果通过TUNEL染色发现, 跑台组、中药组、联合组骨骼肌凋亡细胞数量均较模型组明显减少(P<0.05);联合组凋亡细胞数量亦显著低于跑台组及中药组水平(P<0.05)。通过Western blot检测发现, 模型组Bcl-2蛋白表达较健康组显著降低, Bax蛋白表达则显著增高(P<0.01);与模型组比较, 中药组及联合组Bcl-2蛋白表达均显著增高(P<0.01), Bax蛋白表达则显著降低(P<0.01);另外联合组Bcl-2蛋白表达均明显高于中药组及跑台组水平, Bax蛋白表达则显著低于中药组及跑台组水平(P<0.05)。与模型组比较, 中药组、联合组IGF-1、p-PI3K及p-Akt蛋白表达均显著升高(P<0.01);联合组IGF-1、p-PI3K、p-Akt蛋白表达亦较跑台组及中药组显著增高(P<0.01)。结论跑台训练联合中药松弛膏外敷能抑制DMA大鼠骨骼肌细胞凋亡, 其作用机制可能与激活IGF-1/PI3K/Akt信号通路, 继而上调抑凋亡蛋白Bcl-2含量, 下调促凋亡蛋白Bax含量有关。 展开更多

关键词 废用性肌萎缩 igf-1/PI3K/Akt信号通路 细胞凋亡 B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2) Bcl-2相关X蛋白(Bax)

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隔药饼灸对高脂血症兔IGF-1/Sp1蛋白及基因表达的影响 被引量：2

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作者 李芊 欧阳里知 +5 位作者 刘惠娟 彭涵 刘红华 葛君芸 常小荣 刘迈兰 《湖南中医药大学学报》 CAS 2022年第10期1688-1694,共7页

目的探究隔药饼灸对高脂血症兔胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)/特异性蛋白1(specificity protein 1,Sp1)蛋白及基因表达的影响。方法将36只雄性新西兰兔随机分为正常组、模型组和隔药饼灸组,每组12只。造模各... 目的探究隔药饼灸对高脂血症兔胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)/特异性蛋白1(specificity protein 1,Sp1)蛋白及基因表达的影响。方法将36只雄性新西兰兔随机分为正常组、模型组和隔药饼灸组,每组12只。造模各组予高胆固醇配方饲料喂养8周制备高脂血症模型,正常组普食饲养。模型组捆绑操作,隔药饼灸组隔药饼灸干预,施灸穴位分为腹背两组,腹组为“巨阙”与双侧“天枢”“丰隆”,背组为双侧“心俞”“肝俞”“脾俞”,每天只施灸一组穴位,两组穴位交替施灸,持续8周。干预8周后,取各组兔血清、主动脉组织及肝组织样本,采用ELISA、RT-PCR技术检测IGF-1、Sp1指标。结果(1)干预8周后,与正常组比较,模型组血清IGF-1、Sp1含量上升(P<0.01);与模型组比较,隔药饼灸组血清IGF-1、Sp1含量下降(P<0.01)。(2)与正常组比较,模型组主动脉IGF-1的mRNA表达量显著上升(P<0.001),与模型组比较,隔药饼灸组主动脉IGF-1的mRNA表达量下降(P<0.01)。(3)与正常组比较,模型组肝组织IGF-1和Sp1的mRNA表达量显著上升(P<0.001,P<0.01);与模型组比较,隔药饼灸组肝组织IGF-1和Sp1的mRNA表达量下降(P<0.01)。结论隔药饼灸可能影响IGF-1/Sp1信号通路,通过胆固醇逆转运环节,调节LDL-C的摄取和转运而缓解高脂血症。 展开更多

关键词 高脂血症 隔药饼灸 胰岛素样生长因子1 特异性蛋白1 胆固醇逆转运 低密度脂蛋白胆固醇 igf-1/Sp1信号通路 血脂

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骨髓间充质干细胞旁分泌IGF-1体外调节胰岛瘤细胞 被引量：1

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作者 张勇群 施静 +3 位作者 郝豆豆 万莎 陈思媛 葛志静 《西南民族大学学报（自然科学版）》 CAS 2021年第2期174-180,共7页

采用体外共培养技术探索骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外调节胰岛瘤细胞功能的可能机制.将培养的细胞分为:大鼠胰岛瘤细胞系(INS-1)单独培养的三组(培养的INS-1细胞系、培养的INS-1细胞系+IGF-1、培养的INS-1细胞系+NVPAEW541)、培养的INS-... 采用体外共培养技术探索骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外调节胰岛瘤细胞功能的可能机制.将培养的细胞分为:大鼠胰岛瘤细胞系(INS-1)单独培养的三组(培养的INS-1细胞系、培养的INS-1细胞系+IGF-1、培养的INS-1细胞系+NVPAEW541)、培养的INS-1细胞系加BMSCs上清液后培养组的三组(培养的INS-1细胞系+BMSCs上清液、培养的INS-1细胞系+BMSCs上清液+IGF-1、培养的INS-1细胞系+BMSCs上清液+NVPAEW541)共6组,按不同干预进行刺激48h,取各组细胞的上清液、细胞爬片、进行细胞形态学观察、胰岛素及IGF-1分泌水平及免疫荧光学检测,对比分析各组的实验结果.结果显示,培养的INS-1细胞系+NVPAEW541组与培养的INS-1细胞系+BMSCs上清液+NVPAEW541组的细胞都呈缩小状、细胞数量也较其他各组少;培养的INS-1细胞系+BMSCs+IGF-1组的胰岛素分泌水平、IGF-1的分泌水平及免疫荧光强度是所有组中最高的(P<0.05);培养的INS-1细胞系+BMSCs组的胰岛素分泌水平、IGF-1分泌水平以及免疫荧光强度较INS-1组高(P<0.05);而培养的INS-1细胞系+BMSCs组的胰岛素水平较培养的INS-1细胞系+IGF-1组略低(P>0.05);但培养的INS-1细胞系+NVPAEW541组的胰岛素水平及IGF-1水平和免疫荧光强度仅较INS-1组略低(P>0.05);培养的INS-1细胞系+BMSCs++NVPAEW541组的各分泌水平以及免疫荧光强度也较培养的INS-1细胞系+BMSCs组低(P<0.05).研究发现BMSCs上清液具有和IGF-1因子相似的功能,能通过刺激IGF-1R通路调节大鼠胰岛瘤细胞的功能. 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 胰岛素样生长因子(igf-1) 胰岛瘤细胞(INS-1) igf-1R信号通路

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绿原酸对昆虫病原线虫卡森斯氏线虫寿命及抗氧化活性的调控 被引量：2

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作者 陈红 李茜童 +1 位作者 王兴铎 钱秀娟 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期108-116,共9页

为观察绿原酸(CGA)对昆虫病原线虫寿命及抗氧化活性的影响,探究绿原酸对线虫生命活动的调控机制,本文以卡森斯氏线虫作为抗衰老模型,用不同浓度的绿原酸(0、50、100、500、1000μmol/L)处理,探究其对卡森斯氏线虫寿命、抗氧化活性、脂... 为观察绿原酸(CGA)对昆虫病原线虫寿命及抗氧化活性的影响,探究绿原酸对线虫生命活动的调控机制,本文以卡森斯氏线虫作为抗衰老模型,用不同浓度的绿原酸(0、50、100、500、1000μmol/L)处理,探究其对卡森斯氏线虫寿命、抗氧化活性、脂褐素水平、相关基因m RNA表达水平的调控作用,初步探讨绿原酸的潜在作用机理。结果表明,与空白对照组相比,用100μmol/L绿原酸刺激线虫后使处理组最长寿命增加了36.36%,显著抑制体内脂褐素的积累;且该浓度刺激线虫体内的SOD和CAT酶活力,分别提高了1.97倍和2.47倍;此外,q RT-PCR结果显示,100μmol/L CGA喂养线虫后,daf-16、gst-4基因转录水平相比对照分别提高了1.78、3.51,而daf-2基因转录水平呈下降的趋势,降低了0.13。综上可知,绿原酸通过胰岛素/IGF-1信号通路提高昆虫病原线虫卡森斯氏线虫机体的抗氧化能力并延长昆虫病原线虫的寿命。 展开更多

关键词 绿原酸 昆虫病原线虫 寿命 抗氧化 胰岛素/igf-1信号通路

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华蟾素通过IGF-1R信号通路对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响 被引量：8

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作者 杨建波 刘鹏 +2 位作者 张文兴 陈青山 邓芳芳 《中医学报》 CAS 2021年第12期2636-2641,共6页

目的:探讨华蟾素通过IGF-1R信号通路对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法:将肝癌HepG2细胞株随机分为不同浓度华蟾素注射液组(0.420 mg·L^(-1)、0.210 mg·L^(-1)、0.105 mg·L^(-1)、0.053 mg·L^(-1))及空白对照... 目的:探讨华蟾素通过IGF-1R信号通路对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法:将肝癌HepG2细胞株随机分为不同浓度华蟾素注射液组(0.420 mg·L^(-1)、0.210 mg·L^(-1)、0.105 mg·L^(-1)、0.053 mg·L^(-1))及空白对照组,每组重复3次。待细胞融合度达80%左右时,各组培养基中加入相应浓度的药物,空白对照组加入等体积细胞培养基,培养48 h。CCK-8法检测肝癌细胞的增殖抑制率;细胞侵袭迁移实验(Transwell)检测肝癌细胞迁移及侵袭情况;Western blot法检测细胞IGF-1R、Akt、ERK蛋白表达。结果:与空白对照组比较,0.420 mg·L^(-1)华蟾素注射液组、0.210 mg·L^(-1)华蟾素注射液组、0.105 mg·L^(-1)华蟾素注射液组、0.053 mg·L^(-1)华蟾素注射液组细胞IGF-1R、Akt、ERK蛋白表达显著下调(P<0.05),12 h、24 h、48 h细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),细胞迁移能力和细胞侵袭能力显著降低(P<0.05);与0.053 mg·L^(-1)华蟾素注射液组比较,0.420 mg·L^(-1)华蟾素注射液组、0.210 mg·L^(-1)华蟾素注射液组、0.105 mg·L^(-1)华蟾素注射液组细胞IGF-1R、Akt、ERK蛋白表达显著下调(P<0.05),12 h、24 h、48 h细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),细胞迁移能力和细胞侵袭能力显著降低(P<0.05);与0.105 mg·L^(-1)华蟾素注射液组比较,0.420 mg·L^(-1)华蟾素注射液组、0.210 mg·L^(-1)华蟾素注射液组细胞IGF-1R、Akt、ERK蛋白表达显著下调(P<0.05),12 h、24 h、48 h细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),细胞迁移能力和细胞侵袭能力显著降低(P<0.05);与0.210 mg·L^(-1)华蟾素注射液组比较,0.420 mg·L^(-1)华蟾素注射液组细胞IGF-1R、Akt、ERK蛋白表达显著下调(P<0.05),12 h、24 h、48 h细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),细胞迁移能力和细胞侵袭能力显著降低(P<0.05)。结论:华蟾素能够抑制肝癌细胞的增殖、迁移及侵袭,其作用可能与抑制IGF-1R信号通路有关。 展开更多

关键词 华蟾素 igf-1R信号通路 肝癌细胞 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭

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皮肤再生医疗技术作用IGF-1/PI3K/Akt信号通路调控难愈合创面血管生成的机制研究 被引量：31

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作者 李利青 冯时 唐乾利 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期2460-2465,共6页

目的:探讨皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)作用IGF-1/PI3K/Akt信号通路调控创面血管生成促进体表慢性难愈合创面修复的机制。方法:145只雄性SD大鼠随机分为空白组(21只),对照组(31只),以及慢性难愈合创面组(93只);慢性难愈合创面组造模成... 目的:探讨皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)作用IGF-1/PI3K/Akt信号通路调控创面血管生成促进体表慢性难愈合创面修复的机制。方法:145只雄性SD大鼠随机分为空白组(21只),对照组(31只),以及慢性难愈合创面组(93只);慢性难愈合创面组造模成功后再随机分为模型组、贝复新组和MEBT/MEBO组,每组各31只。计算创面的愈合时间及愈合率;取干预治疗后第3、7、14天的创面组织,ELISA法检测胰岛素样生长因子1(IGF-1)含量,Western Blot技术测定磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化内皮型一氧化氮合酶(p-eNOS)及血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)的蛋白表达量;碱性水浸泡法扫描电子显微镜技术(SEM)观察创面组织全层皮肤愈合过程。结果:与模型组比较,MEBT/MEBO组显著缩短大鼠创面愈合时间和提高创面愈合率(P<0.01)。造模及干预治疗14d后,SEM结果显示MEBT/MEBO组大鼠全层皮肤创面愈合过程较模型组理想。与模型组比较,第7天时MEBT/MEBO组大鼠创面组织IGF-1水平及PI3K、p-Akt、p-eNOS、VEGFR2蛋白表达含量均显著增加(P<0.05,P<0.01)。结论:MEBT/MEBO能较显著促进慢性难愈合性创面的修复,较好改善其全层皮肤创面愈合过程,其作用机制可能是通过激活IGF-1/PI3K/Akt信号通路,促进创面新生血管生成,从而加快创面的愈合速度。 展开更多

关键词 体表慢性难愈合创面 皮肤再生医疗技术 igf-1/PI3K/Akt信号通路 修复机制

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miRNA-1对胃癌细胞体外EGFR-TKI敏感性影响的实验研究 被引量：2

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作者 娄智 吉亚君 +2 位作者 王鑫 胡晨曦 刘玮萱 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2022年第2期103-108,共6页

目的探讨上调或沉默miRNA-1(miR-1)表达对胃癌细胞体外表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)敏感性影响的研究。方法选择人胃癌细胞系MKN-45作为受试对象,慢病毒转染miR-1或miR-1 shRNA,分别作为miR-1组和miR-1 shRNA组,并采用... 目的探讨上调或沉默miRNA-1(miR-1)表达对胃癌细胞体外表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)敏感性影响的研究。方法选择人胃癌细胞系MKN-45作为受试对象,慢病毒转染miR-1或miR-1 shRNA,分别作为miR-1组和miR-1 shRNA组,并采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测GES-1和MKN-45细胞中miR-1表达。另外设置空白对照组和阴性对照组。采用MTT法检测MKN-45细胞对不同浓度AZD9291(奥西替尼)的敏感性;流式细胞术检测1μmol/L AZD9291作用48 h后MKN-45细胞凋亡活力和细胞周期。采用Western blotting法检测各组细胞中PI3K/AKT通路相关蛋白的表达。结果qPCR证实miR-1在MKN-45细胞系中低表达。MTT法检测结果显示,与空白对照组比较,miR-1组细胞对AZD9291敏感性明显增加,而miR-1 shRNA组细胞对AZD9291敏感性明显降低。Annexin V/PI双染法和BrdU法检测,miR-1组细胞凋亡率为(44.65±5.18)%,高于空白对照组的(15.40±2.13)%和阴性对照组的(17.92±3.14)%,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-1 shRNA组细胞凋亡率为(11.20±2.48)%,低于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组和阴性对照组比较,miR-1组细胞IGF-1R、p-IGF-1R、p-AKT、p-p70S6K蛋白表达量明显降低,miR-1 shRNA组细胞IGF-1R、p-IGF-1R、p-AKT、p-p70S6K蛋白表达量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论上调miR-1表达可增加MKN-45胃癌细胞系对AZD9291的敏感性,其作用机制可能与抑制IGF-1R/PI3K/AKT信号通路的激活有关。 展开更多

关键词 胃癌 EGFR-TKI MIR-1 AZD9291(奥西替尼) igf-1R/PI3K/AKT信号通路

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miR-486-5p对C2C12细胞IGF-1-PI3K/AKT-mTOR信号通路的影响 被引量：2

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作者 郭晓萍 陈时锦 +2 位作者 张名媛 蒋钦杨 兰干球 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期481-488,共8页

本文旨在研究miR-486-5p对C2C12细胞IGF-1-PI3K/AKT-mTOR信号通路的影响,探讨miR-486-5p在C2C12细胞中对胰岛素信号通过基因的调控机制。利用构建好的miR-486-5p过表达和抑制慢病毒载体,通过脂质体转染法分别在C2C12细胞上过表达和抑制m... 本文旨在研究miR-486-5p对C2C12细胞IGF-1-PI3K/AKT-mTOR信号通路的影响,探讨miR-486-5p在C2C12细胞中对胰岛素信号通过基因的调控机制。利用构建好的miR-486-5p过表达和抑制慢病毒载体,通过脂质体转染法分别在C2C12细胞上过表达和抑制miR-486-5p的表达,利用荧光定量PCR法检测miR-486-5p过表达和抑制效率,同时检测过表达和抑制miR-486-5p后IGF-1、INSR、IRS1、PI3K、PI3KR1、PDK1、AKT1、PTEN、Fox O1、m TOR、4EBP1基因的mRNA变化。荧光定量PCR结果显示24 h过表达倍数和抑制效率分别为2.8倍和35%,48 h过表达倍数和抑制效率分别为1.4倍和15%。过表达miR-486后,24 h和48 h时INSR、PDK1、PTEN、AKT1、FoxO1、4EBP1基因均显著下调;抑制miR-486后,24 h时4EBP1显著上调,48 h时IGF-1显著上调,4EBP1显著下调。本研究表明过表达miR-486-5p后胰岛素信号通路基因的表达受到抑制,抑制miR-486-5p后胰岛素信号通路基因的表达上升,这可能是肥胖患者血清miR-486-5p升高损害胰岛素信号引起葡萄糖摄取能力降低,从而导致胰岛素抵抗发生的原因。 展开更多

关键词 miR-486-5p igf-1-PI3K/AKT-mTOR信号通路 C2C12细胞

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知母须根总皂苷纯化工艺及其延长秀丽隐杆线虫寿命的作用机制研究 被引量：2

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作者 廖延武 黄琪 +5 位作者 王桐生 吴德玲 许凤清 金传山 马凯 邵志愿 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期559-565,共7页

目的考察知母须根总皂苷富集纯化的最佳工艺,并对其延长秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,C.elegans)寿命的作用及机制进行研究。方法以知母须根总皂苷得率、总皂苷含量等为指标,考察大孔树脂型号、上样液浓度、吸附流速、上样体积... 目的考察知母须根总皂苷富集纯化的最佳工艺,并对其延长秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,C.elegans)寿命的作用及机制进行研究。方法以知母须根总皂苷得率、总皂苷含量等为指标,考察大孔树脂型号、上样液浓度、吸附流速、上样体积、洗脱溶剂浓度及体积对富集结果的影响。以秀丽隐杆线虫为实验模型,以0.5、1.0、2.0 mg·mL^-1知母须根总皂苷进行干预,测定秀丽隐杆线虫寿命、后代数目、运动能力;采用qPCR法测定知母须根总皂苷(1.0 mg·mL^-1)干预后秀丽隐杆线虫体内daf-16、daf-2、sod-3、ctl-2等基因的表达情况。结果最佳树脂型号为AB-8,上样液浓度为0.2 g·mL^-1,吸附流速及洗脱流速均为1.0 mL·min-1,洗脱剂为70%乙醇,洗脱体积为3倍柱体积,所富集的总皂苷纯度>50%。与空白对照组比较,1.0 mg·mL^-1浓度的知母须根总皂苷可显著延长秀丽隐杆线虫的平均寿命,提高线虫的半数致死天数(P<0.05)、产卵数目及运动频率(P<0.01);显著提高线虫体内sod-3、daf-16和ctl-2基因的表达量(P<0.01,P<0.001),降低daf-2基因的表达量(P<0.05)。结论优选的工艺稳定可行,可用于知母须根总皂苷的富集纯化;知母须根总皂苷能延长秀丽隐杆线虫的寿命,其机制可能与Insulin/IGF-1信号通路有关。 展开更多

关键词 知母须根总皂苷 分离富集 纯化工艺 秀丽隐杆线虫 延缓衰老 作用机制 Insulin/igf-1信号通路

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清燥救肺汤含药血清对非小细胞肺癌细胞恶性行为的影响 被引量：5

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作者 张美英 侯炜 高坤 《广州中医药大学学报》 CAS 2022年第12期2891-2896,共6页

【目的】探讨清燥救肺汤(由桑叶、麦冬、枇杷叶、石膏、党参等组成)含药血清对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞的抑制作用及机制。【方法】以NSCLC细胞株H1299为研究对象,实验分为空白血清组及清燥救肺汤低、中、高浓度含药血清组。干预后,平... 【目的】探讨清燥救肺汤(由桑叶、麦冬、枇杷叶、石膏、党参等组成)含药血清对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞的抑制作用及机制。【方法】以NSCLC细胞株H1299为研究对象,实验分为空白血清组及清燥救肺汤低、中、高浓度含药血清组。干预后,平板克隆形成实验观察肺癌细胞增殖能力,Transwell小室实验观察肺癌细胞侵袭、迁移能力,聚合酶链反应(PCR)法、Western Blot法分别检测肺癌细胞上清辅助性T细胞(Th)1表型因子干扰素γ(IFN-γ)、Th2细胞表型因子白细胞介素4(IL-4)及胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)/信号传导与转录激活因子3(STAT3)通路相关蛋白IGF-1R、STAT3的mRNA、蛋白表达水平。【结果】与空白血清组比较,清燥救肺汤低、中、高浓度含药血清组肺癌细胞克隆率、侵袭和迁移数量,及IL-4、IGF-1R、STAT3的mRNA、蛋白表达水平降低,IFN-γmRNA、蛋白表达水平升高(均P<0.05),且呈明显的浓度依赖性。【结论】清燥救肺汤含药血清可通过调控T细胞分化、抑制IGF-1R/STAT3通路的活化抑制NSCLC细胞恶性行为。 展开更多

关键词 清燥救肺汤 非小细胞肺癌 T细胞分化 igf-1R/STAT3信号通路 H1299细胞

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